大鼠脑出血灶周HIF-1a表达及GM1对其变化的影响

目的:研究大鼠脑出血灶周边组织急性期HIF-1a的表达机制,探讨GM1对HIF-1a表达的影响.方法:①Wistar大鼠96只,随机分为:对照组,脑出血组,神经节苷酯干预组(局部和腹腔给药组),各实验组分为出血后6、12、24、48h四个时间点.采用大脑立体定位法注入木肝素化动脉血复制大鼠脑出血模型.②采用免疫组化染色法检测脑组织HIF-1a的表达.结果:①大鼠脑出血周边组织6h可见HIF-1a的表达,在6～48h呈逐渐上升趋势.②GM1干预后周边组织HIF-1a表达阳性细胞数与脑出血组对应时间点比较显著上升,差异均具有显著性(P＜0.05).③GM1干预组中,与腹腔给药相比,局部用药各时间点周边组织HIF-1a表达阳性细胞数显著增高,差异具有显著性(P＜0.05).结论:①HIF-1a参与脑出血用边组织损伤应答反应.②GM1可增强脑出血急性期HIF-1a的表达.⑧GM1可改善脑出血预后,且局部用药优于腹腔给药.     

大鼠脑出血灶周HSP70凋亡表达及GM1对其变化的影响

目的:研究大鼠脑出血灶周边组织HSP70的表达机制,探讨GM1抗细胞凋亡作用及对HSP70表达的影响。方法:1Wistar大鼠96只,随机分为:对照组,脑出血组,神经节苷酯干预组。大脑立体定位法复制脑出血模型。2免疫组化染色法检测脑组织HSP70表达。3吉姆萨染色法检测神经细胞凋亡。结果:1脑出血周边组织6h见HSP70表达,在6~48h呈上升趋势。2脑出血周边组织6h见凋亡细胞,在6~48h呈上升趋势。3GM1干预后HSP70表达与脑出血组比较显著上升,而凋亡细胞数下降,差异均具有显著性(P<0.05)。4GM1干预组中,局部比腹腔各时间点HSP70表达阳性细胞数增高,而凋亡细胞数下降,差异具有显著性(P<0.05)。结论:1HSP70参与脑出血周边组织损伤应答反应。2GM1可增强脑出血急性期HSP70的表达,同时具有抗细胞凋亡作用。3GM1可改善脑出血预后,且局部用药优于腹腔给药。     

大鼠脑出血灶周HIF-1α表达及GM_1对其变化的影响

目的:研究大鼠脑出血灶周边组织急性期HIF-1α的表达机制,探讨GM1对HIF-1α表达的影响。方法:1Wistar大鼠96只,随机分为:对照组,脑出血组,神经节苷酯干预组(局部和腹腔给药组),各实验组分为出血后6、12、24、48h四个时间点。采用大脑立体定位法注入未肝素化动脉血复制大鼠脑出血模型。2采用免疫组化染色法检测脑组织HIF-1α的表达。结果:1大鼠脑出血周边组织6h可见HIF-1α的表达,在6~48h呈逐渐上升趋势。2GM1干预后周边组织HIF-1α表达阳性细胞数与脑出血组对应时间点比较显著上升,差异均具有显著性(P<0.05)。3GM1干预组中,与腹腔给药相比,局部用药各时间点周边组织HIF-1α表达阳性细胞数显著增高,差异具有显著性(P<0.05)。结论:1HIF-1α参与脑出血周边组织损伤应答反应。2GM1可增强脑出血急性期HIF-1α的表达。3GM1可改善脑出血预后,且局部用药优于腹腔给药。     

