水飞蓟素对野百合碱诱发肺动脉高压大鼠肺血管重构的保护作用

目的探讨水飞蓟素对野百合碱(MCT)诱发肺动脉高压大鼠模型肺血管重构的保护作用及机制。方法 24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、MCT诱发肺动脉高压模型组(M组)、水飞蓟素治疗组(S组),每组8只。28d后,右心导管法测量各组右心室收缩压(RVSP),称量法计算右心室肥大指数(RVHI),HE染色和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学染色观察肺血管重构,TUNEL法检测肺动脉平滑肌细胞凋亡,RT-PCR法行肺组织Fas mRNA半定量检测。结果与M组比较,S组RVSP、RVHI、α-SMA表达均降低(P<0.01),肺动脉平滑肌细胞凋亡稍升高,肺组织Fas mRNA表达升高(P<0.05)。结论水飞蓟素对野百合碱诱发肺动脉高压大鼠肺血管重构具有保护作用。     

吸入低氧高二氧化碳对小鼠右心室收缩压及肺小动脉重建的影响

目的观察低氧高二氧化碳环境下,小鼠右心室收缩压(RVSP)、右心肥大指数的改变及肺小动脉结构的重建,初步建立小鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压模型。方法将C57BL/6小鼠随机分为实验2周组、实验4周组和对照组。实验组饲养于氧舱中,舱内氧浓度为9%~11%,二氧化碳浓度为5%~6%,每天8h,每周6d。实验2周组在舱内2周,实验4周组在舱内4周。至相应时间后检测RVSP、右心室与左心室 室间隔重量比[RV/(LV S)]、肺小动脉管壁厚度与血管外径比(MT%)、血管壁面积与血管总面积比(MA%),并观察右心室心肌组织的病理改变。结果实验2周组小鼠RVSP、RV/(LV S)、MT%、MA%均高于对照组(P<0.05),并且光镜下可见心肌增生肥大。实验4周组小鼠的上述病变更为明显。结论在常压低氧高二氧化碳环境中2周即可形成较理想的肺动脉高压小鼠模型,这为更好地研究肺心病提供了新的途径。     

HIF和VEGF在低氧性肺动脉高压中的调控作用

目的:观察低氧诱导因子-1α(HIF-1 α)蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白在低氧性肺动脉高压小鼠肺内的表达,探讨HIF和VEGF在其中的调控作用.方法:建立低氧性肺动脉高压小鼠模型,SPF级雄性C57BL/6小鼠16只,随机分为正常对照组(C组),低氧、高二氧化碳4 w组(H组),每组8只.测二组小鼠的右心室收缩压(RVSP)和右心室重量:比RV/(LV S).光镜下观察右心室和肺组织病理学改变.应用免疫组化技术检测肺细小动脉上HIF-1 α蛋白和VEGF蛋白的表达.结果:H组小鼠RVSP明显高于C组,且RV/(LV S)亦有增加.光镜下肺细小动脉管腔变窄管壁增厚,中膜平滑肌细胞肥大增生.免疫组织化学显示:H组小鼠肺细小动脉HIF-1 α蛋白和VEGF蛋白免疫组化吸光度高于对照组;VEGF蛋白与HIF-1 α蛋白表达呈正相关.结论:慢性低氧使HIF-1 α蛋白和VEGF蛋白在肺细小动脉表达增加,二者参与小鼠肺动脉高压的形成和发展过程.     

