异氟醚麻醉对大鼠血皮质醇及海马脑源性神经营养因子和神经生长因子的影响

目的 探讨异氟醚麻醉对大鼠血皮质醇及海马脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)的影响.方法 成年SD雄性大鼠36只,10周龄,体重250～280 g,采用随机数字表法,将其随机分为6组:正常对照组(C组,n=6)、O2组(O组,n=6)和异氟醚组(I组,n=24).I组通入2％异氟醚2h,纯氧流量3 L/min,O组仅通入纯氧.O组于停止通入纯氧后进行水迷宫实验,Ⅰ组分别于停止给药后2h、1、7、14 d取6只大鼠、进行水迷宫实验,定位航行实验中记录逃避潜伏期和游泳总路程,空间探索实验中记录穿越平台次数和游泳总路程.每个时点水迷宫实验结束后,取眼眶血,测定血浆皮质醇浓度;取海马组织,测定BDNF和NGF的含量.结果 与C组比较,O组空间探索实验中穿越平台次数减少,游泳总路程缩短,血浆皮质醇浓度降低,Ⅰ组于停止给药后1d时定位航行实验中逃避潜伏期和游泳总路程均延长,空间探索实验中穿越平台次数减少,游泳总路程缩短、海马BDNF含量降低(p＜0.05或0.01).结论 异氟醚麻醉对大鼠认知功能短期内有一过性抑制作用,其机制与促进皮质醇释放与海马BDNF合成有关,而与海马NGF合成无关.     

乳化异氟醚麻醉对大鼠海马淀粉样β蛋白表达及Tau蛋白磷酸化水平的影响

目的 探讨乳化异氟醚麻醉对大鼠海马淀粉样β蛋白(Aβ)表达及Tau蛋白磷酸化水平的影响.方法 健康SD大鼠72只,体重250～300 g,8周龄.采用随机数字表法,将其分为3组:正常对照组(C组,n=12)、脂肪乳组(E组,n=12)和8％乳化异氟醚组(EI组,n=48).E组和EI组分别经尾静脉缓慢注射30％脂肪乳或8％乳化异氟醚0.15 ml/100 g.C组不给予任何药物.麻醉前6d行Morris水迷宫实验,E组于给药后2 h(T1)、C组于相应时点、EI组分别于T1、给药后1 d(T2)、7 d(T3)和14 d(T4)时随机取12只大鼠测定逃避潜伏期和行空间搜索实验.各时点Morris水迷宫实验结束后,取血样,测定血浆S100蛋白浓度;取血后取脑组织,采用免疫组化法测定脑组织Aβ和磷酸化Tau (p-Tau)蛋白表达水平.结果 麻醉前与定位航行实验第1天比较,大鼠第3-5天逃避潜伏期和游泳总路程缩短(P＜0.01).与C组比较,EI组T1时逃避潜伏期和游泳总路程延长,原平台所在象限停留时间缩短,T4时血浆S100蛋白浓度降低(P＜0.05),海马Aβ和p-Tau蛋白表达水平差异无统计学意义,E组Morris水迷宫实验各指标、血浆S100蛋白浓度、海马Aβ和p-Tau蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P＞0.05);与T1时比较,EI组T-T时逃避潜伏期和游泳总路程缩短,原平台所在象限停留时间延长(P＜0.05).结论 乳化异氟醚麻醉对大鼠海马Aβ表达水平和Tau蛋白磷酸化水平无明显影响,提示海马Aβ和Tau蛋白与乳化异氟醚麻醉诱发的认知功能障碍无关.     

手术对异氟醚麻醉下老龄大鼠术后认知功能的影响

目的 探讨手术对老龄大鼠异氟醚麻醉下术后认知功能的影响.方法 健康雄性老龄SD大鼠72只,年龄20月,体重500～600 g,随机分为3组(n=24):对照组(C组)、异氟醚麻醉组(I组)和手术组(O组).C组吸入30%氧气2 h,I组吸入1.5%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h,O组吸入1.5%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h,并实施腹部手术.于麻醉结束后或术后24 h时随机取8只大鼠,取海马组织,采用免疫组织化学法和RT-PCR法分别测定神经元胆碱乙酰转移酶(ChAT)及ChAT mRNA的表达水平,其余大鼠进行Morris水迷宫实验,测定认知功能.结果 与C组比较,I组和O组逃避潜伏期延长,原平台象限停留时间缩短,穿越原平台次数减少,海马神经元ChAT mRNA及其蛋白表达水平降低(P<0.05);与I组比较,O组术后第4、5天逃避潜伏期延长,原平台象限停留时间缩短,海马神经元ChAT mRNA及其蛋白表达水平降低(P<0.05);与麻醉结束后或术后第3天比较,C组第4、5天逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05),I组和O组逃避潜伏期延长(P<0.05);I组和O组麻醉结束后或术后第4、5天逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05).结论 手术操作可加重异氟醚引起的老龄大鼠术后认知功能障碍,其机制可能与海马胆碱能神经元受损有关.     