兔脑出血灶周缺氧诱导因子-1α、IL-6表达的实验研究

目的 探讨缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible facor-1α，HIF-1α）、IL-6在脑出血灶周的表达，并探讨其表达的意义。方法 家兔28只，分为A、B、C、D4组，A组4只为对照组，B、C、D各8只，采用不同量的新鲜动脉血制作脑出血模型。应用免疫组化技术检测家兔脑出血模型灶周脑组织中HIF-1α、IL-6的表达。结果 各组脑出血灶周组织中HIF-1α、IL-6的表达有显著意义（P〈0．05）。结论 脑出血灶周存在HIF-1α、IL-6表达，为判断脑出血灶周缺血半暗带的存在提供了依据；HIF-1α可能具有神经细胞保护作用。     

神经节苷脂GM1与亚低温对缺氧缺血后脑中HSP70、NPY表达的影响

目的 探讨神经节苷脂GM1与亚低温对缺氧缺血(HI)后新生大鼠脑中热休克蛋白70(HSP70)和神经肽Y(NPY)蛋白和基因表达的影响.方法 50只新生7 d SD大鼠制作HI模型,随机分为假手术(A)组、模型(B)组、神经节苷脂GM1(C)组、亚低温(D)组和神经节苷脂与亚低温联合干预(E)组,每组10只.采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠脑中HSP70、NPY蛋白及基因表达.结果 A组HSP70、NPY蛋白及其mRNA表达较弱,B组HSP70蛋白及其 mRNA表达增加,NPY蛋白及其mRNA表达明显增强,各干预组HSP70蛋白和mRNA表达进一步升高,而以E组升高更明显(P＜0.05),而NPY和mRNA在各干预组中表达减弱,联合组减弱更明显(P＜0.05).结论 神经节苷脂GM1与亚低温对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用可能与影响HSP70、NPY的表达有关.     

复原胶囊对脓毒症大鼠肾组织HIF-1α表达的影响

目的:研究复原胶囊对脓毒症大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术、模型及复原胶囊高、低剂量组,每组4只。复原胶囊组大鼠连续4d灌胃后行盲肠结扎穿孔(CLP)手术。各组复制模型后分别于3、6、12、24h行RT-PCR检测肾组织HIF-1α的表达;酶联免疫吸附法检测血清白介素-6(IL-6)水平;心脏取血检测血清肾功能;HE染色镜下观察肾组织病理学变化。结果:与假手术组比较,模型组HIF-1αmRNA表达3h时逐渐升高,24h达高峰(P<0.05);与模型组比较,复原胶囊高、低剂量组6、12、24h时HIF-1αmRNA表达显著降低(P<0.05);复原胶囊高、低剂量组BUN显著降低(P<0.05);HE染色显示复原胶囊组损伤较轻。结论:复原胶囊对脓毒症大鼠肾损伤的保护作用可能与调控HIF-1α的表达有关。     

实验性脑出血大鼠缺氧诱导因子-1α的表达与脑水肿及细胞凋亡的相关性研究

目的研究脑出血(ICH)血肿周围缺血半暗带区缺氧诱导因子(HIF)-1α的表达及与脑水肿和细胞凋亡的关系。方法采用自体血脑内注射法建立脑出血动物模型,应用免疫组织化学方法检测脑出血后不同时间血肿周边脑组织中HIF-1α蛋白表达情况,并应用干湿比重法测定脑组织含水量及应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞。结果脑出血后血肿周围缺血半暗带区HIF-1α蛋白表达与脑水肿呈正相关(r=0.466,P<0.01),与细胞凋亡呈正相关(r=0.195,P<0.05)。结论缺血半暗带区脑组织中HIF-1α表达与细胞凋亡和脑水肿呈正相关。     