钙蛋白酶介导低氧诱导的肺动脉高压肺血管重构

目的：研究钙蛋白酶(calpain)在低氧诱导肺动脉高压肺血管重构中的作用及机制。方法：SD大鼠随机分为低氧模型组和常氧对照组。插管法测定大鼠右心室收缩压及平均肺动脉压,右心室/(左心室+室间隔)比值评价右心肥厚指数,HE染色检测血管重构情况,分别采用实时荧光定量PCR和Western印迹检测肺动脉calpain-1,-2和-4 mRNA和蛋白的表达。原代培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞分为4组：常氧对照组、常氧对照+ MDL28170(calpain抑制剂)组、低氧模型组、低氧模型+MDL28170组。MTS及流式细胞术观察细胞增殖情况,实时荧光定量PCR检测Ki-67及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA) mRNA表达情况。结果：与常氧对照组大鼠比较,低氧模型组大鼠右心室收缩压、平均肺动脉压及右心肥厚指数显著增加,肺动脉血管显著重构;同时,低氧模型组大鼠肺动脉中calpain-1,-2,-4 mRNA和蛋白表达也显著上调。与常氧对照组细胞比较,低氧模型组细胞显著增殖,MDL28170可显著抑制低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖,同时逆转低氧诱导的Ki-67和PCNA mRNA表达上调。结论：calpain介导低氧诱导的肺动脉高压肺血管重构,其机制可能与介导低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖有关。     

紫杉醇脂质体对肺动脉高压大鼠 肺血管重构的干预作用

目的 探讨紫杉醇脂质体对野百合碱（monocrotaline,MCT）诱导肺动脉高压模型大鼠肺血管重构的影响。方法 将30只雄性Sprague–Dawley大鼠随机分为正常对照组（正常组）、野百合碱模型组（MCT组）和紫杉醇脂质体组（治疗组）,每组各10只;MCT组和治疗组大鼠腹腔注射1%MCT溶液造模,造模第21天起,治疗组大鼠予尾静脉注射紫杉醇脂质体,正常组和MCT组大鼠予尾静脉注射等量生理盐水,每3d注射1次,35d后测定各组大鼠右心室收缩压（right ventricular systolic pressure,RVSP）和右心室肥厚指数（right ventricular hypertrophy index,RVHI）;观察肺组织病理形态并检测肺动脉中膜厚度百分比、血管壁面积指数、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）及α–平滑肌肌动蛋白（α–smooth muscle actin,α–SMA）表达水平。结果 MCT组大鼠的RVSP、RVHI、肺动脉中膜厚度百分比、血管壁面积指数、PCNA及α–SMA表达均显著高于正常组（P<0.05）,治疗组大鼠的RVSP、RVHI、肺动脉中膜厚度百分比、血管壁面积指数、PCNA及α–SMA表达均显著低于MCT组（P<0.05）。结论 紫杉醇脂质体可降低MCT诱导肺动脉高压大鼠的肺动脉压力,缓解肺血管重构。     

4-PBA对大鼠肺动脉高压的作用及药理机制

为探讨4-苯基丁酸(4-PBA)对大鼠肺动脉高压的作用及机制,选取SD大鼠60只,将大鼠随机分为对照组、模型组、4-PBA组,对照组、模型组给予等量生理盐水,4-PBA组分别给予250 mg/kg或500 mg/kg 4-PBA,连续4周,观察各组大鼠血流动力学(RVSP、mPAP、PASP)、右心室重构指数(RVHI)及肺血管壁厚占血管外径的百分比(MVT%)指标,采用Western blot检测蛋白表达,结果显示,与对照组比较,模型组RVSP、mPAP、PASP、RVHI、MVT等均显著升高,α-SMA、Bcl-2和Bax等蛋白表达均显著增加,给予4-PBA干预后,上述指标和蛋白表达显著下降。结果得出4-PBA可改善肺动脉高压大鼠血流动力学、右室和肺血管重构,可能与其下调α-SMA、Bcl-2和Bax蛋白表达有关。     

