1,25-二羟基维生素D3对小鼠成骨细胞增殖的影响

目的 检测1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对小鼠成骨细胞增殖及细胞周期的影响及其意义.方法 取出生24 h内的小鼠30只,无菌条件下取出颅骨,应用酶消化法进行成骨细胞培养,在培养液中加入不同浓度的1,25(OH)2Ds(10-8、10-9、10-11 mol/L),应用四唑蓝比色法(MTT)法检测其对成骨细胞增殖的影响,应用流式细胞仪检测其对成骨细胞细胞周期的影响.结果 小鼠成骨细胞在1,25(OH)2D3处理的24、48、72 h,10-8、10-9mol/L组与对照组吸光度(A)相比较,差异有统计学意义(P＜0.01),10-11mol/L组与对照组A比较,差异无统计学意义(P＞0.05);1,25(OH)2D3作用下小鼠成骨细胞S期(8.00±1.42)、G2-M期(7.70±0.67)的细胞减少,G1期(84.30±1.90)细胞增加. 结论 1,25(OH)2D3可以抑制体外培养的小鼠成骨细胞的增殖,并呈现一定的浓度依赖性.     

3,3',5-碘-L-甲腺原氨酸对成骨细胞前体增殖和成骨分化的作用

目的观察不同浓度的3,3',5-碘-L-甲腺原氨酸(3,3',5-triiodo-L-thyronine,T3)对小鼠颅顶前成骨细胞亚克隆14(MC3T3-E1 subclone 14)细胞增殖及分化水平的作用.方法分别给予不同浓度T3干预细胞,培养1、2、3 d后采用CCK8法检测细胞增殖水平;在成骨分化诱导试剂干预7 d基础上,结合上述T3给药,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测各浓度组成骨细胞分化水平,通过实时荧光定量PCR和免疫蛋白印迹(Western blot)法检测各浓度组的成骨细胞标记性基因及蛋白的表达差异.结果在分别干预1、2、3 d后,T3随着浓度增高,对细胞的增殖水平均呈明显上调;而且相同剂量的T3对于细胞增殖呈时间依赖性增强.此外,MC3T3-E1 Subclone 14细胞诱导7 d后,对比于0对照组,低浓度T3(1 nmol/L)对成骨细胞各分化参数均无明显作用,而10、100、1000 nmol/L的T3对细胞ALP染色,成骨细胞相关基因及蛋白均明显上调,其中以10和100 nmol/L组最为显著.结论T3对于MC3T3-E1 Subclone 14细胞的增殖和成骨细胞分化均有显著的促进作用.     

基于PI3K/AKT信号通路研究丹酚酸B对成骨细胞骨形成的调控作用

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路在丹酚酸B对成骨细胞骨形成的调控作用。方法 0.00、0.01、0.03、0.10、0.30、1.00 nmol/L的丹酚酸B作用MC3T3-E1细胞12、24、36 h,MTT法检测细胞活力,RT-PCR法检测碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)、Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)、骨钙素(OCN)mRNA表达,Western印迹检测细胞中ALP、OPN、COLⅠ、OCN及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达。结果与0.00 nmol/L比较,0.03、0.10、0.30 nmol/L丹酚酸B组细胞活力显著提高(P0.01),ALP、OPN、COLⅠ、OCN蛋白及mRNA表达量上调(P0.01),PI3K及p-AKT表达量上调(P0.01);而LY294002组ALP、OPN、COLⅠ及OCN蛋白及mRNA表达量下调(P0.01),PI3K及p-AKT表达量下调(P0.01)。与LY294002组比较,丹酚酸B+LY294002组ALP、OPN、COLⅠ、OCN蛋白及mRNA表达量上调(P0.01),PI3K及p-AKT表达量上调(P0.01)。结论丹酚酸B通过激活PI3K/AKT信号通路促进MC3T3-E1细胞骨形成。     

1,25-（OH）2D3对大鼠系膜细胞增殖的影响及机制探讨

目的探讨1,25-二羟基维生素D3[12,5-（OH）2D3]对大鼠肾小球系膜细胞（MC）增殖的影响及机制,为其临床应用提供依据。方法将体外培养的对数生长期大鼠MC分为对照组和观察组。观察组采用1,25-（OH）2D3（浓度为10-8mol/L）干预,对照组不干预。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,免疫荧光染色法检测蛋白激酶（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）表达。结果与对照组比较,观察组MC增殖受抑,细胞周期阻滞于G1期;Akt、mTOR蛋白表达降低,P均〈0.05。结论 1,25-（OH）2D3可抑制大鼠肾小球MC增殖,其作用机制可能为抑制磷脂酰肌醇-3激酶/Akt/mTOR信号传导通路。     