异氟醚对老龄大鼠海马CA3区突触素表达的影响

目的 评价异氟醚对老龄大鼠海马CA3区突触素表达的影响.方法 雌性清洁级SD大鼠63只,月龄24月,体重400～650 g,随机分为3组(n=21):对照组(C组)、1.2%异氟醚组(E_1组)和1.8%异氟醚组(E_2组).C组吸入含40%氧气的空氧混合气体3 h;E_(1,2)组吸入3%异氟醚行麻醉诱导,待翻正反射消失后再分别吸入1.2%、1.8%异氟醚维持3 h.各组随机取12只大鼠,于麻醉结束后第1天采用Morris水迷宫系统测定大鼠认知功能(逃避潜伏期和探索时间),连续测定7 d;随机取9只大鼠于麻醉结束后第1、3和7天处死,测定海马CA3区突触素的表达水平.结果 与C组比较,E_1组和E_2组麻醉结束后第2、3天逃避潜伏期延长(P<0.05或0.01),第4～6天逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05),麻醉结束后海马CA3区突触素表达持续下调(P<0.05).三组探索时间比较差异无统计学意义(P>0.05);与E_1组比较,E_2组逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05),海马CA3区突触素表达下调(P<0.01).结论 异氟醚致老龄大鼠认知功能障碍与海马突触素表达无关.     

新生大鼠七氟醚麻醉对发育期认知功能和海马乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的 探讨新生大鼠七氟醚麻醉对发育期认知功能和海马乙酰胆碱酯酶( AChE)活性的影响.方法 出生7d的SD大鼠80只,体重12 ～ 16 g,雌雄各半,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n＝16):A组和B组分别吸入3％七氟醚6h和2h;C组和D组分别吸入1.5％七氟醚6h和2h;E组只吸人氧气.待大鼠生长至断乳期(出生后16～21 d)和性成熟期(出生后55～60 d)时,采用Morris水迷宫实验测试认知功能.分别于出生后21和60d水迷宫实验结束后30 min处死大鼠,取海马组织,采用比色法测定AChE活性.结果 与E组比较,A组出生后17～20 d、B组和C组出生后18、19 d、D组出生后18d时逃避潜伏期延长,A组出生后21 d时AChE活性升高(P<0.05或0.01);与A组比较,B组和C组出生后19、20d时逃避潜伏期缩短,出生后21 d时海马AChE活性降低(P<0.05或0.01);与B组和C组比较,D组出生后19、20d时逃避潜伏期缩短(P<0.05);五组大鼠原平台象限活动时间和穿越原平台次数、出生后60d时AChE活性比较差异无统计学意义(P＞0.05);性成熟期各组逃避潜伏期差异无统计学意义(P＞0.05).结论 新生大鼠接受七氟醚麻醉后,可短暂降低发育期认知功能,且与吸入浓度和时间有关,其机制可能与增强海马AChE活性有关.     

米诺环素对异氟醚麻醉后老年大鼠认知功能和海马炎症反应的影响

目的探讨米诺环素预处理对老年大鼠吸入异氟醚后认知功能和海马炎症反应的影响。方法健康雄性SPF级SD大鼠48只,约20月龄,体重350～400g,随机分为3组:生理盐水组(NS组)、异氟醚组(Iso组)、米诺环素预给药组(M组),每组16只。NS组腹腔注射等容量生理盐水;Iso组大鼠开始吸入2.5%异氟醚3min,随后1.5%异氟醚麻醉维持4h;M组于吸入异氟醚前30min腹腔注射米诺环素50mg/kg,余同Iso组。所有大鼠麻醉结束后24h立即进行认知功能测试,包括Morris水迷宫和旷场实验测试,认知功能测试完毕后立即处死大鼠,取海马组织,采用ELISA法测定大鼠海马IL-1、IL-6、TNF-α的浓度。结果与NS组比较,Iso组第2、3和4天逃避潜伏期明显延长(P0.05),第5天平台象限停留时间明显缩短、穿越平台象限次数明显减少(P0.05),第1、2和3天中心区停留时间明显缩短(P0.05)。与Iso组比较,M组第2、3和4天逃避潜伏期明显缩短(P0.05),第5天平台象限停留时间明显延长、穿越平台象限次数明显增多(P0.05),第1、2和3天中心区停留时间明显延长(P0.05)。与NS组比较,Iso组海马IL-1、IL-6、TNF-α浓度明显升高(P0.05),与Iso组比较,M组海马IL-1、IL-6、TNF-α浓度明显降低(P0.05)。NS组和M组不同时点各指标差异无统计学意义。结论米诺环素预处理可减轻异氟醚麻醉所致老年大鼠认知功能障碍,其机制可能与抑制海马炎症反应有关。     

