SALL4在儿童卵黄囊瘤中表达的研究

目的 研究分析一种新的肿瘤标志物SALL4在儿童卵黄囊瘤(yolk sac tumor,YST)的表达情况及临床意义.方法 收集儿童卵黄囊瘤病理标本21例(含有穿刺标本8例).选取成熟畸胎瘤(mature teratoma,MT)10例、未成熟畸胎瘤(immature teratoma,IMT)5例、无性细胞瘤1例进行对照研究.应用免疫组织化学方法检测SALL4在上述肿瘤中的表达情况,并就SALL4与甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)在YST的表达情况进行比较.结果 ①SALL4在21例儿童YST全部表达,且每例都有较高的阳性表达强度;②在儿童YST中,SALL4的阳性表达强度强,为6例(++)、15例(+++),而AFP在YST的表达相对较弱,分别为2例(-)、5例(+)、9例(++)、5例(+++),SALL4表达强度比AFP更强(P＜0.01);在儿童YST中,SALL4与AFP的表达强度之间进行相关性分析,发现两者无明显相关性(P＞0.05);③8例穿刺标本中,SALL4染色3例(++)、5例(+++),AFP染色1例(-)、2例(+)、4例(++)、1例(+++),两者比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ①在儿童常见生殖细胞肿瘤(GCT)中,SALL4可能作为YST相对敏感的新一代瘤标;②在免疫组化染色分析中,SALL4比AFP在儿童YST中阳性表达强度更高;但SALL4与AFP的表达强度之间无明显相关性;③SALL4免疫组化染色可帮助儿童YST的诊断,尤其针对组织量少的穿刺标本,更敏感的瘤标SALL4有助于标本的病理分子学诊断.

Abstract：

Objective To study the expression of SALL4 in yolk sac tumors (YST) in children.Methods Twenty one patients were diagnosed with yolk sac tumor and treated in the children's hospital of Chongqing medical university. Their tumor tissue specimens including 8 puncture biopsy specimens were collected for this study. In addition, 10 cases of mature teratoma (MT), 5 cases of immature teratoma (IMT). 1 dysgerminoma were collected as control The expressions of SALL4 in YST,MT, IMT and dysgerminoma were studied by SP immunohistochemical method. Alpha fetoprotein 21 patients. Among them, the expression of SALL4 in YST was strong ( + + ) in 6 patients, and very It is negative in 2 cases, detectable in 5, strong in 9, and very strong in 5. The expression of SALL4 expression of SALL4 was strong ( + + ) in 3 cases, and very strong ( + + + ) in 5 cases. The staining of AFP was negative in 1 case ( - ), detectable in 2 ( + ), strong in 4 ( + + ) and very strong in 1 ( ++ + ). A significant difference was found between SALL4 and AFP expression in these specimens (P＜0. 05). Conclusions SALL4 could be a new relatively sensitive tumor marker for YST. The expression of SALL4 is stronger than AFP in YST. But their expression doesn't correlate with each other.Immunohistochemical staining of SALL4 could be helpful to diagnose YST in children, especially in the small amount specimens.     

小儿卵黄囊瘤临床病理及免疫组化分析

目的：探讨小儿卵黄囊瘤临床病理特点。方法：对61例小儿卵黄囊瘤临床病理资料回顾分析,部分进行免疫组织化学染色。结果：男36例,女25例,发病年龄出生～14岁,平均 22.3月;<3岁的占 78.7 %。性腺内39例,性腺外22例。镜下病理形态多样,以内胚窦结构(SD小体)最具特征性,但并非每例都能见到,网状结构、玻璃样小体、微囊结构及腺样结构在所有病例均可见到 ,常伴有出血坏死。免疫组织化学染色显示AFP+,AAT+,CK+,HCG-,PCNA+,P53+。结论：小儿卵黄囊瘤多为单一成分的卵黄囊瘤,常见于睾丸(占54.1%),预后较成人好。性腺外卵黄囊瘤主要位于骶尾部(20/22例),且多为女性(18/20例),预后较差 。诊断卵黄囊瘤时不必过分强调S D小体的存在,免疫组织化学染色有助于鉴别诊断。     

P-gp、MRP和LRP在神经母细胞瘤中的表达及意义

对化疗耐药是恶性肿瘤治疗失败的主要原因之一。国内外研究表明 ,肿瘤耐药异常复杂 ,是多基因、多步骤综合作用的结果[1] 。耐药相关标志主要包括多药耐药基因 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｇｅｎｅ,ＭＤＲ1)及其编码产物Ｐ 糖蛋白 (ｐ ｇｌｙ ｃｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｐ ｇｐ)、多药耐药相关蛋白(ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ ,ＭＲＰ)、肺耐药相关蛋白 (ｌｕｎｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｐｒｏｔｅｉｎ ,ＬＲＰ)、谷胱苷肽Ｓ 转移酶、ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅱ和凋亡相关基因如 ｐ5 3和Ｂｃ…     