氟调控成骨细胞内质网应激信号通路对细胞增殖凋亡分化的影响

目的探讨氟调控成骨细胞内质网应激信号通路对细胞增殖凋亡分化的影响。方法培养成骨细胞MC3T3-E1,0、1、2、4、8、16、32、64 mg F-/L组9个不同的氟浓度处理成骨细胞MC3T3-E1 2、7、14 d后,每个时间段设置对照组,CCK8检测细胞的增殖;2、8、20 mg F-/L处理细胞,流式细胞仪检测不同浓度氟对成骨细胞MC3T3-E1凋亡的影响;qRT-PCR检测细胞中与分化相关的基因的表达;Western blot检测内质网应激信号通路相关蛋白的表达。结果低浓度氟(2、4mg F-/L)和中浓度氟(8 mg F-/L)显著增强细胞的增殖(P0.05),高浓度氟(16 mg F-/L)显著降低细胞的增殖(P0.05);2、8、20 mg F-/L处理成骨细胞MC3T3-E1,细胞凋亡率显著高于0 mg F-/L(P0.01),且随着浓度的增加凋亡率变大;2 mg F-/L促进细胞内ALP、OCN、Runx2和Osterix的mRNA表达,20 mg F-/L则抑制上述因子的mRNA表达(P0.01);2、8、20 mg F-/L处理MC3T3-E1细胞中Xbp1、AFT4、Bip和PERK的蛋白表达量都高于0 mg F-/L,其中2 mg F-/L处理细胞中Xbp1和AFT4蛋白表达最多(P0.01),8 mg F-/L处理细胞中PERK的蛋白表达量最多(P0.01),20 mg F-/L处理细胞中Bip蛋白表达量最多(P0.01)。结论低浓度氟促进成骨细胞MC3T3-E1增殖和分化,高浓度则抑制,细胞凋亡率随氟浓度增加而增加,不同氟浓度处理促进成骨细胞中内质网应激信号通路相关蛋白的表达。     

持续性与间歇性低载荷机械振动对成骨细胞增殖与分化的影响

目的观察不同低载荷振动方式对成骨细胞增殖与分化的影响。方法应用振动加载器给予培养的成骨细胞MC3T3-E1以强度为0.25 g、频率35 Hz的振动载荷,设置空白组(A组),持续振动10 min(B组)及振动5 min间歇5 min再振动5 min(C组)两种加载模式组,加载结束后分别检测各组MC3T3-E1细胞的增殖能力(CCK-8法)、碱性磷酸酶(ALP)活性及Runx-2蛋白的表达变化。结果 3组之间成骨细胞增殖情况无明显统计学意义(P=0.742),B组与C组ALP活性及Runx-2蛋白的表达明显高于A组,C组的ALP活性及Runx-2蛋白的表达显著高于B组(P<0.05)。结论低载荷机械振动对成骨细胞的增殖并无影响,然而低载荷机械振动可以促进成骨细胞的分化,特别是适当的间歇低载荷机械振动能够更加明显的促进成骨细胞的分化。     

氟诱导成骨细胞MC3T3-E1自噬与凋亡及其相互作用分析

目的主要研究氟诱导成骨细胞MC3T3-E1发生自噬、凋亡及两者之间的关系。方法利用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法检测氟对成骨细胞MC3T3-E1的增殖活性影响,探寻氟引起凋亡的浓度;流式细胞术检测细胞凋亡;western blot免疫印记技术检测凋亡相蛋白;利用western blot免疫印记技术检测Beclin 1蛋白及LC3蛋白表达水平及变化。结果氟能明显抑制成骨细胞MC3T3-E1增殖,诱发细胞凋亡,其抑制作用呈时间、剂量依赖性;氟在促进细胞凋亡的同时也促进自噬产生;3-甲基腺素(3-MA)抑制自噬后,氟诱导的凋亡进一步增多。结论氟明显抑制MC3T3-E1细胞增殖,同时诱发细胞凋亡和自噬;氟诱导的自噬部分拮抗其诱导的凋亡。     