常压慢性持续缺氧大鼠肺动脉高压模型的建立

目的 探索大鼠肺动脉高压模型的建立方法,为慢性缺氧性肺动脉高压发病机制等方面研究提供实验动物模型。方法 Wistar大鼠常压持续缺氧3周,观测大鼠体重、平均肺动脉压(MPAP)、右心室收缩压（RVSP）、右心室肥大指数[RV/(LV+S)] 、红细胞比容,并观测肺血管病理学改变及血管壁相对厚度指数(RTI)。结果 缺氧组大鼠体重增长缓慢,MPAP、RVSP、RV/(LV+S)、红细胞比容明显高于对照组(P﹤0.05)。肺组织病理检查示缺氧组大鼠肺内血管管壁明显增厚,管腔狭窄,RTI较对照组显著增加(P﹤0.05)。结论 常压慢性持续缺氧3周能形成较理想的大鼠肺动脉高压模型。     

缺氧性肺动脉高压发病中肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡变化

目的：研究缺氧性肺动脉高压发病中肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡变化。方法：用压缺氧法复制大鼠缺氧性肺动脉高压模型,用右心导管法测量平均肺动脉压,称量法计算右心室肥大指数,HE染色结合形态计量分析进行缺氧性肺血管重塑观察,Tunel法行肺动脉平滑肌细胞凋亡检测。结果：缺氧7d大鼠平均肺动脉压开始升高,肺动脉出现缺氧性肺血管重塑;缺氧14d及21d平均肺动脉压进一步升高,缺氧性肺血管重塑更明显,右心室肥大指数增加。对照组及缺氧3d、7d、14d、21d组肺动脉平滑肌细胞凋亡指数差异无显著意义。平均肺动脉压与WA％（血管壁横断面积与血管横断面积比值）及右心室肥大指数呈正相关,WA％与肺动脉平滑肌细胞凋亡指数之间无直线相关关系。结论：缺氧性肺动脉高压发病中肺动脉平滑肌细胞增殖同时不伴有凋亡水平的显著变化。     

埃他卡林对低氧诱导的肺动脉高压大鼠炎症反应的影响

目的:研究ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂埃他卡林(iptakalim,IPT)对低氧性肺动脉高压大鼠炎症反应的影响?方法:将96只清洁级SD大鼠随机分为对照(Control)组?低氧(Hypoxia)组?低氧+IPT(IPT)组,每组32只?Hypoxia组及IPT组每天置于常压低氧舱中8 h,每周6 d,持续4周?分别在低氧第1?2?3?4周末,各组随机取出8只大鼠测量右心室收缩压(RVSP),HE染色观察肺小动脉病理变化,抽取外周血,酶联免疫吸附法(ELISA)测定白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-10,ED1+单核细胞免疫组化测定肺小动脉周围炎症细胞的浸润?结果:IPT可抑制大鼠慢性缺氧性RVSP升高?肺小动脉壁重构及其周围炎症细胞浸润;降低大鼠外周血及肺组织IL-1β含量,增加IL-10合成?释放?结论:IPT可能通过抑制肺血管炎症反应?降低RVSP?缓解肺血管重构,防治大鼠低氧性肺动脉高压?     

低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉和右心室重构研究

目的研究慢性低氧对大鼠肺动脉血管和右心室重构的影响。方法常压间断低氧法复制大鼠慢性低氧模型。右心导管法测平均肺动脉压（mPAP）；测平均主动脉压（mAP），血细胞比容（HCT）；常规HE染色及右心室肥大指数（RVHI）研究右心室重构观察肺血管重构情况；结果慢性低氧大鼠（28d）血细胞比容和平均肺动脉压力显著升高。发生肺动脉血管重构，右心室肥大指数显著增加。结论慢性低氧化导致大鼠肺动脉压增高的同时，伴肺小动脉管壁增厚、管腔狭窄和右心室肥厚等重构性改变。     