不同组织结构类型中神经母细胞瘤中CD82与LRP、MDR 1、Topo Ⅱα的表达及意义

目的 探讨肿瘤转移抑制因子CD82与耐药相关蛋白LRP、多药耐药MDR1、拓扑异构酶Topo Ⅱα在不同组织结构类型的神经母细胞瘤(组织结构良好型,FH型;组织结构不良型,UFH型)中的表达及其意义.方法 收集2001年5月以来近6年上海儿童医学中心保存的儿童神经母细胞瘤石蜡标本33例(其中UFH神经母细胞瘤10例,平均肿瘤分期3期;FH神经母细胞瘤23例,平均肿瘤分期2.57期;男17例,女16例;年龄范围1个月～15岁,平均年龄33.1个月;随访时间21～87个月,平均随访时间45.5个月).利用组织芯片的高通量、低误差、经济省时等优点,将二组标本制作成组织芯片,再行免疫组织化学SP法检测CD82、LRP、MDR1、Topo Ⅱα在神经母细胞瘤巾的表达.采用SAS统计软件对结果进行统计学处理,两样本比较采用Wilcoxon秩和检验.结果 相对于FH型神经母细胞瘤,UFH型神经母细胞瘤中的CD82表达明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05);而LRP、MDRI、Topo Ⅱα的表达显著增强,二组之间差异有统计学意义(P＜0.05).UFH型失随访1例,平均随访时间34.5个月,随访时存活率66.6%;FH型失随访2例,平均随访时间49.5个月,随访时存活率80.9%,两组之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CD82基因的失活在肿瘤转移的潜在性中起着重要作用,UFH型神经母细胞瘤中C1782的低表达表明了UFH型肿瘤具有较强的远处转移能力,而LRP、MDRI、Topo Ⅱα的表达显著增强,表明了UFH型神经母细胞瘤细胞对化疗药物耐药性更为显著.FH型预后相对较好,可能与患儿不同的年龄、肿瘤分期、较少的转移潜力、肿瘤细胞的较低化疗药物耐药性均有关.     

β-catenin、cyclinD1、C-myc在儿童肾母细胞瘤中的表达及临床意义

目的探讨Wnt信号通路中β-catenin、cyclinD1和C-myc蛋白在儿童肾母细胞瘤中的表达及临床意义。方法用免疫组织化学EnVision System二步法检测34例初发小儿肾母细胞瘤及15例肾母细胞瘤旁正常肾组织病理石蜡标本中β-catenin、CyclinD1和C-myc蛋白的表达情况。结果儿童肾母细胞瘤中β-catenin、cyclinD1和C-myc表达阳性率高于瘤旁正常肾脏组织,差异有显著性,三者表达的阳性率呈正相关性(P<0.01);β-catenin、cyclinD1及C-myc的表达分别与儿童肾母细胞瘤组织分型、临床分期或复发转移相关(P<0.05)。结论β-catenin、cyclinD1和C-myc在儿童肾母细胞瘤组织中表达阳性率高,联合检测β-catenin、cyclinD1和C-myc有助于判断预后。     

p14ARF/p16β与Oct-4、Nestin、GFAP在不同组织结构类型的神经母细胞瘤中的表达及意义

目的 探讨p14ARF＜/p16β与Oct-4、Nestin、GFAP在不同组织结构类型的神经母细胞瘤(组织结构良好型,FH型;组织结构不良型,UFH型)中的表达及其意义.方法 收集近6年来本院保存的儿童神经母细胞瘤石蜡标本33例,男17例,女16例;年龄范围1个月～15岁,平均年龄33.1个月;随访时间21～87个月,平均随访时间45.5个月,其中UFH神经母细胞瘤10例,平均肿瘤分期3期;FH神经母细胞瘤23例,平均肿瘤分期2.57期.利用组织芯片的高通量、低误差、经济省时等优点,将二组标本制作成组织芯片,再行免疫组织化学SP法检测p14ARF/p16β与Oct-4、Nestin、GFAP在神经母细胞瘤中的表达.结果 相对于FH神经母细胞瘤,UFH神经母细胞瘤中的p14ARF/p16β表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);而Nestin和GFAP在二组肿瘤中表达均较低,Oct-4二组表达类似.二组之间差异无统计学意义(P0.05).UFH组失随访1例.平均随访时间34.5个月,随访时存活率66.6%;FH组失随访2例,平均随访时间49.5个月,随访时存活率80.9%,二组之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 p14ARF/p16β基因的失活在肿瘤的发生中起着重要作用,UFH神经母细胞瘤中p14ARF/p16β的低表达表明了肿瘤分化较差,肿瘤分期较高;而Nestin、Oct-4和GFAP表达类似.表明了不同组织结构类型的神经母细胞瘤(FH型和UFH型)均具有一些最原始的神经干细胞的生物学特征,具有进一步分化的潜力.并使得神经母细胞瘤进展迅速,呈现恶性的组织表型.FH型预后相对较好,可能与患儿不同的年龄、肿瘤分期、是否转移和复发均有关.     

