分子生物学鉴定急性白血病患者ABO血型抗原

目的:应用分子生物学方法鉴定急性白血病患者ABO血型抗原,确定患者ABO血型正反定型不符的原因。方法:选取临床正反定型不一致白血病患者,常规血清学ABO血型正反定型;直接和间接抗人球蛋白试验检测不规则抗体;吸收放散法鉴定弱血型抗原;PCR方法扩增ABO基因的7个外显子及侧翼内含子,扩增产物进行测序及序列分析。结果:患者正定型为AB亚型,反定型为AB型;直抗和间抗为阴性;吸收放散试验证明红细胞上存在弱A和B抗原;ABO基因扩增产物测序结果表明其基因型为ABO*A102/B101。结论:该白血病患者经分子生物学方法确定为正常AB型,其血型抗原减弱由白血病所致。基因分型法可以正确区分血型抗原减弱或亚型。     

天津地区某教学医院职工ABO、Rh血型分布调查

目的:调查天津地区某教学医院职工的血型分布特征,建立血型档案,为日后职工安全供输血提供理论依据。方法:通过应用血清学正反定型、ABO基因分型试验等方法检测该院1 287位职工的ABO血型、使用单克隆IgM抗D血清鉴定Rh(D)血型。结果:ABO血型中A型占28.7%,B型占31.5%,O型占28.6%,AB型占11.2%,血型分布特征为BAOAB。Rh(D)阴性血型11人,阴性率0.85%。3例ABO正反定型不符,其中2例基因分型检测鉴定结果为B(A)型;另外1例为B型,NN,有抗M抗体存在。结论:根据本研究,建立健全了职工血型档案,了解了该院职工的血型分布特征,明确检测ABO正反定型的重要性,防止亚型及有意义不规则抗体对血型鉴定的影响,确保ABO、Rh血型定型结果的准确。     

22例ABO血型正反定型不符的研究分析

目的：研究分析无偿献血市民ABO血型正反定型不符的原因。方法：应用ABO血型正反定型试验、吸收-放散试验、唾液血型物质检测试验和谱细胞鉴定试验,检测ABO血型正反定型不符的标本。结果：22例无偿献血者ABO血型正反定型不符的标本经检测鉴定,分别为A亚型1例（A2亚型）,B亚型2例（B3型1例,Bm型1例）,抗B减弱2例,抗M抗体12例,冷抗体4例,Le^b抗体1例。结论：当ABO血型正反定型不相符时,必须进行鉴定和确认试验,以确定红细胞上的弱抗原或血清中的弱抗体和不规则抗体,从而确保临床用血安全。     

ABO血型正反定型不符原因分析及结果确认

目的：分析ABO血型正反不符标本的原因及确认试验结果。方法：应用ABO正反定型和吸收-放散试验及借助其他抗血清和不规则抗体鉴定,检测ABO正反定型不符的标本。结果：街头无偿献血者初检65210人份的血型检测结果显示,28例血型正反定型不相符,经试验确认无偿献血者分别判定为19例错型;7例亚型（Bx1例、A382例、B31例、A32例、cisAB1例）;2例为不规则抗体（抗-M1例、抗Ⅰ例）。临床患者输血前正反定型不相符7例（A382例亚型、A31例亚型、冷凝集2例、自身溶血型贫血2例）。结论：当血型正反定型不符时,必须增加抗A、B及抗H等稀有试剂,结合不规则抗体筛选和吸收-放散试验以确定和排除红细胞上的弱抗原或血清中的弱抗体。     