吸入不同浓度异氟醚对老龄大鼠海马细胞色素c表达的影响

目的 评价吸入不同浓度异氟醚对老龄大鼠海马细胞色素c(Cyt c)表达的影响.方法 健康雄性老龄SD大鼠63只,月龄20月,体重500～600 g,随机分为3组(n=21),对照组(C组):吸入30%氧气2 h;0.75%异氟醚组(L组):吸入0.75%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h;1.5%异氟醚组(I2组):吸入1.5%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h.分别于麻醉30 min、1和2 h时,各组取5只大鼠,取动脉血样行血气分析.于麻醉结束后24 h时,各组取8只大鼠,测定认知功能;取8只大鼠,分别采用免疫组化法和Western blot法测定海马Cyt c 的表达水平.结果 与C组比较,Ⅰ1组和Ⅰ2组逃避潜伏期延长,原平台象限停留时间缩短,穿越原平台次数减少,海马Cyt c表达上调(P＜0.05);与Ⅰ1组比较,Ⅰ2组逃避潜伏期、原平台象限停留时间缩短和穿越原平台次数差异无统计学意义(P＞0.05),海马Cyt c表达上调(P＜0.05).结论 吸入异氟醚可通过上调海马Cyt c的表达导致老龄大鼠认知功能障碍.     

海马RhoA-ROCK2通路在老年小鼠术后认知功能障碍中的作用

目的探讨海马RhoA-ROCK2通路在老年小鼠术后认知功能障碍(postoperative cognitive dysfunction,POCD)中的作用及潜在机制。方法采用异氟醚麻醉+腹腔探查术建立POCD模型。18月龄雄性C57BL/6小鼠48只,随机均分为四组:对照+生理盐水组(CS组)、对照+法舒地尔(Rho激酶抑制剂)组(CF组)、异氟醚麻醉+腹腔探查术+生理盐水组(SS组)及异氟醚麻醉+腹腔探查术+法舒地尔组(SF组)。水迷宫训练开始前2h至行为学结束前2h,每天腹腔注射法舒地尔25mg/kg或等容量生理盐水,连续注射13d。手术前5d起行水迷宫训练,术后第1、3、7天分别行水迷宫定位航行测试,第7天定位航行测试后4h行空间探索测试。最后一次行为学测试后1h,取小鼠海马及全脑组织,检测海马ROCK2、Rho-GDIα、p-cofilin、cofilin、F-actin、G-actin蛋白含量、RhoA活性及CA1区神经元树突棘数目。结果水迷宫训练阶段,四组游泳速度及逃避潜伏期差异无统计学意义。与CS和CF组比较,术后第1、3、7天SS组逃避潜伏期明显延长,术后第7天平台象限停留时间明显缩短,原平台穿越次数明显减少,海马内RhoA活性及ROCK2蛋白含量明显增加,Rho-GDIα蛋白含量、p-cofilin/coflin、F-actin/G-actin及CA1区神经元树突棘数目明显减少(P0.05);与SS组比较,术后第1、3、7天SF组逃避潜伏期明显缩短,术后第7天平台象限停留时间明显延长,原平台穿越次数明显增加,海马内RhoA活性及ROCK2蛋白含量明显降低、Rho-GDIα蛋白含量、p-cofilin/coflin、F-actin/G-actin及CA1区神经元树突棘数目明显增多(P0.05)。结论术后认知功能障碍老年小鼠海马内RhoA-ROCK2通路活性增加;法舒地尔可改善术后老年小鼠空间记忆损害,其作用机制可能与抑制RhoA-ROCK2通路,增强actin动力学和突触重塑有关。     

