血清透明质酸酶检测在糖尿病肝病中的临床应用价值

糖尿病除可引起肾脏、心脏、视网膜、神经等组织器官损害外,亦可导致各种类型的肝脏损伤。糖尿病患者出现肝脏损伤时,许多药物非常不利于糖尿病的良好控制,需慎用或禁用,所以,我们应及早发现糖尿病导致的肝损伤,并积极加     

化学发光酶免疫法测定血清地高辛浓度

目的：建立地高辛血浓度非放射性检测方法－化学发光酶免疫法并指导临床用药。方法：采用该法测定地高辛标准品及临床慢性心功能不全正接收地高辛治疗者血浓度并进行比较分析。结果：地高辛线性范围0．0－5．0ng/mL，平均回收率为94．65％和93．68％，批内和批间RSD分别为3．58％和5．63％，与放射免疫法相关良好（γ＝0．9356）。结论：化学发光酶免疫法灵敏、准确、稳定和特异，可用作地高辛血浓度监测的非放射性常规方法。     

化学发光微粒子免疫法和化学发光酶免疫法检测异常凝血酶原的比较研究

目的分析和评价化学发光微粒子法(CMIA)与化学发光酶免疫法(CLEIA)在异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)检测中的应用价值。方法采用CMIA和CLEIA法检测138例肝癌患者和80例健康体检对照组血清PIVKA-Ⅱ水平。采用受试者工作特征曲线对两种方法进行分析。结果 CMIA和CLEIA的批内、批间精密度均较好,无显著差异;两种方法检测PIVKA-Ⅱ诊断肝癌的灵敏度、特异性差异无统计学意义(P0.05),且两种方法检测PIVKA-Ⅱ水平总符合率为88.4%。两种方法检测PIVKA-Ⅱ的结果正相关(P0.01),相关系数r为0.996。两种方法检测PIVKA-Ⅱ对相关肿瘤诊断的ROC曲线下面积分别为0.759、0.681,CLEIA稍好。结论 CMIA与CLEIA对PIVKA-Ⅱ的检测结果均有良好一致性,均能较好地满足临床需求。     

酶联免疫法和化学发光免疫法检测血清AFP的比较

甲胎蛋白(AFP)是哺乳动物胚胎期肝脏卵黄囊合成的一种糖蛋白,是辅助诊断原发性肝癌最常用的检测指标.目前检测AFP的方法较多,近年发展起来的化学发光免疫法因其快速、精确、重现性好及试剂安全无毒的特点,显示出很好的应用前景,EILSA法定性检测.AFP以其快速、简便、实效的优势在各级医院应用较广.     

建立非均衡竞争叶酸定量测定的化学发光免疫分析法

目的 制备抗人叶酸(FA)抗血清并应用异硫氰酸荧光素(FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立可常规应用的定量检测血清FA的化学发光免疫分析(CLIA)法.方法 FITC-FA类似物、FA抗体-HRP依次加入包被有抗FITC抗体的化学发光板,形成FITC抗体-FITC-FA类似物-FA抗体-HRP的免疫反应复合物;并进行方法学评价,同时与非FITC检测系统及罗氏化学发光免疫分析系统检测结果进行比较.结果 成功制备FA抗血清并建立基于FITC系统的非均衡竞争CLIA;经方法学评价,自研法的线性相关系数绝对值大于0.990 0,灵敏度1.21 nmol/L,线性范围1.21～38.80 nmol/L,批内变异系数小于5％,自研法定量检测性能优于非FITC系统;与罗氏检测系统结果有较好相关性(R=0.908 1).结论 建立的非均衡竞争定量检测血清FA的CLIA法,具有良好的检测灵敏度与特异性,可应用于常规检测.     

化学发光免疫法与酶联免疫法检测AFP的比较

目的:探讨两种方法检测AFP的优缺点。方法:采用西门子全自动发光免疫分析仪和雷勃酶标仪。结果:化学发光法和ELISA法之间差异无统计学意义(P>0.05),相关性良好(r=0.996)。结论:化学发光法的精密度和准确性均优于酶联免疫法。     

酶联免疫法与化学发光免疫法检测AFP的比较

目的对甲胎蛋白(AFP)试验进行方法学探讨.方法 ①对比实验用酶联免疫法和化学发光免疫法同时测定88例临床送检血清标本甲胎蛋白(AFP)的含量.②线性实验 将标准液按不同的浓度稀释后做线性实验.③精密度实验 用两法对低、中、高值质控品分别进行精密度实验.结果 ①结果表明,两法无显著差异(P>0.05),相关系数r=0.995,提示两法呈良好相关性.②线性实验显示酶联免疫法和化学发光免疫法分别在5~400 ng/ml和2~900 ng/ml范围内呈良好的线性关系.③精密度实验表明化学发光重复性好于酶联免疫法,特别是病理高值化学发光明显优于酶联免疫法.结论 化学发光免疫法的精密度和准确性均优于酶联免疫法.     