1，25（OH）2 D3对成骨细胞增殖及其与乳腺癌细胞黏附的影响

目的：观察1,25二羟基维生素D3[1,25（OH）2D3]对成骨细胞增殖及其与乳腺癌细胞黏附的影响。方法取对数生长期人成骨细胞hFOB1．19,随机分为三组,正常对照组用DMEM/F12培养基培养;溶剂对照组用含0．1 mL/L乙醇的DMEM/F12培养基培养;1,25（OH）2D3组分别用含1×10-7、1×10-8、1×10-9、1×10-10mol/L 1,25（OH）2D3的DMEM/F12培养基培养。1～3 d后于酶标仪上450 nm处测定吸光度值,计算细胞增殖抑制率;采用微量酶标仪法检测hFOB1．19细胞培养上清中碱性磷酸酶（ ALP）活力。取对数生长期人乳腺癌细胞MDA-MB-231、T47D,分组及处理同上,各组培养24 h后加入对数生长期hFOB1．19细胞,采用细胞黏附法计算MDA-MB-231或T47D与hFOB1．19细胞黏附率。结果正常对照组、溶剂对照组及1×10-7、1×10-8、1×10-9、1×10-10 mol/L 1,25（OH）2D3组细胞增殖抑制率第3天分别为0、-1．63％±2．04％、16．02％±1．13％、10．78％±0．98％、8．82％±2．59％、5．55％±0．57％,各组间比较,P均＜0．05;ALP活力分别为（1．77±0．03）、（1．76±0．01）、（2．11±0．02）、（1．96±0．01）、（1．84±0．04）、（1．81±0．03）金氏单位/100 mL,1×10-7、1×10-8moL/L 1,25（OH）2D3组与其他四组比较,P 均＜0．05;MDA-MB-231与 hFOB1．19细胞黏附率分别为58．80％±3．11％、59．80％±3．96％、42．00％±1．87％、46．40％±2．30％、53．80％±0．84％、57．00％±3．24％,T47D与hFOB1．19细胞黏附率分别为55．75％±2．22％、56．25％±1．71％、47．80％±3．11％、50．60％±2．07％、54．40％±2．70％、57．20％±1．48％,1×10-7、1×10-8moL/L 1,25（OH）2D3组与其他四组比较,P均＜0．05。结论1,25（OH）2D3能抑制成骨细胞增殖,促进成骨细胞分化,降低乳腺癌细胞与成骨细胞的黏附。     

1,25-二羟维生素D3的免疫调节机理及其应用进展

1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]不仅具有调节钙磷代谢的作用,还可影响多种细胞的生长和分化,具有调节免疫系统的作用.该文综述1,25(OH)2D3的免疫调节机制,为进一步开发更安全有效的类似物,并作为新兴的免疫调节剂应用于临床提供理论依据.     

1,25(OH)2维生素D3及其受体与支气管哮喘的免疫机制

维生素D作为一种免疫调节剂,在支气管哮喘(简称哮喘)的免疫机制中发挥重要的作用,其中涉及到T细胞的信号转导途径的研究尚不明确.目前已知1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2 D3]通过与维生素D受体结合发挥免疫调节作用.本文主要综述了1,25(OH)2 D3及其受体介导调节性T细胞在哮喘免疫机制中的作用以及1,25(OH)2 D3发挥生物学效应可能的信号转导途径.了解该免疫机制,对哮喘的防治具有重要的意义.     

左归丸含药血清通过p38 MAPK信号通路诱导MC3T3-E1成骨细胞的分化

目的 探讨p38MAPK信号通路对左归丸含药血清干预MC3I3-E1成骨细胞分化的影响.方法 制备大鼠含药血清,选用p38特异阻滞剂SB203580,实验分为空白对照组、SB203580组、左归丸组、左归丸加SB203580组、倍美力组、倍美力加SB203580组.孵育48 h后,采用PNPP法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,采用Westem印迹法分析ALP蛋白表达水平;孵育7d,采用改良钙钴染色法检测ALP活性;孵育14d,采用茜素红染色法测定矿化沉积情况.结果 与空白对照组比较,左归丸组显著促进MC3T3-E1成骨细胞分化,明显上调ALP蛋白表达水平(P＜0.01);与左归丸组比较,左归丸加SB203580组显著抑制左归丸含药血清对MC3T3-E1成骨细胞的分化的促进作用,明显下调ALP蛋白表达水平(P＜0.01).结论 左归丸含药血清可能部分通过p38MAPK信号通路干预MC3T3-E1成骨细胞分化.     