淡水淹溺大鼠肺表面活性物质相关蛋白质A表达变化的研究

目的观察淹溺后大鼠呼吸、血气、病理及肺表面活性物质相关蛋白质A(SP-A)的变化特点。方法将24只健康雄性大鼠随机分为对照组(6只)和淹溺组(18只),再将淹溺组分为淹溺后2h组、淹溺后4h组和淹溺后6h组,每个亚组6只大鼠。于上述时间点记录大鼠的呼吸频率,经颈动脉采血测血气。处死大鼠后取肺组织行HE染色,观察淹溺后肺组织普通病理变化,采用免疫组织化学法检测SP-A在灌注后不同时间点的变化。结果淹溺组大鼠淡水灌注后呼吸先增快,以后逐渐减慢,但未降至正常范围。PaO2在灌入淡水后5min显著下降[(48.7±3.93)mmHg比(93.65±6.02)mmHg,P<0.05],之后虽有回升,但维持在较低水平。PaCO2在灌入淡水后5min显著上升[(36.20±4.41)mmHg比(55.96±4.60)mmHg,P<0.05],随后降低,显著低于正常水平(P<0.05)。对照组大鼠SP-A主要以膜状形式连续分布于肺泡腔表面。淹溺组大鼠肺泡壁有不同程度的断裂,肺泡腔内可见红细胞聚集,间质水肿明显,呈局灶性肺不张,SP-A主要以颗粒状聚集在肺泡腔内表面和渗液表面,SP-A表达量较对照组显著降低(P<0.05)且进行性下降。结论淡水淹溺后造成肺损伤,导致SP-A的质和量发生改变。     

宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549细胞株体外培养细胞活力的比较研究

目的比较宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549细胞株体外培养细胞活力.方法体外培养宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549细胞株,观察细胞形态变化.取传代培养后1 d、3 d、5 d 3个时间点分别计数细胞,MTT检测3时间点细胞活力变化,并进行统计学分析比较.结果宣威肺腺癌xwlc-05细胞株和肺腺癌A549细胞株各时间点比较,培养1 d、3 d、5 d组的细胞数量逐渐增加,差异有统计学意义（P〈0.05）;同时,宣威肺腺癌xwlc-05细胞株和肺腺癌A549细胞株3 d组细胞活力较1 d组增加,而5 d组的细胞活力较3 d组下降,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论不同肺腺癌细胞株体外增殖和细胞活力不完全一致.     

亚硫酸盐对大鼠肺巨噬细胞膜Fc受体和ConA受体的影响

本文研究了亚硫酸盐对大鼠肺巨噬细胞Fc和ConA受体的影响,及Fc、ConA受体在肺巨噬细胞上的分布。结果发现亚硫酸盐能抑制ConA和Fc受体的活性。Fc受体大多分布在PM的边缘部位,ConA受体在不同形态的PM上分布是不一样的,在圆细胞上分布于周边部,而于膜性细胞和扁平细胞则分布于整个细胞表面。     

Thin-section Computed Tomography Detects Long-term Pulmonary Sequelae 3 Years after Novel Influenza A Virus-associated Pneumonia

Background:

The aim of this research was to evaluate long-term pulmonary sequelae on paired inspiration-expiration thin-section computed tomography (CT) scans 3 years after influenza A (H1N1) virus-associated pneumonia, and to analyze the affecting factors on pulmonary fibrosis.

Methods:

Twenty-four patients hospitalized with H1N1 virus-associated pneumonia at our hospital between September 2009 and January 2010 were included. The patients underwent thin-section CT 3 years after recovery. Abnormal pulmonary lesion patterns (ground-glass opacity, consolidation, parenchymal bands, air trapping, and reticulation) and evidence of fibrosis (architectural distortion, traction bronchiectasis, or honeycombing) were evaluated on follow-up thin-section CT. Patients were assigned to Group 1 (with CT evidence of fibrosis) and Group 2 (without CT evidence of fibrosis). Demographics, rate of mechanical ventilation therapy, rate of intensive care unit admission, cumulative prednisolone-equivalent dose, laboratory tests results (maximum levels of alanine aminotransferase, aspartate transaminase [AST], lactate dehydrogenase [LDH], and creatine kinase [CK]), and peak radiographic opacification of 24 patients during the course of their illness in the hospital were compared between two groups.