血清透明质酸及其在肝病检测中的意义

透明质酸(hyaluronic.acid HA)是一种大分子量的蛋白聚糖.是人体结缔组织基质的主要成份之一,由间质细胞合成,经淋巴系统入血在血中半衰期仅2～5min.大部分迅速被肝脏内皮细胞摄取后降解.由于HA主要在肝脏内代谢,肝病患者,尤其是肝硬化患者其HA代谢障碍,血中HA浓度显著升高(但在实验中,凡是高黄疸的病人血清HA＞400ug/ml).HA既可以反映肝纤维化增生.也可以反映肝细胞的损伤,与血清白蛋白、凝血酶原的检测具有显著相关,因而HA是肝病实验室检测的一个良好指标.     

肝纤维化诊断中血清透明质酸检测的临床意义

观察了１９９０─１９９２年本院住院的１８８例肝硬化及慢性肝炎的血清透明质酸，其中肝硬化（ＨＬＣ）组６８例，慢活肝伴早期肝硬化组４２例，慢活肝（ＣＡＨ）组４０例，慢迁肝（ＣＰＨ）组３８例，正常健康人９８例作为对照组，结果提示ＨＬＣ组、慢活肝伴早期肝硬化组、ＣＡＨ组分别为６０４±４２１．３１、３８５±２０１．７８、２０１±３９．８６μｇ／Ｌ，与正常健康组比较差异显著（Ｐ＜０．００１、Ｐ＜０．００１、Ｐ＜０．０１），而ＣＰＨ组与正常对照组比较无显著差异（Ｐ＞０．０５），同步检测ＨＹＰ、ＡＤＡ、ＧＳＴ、白蛋白、Ａ／Ｇ发现其对早期肝硬化诊断阳性率不如ＨＡ，故认为ＨＡ对诊断早期肝硬化价值较大。     

透明质酸单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立

将1-氰基-4-二甲胺吡啶四氟硼酸盐(CDAP)活化后的透明质酸(HA)与牛血清白蛋白(BSA)共价偶联制备完全抗原BSA-HA,纯化后免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备HA特异性单克隆抗体,考察单抗的生物学特性,并建立HA定量免疫分析方法——间接竞争ELISA法。研究表明,完全抗原BSA-HA免疫BALB/c小鼠后,能诱导HA特异性抗体的分泌;经细胞融合、选择性培养、筛选和亚克隆,获得一株稳定分泌HA特异性抗体的杂交瘤细胞8B6,其腹水抗体效价达1∶256 000以上,亲和常数为6.71×10⁹ mol^-1,独特型为IgG1;以10.0 ng/mL HA包被酶标板,1.0% BSA为封闭剂,建立HA间接竞争ELISA法,其线性范围介于0.01~10.0 μg/mL,特异性好、灵敏度高。     