1,25-(OH)_2维生素D3对再生障碍性贫血患者T细胞亚群的影响

目的:研究再生障碍性贫血(AA)患者外周血中的T细胞亚群变化与血清中1,25-(OH)_2维生素D3水平的关系。方法:利用流式细胞仪检测15例AA患者和25例健康对照者外周血T细胞亚群的变化,并用ELISA法检测AA患者和健康对照者血清中1,25-(OH)_2维生素D3的水平。结果:AA患者血清中1,25-(OH)_2维生素D3水平明显低于健康对照者[(35.5±11.8)pmol/L∶(51.8±12.6)pmol/L,P0.05]。与健康对照者比较,AA患者外周血中CD4在淋巴细胞中比率无明显变化[(31.8±4.7)%∶(33.6±4.2)%,P=0.217],但CD8在淋巴细胞中比率显著升高[(31.5±5.2)%∶(24.8±3.8)%,P0.01],故CD4/CD8比值降低(P0.01);其中在CD4~+细胞中,TH1/TH2比值较健康对照者明显升高[(4.09±1.05)∶(3.12±0.89),P=0.003]。结论:AA患者外周血清中1,25-(OH)_2维生素D3水平异常降低,可能影响AA患者CD4~+T细胞的分化。     

去铁酮对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1生物学活性的影响

目的研究铁螯合剂去铁酮(deferiprone,DFP)体外对成骨细胞增生、分化以及细胞铁代谢的影响。方法体外培养小鼠前成骨样细胞MC3T3-E1,在10 mmo L/Lβ-甘油磷酸和50μg/m L抗坏血酸的诱导下,分化为成骨细胞,同时用不同浓度(25、50、100μmol/L)DFP干预,用CCK-8法检测细胞的增生,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性试剂盒检测细胞ALP活性,实时定量PCR检测细胞膜转铁蛋白受体(transferrin receptor,TfR)mRNA的表达。结果 MC3T3-E1细胞增生结果显示,DMSO溶剂组、对照组(0μmol/L)和DFP 25、50、100μmol/L组A值分别为1.36±1.10、1.41±0.09、0.78±0.06、0.68±0.03、0.46±0.01;ALP活性检测结果显示,对照组(0μmol/L)和DFP 25、50、100μmol/L组ALP活性值分别为0.83±0.05、0.75±0.04、0.64±0.03、0.51±0.03;TfR mRNA表达检测结果显示,对照组(0μmol/L)和DFP 25、50、100μmol/L组表达比分别为1、1.16±0.05、1.32±0.06、2.30±0.11。MC3T3-E1细胞的增生、ALP活性随DFP干预浓度的增加呈剂量依赖性下降(P0.05),TfR mRNA的表达随DFP干预浓度的增加呈剂量依赖性上升(P0.05)。结论 DFP可能通过螯合成骨细胞内的铁离子抑制其增生、分化。     

维生素D与自身免疫性疾病

1,25-二羟维生素D3[1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25(OH)2-D3]是维生素D3的活性形式,自从发现细胞内表达维生素D受体和激活的树突状细胞产生维生素D后,1,25(OH)2-D3的免疫调节作用开始被证实。其主要通过特定的维生素D受体对靶细胞,如T细胞、抗原呈递细胞发挥效应进行调节。本文就1,25(OH)2-D3免疫调节机制,特别是对自身免疫性疾病的免疫调节作用作一综述。     