Results:

Parenchymal abnormality was present in 17 of 24 (70.8%) patients and fibrosis occurred in 10 of 24 (41.7%) patients. Patients in Group 1 (10/24; 41.7%) had a higher rate of mechanical ventilation therapy (Z = −2.340, P = 0.019), higher number of doses of cumulative prednisolone-equivalent (Z = −2.579, P = 0.010), higher maximum level of laboratory tests results (AST [Z = −2.140, P = 0.032], LDH [Z = −3.227, P = 0.001], and CK [Z = −3.345, P = 0.019]), and higher peak opacification on chest radiographs (Z = −2.743, P = 0.006) than patients in group 2 (14/24; 58.3%).

Conclusions:

H1N1 virus-associated pneumonia frequently is followed by long-term pulmonary sequelae, including fibrotic changes, in lung parenchyma. Patients who need more steroid therapy, need more mechanical ventilation therapy, had higher laboratory tests results (maximum levels of AST, LDH, and CK), and had higher peak opacification on chest radiographs during treatment are more likely to develop lung fibrosis.     

COPD患者血清淀粉样蛋白A变化及意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者中血清淀粉样蛋白A（SAA）水平的变化及意义。方法抽取COPD急性期、缓解期患者及健康对照者静脉血,ELISA法检测血清中SAA、CRP、TNF-a及IL-8水平。结果COPD急性期组SAA和CRP水平显著高于缓解期及对照组（P〈0.01）,缓解期组SAA水平显著高于对照组（P〈0.01）;血清SAA水平与TNF-a、IL-8均相关）r=0.76;r=0.71）,血清CRP水平与TNF-a、IL-8均相关（r=0.69;r=0.63）;血清SAA诊断AECOPD的ROC曲线下面积为0.837±0.066,CRP的ROC曲线下面积为0.751±0.059。结论血清SAA对COPD的临床分期具有较高的应用价值,并可能为AECOPD发病机制提供新的见解。     

反义寡核苷酸抑制MMP7基因表达对肺腺癌A549细胞凋亡敏感性影响的研究

目的观察基质溶解素(matrilysin,MMP7)反义寡核苷酸(antisense ligodeoxynucleotide,ASODN)对肺腺癌A549细胞凋亡敏感性的影响。方法采用硫代磷酸修饰的MMP7ASODN,通过脂质体导入A549细胞后,RT-PCR检测MMP7 ASODN对MMP7 mRNA表达的影响;流式细胞仪检测其对细胞膜Fas抗原表达率的影响;加入重组FasL,诱导凋亡,流式细胞仪检测凋亡率。结果RT-PCR结果表明,MMP7 ASODN转染能显著抑制A549细胞MMP7 mRNA表达。流式细胞仪检测表明,MMP7ASODN转染A549细胞后,与未转染组和错义寡核苷酸(scrambled oligodeoxynucleotide,SCODN)组比较,细胞膜Fas蛋白表达率增高,有显著性差异(P<0.01)。加入重组FasL,诱导细胞凋亡,细胞凋亡率明显增高,与未转染组和SCODN组有显著性差异(P<0.01)。结论MMP7ASODN可以抑制肺腺癌A549细胞株MMP7基因的表达,上调细胞膜Fas抗原表达,增强A549细胞凋亡敏感性。     

硝苯吡啶和硫氮酮对肺动脉高压血流动力学的影响

本交使用右心导管法，直接观测30例肺动脉高压者相应部位的压力及血氧含量，用Fick＇s公式计算心排血量（CO），心脏排血指数（CI），体循环阻力（SVR），肺循环阻力（PVR），意在观察探讨钙拮抗剂硝苯吡啶、硫氮■酮对肺动脉高压的降压效果及血流动力学影响。结果表明硝苯吡啶、硫氧■酮对肺动脉压力分别降低12．62％及9．56％；对肺循环阻力分别降低16．71％及12．00％；心排血量分别提高17．40％及17．16％，经统计学处理有非常显著意义。     