大鼠脑出血周边组织TNF-α、ICAM-1的表达及NAC对其变化的影响

目的:研究大鼠脑出血周边组织细胞凋亡及TNF-α、ICAM-1(细胞粘附因子-1)的表达机制,探讨NAC(N-乙酰-L-半胱氨酸)抗细胞凋亡作用和对TNF-α、ICAM-1表达的干预机制.方法:Wistar大鼠105只,随机分为对照组,脑出血组,脑出血 NAC组,各分为(出血6h,12h,24h,48h,3d,5d,7d)七个时间点.采用立体定位注入自体未肝素化动脉血复制脑出血模型.采用免疫组化染色法检测脑组织ICAM-1的表达;利用原位末端标记法检测出血周边组织神经细胞的凋亡.结果:①脑出血后6h血肿周边组织TNF-α开始表达,48h达高峰,12hICAM-1开始表达,72h达高峰.各组与对照组之间有显著差异(均P＜0.05).②大鼠脑出血周边组织6h出现凋亡细胞,12h上升显著,3d凋亡细胞达峰值,7d仍有凋亡细胞表达.③NAC干预后周边组织TNF-α、ICAM-1表达阳性细胞数及凋亡细胞数与脑出血组对应时间点比较显著下降(P＜0.05).结论:①细胞因子TNF-α、ICAM-1参与了脑出血周边组织炎性反应损伤.②脑出血周边组织存在着细胞凋亡病理生理过程.③NAC可抑制细胞因子TNF-α、ICAM-1表达,同时具有抗细胞凋亡作用,可改善脑出血预后.     

结肠癌组织中HIF-1α的表达及生物学意义

目的研究缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在结肠癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组化技术检测68例结肠癌组织和10例癌旁组织中HIF-1α的表达,分析HIF-1α表达水平高低与临床病理特征的相关性。结果 HIF-1α阳性染色于细胞质和细胞核,在结肠癌组织表达率为44%,在癌旁组织不表达。HIF-1α高表达与肿瘤TNM分期(P<0.01)和转移显著相关(P<0.05),但与患者年龄、性别及肿瘤大小无相关性。结论 HIF-1α在结肠癌发病过程中可能起重要的作用,可作为结肠癌预后判断及淋巴结转移监测的有价值指标之一。     

脑出血大鼠脑组织缺氧诱导因子的动态变化及促红细胞生成素对其的影响

目的探讨实验性脑出血大鼠脑组织中缺氧诱导因子（HIF-1α）在脑出血后不同时间点的动态演变过程及促红细胞生成素（EPO）对其影响。方法应用自体血脑内注射法建立脑出血大鼠模型并随机分为假手术组、脑出血非干预组及脑出血EPO干预组,应用免疫组化方法检测脑出血后不同时间及组别血肿周边脑组织中HIF-1α蛋白表达情况。结果大鼠脑出血后HIF-1α蛋白阳性表达率在72 h内随时间进行性增加,并于出血后72 h达到高峰,此后HIF-1α蛋白表达的阳性率逐渐下降,脑出血EPO干预组较脑出血组各时间点HIF-1α蛋白阳性率明显减少,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论脑出血后HIF-1α表达存在一定变化规律,EPO能显著减少HIF-1α表达。     

乳腺癌组织中ING4、HIF-1α和HIF-2α表达及与肿瘤微血管新生的关系

目的 探讨乳腺癌组织中生长抑制因子4(ING4)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)表达及与肿瘤微血管新生的关系.方法 选取择期行手术治疗的乳腺癌病人107例,利用实时荧光定量PCR技术检测乳腺癌和癌旁组织中HIF-1α、HIF-2α、ING4和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达,免疫组化染色检测乳腺癌和癌旁组织中微血管密度(MVD).结果 乳腺癌组织中HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA相对表达量均高于癌旁组织,而ING4 mRNA 相对表达量低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α mRNA相对表达量与淋巴结转移有关(P<0.05),HIF-2α mRNA相对表达量与肿瘤大小、淋巴结转移有关(P<0.05),ING4 mRNA相对表达量与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);乳腺癌组织中VEGF mRNA相对表达量和MVD计数均高于癌旁组织,均差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析显示,乳腺癌组织中HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA相对表达量均与VEGF mRNA相对表达量和MVD计数呈正相关(r=0.382、0.417和0.408、0.491,P<0.05),ING4 mRNA相对表达量均与VEGF mRNA相对表达量和MVD计数呈负相关(r=-0.395、-0.502,P<0.05).结论 乳腺癌组织中HIF-1α、HIF-2α基因表达升高,而ING4基因则被抑制,可能共同参与了乳腺癌组织中血管新生.     