ABO疑难血型的血清学与PCR-SSP检测分析

目的:通过对ABO疑难血型的血清学与基因检测分析,探讨ABO亚型的分布状况和ABO血型基因分型的意义。方法:采用试管法正反定型、吸收放散试验等一系列血型血清学方法检测分析97例正反定型不符血液标本的血清学表型,对其中61例标本,辅以聚合酶链式反应-特异性序列引物(PCR-SSP)基因分型技术检测其基因型。结果:97例ABO疑难样本中检出A亚型13例,B亚型8例,AB亚型50例,B(A)18例、CisAB 5例,Bh m 1例,O型抗-B抗体缺失1例,1例有直抗阳性和自身抗体干扰,排除后被定为A型。PCR-SSP技术检出常见ABO基因4个(A、A201、B、O),以及ABO基因型6个(A/O、A201/O、B/O、A/B、A201/B、O/O)。结论:ABO疑难血型的鉴定应采用多种血清学方法进行检测,PCR-SSP技术能识别ABO基因型,作为一种辅助方法可应用于检测ABO疑难血型。     

Bm亚型1例

ABO亚型又称ABO变异型，包括A亚型和B亚型，主要特征为正反定型不符及抗原减弱的多种表现型。笔者为患者鉴定血型时，发现1例正定型为O型，反定型为B型，经系统鉴定为Bm亚型。现报告如下。     

健康献血者及疾病患者ABO正反定型不符比较研究

目的：分析比较健康献血者及疾病患者ABO血型正反定型不符的原因及特点，为解决ABO疑难血型鉴定提供依据及思考方向。方法：分析研究近3年来本中心检验科及柳州市县各医院因ABO血型正反定型不符而送本中心输血研究室进行疑难血型鉴定的47例健康献血者及60例疾病患者疑难血型鉴定记录。结果：送检的健康献血者及疾病患者AB0正反定型不符血样本在血型构成比上差异无统计学意义，均为B型〉A型〉O型〉AB型。导致健康献血者及疾病患者ABO正反定型不符的原因构成差异有统计学意义。健康献血者及疾病患者ABO正反定型不符原因，A型与B型比较均有显著差异。结论：克服冷凝集素对ABO正反定型的干扰可解决较大部分健康献血者及疾病患者ABO正反定型不符样本的难题。疾病患者抗原减弱或缺乏，抗体减弱或缺乏常与疾病相关，而健康献血者抗原减弱常常是亚型原因。     

东莞市无偿献血者ABO亚型和弱D型分布调查

目的:分析无偿献血者ABO亚型和弱D型的分布特点。方法:对2009-01-01-2012-12-31在我市参加无偿献血的197 146名献血者血样进行ABO、RhD血型鉴定,若ABO正反定型不一致及有弱凝集等反应特点的样本进行确认试验,鉴定为ABO亚型者确定亚型分型;对RhD阴性及有弱凝集反应者进行弱D型确认试验。结果:在197 146名献血者中共检出ABO亚型30例,其中A亚型5例,B亚型12例,AB亚型7例,类孟买型6例;除A2、A2B和类孟买型外,ABO亚型的检出率为0.011%;共检出弱D型28例,检出率为0.014%。结论:我市无偿献血者中ABO亚型频率偏低,B亚型明显多于A亚型;弱D型频率明显低于国外报道,与国内报道相似。     

B(A)血型与cisAB血型的血清学表型及基因型研究

目的:研究罕见B(A)和cisAB血型的血清学特性和分子机制,对表型和基因型的关联性进行分析。方法:采用血型血清学方法进行ABO血型正反定型,对其中血清学表型为AB亚型的标本,应用PCR-SBT法扩增ABO基因第6、7外显子,进行基因测序,确定突变位点和类型,并对表型和基因型关联性进行分析。结果:16例血清学表型为AB亚型的标本中,经分子生物学鉴定确定为B(A)血型的12例,包括3种B(A)型等位基因,分别为ABO*BA.03(1例)、ABO*BA.04(5例)、ABO*BA.02(6例),这3种等位基因所对应的表型有B(A)、AB_x、正O反B。确定为cisAB血型的4例,4例样本基因型全部为ABO*cisAB.01,血清学表型为A_xB和A_2B_x,未发现其他变异型。结论:本研究显示了16例B(A)型和cisAB型的血清学表型和基因型特点,通过基因测序了解突变位置及类型。相同的基因型可表现出多种不同的血清学反应特点,对于ABO亚型等疑难血型的鉴定,采用血清学方法和分子生物学方法相结合的方式能够准确鉴定血型。     

