SAC诱导青少年牙周炎B细胞多克隆激活

Ｂ淋巴细胞和浆细胞是慢性牙周炎病损成立期和进展期的主要炎性细胞 ,Ｂ细胞的多克隆激活是牙周组织破坏的可能机制[1] 。本实验利用Ｂ细胞多克隆激活剂———葡萄球菌Ａ蛋白菌体 (ＳＡＣ)诱导的3 Ｈ -ＴｄＲ掺入的全血Ｂ淋巴细胞转化试验 ,检测了青少年牙周炎 (ＪＰ)患者Ｂ细胞识别抗原和转化为母细胞的能力 ;同时利用Ｂ细胞单克隆抗体 ,采用间接免疫荧光技术观察其数量的变化 ,以分析多克隆Ｂ细胞激活在ＪＰ致病过程中的可能作用。1　材料和方法1.1　病例选择实验组 :ＪＰ患者 17例 ,平均年龄为 2 4.8岁 ,3月内未行牙周治疗。对照组 :无牙…     

老年人牙周炎患者外周血T细胞及其亚群的研究

运用部分CD系列的McAb,采用APAAP桥联酶标法检测了11名老年人牙周炎,10名正常老年人及13名正常青年人外周血CD3、CD4、CD8和CD25百分率,结果表明正常老年人与正常青年人相比CD3有显著下降,反映了老年人细胞免疫功能可能有下降;老年人牙周炎组与正常老年人相比CD3、CD4、CD4/CD8比值都有非常明显的下降,说明T细胞及其亚群有紊乱,提示老年人牙周炎可能与机体细胞免疫功能低下有关。     

变链球菌表面蛋白分子结构中T、B细胞表位的定位分布

变链球菌（ｍｕｔａｎｓｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）表面蛋白（包括ＰＡｃ,ＳＲ,ＰＡｇ,ＡｇⅠ／Ⅱ,ＳｐａＡ）是致龋的主要毒力因子。表面蛋白的主动免疫及其单克隆抗体的被动免疫都能有效地抑制变链球菌在口腔中的定居与繁殖,降低龋齿发生率。近年来,随着现代免疫学、分子生物学和基因工程技术的发展,已开始对表面蛋白分子中特定功能区和Ｔ、Ｂ细胞表位的定位分布进行深入的研究。１　Ｔ、Ｂ细胞表位在免疫应答中的作用表位又称为抗原决定簇,是抗原分子中可激发特异性免疫应答的特异的化学立体结构基因。Ｔ细胞表位是免疫应答的…     

慢性牙周炎病人外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的检测和免疫抑制功能分析

目的：探讨慢性牙周炎病人外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与牙周炎病变程度的相关性，并进一步分析CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的免疫抑制功能。方法：应用流式细胞仪检测牙龈炎、慢性牙周炎病人和健康对照者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的比例；以体外淋巴细胞混合培养法检测CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对同源CD4^＋CD25^-T细胞增殖的抑制效应，ELISA法检测培养体系中转化生长因子一B、白细胞介素一10的分泌水平。结果：轻度和中度慢性牙周炎组外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的比例分别为（19．33±7．04）％和（18．56±5．79）％，显著高于健康对照组和牙龈炎组（P〈0．05）；重度慢性牙周炎组为（9．31±3．04）％，显著低于健康对照组、牙龈炎组、轻度和中度慢性牙周炎组（P〈0．05）。当与CD4^＋CD25^-T细胞1：1混合培养时，重度慢性牙周炎者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的抑制率较健康对照组、牙龈炎组、轻度和中度慢性牙周炎组降低（P〈0．05），各培养组之间转化生长因子-β、白细胞介素-10的分泌水平无显著差异。结论：轻度和中度慢性牙周炎病人外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达上调，而重度慢性牙周炎病人则显著下降；重度慢性牙周炎病人CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的抑制功能存在异常，可能与其接触抑制途径缺陷有关。     

变形链球菌表面蛋白分子结构中T、B细胞表位的研究

T、B细胞表位是蛋白质抗原诱导机体产生免疫应答不可缺少的重要结构。含有 T、B细胞表位的防龋疫苗可激发有效的免疫应答和显著的抗龋效果。本文就表面蛋白分子结构中 T、B细胞表位的结构特点进行综述     

