孕早期吸入安氟醚对子代大鼠认知功能的影响

目的 探讨孕早期吸入安氟醚对子代大鼠认知功能的影响.方法 孕8～10 d SD大鼠30只,随机分为对照组(C组)、吸入安氟醚4 h组(E1组)和吸入安氟醚8 h组(E2组),每组10只.E1组和E2组分别吸入1.7%安氟醚4和8 h,氧流量2 L/min,C组吸入等流量氧气.于出生后20和30 d,采用Morris水迷宫实验测试子代大鼠的认知功能.结果 与C组比较,E1组和E2组出生后20和30 d时子代大鼠认知功能测试第3至5天逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,平台象限停留时间缩短(P＜0.05);E1组和E2组子代大鼠上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 孕早期吸入安氟醚可降低子代大鼠的认知功能.     

大鼠妊娠前后吸入异氟烷或七氟烷对子代海马NMDA受体表达的影响

目的 探讨大鼠妊娠前后吸入异氟烷或七氟烷对子代海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体表达的影响.方法 雌性SD大鼠30只,3月龄,体重250～ 300 g,采用随机数字表法,将其分为5组(n=6):对照组(C组)、妊娠前1d吸入1.6％异氟烷6h组(BI组)、妊娠6、10、14和18d时吸入1.6％异氟烷6h组(PI组)、妊娠前吸入2.4％七氟烷6h组(BS组)和妊娠6、10、14和18d吸入2.4％七氟烷6h组(PS组).于出生当天(T1)、出生后第7(T2)、14(T3)和28天(T4)时各组按窝别随机取12只子鼠处死取海马,采用免疫荧光和RT-PCR法检测NMDA受体(NRI、NR2A和NR2B)的表达水平.结果 与C组比较,BI组和BS组子鼠海马NMDA受体表达差异无统计学意义(P＞0.05),PI组和PS组T1-3时子鼠海马NR1和NR2A表达上调,NR2B表达下调,NR1 mRNA和NR2A mRNA表达上调,NR2B mRNA表达下调(P＜0.01),T4时NMDA受体表达差异无统计学意义(P＞0.05);与PI组比较,PS组T1-3时子鼠海马NR1和NR2A表达上调,NR2B表达下调,NR1 mRNA和NR2A mRNA表达上调,NR2B mRNA表达下调(P＜0.05或0.01),T4时NMDA受体表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 妊娠前吸入异氟烷或七氟烷对子鼠海马NMDA受体表达无影响,妊娠后吸入异氟烷或七氟烷可引起子鼠海马NMDA受体表达异常,可能引起子鼠海马神经细胞凋亡和神经系统发育及认知功能异常.     

孕早期七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能的影响

目的 评价孕早期七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能的影响.方法 孕5～7d的SD大鼠30只,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):正常对照组(C组)、吸入七氟醚4h组(S1组)和吸入七氟醚8h组(S2组).S1组和S2组分别吸入95％氧气-1.8％七氟醚4h和8h,氧流量2L/min,C组吸入95％氧气8h.分别于出生后20、30 d取5只母鼠的子鼠,采用Morris水迷宫实验测定认知功能,持续7d,然后处死子代大鼠,分离海马组织,测定N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)mRNA及其蛋白和hippyragranin mRNA的表达水平.结果 3组子代大鼠水迷宫实验结果、NR2B mRNA及其蛋白和hippyragranin mRNA表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 孕早期七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能无影响.     

NR2B多肽疫苗对神经病理性痛大鼠的镇痛效应

目的 评价NR2B多肽疫苗对神经病理性痛大鼠的镇痛效应.方法 成年雌性SD大鼠,体重180～200 g,制备保留性神经损伤(SNI)模型,7 d后选取SNI模型制备成功的大鼠18只,随机分为3组(n=6),NR2B组沿背部两侧皮下多点注射NR2B多肽疫苗50 μl(含NR2B 100μg)3次,每隔2周注射1次;PBS组和KLH组分别给予PBS 50 μl和匙孔虫戚血蓝蛋白100 μg,均用弗氏佐剂稀释至100 μl.分别于制备SNI前1 d(基础值)、第1次免疫前1 d及第3次免疫后14d时测定机械痛阈;分别于制备SNI前1 d及第3次免疫后14 d时取血清和脑脊液,测定NR2B抗体滴度,然后处死大鼠,取L3-5脊髓组织,其中3只采用免疫组化法测定脊髓背角胶质纤维酸性蛋白表达水平,反映星形胶质细胞激活程度;另外3只采用Western blotting法测定脊髓背角NR2B蛋白表达水平.结果 NR2B组第3次免疫后14 d时血清及脑脊液中均可检测到NR2B抗体,而SNI前1 d时未检测到NR2B抗体,PBS组及KLH组各时点均未检测到NR2B抗体.与基础值比较,各组机械痛阈均降低(P<0.05);与PBS组和KLH组比较,NR2B组第3次免疫后机械痛阈升高,脊髓背角星形胶质细胞激活程度降低,NR2B蛋白表达下调(P<0.05).结论 NR2B多肽疫苗对神经病理性痛大鼠具有镇痛作用,其机制与进入脊髓的NR2B抗体下调了NR2B蛋白表达有关.     