罕见B(A)亚型引起交叉配血不合1例

<正>ABO亚型又称为ABO血型的变异,往往在ABO正反定型不符时被发现,但有些ABO亚型在正反定型相符时会被误判,造成临床交叉配血困难。B(A)血型是一种较为罕见的ABO亚型,我们发现了B(A)血型误判为B型引起的交叉配血困难1例,并进行了家系调查和分子生物学鉴定,现报告如下。1资料与方法1.1临床资料男,30岁,汉族,已婚,在沧州市中心血站无偿献400ml全血,以B、RhD(+)2U悬浮红细胞发     

武汉市HIV-1相关基因序列分析及亚型分布

目的研究武汉市HIV感染人群中的HIV毒株的亚型分布特点和流行规律。方法采集武汉市60名已被确认为HIV-1感染者的抗凝全血样品,提取前病毒DNA,用巢式聚合酶链反应方法（nested-PCR）扩增病毒膜蛋白env基因的C2-V5区及gag基因的部分区段,对PCR纯化产物直接测序,并应用GCG软件对序列进行分析。结果通过PCR扩增得到60份样品的结果,其中env基因序列45份、gag基因序列52份。依据env和gag区基因序列,与HIV-1各个亚型国际参考株比较,通过系统进化分析,最后确定武汉市样品分属5个亚型,分别为HIV-1B亚型中的泰国B（B’）亚型32份,流行重组型CRF07-BC12份,流行重组型CRF01-AE9份,A亚型1份和C亚型6份。结论武汉市存在多种HIV-1亚型,应加强对HIV-1毒株亚型变异的监测,及时调整防治策略。     

输血前开展A_2/A_2B亚型和Rh弱D血型检测的临床意义

目的：探讨输血前开展A2/A2B 亚型和 Rh 弱 D 血型检测的临床意义。方法：通过对2009年1-12月献血者中初筛Rh（D）阴性324人次、A型15123人次、AB型6049人次为基数,计算A2/A2B亚型和Rh弱D血型的检出比率;χ2检验比较2008年与2009年A型和AB型输血患者溶血性输血反应发生率、无效输血发生率。结果：本地区Rh（D）阴性中Rh弱D比率为11.11%;A2亚型比率为2.06%;A2B亚型比率为2.13%;2008-2009年A型、AB型溶血性输血反应的发生率分别由0.098%、0.136%降为0.037%、0.039%;无效输血的发生率分别由12.37%、17.35%降为7.67%、8.04%。结论：输血前开展A2/A2B亚型检测,为患者提供更相合的血液,可以大幅度降低临床溶血性输血反应发生率,降低临床无效输血发生率,确保患者输血安全,提高临床输血效果;Rh弱D血型检测可以更好地指导临床稀有血型患者的输血安全,节约宝贵的血液资源。     

河南省HIV流行毒株env膜蛋白基因C2-V3区序列特征和亚型研究

目的 了解河南省内艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)流行株的亚型及序列变异特征。方法 用套式聚合酶链反应(nested-PCR)，对河南省内28份HIV-1感染者外周血单个核细胞(PBMc)中前病毒脱氧核糖核酸(DNA)的膜蛋白基因进行扩增，并对C2-V3及其邻区350～450个核苷酸序列进行测定和分析。结果 28份样品间的基因离散率为5．72％，与流行于云南省的(泰国B)毒株基因距离为5.80％，与欧美B亚型基因距离为18．05％，而与其它A、C、D、F、G、H、J、O等亚型的基因距离均在24％以上。系统树分析显示，28份样本与泰国B亚型聚在一起而远离其它国际亚型。对于其V3环四肽序列的分析表明，具有泰国B亚型基因型GPGQ的8例，占28．57％；具有欧美B亚型基因型GPGR的13例，占46．4％。结论 河南省流行的HIV株属B‘亚型，其毒株来自与泰国接壤的云南省，在河南省流行的时间约在6～10年，其V3环顶端四肽序列特征以GPGR为主。     