1α，25-二羟维生素D3对成骨细胞增殖分化、Ⅰ型胶原及核心结合因子α-1基因表达的影响

目的研究1α,25-二羟维生素D3[1α,25-（OH）2D3]对体外培育SD大鼠成骨细胞（OB）增殖分化以及核心结合因子α-1（Cbfa-1）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）mRNA表达的影响。方法采用胰蛋白酶和胶原酶消化法从24h内新生SD乳鼠颅盖骨分离得到OB,设置0、1、10、100nmol／L1α,25-（OH）2D3干预组,干预24、48、72h后分别采用噻唑蓝比色法（MTT）检测OB增殖率,采用PNPP法测定碱性磷酸酶（ALP）活性,采用逆转录-聚合酶链反应法检测细胞cbfa-1和ColImRNA表达。结果 在1α,25-（OH）2O3干预24、48h和72h后,与0nmol／L组比较,1nmol／L组吸光度（A值）均显著增加（P〈0．05）;1α,25-（OH）2D3干预细胞ALP活性、ColⅠ和Cbfa-1基因mRNA表达呈时间依赖性和剂量依赖性增高,且在24h、48h和72h,100nmol／L组与0nmol／L组比较,以上指标差异均显著性增高（P〈0．05）。结论低浓度1d,25-（OH）2D3可促进OB增殖和分化;高剂量对OB增殖无明显作用,但可促进OB分化,提高其ALP活性,增强ColⅠ及Cbfa-1基因mRNA表达而影响骨代谢。     

IGF-1对MC3T3-E1细胞凋亡及凋亡调控蛋白Bax、Bc1-2表达的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对小鼠前成骨样MC3T3*E1细胞凋亡基因相关蛋白Bax/BEl-2表达的影响.方法 MC3T3-E1细胞分组培养,应用4个浓度的IGF-1(1 ng/mL、10 ng/mL、30 ng/mL、50 ng/mL)干预24 h.观察MC3T3-E1细胞动态生长状况;流式细胞技术检测细胞凋亡率;免疫组织化学法检测凋亡蛋白Bax/Bc1-2的表达水平.结果 与正常血清对照组相比,无血清对照组MC3T3-E1细胞凋亡率增加(P<0.05);与无血清组相比,IGF-1组MC3T3一E1细胞凋亡率降低(P<0.05),Bax表达减弱(P<0.05),Bc1-2表达增强(P<0.05);各浓度组间比较,(1-50)ng/mL浓度范围内MC3T3-E1细胞凋亡率随IGF-1浓度加大而逐渐降低(P<0.05),Bax表达逐渐减弱(P<0.05),50ng/mL浓度组Bc1-2表达明显增强(P<0.01),Bc1-2/Bax灰度比与细胞凋亡率呈显著正相关(r=0.917,P<0.01).结论 一定浓度的IGF-1同时调节Bax和Bc1-2表达,抑制无血清培养诱导的细胞凋亡:并存在刺量依赖性效应.     

硫辛酸对体外培养的MC3T3-E1成骨细胞骨形成的影响

目的研究硫辛酸对体外培养的H2O2处理后的小鼠前成骨细胞MC3T3-E1骨形成的影响,并初步探讨硫辛酸促成骨细胞骨形成的作用机制。方法在体外培养的MC3T3-E1培养基中分别加入不同浓度(0.1、0.2和0.4 mmol/L)的硫辛酸作用20 h,接着加入1 mmol/L H2O2作用4 h,用MTT法检测药物对成骨细胞活力的影响;用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP),细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测成骨细胞内ALP、SOD、LDH活性和MDA含量;用Von Kossa染色法检测矿化结节数目;用real time-PCR方法检测成骨细胞内Ⅰ型胶原(collagen-Ⅰ,COL-Ⅰ)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、转录因子Osterix、骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、NADPH氧化酶4(NADPH oxidase4,Nox4)、护骨素(osteoprotegerin,OPG)、细胞核因子κB受体活化因子配基(receptor activator nuclear factor-kappa B ligand,RANKL)mRNA表达,用流式细胞仪检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果硫辛酸可增加ALP活力和矿化结节数目,促进骨形成相关指标COL-Ⅰ、Osterix、BMP-2和OCN mRNA表达(P0.05);硫辛酸提高H2O2损伤后MC3T3-E1细胞活力,上调细胞内SOD活性并降低细胞中MDA含量和上清中LDH活性;硫辛酸上调MC3T3-E1细胞OPG/RANKL比值及下调ROS和Nox4 mRNA表达水平(P0.05)。结论硫辛酸在一定浓度范围内(0.1~0.4 mmol/L)促进H2O2处理后MC3T3-E1细胞的骨形成过程,这种促进作用是通过下调Nox4和ROS水平,降低氧化应激发挥抗氧化作用上调OPG/RANKL实现的。     