国产化学发光试剂检测4项血清肝纤维化标志物对肝纤维化诊断的应用分析

目的探讨国产化学发光(CL)试剂检测血清肝纤维化标志物透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)对肝纤维化的诊断价值。方法采用CL法检测123例有病理诊断的慢性肝炎患者(病例组)及30例健康体检者(对照组)的血清HA、LN、PⅢNP、CⅣ,病例组按纤维化程度分为S0～S4期,评价4项指标对肝纤维化的诊断价值。结果病例组HA、LN、CⅣ明显高于对照组[(4.47±0.86)vs.(2.02±0.23),P=0.000;(4.15±0.81)vs.(3.57±0.67),P=0.002;(3.49±0.89)vs.(2.15±0.81),P=0.000]。4项指标均呈现对照组S0,S1S2,S2S3,S4期HA与CⅣ下降、LN与PⅢNP升高。不同肝纤维化分期的患者中4项指标组间差异均有统计学意义(P0.01),4项指标的S0与S1期比较,差异无统计学意义(P0.05),而S0与S2期、S1与S2期比较,差异均有统计学意义(P0.05)。LN、PⅢNP、CⅣ3项指标与肝纤维化程度有正相关性(P均0.01)。诊断肝纤维化的受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积(AUC)依次为CⅣ(0.790)HA(0.775)LN(0.725)PⅢNP(0.644)。HA、HA+LN+CⅣ3项联合、4项联合对肝纤维化诊断的敏感性及准确率较高;综合诊断效能CⅣLNPⅢNP;单项及联合检测的阳性似然比为1～3。结论 4项指标对肝纤维化诊断均有一定价值,但对早期肝纤维化诊断的意义有限,当纤维化程度为S2期时,其意义最明显。随着肝纤维化程度加重,HA与CⅣ反呈下降趋势,可能与细胞外基质的分解降低有关。多指标联合适合在排除肝纤维化时应用;所有单项及联合检测对诊断肝纤维化的阳性似然比均较低,说明其诊断价值有限,不能替代肝组织活检。     

AFP电化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种快速、特异、灵敏的检测人甲胎蛋白(AFP)的电化学发光免疫分析法。方法用链霉亲和素包被的磁性微粒、生物素标记的抗AFP单克隆抗体、钌复合物标记配对的抗AFP单克隆抗体组成AFP电化学发光免疫分析法试剂,在电化学发光免疫分析仪上对其准确性、灵敏度、特异性等效能进行方法学评价,同时用所建方法与进口的同类电化学发光免疫分析法试剂(Roche)对80例肝癌患者血清AFP检测结果进行相关性分析。对218名健康志愿者血清AFP进行了正常值调查。结果自建电化学发光免疫分析法检测AFP的批内精密度在2.8%～4.5%之间,批间精密度在3.2%～9.8%之间,分析灵敏度为0.605ng/ml。与进口同类试剂比较,直线回归方程为y=0.9936x-0.4566(r=0.9877,P<0.05)。分析测量范围为0.605～1452.0ng/ml,自建试剂与CEA和CA199无交叉反应。自建电化学发光免疫分析法检测AFP的正常参考值为<6.7ng/ml。结论自建AFP电化学发光免疫分析法特异性高,灵敏度好,与进口同类试剂检测结果相关性达0.9877。确定的实验室正常参考范围接近进口同类试剂,具备产业化的潜能。     

应用FITC系统建立非均衡竞争游离三碘甲腺原氨酸（FT3）化学发光法

目的制备抗人T3多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanat,FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测游离三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)的方法。方法以T3-牛血清白蛋白(bovin serum albumin,BSA)为抗原免疫新西兰大白兔,制备抗人T3多克隆抗体,亲和层析法纯化并联接辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase,HRP)。用FITC标记T3-类似物。采用抗FITC抗体包被发光板,FITC-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,通过非均衡竞争法原理,固相抗原与血清中FT3竞争结合抗T3抗体-HRP,通过标准曲线计算FT3浓度,建立方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白(Bovine serum gamma globulin,BGG)包被(非FITC系统)的检测系统相比较。将本方法应用于临床120份血清标本的检测,定量结果与德国罗氏2010电化学发光全自动免疫分析系统(Elec-sys 2010)定量结果进行比较。结果抗体经酶联免疫吸附实验证明对T3、具有高度特异性。应用FITC系统建立的非均衡竞争化学发光免疫分析标准曲线的线性R>0.99,线性范围0.25～50 pg/ml,分析灵敏度为0.25 pg/ml,精密度测试批内、批间变异系数CV<5%,检测结果优于非FITC系统的检测。对于临床血清标本的检测,其定量结果与德国Elecsys2010定量试剂盒的定量结果具有很好的相关性,相关系数r=0.962 2,两者的测定值无显著性差异。结论制备的抗人T3多克隆抗体特异性强,以FITC系统为平台建立的非均衡竞争FT3检测化学发光法具有精密性好、灵敏度高、稳定性强,有良好的准确性,达到临床测定的需求,可代替进口化学发光产品用于临床样本的检测。     