不同浓度七氟烷对老年大鼠认知功能的影响

目的 探讨不同浓度七氟烷对老年大鼠认知功能的影响.方法 18月龄雄性SD大鼠40只,体重500～650 g,随机分为3组,对照组(C组,n=8)吸入空气,1.5%七氟烷组(S1组,n=16)吸入1.5%七氟烷2 h,3.0%七氟烷组(S2组,n=16)吸入3.0%七氟烷2 h.于吸入七氟烷后1、7 d(T1.2)S1组和S2组随机取8只大鼠,采用Y型迷宫实验行认知功能测试,认知功能测试后12 h时处死大鼠,断头取脑,采用RT-PCR方法测定左侧海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)mRNA表达,采用免疫组化法检测右侧海马NR2B蛋白表达.结果 与C组比较,S2组吸入七氟烷后1 d大鼠认知功能减退,右侧海马NR2B蛋白、左侧海马NR2B mRNA表达上调(P<0.05),S1.组上述指标差异无统计学意义(P0.05).结论 吸入1.5%七氟烷后老年大鼠认知功能无明显变化;吸入3%七氟烷后1 d老年大鼠认知功能减退,可能与其上调海马含2B亚基的NMDA受体表达有关.     

利多卡因致大鼠惊厥时海马神经元含NR2B亚基的N-甲基-D-天门冬氨酸受体表达的变化

目的 评价利多卡因致大鼠惊厥时海马神经元含NR2B亚基的N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体表达的变化.方法 健康雄性SD大鼠24只,体重220～250 g,6月龄,采用随机数字表发法,将其分为2组(n=12):生理盐水组(N组)和利多卡因组(L组).L组经尾静脉输注2％利多卡因4 mg· kg-1·min-1至大鼠发生RacineⅢ级惊厥,N组以等容量等速率生理盐水替代.于惊厥停止后即刻、6、12 h(T1～3)时取海马,采用免疫印迹和RT-PCR法检测NR2B蛋白及mRNA的表达水平.结果 与N组比较,L组NR2B蛋白及mRNA表达上调.与T1时比较,L组T2,3时NR2B蛋白及mRNA表达下调(P＜0.05).与T2时比较,L组T3时NR2B蛋白表达下调(P＜0.05).结论 利多卡因诱发大鼠惊厥时海马神经元含NR2B亚基的NMDA受体表达上调,该变化可能与利多卡因诱发惊厥发作有关.     

异氟醚对新生大鼠认知功能的影响

目的 观察异氟醚对新生大鼠认知功能的影响。方法 新生1周Wistar大鼠40只，雌雄不拘，随机分为5组（n=8）：对照组（A组）吸入空气，B、C组分别吸入1．8％和1．2％异氟醚6h，D、E组分别吸入1．8％、1．2％异氟醚3次，1次／日，2h／次。吸入异氟醚后3周进行认知功能测试，包括旷场实验和Morris水迷宫测试，认知功能测试完毕后立即处死大鼠，取海马组织，进行免疫组织化学染色，测定N-甲基-D-天冬氨酸受体-2（NMDAR2）及谷氨酸转运体（GLAST）的表达。结果 吸入异氟醚可导致大鼠认知功能降低，海马NMDAR2和GLAST表达增加，吸入高浓度异氟醚后海马NMDAR2和GLAST表达增加更明显，单次吸入和多次吸入异氟醚后海马NMDAR2和GLAST表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 异氟醚可降低新生大鼠认知功能，与上调海马NMDAR2及GLAST表达有关。     