Significance of the minor i and t determinants of hepatitis B virus in hepatocellular carcinoma

Stored sera from asymptomatic hepatitis B virus (HBV) carriers and hepatitis B virus surface antigen-positive hepatocellular carcinoma (HCC) patients were tested for HBV subtypes, such as subtype determinants d, y, w, r and also antigenic determinants isoleucine (i) and threonine (t) by direct S gene nucleotide sequencing. Significant changes in minor i and t determinants in hepatocellular carcinoma patients with adr hepatitis B carriers were seen. The adr subtype with t determinant was present in 14/25 (56%) of HCC patients compared with only two of 28 (7%) in asymptomatic hepatitis B carriers ( P < 0.001). However, the adr subtype with i determinant was present in nine of 25 (36%) of the HCC patients and also present in 24/28 (86%) of asymptomatic carriers ( P < 0.001). No significant changes were seen with the adw subtypes. These results show that i and t minor determinant changes are more common with adr subtypes associated with HCC than with the adw subtype. Whether these subtle changes are pathologically relevant or only a polymorphism of hepatitis B genotypes will depend on subsequent follow-up studies.     

Molecular epidemiology of HIV Type 1 in Ukraine: birthplace of an epidemic

During the 1990s, HIV-1 spread rapidly through drug networks in Ukraine and from there throughout the former Soviet Union. To examine the origins of this epidemic, the genetics of HIV-1 in Ukraine were studied. Proviral DNA from PBMC was extracted and PCR amplified. Part of pol and nearly full genomes of HIV-1 were sequenced and characterized. The predominant genetic form in 163 strains was subtype A (66%), followed by subtypes B (30%), C (2%), D (1%), and a new AB recombinant form (1%). HIV strains from Kiev were diverse having subtypes A, B, C, and D. In Crimea, Donetsk, Poltava, and Odessa, however, the strains were overwhelmingly subtype A, while in Nikolaev subtype B predominated. After the near simultaneous introduction of subtypes A and B in Ukraine, subtype B remained where it was introduced while subtype A spread widely, creating the fastest growing epidemic in the world.     

四川省HIV—1的基因分型调查

目的了解四川省ＨＩＶ１各亚型的流行情况。方法采集四川省内检出的１２例ＨＩＶ１感染者的全血标本,提取核酸后用套式聚合酶链反应（ＮｅｓｔｅｄＰＣＲ）技术扩增ＨＩＶ１ｅｎｖ基因区,用异源双链电泳泳动法进行ＨＩＶ１亚型的分析。结果１２份标本中有１１份ＰＣＲ扩增阳性,亚型分析证明１１份标本均为Ｂ亚型。结论ＨＩＶ１Ｂ亚型可能是四川省流行的主要亚型。     

An AB recombinant and its parental HIV type 1 strains in the area of the former Soviet Union: low requirements for sequence identity in recombination. UNAIDS Virus Isolation Network

In the former Soviet Union (SU) increasing numbers of HIV-1 infections among injecting drug users (IDU) have been reported, especially in the Ukraine. The main subtype transmitted among the IDUs seems to be subtype A, but limited numbers of subtype B cases have also been reported. In Kaliningrad, Russia, an AB recombinant strain was earlier shown to be responsible for the local outbreak. Here we describe the genetic relationship of HIV-1 strains circulating among IDUs in the former SU. For subtype A and the AB recombinant strains nearly full-length genomes were sequenced, and for one subtype B strain the entire envelope gene was cloned. The relationship between the AB recombinant strain and the subtype A and subtype B strains and the mosaic structure of the recombinant was studied by phylogenetic analysis. Ukrainian A and B strains were shown to be the probable parental viruses of the Kaliningrad AB recombinant strain. In the envelope gene the recombination breakpoint could also be precisely mapped to a region of similarity of only 14 base pairs. This suggests that only short stretches of absolute sequence identity may be needed for efficient RNA recombination between HIV-1 subtypes.