白藜芦醇减轻LPS诱导的牙周膜细胞损伤并抑制TLR4/NF-κB活化

目的:探究白藜芦醇(RES)对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜细胞(hPDLCs)损伤的保护作用.方法:体外培养并鉴定hPDLCs,将培养的hPDLCs随机分为5组:对照组、LPS(10 μg/ml)+RES(0、30、60、90tμmol/L)组,MTT法检测各组细胞增殖能力,ELISA检测各组细胞分泌TNF-α/IL-6水平,PCR和Western blot检测各组细胞TLR4/NF-κB mRNA和蛋白表达.结果:分离培养的hPDLCs抗波丝蛋白表达阳性,抗角蛋白表达阴性.与对照组比,LPS处理后细胞增殖能力明显降低,细胞分泌TNF-α/IL-6水平和TLR4/NF-κB mRNA和蛋白表达明显增加;30～90 μmol/L白藜芦醇预处理后,细胞增殖能力增加(P＜0.05),细胞分泌TNF-α/IL-6水平、TLR4/NF-κB mRNA以及蛋白表达则下调(P＜0.05),均呈现一定的浓度依赖性.结论:白藜芦醇可抑制TLR4/NF-κB活化并减轻LPS诱导的牙周膜细胞损伤.     

AMPK/NF-κB参与牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导的人牙周韧带细胞的炎症反应

目的:探索牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide, PgLPS)刺激对人牙周韧带细胞(human periodontal ligament cells, hPDLCs)引起炎症反应的机制的影响。方法:体外培养hPDLCs,以PgLPS梯度浓度进行干预,CCK-8法检测细胞活性,qRT-PCR法检测细胞IL-6、IL-8、AMPK、NF-κB mRNA的表达水平,ELISA法检测上清IL-6、IL-8的浓度,Western Blot法检测细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)、核转录因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、核转录因子抑制蛋白α(inhibitor of NF-κBα,IκBα)的蛋白活性。结果:与对照组相比,PgLPS刺激能提高细胞IL-6、IL-8分泌,降低细胞p-AMPK表达,增强p-IκBα、p-NF-κB表达,且均呈现浓度依赖性(P<0.05);AMPK、NF-κB、IL-6和IL-8的核酸表达水平(mR...     

抗RANKL多克隆抗体抑制T细胞介导的破骨细胞形成的体外研究

目的：探讨抗核因子-КB受体活化因子配体（RANKL）多克隆抗体对T细胞介导的破骨细胞形成的影响。方法：制备兔抗鼠RANKL多克隆抗体,使用不同浓度的抗体（1、5及10μg/mL）,观察小鼠重组RANKL诱导的破骨细胞形成,显微镜下计数抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）阳性多核细胞数/孔;体外分离、纯化、扩增大鼠的颈T淋巴细胞,给予不同浓度的兔抗鼠RANKL特异性抗体进行干预,取其上清和T细胞,分别与RAW264.7细胞共同培养,TRAP法测定T细胞介导的破骨细胞形成,显微镜下计数TRAP（＋）多核细胞数/孔;ELISA测定细胞上清中的可溶性RANKL浓度（sRANKL,pg/mL）。实验结果采用SPSS11.5软件包进行统计学分析。结果：兔抗鼠RANKL抗体既可减少RANKL诱导的TRAP（＋）多核细胞数,也可减少T细胞介导的TRAP（＋）多核细胞数,5μg/mL及10μg/mL抗体组差异显著（P〈0.05）,且呈浓度依赖性;上清中检出sRANKL的浓度与不加抗体对照组相比明显降低,具有统计学意义（P〈0.05）。结论：抗RANKL特异性抗体可通过减少sRANKL的表达水平,直接阻断RANKL与核因子-КB受体活化因子（RANK）的结合,降低T细胞介导的破骨样细胞吸收。     

Sj(o)gren综合征中T细胞亚群值的测定

目的:研究Sj(o)gren综合征中T细胞亚群和免疫球蛋白的变化.方法:应用单克隆抗体技术检测T细胞亚群,用单向免疫扩散法检测IgA、IgG、IgM 结果:Sj(o)gren综合征患者外周血中CD4降低(P＜0.05)、CD8升高(P＜0.05),其程度与病情发展相一致,严重者CD4/CD8倒置.IgA、IgG、IgM均升高(P＜0.05),尤以IgG显著(P＜0.01).结论:Sj(o)gre综合征中存在免疫调节异常.     

共培养诱导人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)向牙周膜细胞(hPDLs)分化的体外实验研究

目的:研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)向人牙周膜细胞(hPDLs)分化的可能性。方法:原代培养获得hUCMSCs和hPDLs;应用Transwell小室将两种细胞进行非接触式共培养;使用流式细胞仪检测共培养过程中hUCMSCs干细胞标记物CD146、SOX2、SSEA和Stro-1的变化情况;通过免疫荧光技术和Western Blot技术检测共培养过程中波形蛋白(Vimentin)在hUCMSCs中的变化情况。结果:共培养过程中hUCMSCs中的CD146、SOX2、SSEA和Stro-1持续降低;而Vimentin持续增高。结论:通过与hPDLs共培养,可以成功地将hUCMSCs诱导分化成为牙周膜样细胞,进一步证明了hUCMSCs可用于牙周损伤修复的可能。