艾芬地尔预先给药对CCI大鼠脊髓NMDA受体NR2B亚基表达的影响

目的探讨艾芬地尔预先给药对坐骨神经慢性压榨性损伤(CCI)大鼠脊髓背角NR2B亚基表达的影响及其对神经病理性疼痛的预防作用。方法雄性SD大鼠50只,体重180～200 g,随机分为3组:假手术组(n=10)、CCI组(n=20)和艾芬地尔组(n=20)。建立CCI动物模型,假手术组大鼠仅分离坐骨神经,但不结扎神经。艾芬地尔组大鼠在术前30 min及术后1、2 d连续3 d腹腔内注射艾芬地尔(10 mg/kg);CCI组大鼠腹腔内注射相同体积的生理盐水;假手术组未给药。各组均于术前,假手术组于假手术后3 d、艾芬地尔组和CCI组均于CCI术后7、14 d分别取10只大鼠,以von Frey纤维测定机械痛阈,随后断头处死,取患侧L4.5脊髓背角组织,采用Western blot方法测定NR2B亚基的蛋白表达。结果各组术前基础机械痛阈比较差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,CCI组术后7、14 d时机械痛阈降低(P<0.05),艾芬地尔组术后7、14 d时差异无统计学意义(P>0.05);与CCI组比较,艾芬地尔组术后7、14 d时机械痛阈升高(P<0.05)。与假手术组相比,艾芬地尔组和CCI组术后7、14 d时脊髓背角NR2B蛋白表达均升高(P<0.05);与CCI组比较,艾芬地尔组术后7、14 d时脊髓背角NR2B蛋白表达降低(P<0.05)。结论大鼠腹腔内预先注射艾芬地尔,通过特异性地拮抗含NR2B亚基NMDA受体,可有效地预防CCI导致的神经病理性疼痛,其机制与降低脊髓背角NR2B亚基表达升高有关。     

孕早期异氟醚麻醉对子代大鼠认知功能的影响

目的 评价孕早期异氟醚麻醉对子代大鼠认知功能的影响.方法 孕5～7d的SD大鼠30只,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):正常对照组(C组)、吸入异氟醚4h组(Ⅰ1组)和吸入异氟醚8h组(Ⅰ2组).Ⅰ1组和Ⅰ2组分别吸入95％氧气-1.4％异氟醚4h和8h,氧流量2L/min,C组吸入95％氧气8h.分别于出生后20、30 d取5只母鼠的子鼠,采用Morris水迷宫实验测定认知功能,持续7d,然后处死子代大鼠,分离海马组织,测定N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基mRNA及其蛋白的表达水平.结果 3组子代大鼠水迷宫实验结果、N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基mRNA及其蛋白表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 孕早期异氟醚麻醉对子代大鼠认知功能无影响.     

NMDA受体在七氟烷麻醉致老龄小鼠海马神经元程序性坏死中的作用

目的评价N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA受体)在七氟烷麻醉致老龄小鼠海马神经元程序性坏死中的作用。方法清洁级健康雄性C57BL/6小鼠90只, 18月龄, 体重27～30 g, 采用随机数字表法分为3组(n=30):对照组(C组)、七氟烷麻醉组(S组)和七氟烷麻醉+NMDA受体拮抗剂盐酸美金刚组(S+M组)。S组和S+M组小鼠连续3 d吸入3%七氟烷2 h, S+M组于每次吸入七氟烷前1 h腹腔注射盐酸美金刚20 mg/kg, C组只吸入纯氧。分别于麻醉前1 d、麻醉后3和7 d时每组随机取10只小鼠行Morris水迷宫实验。Morris水迷宫实验结束后立即处死小鼠取海马, 于光镜下观察病理学结果, 采用流式细胞术测定神经元程序性坏死率和胞浆游离钙离子浓度([Ca2+]i), Wes-tern blot法检测NMDA受体亚型GluN2A、GluN2B和受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)的表达。结果与C组比较, S组和S+M组麻醉后各时点逃避潜伏期延长, 穿越原平台位置次数减少, 海马[Ca2+]i和神经元程序性坏死率升高, GluN2A、GluN2B和RIP1表达上调(P<0...     