灯盏花对实验性肝纤维化大鼠血清和肝匀浆中透明质酸和层粘蛋白含量的影响

目的　观察灯盏花对实验性肝纤维化大鼠血清和肝匀浆中透明质酸和层粘蛋白含量的影响,探讨灯盏花有无抗肝纤维化作用。方法　用四氯化碳制成实验性肝纤维化造模大鼠,部分使用灯盏花注射液腹腔注射,分期分批处死大鼠,采用放免法,分别测定血清和肝匀浆中透明质酸和层粘蛋白含量。结果　灯盏花治疗组大鼠血清及肝匀浆中透明质酸和层粘蛋白含量较单纯造模大鼠含量为低,且差异显著。结论　灯盏花能抑制四氯化碳所致大鼠肝纤维化的进程,有一定抗肝纤维化作用。     

化学发光法检测肝纤维化血清学指标的临床应用

目的探讨化学发光法检测肝纤维化指标包括三型前胶原N端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)及透明质酸(HA)对肝纤维化的诊断价值。方法用化学发光法检测132例乙型病毒性肝炎患者血清中肝纤维化四项指标的水平,评价四项指标鉴别诊断肝炎及肝硬化的价值。结果乙型肝炎组、肝癌组、肝硬化组血清中的四项指标依次升高,均与正常对照组差异有统计学意义(P<0.01)。ROC曲线显示,PⅢNP、CIV、LN、HA的曲线下面积分别为0.680、0.825、0.716、0.825,灵敏度分别为39.1%、87.0%、87.0%、82.6%,特异性分别为89.8%、69.3%、53.4%、86.4%,准确性分别为79.09%、72.73%、78.18%、85.45%。在联合检测中,HA+PⅢNP组合的灵敏度为83.0%,特异性为80.0%,准确性为80.1%。结论单个指标检测,HA是四项指标中鉴别诊断肝炎与肝硬化最有价值的一项,通过HA联合其他指标进行分析,其中HA+PⅢNP组合特异性、准确性最高。     

对比分析化学发光免疫法与免疫放射测量法

目的 比较化学发光免疫分析（CLI）与免疫放射测量分析（IRMA）检测血清促甲状腺激素（TSH）在临床应用中的作用。方法 分别用CLI和IRMA对83例临床初诊怀疑甲状腺机能亢进（甲亢）患者的血清TSH进行检测和对比分析。结果 这两种方法的测定值具有高度相关性（r=0.9081,P<0.001）, CLI诊断甲亢的灵敏度和特异性为70.6%和84.4%;IRMA的灵敏度和特异性为93.2%和51.1%,没有优劣之分,但存在系统偏差,CLI特异性较好,IRMA灵敏性较高。结论 对于甲亢与甲状腺功能正常的鉴别,化学发光免疫分析与免疫放射测量分析具有相似的能力。     

乙型肝炎表面抗体化学发光免疫分析法的建立

目的建立乙型肝炎表面抗体(HBsAb)化学发光免疫分析(CLIA)检测试剂盒。方法采用两株乙型肝炎表面抗原(HBsAg)分别包被磁微球和标记吖啶酯(AE),建立双抗原夹心化学发光免疫检测试剂盒,优化反应体系并对试剂盒的各项性能指标进行评价。结果 HBsAb-CLIA检测试剂的灵敏度为0.03 mIU/ml,测量范围为0.03~960 mIU/ml;分析内和分析间精密度分别为2.94%~5.14%和3.03%~6.33%;与乙型肝炎E抗体(HBeAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)等无交叉反应;673名正常人血清测试结果表明该检测试剂的正常参考范围为0~10 mIU/ml;用本试剂与进口雅培同类试剂同时检测1 411例临床样本,其相关方程为y=0.944x+4.056,相关系数为0.947。结论已成功制备操作简单,成本低,各项性能指标均能达到临床检测要求的HBsAb-CLIA试剂盒,可用于临床血清样本HBsAb浓度的测定。     

不同化学发光分析系统对乙型肝炎血清标志物检测的比较

目的:对Roche Cobas e601和Abott Architect i2000 分析系统检测主要乙型肝炎血清标志物HBsAg?抗-HBs和HBeAg的结果符合性和相关性进行评价?方法:分别采用两种分析系统对119份?140份?197份标本的HBsAg?抗-HBs和HBeAg进行检测?结果:两种分析系统对HBsAg?抗-HBs?HBeAg检测的定性结果符合率分别为99.1%?95.7%和90.9%,定量数值的相关系数分别为0.566?0.863?0.964,其中抗-HBs浓度存在显著差异(P < 0.05),Abott Architect i2000显著高于Roche Cobas e 601分析系统?结论:两种分析系统在乙型肝炎标志物的定性结果判断中具有较好的符合率,但抗-HBs浓度之间存在差异?