七氟醚对老年大鼠术后认知功能及海马miR-132表达的影响

目的 探讨七氟醚对老年大鼠认知功能及海马miR-132表达的影响.方法 雄性SD大鼠60只,18～20月龄,行水迷宫训练5d后,按随机数字表法分为对照组(C组)和七氟醚组(S组),每组30只.S组2％七氟醚,C组纯氧处理后6h、1d、3d、7d进行水迷宫实验,记录逃避潜伏期和游泳总距离.各时点水迷宫实验结束后处死大鼠取海马组织,采用实时定量聚合酶链反应检测海马组织内miR-132的表达.结果 与C组比较,S组麻醉后6h、1d、3d、7d水迷宫测试的逃避潜伏期及游泳总距离明显延长,海马miR-132表达(0.41±0.03、0.43±0.04、0.51±0.03、0.62±0.05)明显降低(P＜0.05).S组内,与麻醉后6h比较,麻醉后1d及以后时间点水迷宫测试的逃避潜伏期[(69±10)、(61±11)、(43±9)s]明显缩短(P＜0.05);麻醉后3、7d水迷宫测试的游泳总距离[(1 424±198)、(1 052±134) cm]明显缩短(P＜0.05),海马miR-132的表达明显增加(P＜0.05).S组内,麻醉后7d与麻醉后各时间点比较,水迷宫测试的逃避潜伏期及游泳总距离明显缩短(P＜0.05),海马miR-132的表达明显增加(P＜0.05).结论 七氟醚可导致老龄大鼠术后认知功能障碍,其机制可能与其抑制海马组织内miR-132表达有关.     

孕期吸入异氟醚对子代大鼠海马神经元突触可塑性的影响

目的 探讨孕期吸入异氟醚对子代大鼠海马神经元突触可塑性的影响.方法 孕14 d的SD大鼠10只,体重220～250 g,采用随机数字表法,将孕鼠随机分为对照组和异氟醚组,每组5只.对照组大鼠每天单纯机械通气2 h,异氟醚组大鼠每天吸入1.3%异氟醚2 h,至大鼠分娩.子代大鼠出生后4周,采用Morris水迷宫实验测定认知功能,测定结束后处死子代大鼠取脑,分离海马,采用透射电镜观察海马CA1区神经元突触的超微结构,计数海马神经元突触数量,测定突触后致密物质厚度.结果 与对照组相比,异氟醚组子代大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马神经元突触数量减少,突触后致密物质厚度降低(P<0.05).结论 孕期吸入异氟醚可通过抑制子代大鼠海马神经元突触的可塑性而降低其认知功能.     

乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时脑组织突触后致密物质95活化的影响

目的 探讨乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时脑组织突触后致密物质95(PSD95)活化的影响.方法 雄性清洁级SD大鼠32只,体重280 ～ 300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=8):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、乳化异氟醚组(EI组)和脂肪乳剂组(LE组).采用大脑中动脉阻塞法制备局灶性脑缺血再灌注模型.EI组和LE组分别腹腔注射8％乳化异氟醚10.5 ml/mg或30％脂肪乳10.5 ml/mg,24h后制备模型.再灌注6h时行神经功能缺陷评分,随机取4只大鼠,处死后取缺血侧海马和皮层组织,采用Western blot法检测磷酸化的PSD95( pPSD95)的表达水平.再灌注24 h时,随机取4只大鼠,处死后取脑组织,计算脑梗死体积百分比.结果 S组未见神经功能缺陷和脑梗死发生.与S组比较,I/R组、EI组和LE组神经功能缺陷评分、脑梗死体积百分比、海马和皮质pPSD95表达水平升高(P＜0.01);与I/R组比较,EI组神经功能缺陷评分、脑梗死体积百分比、海马和皮质pPSD95表达水平降低(P＜0.05),LE组差异无统计学意义(P＞0.05).结论乳化异氟醚可通过抑制脑组织PSD95的活化,减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤.     