孕早期氯胺酮麻醉对子代大鼠海马c-fos mRNA和c-jun mRNA表达的影响

目的 探讨孕早期氯胺酮麻醉对子代大鼠海马c-fos mRNA和c-jun mRNA表达的影响.方法 孕5～13 d的SD大鼠30只,体重250～300 g,随机分为2组(n=15):对照组(C组)和氯胺酮组(K组).K组经尾静脉注射氯胺酮20 mg/kg,随后以130 mg·kg-1·h-1的速率静脉输注2 h;C组以等量生理盐水替代氯胺酮.子代大鼠于出生后20和30 d时测定认知功能,取海马组织,测定c-fosmRNA和c-jun mRNA表达水平并观察超微结构.结果 与C组比较,K组子代大鼠出生后30 d时认知功能测定第2天逃避潜伏期延长(P＜0.05),海马c-fos mRNA和c-jun mRNA的表达水平差异无统计学意义,出生后20 d上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).K组海马神经元发生损伤.结论 孕早期氯胺酮麻醉抑制子代大鼠认知功能的机制与海马神经元受损有关,但与海马c-fos mRNA和c-jun mRNA表达无关.     

吗啡耐受大鼠脊髓NR2B与mGluR5的相互作用

目的 评价吗啡耐受大鼠脊髓含2B亚基的NMDA受体(NR2B)和代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)的相互作用.方法 雄性SD大鼠,体重220～280 g,取鞘内置管成功的大鼠16只,随机分为2组(n=8).对照组(C组)鞘内注射生理盐水10 μl;吗啡组(M组)鞘内注射吗啡10 μg(10 μl).每日给药2次,连续7 d.于给药前和给药后30 min采用热水缩尾法测定痛阈,计算最大镇痛效应百分比(MPE).最后1次痛阈测定结束后第2天,处死大鼠,取L4-5,脊髓背角,采用Western blot法测定NR2B和mGluRS蛋白表达水平;应用免疫共沉淀技术,NR2B抗体沉淀提取蛋白,Western blot法检测沉淀物.结果 与C组比较,给药1～5 d时M组MPE升高(P<0.01),给药7 d时差异无统计学意义(P>0.05).与C组比较,M组NR2B蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),mGluRS蛋白表达上调(P<0.01).免疫共沉淀法证实NR2B与mGluR5存在相互作用.结论 吗啡耐受大鼠脊髓NR2B与mGluR5存在相互作用.     

反复吸入七氟烷对老年大鼠认知功能的影响

目的 评价反复吸入七氟烷对老年大鼠认知功能的影响.方法 健康Wistar大鼠24只,月龄18月,体重270-450 g,雌雄各半,随机分为3组(n=8):对照组(C组)、2%七氟烷组(S1组)和3%七氟烷组(S2组).C组不吸入七氟烷;S1和S2组分别吸入2%、3%七氟烷,100 min/d,连续5d.于干预结束后1-6d(T1-6)时进行水迷宫实验,记录T1-5时游泳时间和游泳距离及T6时第4象限探索时间和游泳距离.于最后1次水迷宫实验结束后60 min处死大鼠,取海马组织,采用RT-PCR法测定海马N-甲基肌天冬氨酸受体(NMDAR)、NR1和NR2B mRNA的表达.结果 与C组比较,S1组T1时游泳时间和游泳距离延长.T6时第4象限探索时间缩短,NMDAR mRNA表达上调(P<0.05),NRI和NR2B mRNA的表达差异无统计学意义(P<0.05).结论 反复吸入2%七氟烷不会导致老年大鼠认知功能减退;而反复吸入3%七氟烷可导致一过性认知功能减退.     