低氧对大鼠骨髓间充质干细胞HIF-1α表达影响的研究

目的通过体外不同氧浓度下培养大鼠骨髓间充质干细胞,RT-PCR方法检测,观察正常氧浓度和低氧浓度对HIF-1α(缺氧诱导因子-1α)表达的影响。方法分离雄性Wistar大鼠骨髓间充质干细胞体外培养,鉴定其CD34、CD44的表达,分为正常氧浓度组和低氧浓度组培养24h,RT-PCR方法检测,不同氧浓度对细胞HIF-1α表达的影响。结果贴壁法培养的细胞表达CD44,不表达CD34;正常氧浓度培养的细胞较少有HIF-1α的表达,低氧浓度培养的细胞HIF-1α的表达明显增加。结论细胞低氧可激活HIF-1α的表达,低氧浓度培养的细胞的HIF-1α表达较正常氧浓度培养的细胞的表达明显增加。     

白藜芦醇对小鼠移植宫颈癌生长及HIF-1α、VEGF表达的影响

目的 探讨白藜芦醇（Res）对小鼠宫颈癌细胞株U14移植瘤的抑制作用及其相关机制.方法 构建615近交系小鼠U14移植瘤动物模型,并随机分为对照组、Res组、顺铂组,每组10只,给予相应药物干预,接种后第26天处死全部小鼠,检测肿瘤体积及重量,计算抑瘤率,通过免疫组织化学染色法检测肿瘤组织微血管密度（MVD）,采用荧光实时定量PCR和Western blotting分析肿瘤组织缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA及蛋白表达水平.结果 Res组和顺铂组抑瘤率分别为50.46％、57.19％; Res组和顺铂组肿瘤体积、肿瘤质量较对照组显著降低（P＜0.01）;与对照组比较,Res组和顺铂组HIF-1α、VEGF mRNA与蛋白表达水平及MVD明显降低,差异有统计学意义（P＜O.01）,但Res组与顺铂组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 Res通过下调HIF-1α、VEGF表达抑制小鼠宫颈癌的生长.     

晚期宫颈癌患者HIF-1α、HIF-2α及ERCC-1蛋白检测的临床意义

目的探讨晚期宫颈癌患者的缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)、缺氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2,HIF-2α)以及核苷酸切除修复交叉互补-1(excision repair cross-complementing-1,ERCC-1)蛋白检测的临床意义。方法选取2014年8月2016年2月收治的晚期宫颈癌患者30例为观察组,另选取同时间段收治的宫颈良性病变患者30例为对照组。采用RT-PCR以及免疫组化法检测2组患者的病变组织中HIF-1α、HIF-2α的mRNA和蛋白水平,分析HIF-1α、HIF-2α与疾病发生发展的相关性。并根据观察组患者外周血基ERCC-1因表达的不同,将观察组患者分为C组和T组,给予观察组患者顺铂新辅助化疗,观察化疗后C组和T组患者的疗效指标,分析新辅助化疗治疗效果与ERCC-1表达的相关性。结果 HIF-1αmRNA、HIF-2αmRNA在观察组和对照组患者的组织标本中均有表达,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组HIF-1αmRNA、HIF-2αmR...     