丁酸钠和1，25-（OH）2D3对人结肠癌细胞增殖和hTERT表达的影响

背景：端粒酶在肿瘤细胞永生化过程中起重要作用．人端粒酶逆转录酶（hTERT）是调节端粒酶活性的关键因素。有研究发现生物活性制剂丁酸钠和1n,25-二羟维生素D3[1．25-（OH）,D3]具有潜在抗肿瘤效应。目的：观察丁酸钠和1,25-（OH）：D3对人结肠癌细胞增殖的影响及其可能机制。方法：以不同浓度丁酸钠（0．5～2．0mmol／L）、1,25-（0H）2D3（10^-6～10^-6mol/L）或两者联合[1．0mmol／L丁酸钠＋10^-7mol／L1,25-（OH）2D3]诱导人结肠癌细胞株HT29,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,RT—PCR检测hTERTmRNA表达。结果：丁酸钠和1,25-（OH）2D3能剂量和时间依赖性地抑制HT29细胞生长：1．0mmol／L丁酸钠和10^-7mol／L 1．25-（OH）2D3能诱导HT29细胞G0／G1期阻滞和细胞凋亡,抑制hTERTmRNA表达。联合用药组的上述作用较两者单用更为明显（P〈0．05）。结论：丁酸钠和1,25-（OH）2D3抑制人结肠癌细胞增殖的作用与其通过下调hTERT基因表达而抑制端粒酶活性、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡有关：两者联合可产生协同作用．     

淫羊藿苷通过雌激素受体和p38MAPK信号诱导MC3T3-E1Subclone14细胞的分化

目的观察淫羊藿苷(ICA)对MC3T3-E1Subclone14前体成骨细胞株活力、分化的影响,以及雌激素受体(ER)信号、p38MAPK信号在分化过程中的作用。方法 WST-8方法检测MC3T3-E1Subclone14细胞活力;pNPP法检测细胞碱性磷酸酶活性(ALP);ELISA检测I型胶原(ColI)和骨钙素(BGP);Western印迹法检测p38MAPK的蛋白磷酸化;并分别用ICI182780阻断ER受体或SB203580阻断p38MAPK信号后检测ICA对细胞ALP、Col I、BGP的影响;Western印迹法检测ICI182780阻断ER受体信号后,ICA对p38MAPK蛋白磷酸化的影响。结果 ICA(10-7、10-6、10-5mol/L)对细胞活力与对照组比较,在统计学上无显著差异(P>0.05);ICA可以浓度依赖性的提高细胞的ALP、Col I和BGP和矿化结节数量(P<0.01,P<0.05);ICI182780阻断ER受体信号后,10-5mol/L浓度的ICA促细胞分化的特性明显下降(P<0.01);ICA可以浓度组依赖性的提高细胞p38MAPK的蛋白磷酸的水平(P<0.01);SB203580阻断p38MAPK信号后,10-5mol/L浓度的ICA促分化的特性下降(P<0.01);ICI182780阻断ER受体信号后,10-5mol/L浓度ICA促p38MAPK磷酸化明显减弱(P<0.01)。结论 ICA可以促进MC3T3-E1Subclone14细胞分化,ER受体信号、p38MAPK信号在促分化过程中起着重要作用,ER受体信号通路在p38MAPK信号通路的上游。     

3D打印对多孔BMP-2复合涂层钛合金试件BMP-2装载、释放及成骨细胞增殖、分化的影响

目的 探讨3D打印对多孔BMP-2复合涂层钛合金试件BMP-2装载率、累计释放率及成骨细胞增殖、分化的影响。方法 取制备成功的3D打印多孔BMP-2复合涂层钛合金试件作为实验组，高温烧结多孔BMP-2复合涂层钛合金试件作为对照组。扫描电镜观察多孔BMP-2复合涂层钛合金试件微孔的大小、形状、孔径、孔隙率、孔深度等表征；¹²⁵I放射性标记法测定BMP-2的装载率；ELISA试剂盒测定BMP-2累计释放率；扫描电镜观察MC3T3-E1细胞在多孔BMP-2复合涂层钛合金试件上的生长情况；CCK-8法检测细胞增殖能力；qRT-PCR法检测RUNX2、ALP、OCN、OPN mRNA表达；Western blotting法检测RUNX2、ALP、OCN、OPN蛋白表达。结果 与对照组比较，实验组孔径、孔深度、BMP-2装载率、BMP-2累计释放率(1、3、6、9、12、15、18、21 d)、MC3T3-E1细胞的增殖能力(3、5 d时)、RUNX2、ALP、OCN、OPN mRNA及蛋白表达升高(P均<0.05)，孔隙率为(68.24±2.31)%。培养7 d后，对...