N-甲基-D-天门冬氨酸受体与吸入麻醉药对小鼠催眠、镇痛作用的关系

目的探讨N．甲基．D．天门冬氨酸(NMDA)受体与安氟醚、异氟醚、七氟醚对小鼠催眠及镇痛作用的关系。方法实验动物选用昆明种小鼠,雌雄不拘。第一部分为催眠实验,120只小鼠随机分成安氟醚、异氟醚、七氟醚三组,分别腹腔注射安氟醚2 ITIl·kg～、异氟醚1．2IrIl·kg～、七氟醚5 rnl·奴～,每组又分成人工脑脊液(aCSF‘)、NMDA 25、NMDA 50及NMDA 75亚组,每亚组10只,各组翻正反射消失后立即侧脑室注射aCSF、NDMA25、50、75 mg 10 m,记录翻正反射恢复(RT)时间。第二部分为镇痛实验,160只小鼠随机分成对照、安氟醚、异氟醚、七氟醚组,对照组不给予任何处理,安氟醚、异氟醚、七氟醚组分别皮下注射安氟醚1．5 llll·kg一、异氟醚0．8 Jnl·kg一、七氟醚4．5 llll·kg～,各组又分成 aCSF、NMDA 2．5、NMDA5及NMDA 10亚组,每亚组10只,各组注药后10 min鞘内注射aCSF或2．5、5、 10 ng NMDA lO出,1 min后腹腔注射O．6％冰醋酸,记录扭体次数。结果催眠实验中,安氟醚、异氟醚、七氟醚组的亚组间比较RT差异无统计学意义(P>0．05)。镇痛实验中,与aCSF亚组比较,对照组的NMDA 2．5亚组、NMDA 5亚组、NMDA 10亚组扭体次数差异无统计学意义,安氟醚、异氟醚、七氟醚组的NMDA 5 ng亚组、NMDA 10 ng亚组扭体次数增加(P相似文献   

脊髓神经激肽-1受体在吸入麻醉药对小鼠抗伤害性效应中的作用

目的 探讨脊髓神经激肽-1受体(NK-1R)在吸入麻醉药对小鼠抗伤害性效应中的作用.方法 昆明种小鼠320只,雌雄各半,体重20～25g,按分层随机区组设计,将小鼠随机分为4组(n=80):生理盐水组(NS组)、恩氟醚组(E组)、异氟醚组(Ⅰ组)和七氟醚组(S组),每组再分为4个亚组,Ⅰ组～Ⅳ组,每亚组20只.NS组腹腔注射生理盐水1.0 ml/kg,E组、Ⅰ组和S组分别腹腔注射恩氟醚0.5 ml/kg、异氟醚0.4 ml/kg和七氟醚2.0 ml/kg,腹腔注射结束后5 min时,Ⅰ组～Ⅳ组分别鞘内注射生理盐水5μl、Sar-SP(NK-1R激动剂)20、40和80ng.于腹腔给药前(基础状态)、鞘内给药后测定甩尾潜伏期(TFL),于鞘内给药后1 min时行福尔马林实验,记录Ⅰ相和Ⅱ相累积舔足时间(PLT).结果 与NS组比较,E组、Ⅰ组和S组相应亚组TFL延长,Ⅰ相和Ⅱ相PLT缩短(P＜0.05或0.01);与Ⅰ组比较,E组、Ⅰ组和S组各其余亚组TFL缩短(P＜0.05);E组、Ⅰ组和S组的Ⅱ组～Ⅳ组TFL均逐渐缩短(P＜0.05);NS组、E组、Ⅰ组和S组各亚组间Ⅰ相和Ⅱ相PLT比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 脊髓 NK-1R与吸入麻醉药(恩氟醚、异氟醚、七氟醚)抗热刺激诱发的伤害效应有关,与其抗化学性刺激和炎性刺激诱发的伤害效应无关.

Abstract：

Objective To investigate the role of neurokinin-1 receptor (NK-1R) in the anti-nociceptive effect of enflurane, isoflurane and sevoflurane in mice. Methods Three hundred and twenty Kunming mice of both sexes weighing 20-25 g were randomly divided into4 groups (n =80 each): group normal saline (group NS);group enflurane (group E); group isoflurane (group I) and group sevoflurane (group S). Normal saline (NS) 1.0ml/kg, erflurane 0.5 ml/kg, isoflurane 0.4 ml/kg and sevoflurane 2.0 ml/kg were injected intraperitoneally in NS,E,I and S groups respectively. Each group was further divided into 4 subgroups receiving intrathecal NS 5 μl and Sar-SP (NK-IR agonist) 20, 40 and 80 ng respectively at 5 min after intraperitoneal injection of inhalation anesthetics. The anti-nociceptive effect of the inhalation anesthetics was assessed by tail flick latency (TFL) (the latency for removal of the tail from the path of heat source) and paw-licking time (PLT) after intraplantar formalin injection. Results lntraperitoneal enflurane, isoflurane and sevoflurane significantly prolonged TFL and shortened PLT. Intrathecal Sar-SP 20, 40 and 80 ng significantly shortened TFL dose-dependently but had no significant effeet on PLT as compared with control subgroup. Conclusion NK-1R is involved in the anti-nociceptive effect of enflurane, isoflurane and sevofluran on thermal pain but not chemical and inflammatory pain.