基质细胞衍生因子-1、趋化因子受体4及血管内皮生长因子在小儿肾母细胞瘤中的表达

目的 探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、趋化因子受体4(CXCR4)和血管内皮生长因子(VEGF)在小儿肾母细胞瘤中的表达及其与临床特征的关系.方法 收集郑州大学第一、三附属医院2003年5月-2008年5月手术切除经病理证实为肾母细胞瘤的石蜡标本30例.男13例,女17例;年龄4个月～7岁.其中预后良好组织型22例;预后不良组织型8例,以细胞质染成棕黄色为阳性细胞,以染色强度和阳性瘤细胞百分比的乘积作为阳性和阴性判断标准.对照组12例取瘤旁正常肾组织标本.2组均行HE染色,采用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 VEGF、CXCR4和 SDF-1在肾母细胞瘤中的阳性表达率分别为63.33%、70.0%、53.33%,而在瘤旁正常肾组织中的阳性表达率分别为25.0%、8.3%、16.7%.VEGF、CXCR4 和 SDF-1在肾母细胞瘤中的表达均明显高于瘤旁正常肾组织(Pa<0.05),3者在临床分期Ⅲ～Ⅳ期和预后不良组织型组及有淋巴转移组的肾母细胞瘤中的表达明显高于在临床分期Ⅰ～Ⅱ期和预后良好组织型及无淋巴结转移的肾母细胞瘤中的表达(Pa<0.05).相关分析显示CXCR4与VEGF、SDF-1的阳性表达均呈正相关,SDF-1与VEGF的阳性表达亦呈正相关.肾母细胞瘤中CXCR4、SDF-1和VEGF的表达与肿瘤的淋巴结转移、病理分型及临床分期有相关性,而与性别无相关性.结论 VEGF、SDF-1及 CXCR4与肾母细胞瘤的发展、预后有关,参与了肿瘤血管的生成及肿瘤的增殖侵袭,对于评估患儿预后及靶向治疗肾母细胞瘤具有一定意义.     

基质金属蛋白酶-9、白细胞介素-1β和金属蛋白酶组织抑制因子-1在新生乳鼠脑缺氧缺血损伤中的动态表达及内在联系

目的探讨新生乳鼠脑缺氧缺血(hypoxic ischemic,HI)后24 h内基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的变化规律及关系。方法7日龄SD乳鼠随机分为HI组(n=40)和假手术组(sham组,n=40)。建立HI模型,按术后5个时间点(0、4、8、12、24 h)分为5个亚组取脑组织,每组8例。HE染色观察大脑皮质病理变化,Western blot和RT-PCR法检测MMP-9、IL-1β和TIMP-1的表达。此外,制作小鼠海马神经元HT22细胞缺氧模型,加入MMP-9抑制剂和MMP-9激动剂,进一步证实MMP-9、IL-1β和TIMP-1的关系。结果HI后4 h大脑皮质出现轻微的核异常和胞体肿胀,12 h神经元嗜酸性改变最为明显。与8 h、12 h比较,HI后24 h MMP-9和IL-1β蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.01)。HT22细胞缺氧4 h加入MMP-9抑制剂,IL-1βmRNA表达下调。结论新生乳鼠HI早期MMP-9、IL-1β和TIMP-1表达呈时间依赖性,抑制MMP-9表达可降低IL-1β水平。     

Ⅳ型胶原和金属蛋白酶组织抑制剂-1在肾小球系膜细胞中的表达及福辛普利干预的意义

目的探讨Ⅳ型胶原（ColⅣ）及金属蛋白酶组织抑制剂－1（TIMP－1）在脂多糖（LPS）诱导的大鼠肾小球系膜细胞（GMC）中的表达及血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）福辛普利（FOS）干预的意义。方法建立体外培养的大鼠GMC，鉴定后3～10代用于实验。实验分为5组。对照组：仅加正常培养液；LPS组：加正常培养液及10μg／L LPS；FOS高、中、低剂量组：除正常培养液及10μg／L LPS外，分别加FOS1&#215;10^-4mol／L（FOS1组）、1&#215;10^-6mol／L（FOS2组）、1&#215;10^-8mol／L（FOS3组）。各组细胞培养6、12和24h后采用ELISA法测定细胞培养上清液中ColⅣ和TIMP-1蛋白表达量，收集细胞提取RNA，采用实时荧光定量RT—PCR法检测其TIMP—1 mRNA表达的变化。结果1．正常培养的大鼠GMC均有一定量的ColⅣ和TIMP-1蛋白表达；LPS组在各时间点ColⅣ和TIMP-1蛋白分泌均高于对照组（Pa〈0．01），而FOS各组ColⅣ和TIMP-1蛋白分泌均低于LPS组（Pa〈0．01）。2．正常培养的大鼠GMC可表达一定量TIMP-1mRNA，LPS组在各时间点TIMP-1mRNA表达量均高于对照组，FOS各组表达量均低于LPS组。结论FOS抑制LPS诱导的GMC分泌ColⅣ，从蛋白和mRNA水平抑制LPS诱导的大鼠TIMP-1表达，而TIMP-1是调节ColⅣ降解的重要因子，为FOS的肾脏保护作用机制提供理论依据。