ERK1/2激活参与乳化异氟醚后处理的脑保护作用

目的观察细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的激活在8%乳化异氟醚后处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤中的作用。方法健康成年雄性SD大鼠48只,随机均分为六组:假手术组(S组)、缺血-再灌注组(IR组)、乳化异氟醚后处理组(EI组)、ERK抑制剂PD98059组(PD组)、乳化异氟醚后处理+PD98059组(EP组)、溶媒DMSO组(D组)。除S组外,均采用大脑中动脉阻闭2h,再灌注24h建立局灶性脑缺血-再灌注模型。缺血2h恢复再灌注即刻,EI组、EP组腹腔注射8%乳化异氟醚10.5ml/kg,其余各组注射生理盐水10.5ml/kg。PD组、EP组和D组于再灌注前30min侧脑室分别注入PD98059和DMSO。再灌注24h时进行神经功能缺陷评分(NDS评分),并观察组织形态学变化及细胞凋亡、p-ERK1/2阳性表达。结果与IR组相比,EI组NDS评分降低,凋亡细胞减少,磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达上调(P<0.05);与EI组相比,EP组NDS评分增高,凋亡细胞显著增加,p-ERK1/2表达下调(P<0.05)。结论 8%乳化异氟醚后处理通过激活ERK1/2信号通路对抗局灶性脑缺血-再灌注损伤。     

孕期吸入异氟醚对子代大鼠海马神经元突触可塑性的影响

目的 探讨孕期吸入异氟醚对子代大鼠海马神经元突触可塑性的影响.方法 孕14 d的SD大鼠10只,体重220～250 g,采用随机数字表法,将孕鼠随机分为对照组和异氟醚组,每组5只.对照组大鼠每天单纯机械通气2 h,异氟醚组大鼠每天吸入1.3%异氟醚2 h,至大鼠分娩.子代大鼠出生后4周,采用Morris水迷宫实验测定认知功能,测定结束后处死子代大鼠取脑,分离海马,采用透射电镜观察海马CA1区神经元突触的超微结构,计数海马神经元突触数量,测定突触后致密物质厚度.结果 与对照组相比,异氟醚组子代大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马神经元突触数量减少,突触后致密物质厚度降低(P<0.05).结论 孕期吸入异氟醚可通过抑制子代大鼠海马神经元突触的可塑性而降低其认知功能.

Abstract：

Objective To investigate the effect of isoflurane inhalation during gestation period on plasticity of hippo-campal synapses in offspring rats. Methods Ten healthy pregnant SD rats at 14 day gestation were randomly divided into 2 gorups ( n = 5 each): control group (group C) and isoflurane group (group I). The rats in group C were mechanically ventilated with O2 while in group I the rats inhaled 1.3% isoflurane in O2 for 2 h a day until labor. Four weeks after birth 4 offspring rats from each pregnant rats (2 male, 2 female) were tested for learning and memory abilities using Morris water maze. Then the offspring rats were sacrificed and hippocampi isolated. The synaptic structure of hippocampal CA1 area was examined by trans-electron microscopy. Results Morris water maze test showed that the escape latency was significantly shorter and the number of times of spanning flat roof greater in group C than in group I. The structure of hippocampus was intact in group C but incomplete in group I. Meanwhile the thickness of synaptic density was significantly decreased in group I. Conclusion Isoflurane anesthesia of pregnant rats may induce learning and memory disabilities in offspring rats by inhibiting the plasticity of synaptic structure in hippocampus.     

孕期吸入异氟醚对子代大鼠海马神经元突触可塑性的影响

目的 探讨孕期吸入异氟醚对子代大鼠海马神经元突触可塑性的影响.方法 孕14 d的SD大鼠10只,体重220～250 g,采用随机数字表法,将孕鼠随机分为对照组和异氟醚组,每组5只.对照组大鼠每天单纯机械通气2 h,异氟醚组大鼠每天吸入1.3%异氟醚2 h,至大鼠分娩.子代大鼠出生后4周,采用Morris水迷宫实验测定认知功能,测定结束后处死子代大鼠取脑,分离海马,采用透射电镜观察海马CA1区神经元突触的超微结构,计数海马神经元突触数量,测定突触后致密物质厚度.结果 与对照组相比,异氟醚组子代大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马神经元突触数量减少,突触后致密物质厚度降低(P<0.05).结论 孕期吸入异氟醚可通过抑制子代大鼠海马神经元突触的可塑性而降低其认知功能.     