Changes of Tumor Necrosis Factor, Surfactant Protein A, and Phospholipids in Bronchoalveolar Lavage Fluid in the Development and Progression of Coal Workers＇ Pneumoconiosis

Objective To evaluate the alterations of biomarkers in the development and progression of coal workers＇ pneumoconiosis （CWP）. Methods The type and number of cells, and the levels of tumor necrosis factor-alpha （TNF-α）, pulmonary surfactant protein, phospholipids and fibronectin in bronchoalveolar lavage fluid were assayed in 14 health active coal miners, 21 coal miners without CWP and 13 miners with CWP of 0/1 to 1/1. Results Compared to active coal miners without CWP （8,23μg/mL）, TNF-α concentration was gradually decreased when dust exposure was stopped （5.90 μg/mL）. Elevated surfactant protein A （SP-A） level and phosphatidylglycerol （PG） to phosphatidylinositol （PI） ratio were found in miners actively exposed to coal dust （6528 μg/mL for SP-A and 10. for PG/P1）, and both parameters decreased when CWP progressed from CWP （0/1） （3419μg/mL for SP-A and 5.9 for PG/PI） to CWP （1/1） （1654 μg/mL for SP-A and 5.5 for PG/PI）. Conclusion Biomarkers in bronchoalveolar lavage fluid can be used to screen coal miners at high risk of developing coal workers＇ pneumoconiosis.     

肺动脉平滑肌细胞上TMEM16A的表达及其阻滞剂对细胞增殖的作用

目的：研究TMEM16A在大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)上的表达及其阻滞剂(T16Ainh-A01)对PASMCs增殖的作用。方法组织块贴壁法分离正常大鼠PASMCs,原代培养。光镜下观察细胞形态,细胞免疫化学和细胞免疫荧光进行鉴定。细胞免疫荧光检测TMEM16A在PASMCs上表达。原代培养的3~6代PASMCs分别在10μmol/L T16Ainh-A01、20μmol/L T16Ainh-A01和50μmol/L T16Ainh-A01下培养24 h,用CCK-8法检测细胞增殖情况。结果倒置显微镜下PASMCs以长梭形为主,细胞核卵圆形,部分细胞重叠区域呈典型的“峰-谷”状结构。免疫学检测显示胞浆内与细胞长轴平行的肌丝被染成棕黄色,标记肌丝的红色荧光也与细胞长轴平行,标记细胞膜上的TMEM16A的绿色荧光可见表达,而细胞核不染色。CCK-8实验检测,相对于对照组,10μmol/L T16Ainh-A01组细胞活力均数为(96.74±0.92)%,20μmol/L T16Ainh-A01组均数为(92.21±1.25)%,50μmol/L T16Ainh-A01组均数为(87.41±3.27)%,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论正常大鼠PASMCs表达TMEM16A;T16Ainh-A01可抑制PASMCs增殖,其抑制作用呈浓度依赖性;TMEM16A可能参与调控PASMCs增殖。     

24例肺栓塞诊治分析

目的 回顾性分析24例肺栓塞（pulmonary embolism,PE）的诊断及治疗.方法 收集2003年1月～2005年5月间我院24例诊断为肺栓塞的入院患者的病历资料,分析其临床表现、实验室检查、治疗与转归.结果 24例PE入院年龄27～78岁,平均（58.6±9.2）岁,临床表现依次为呼吸困难、咳嗽、烦躁、低血压、胸痛、咯血、心悸等,原发病21例,其中6例合并两种以上原发病.实验室检查：D-二聚体＞500 μg/L20例、血气分析异常18例,心电图异常18例,X线胸片异常20例,螺旋CT肺动脉扫描异常2例,心脏超声心动图19例,下肢B型超声下肢深静脉血栓15例,肺通气灌注异常6例,肺动脉造影2例均异常.12例溶栓加抗凝治疗,14例抗凝治疗.结论 PE临床表现各异,无特异性诊断,如能及时正确诊断及治疗,预后良好.