鼻咽癌组织中Survivin蛋白和HIF-1α表达水平及临床意义

目的 探讨鼻咽癌组织中Survivin蛋白和缺氧诱导因子-1α(HIF-1 α)表达水平及临床意义.方法 选取2010年12月-2015年12月经病理切片确诊为鼻咽癌的患者72例;同时选取24例慢性鼻咽炎组织标本进行对照.应用免疫组织化学检测Survivin蛋白和HIF-1α的表达情况,并分析其表达水平的临床意义.结果 鼻咽癌组织中Survivin蛋白和HIF-1α阳性表达率均高于慢性鼻咽炎组织(P＜ 0.001).Ⅲ+Ⅳ期鼻咽癌组织Survivin蛋白和HIF-1α的阳性表达率、中等及以上阳性表达率均高于Ⅰ+Ⅱ期鼻咽癌组织(P ＜0.001);有淋巴结转移的患者Survivin蛋白和HIF-1α的阳性表达率均高于无淋巴结转移的患者(P＜0.05和P＜0.001).结论 Survivin和HIF-1α表达在鼻咽癌组织中具有较高的表达,两者在鼻咽癌的分期,进展过程中起到了重要的作用.     

乳腺癌不同部位HIF-1α表达对肿瘤血管生成的研究

目的观察HIF-1α在乳腺癌不同部位表达对肿瘤血管生成的影响。方法选取乳腺癌大体标本30例,常规固定,HE染色、HIF-1αCD31免疫组化染色。结果乳腺癌组织内存在HIF-1α的表达,且肿瘤周边区域HIF-1α的表达水平较中央区域低（P〈0.01）,肿瘤周边区域及肿瘤中央细胞HIF-1α表达水平与微血管密度（micro vascular density MVD）密切相关（r值分别为0.8571和0.8346,P〈0.01）。结论乳腺癌中存在HIF-1α的表达,且与肿瘤血管生成密切相关。     

川芎嗪对缺氧时视网膜血管内皮细胞HIF-1α、VEGF表达及细胞增殖的影响

目的研究川芎嗪对缺氧时体外培养的牛眼视网膜血管内皮细胞（BREC）VEGF表达及细胞增殖活性的影响,探讨川芎嗪治疗视网膜新生血管性疾病的药理机制及可行性。方法 CoCl2模拟缺氧处理培养的BREC细胞,用浓度分别为20、40、120μg/mL的川芎嗪分别加入细胞培养液中24h,采用ELISA法检测细胞培养上清液VEGF含量,免疫组织化学法和生物荧光法分别检测细胞PCNA的表达、细胞内ATP含量以分析细胞增殖能力,采用免疫组织化学法检测HIF-1α的表达。结果川芎嗪可减少缺氧引起的视网膜血管内皮细胞中PCNA的表达,降低细胞内ATP含量,降低培养上清液中的VEGF浓度,且呈剂量依赖性。结论川芎嗪可抑制缺氧引起的视网膜血管内皮细胞的增殖。其机制可能是通过抑制HIF-1α途径来实现的。     

HIF-1α及VEGF在乳腺癌组织中的表达及预后判断

目的检测乳腺癌组织中缺氧诱导因子1(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平,探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测乳腺良性病变、乳腺癌组织和癌旁组织中HIF-1α和VEGF表达水平。结果 HIF-1α蛋白在乳腺良性病变和癌旁组织中表达水平极低;在乳腺癌组织中HIF-1α表达阳性率为66.25%(53/80),VEGF表达阳性率为71.25%(57/80)。结论乳腺癌组织中HIF-1α、VEGF表达上调,可作为临床判断预后的重要指标。     

HIF-1α和VEGF在扁平苔藓中的表达及意义

目的 检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）在扁平苔藓皮损中的表达情况,探讨其在扁平苔藓发病机制中的作用。方法 采用免疫组织化学S-P染色法,检测HIF-1α、VEGF在扁平苔藓及正常皮肤的表达。结果 扁平苔藓皮损中HIF-1α与VEGF的表达水平显著高于正常人对照组,扁平苔藓皮损中HIF-1α与VEGF表达呈正相关。结论 HIF-1α与VEGF在扁平苔藓中呈高表达,可能参与扁平苔藓的发病机制。