乳化异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注时NF-κB活性的影响

目的 探讨乳化异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注时NF-κB活性的影响.方法 健康雄性SD大鼠48只,体重230～280 g,随机分为4组(n=12):假手术组(S组)仅穿线不结扎;缺血再灌注组(IR组)结扎左冠状动脉前降支30 min,恢复灌注120 min制备心肌缺血再灌注损伤模型;脂肪乳剂组(L组)经股静脉输注30%脂肪乳剂4 ml·kg-1·h-1 30 min后制备模型;乳化异氟醚组(EI组)经股静脉输注乳化异氟醚4 ml·kg-1·h-130 min,洗脱15 min后制备模型.于再灌注120 min时采集股动脉血样,采用ELISA法测定血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、IL-6浓度及磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,随后处死大鼠取心脏,采用Western blot法测定心肌细胞NF-κB活性,电镜下观察心肌细胞的超微结构.结果 与S组比较,IR组、EI组和L组心肌细胞NF-κB活性升高,血清IL-6、cTnI浓度及CK-MB活性升高(P＜0.05或0.01);与IR组比较,ET组心肌细胞NF-κB活性降低,血清IL-6、cTnI浓度及CK-MB活性降低(P＜0.05);电镜结果显示:EI组心肌细胞损伤程度较IR组和L组减轻.结论 乳化异氟醚预处理可通过降低NF-κB活性抑制炎性反应,从而减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

孕早期安氟醚麻醉对大鼠子代海马NR2B表达的影响

目的 评价孕早期安氟醚麻醉对大鼠子代海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)表达的影响.方法 孕8～10 d SD大鼠30只,体重200～250 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):对照组(C组)、吸入安氟醚4h组(E1组)和吸入安氟醚8h组(E2组).E1组和E2组分别吸入1.7％安氟醚4和8h,氧流量为2 L/min,C组吸入等流量氧气.分别于出生后20和30d,采用Morris水迷宫系统测定子鼠的认知功能.于水迷宫实验结束后第2天,取各组子鼠海马组织,分别采用PCR和免疫组化法测定NR2B mRNA及蛋白的表达.结果 与C组比较,E1组和E2组子鼠出生后20和30 d时逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,平台象限停留时间缩短(P＜0.05),海马NR2B mRNA及蛋白表达下调(P＜0.05);与E1组比较,E2组子鼠出生后20和30 d时海马NR2B mRNA及蛋白表达比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 孕早期安氟醚麻醉可降低大鼠子代的认知功能,其机制与抑制大鼠子代海马NR2B表达有关.     

七氟醚麻醉对幼鼠海马c-Jun氨基末端激酶表达和神经细胞凋亡的影响

目的 评价七氟醚麻醉对幼鼠海马c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达和神经细胞凋亡的影响.方法 健康雄性SD大鼠40只,日龄30～35 d,体重100～110 g,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=20):对照组(C组):吸入含有30%氧气的空氧混合气体5 h;七氟醚组(s组):吸入3%七氟醚5 h,并维持麻醉箱氧浓度为30%.苏醒后1 h时,每组随机处死10只大鼠,取两侧海马组织,分别采用免疫组化法和Western blot法测定磷酸化JNK(p-JNK)的表达水平,采用TUNEL法检测神经细胞凋亡情况.苏醒后24 h时,每组随机取10只大鼠,采用Morris水迷宫测试认知功能.结果 与C组比较,S组海马组织p-JNK表达上调,凋亡细胞计数升高,潜伏期延长和平台象限停留时间缩短(P＜0.05或0.01).结论 吸入3.0%七氟醚可能通过激活JNK信号通路,诱发海马神经细胞凋亡,从而导致幼鼠认知功能降低.

Abstract：

Objective To investigate the effects of sevoflurane anesthesia on the expression of c-Jun N-terminal kinase (JNK) and neuronal apoptosis in hippocampus in juvenile rats.Methods Forty healthy male SD rats, aged 30-35 days, weighing 100-110 g, were randomly divided into 2 groups (n = 20 each): control group (group C) and sevoflurane group (group S) . Group C inhaled a gas mixture of oxygen and air for 5 h and group S 3% sevoflurane for 5 h. The concentration of oxygen in both groups was maintained at 30% . Ten rats in each group were scarified at 1 h after regaining consciousness and the hippocampi removed for determination of phospho-JNK expression (by immuno-histochemistry and Western blot) and neuronal apoptosis (by TUNEL) . Another 10 rats were selected at 24 h after regaining consciousness to assess the cognitive function using Morris water maze. Results Compared with group C, phospho-JNK expression was significantly up-regulated, the number of apoptotic neurons increased, the latency prolonged and the duration of staying at the original platform quadrant shortened in group C ( P ＜ 0.05 or 0.01) . Conclusion Inhalation of 3.0% sevoflurane can induce neuronal apoptosis in hippocampus by activating JNK signaling pathway, thus leading to cognitive decline in juvenile rats.