双纸片法测定葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的实验室检查

大环内酯类、林可霉素类和链阳霉素B(Streptogramin MLSB)是在功能上非常相似的抗生素.大环内酯类常用的有红霉素、克拉霉素和阿奇霉素:林可霉素类包括克林霉素和林可霉素:链阳霉素由喹蚁普叮和达福普叮两部分组成,起协同抗菌作用.上述3类抗生素通常称为MLS[1].     

双纸片法测定葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的实验研究

大环内酯类、林克酰胺类和链阳菌素类B（macrolide,lincosamide and stretogramin B, MLSB）抗生素是广泛应用于治疗葡萄球菌及链球菌等细菌感染的抗菌药物,尤其是克林霉素和链阳菌素类常用来治疗严重的葡萄球菌等细菌感染并作为对青霉素过敏的首选替代药物.现大环内酯类药物已呈较高的耐药率,如能及时、准确地检测和报告诱导型 MLSB 的存在,可排除克林霉素潜在性耐药的威胁.本研究采用双纸片扩散法对金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌进行诱导型耐药的实验研究及临床实用价值探讨.     

葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的检测

许多临床微生物实验室采用仪器或肉汤微量稀释法进行抗生素敏感试验。这两种方法能检测大多数抗生素耐药机制，但是不断增加的葡萄球菌诱导型克林霉素耐药（MLSBi）用标准的药敏试验方法不能检测。大环内酯类耐药的葡萄球菌由于核糖体靶位被修饰，影响大环内酯类和克林霉素的活性，被称为大环内酯类-林可霉素-链阳霉素B（MLSb）交叉耐药。其编码基因是ermA或ermC。克林霉素结构型耐药可通过标准的药敏试验检测，而MLSb常规方法不能检测。将MLSb和含有msrA基因大环内酯类耐药克林霉素敏感的葡萄球菌区分开来有重要意义。     

D-试验检测耐红霉素葡萄球菌对克林霉素诱导耐药研究

目的了解本院临床分离的耐红霉素葡萄球菌中诱导型克林霉素的检出率及耐药状况。方法按临床试验室标准化研究所（CLISI）K-B纸片法检测葡萄球菌的耐药性,同时CLSI2004年推荐的双纸片协同法（D-试验）检测红霉素和克林霉素的耐药性。结果293株葡萄球菌D-试验阳性的是62．2％,其中耐甲氧西林葡萄球菌57．7％,甲氧西林敏感葡萄球菌4．5％。结论实验室常规开展D-试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药,提供临床医师合理选用大环内酯类、林可霉素类和链阳菌素B类（MLSB）抗菌药物。     

D-试验检测耐红霉素葡萄球菌对克林霉素诱导耐药研究

目的 了解本院临床分离的耐红霉素葡萄球菌中诱导型克林霉素的检出率及耐药状况.方法 按临床试验室标准化研究所(CLISI)K-B纸片法检测葡萄球菌的耐药性,同时CLSI2004年推荐的双纸片协同法(D-试验)检测红霉素和克林霉素的耐药性.结果 293株葡萄球菌D-试验阳性的是62.2%,其中耐甲氧西林葡萄球菌57.7%,甲氧西林敏感葡萄球菌4.5%.结论 实验室常规开展D-试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药,提供临床医师合理选用大环内酯类、林可霉素类和链阳菌素B类(MLSB)抗菌药物.     

D-试验检测耐红霉素葡萄球菌对克林霉素诱导耐药研究

目的 了解本院临床分离的耐红霉素葡萄球菌中诱导型克林霉素的检出率及耐药状况.方法 按临床试验室标准化研究所(CLISI)K-B纸片法检测葡萄球菌的耐药性,同时CLSI2004年推荐的双纸片协同法(D-试验)检测红霉素和克林霉素的耐药性.结果 293株葡萄球菌D-试验阳性的是62.2%,其中耐甲氧西林葡萄球菌57.7%,甲氧西林敏感葡萄球菌4.5%.结论 实验室常规开展D-试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药,提供临床医师合理选用大环内酯类、林可霉素类和链阳菌素B类(MLSB)抗菌药物.     

D试验检测红霉素耐药葡萄球菌和B群链球菌

目的 了解葡萄球菌和B群链球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,以及红霉素对克林霉素诱导耐药的发生率.方法 用CLSI标准D试验检测红霉素和克林霉素的耐药性.结果 所有406株葡萄球菌和75株B群链球菌中对红霉素和克林霉素耐药(eMLS)分别为232株(57.1%)和64株(85.3%);对红霉素耐药对克林霉素敏感但D试验阳性(iMLS)的分剐为103株(25.4%)和4株(5.4%);对红霉素耐药对克林霉素敏感但D试验阴性(MS)的分别为71株(17.5%)和7株(9.3%).结论 临床徽生物实验室常规进行D试验检测葡萄球菌和B群链球菌中对红霉素和克林霉素的诱导耐药性,可帮助临床医生正确选用大环内脂类、林可霉素类和链阳菌素B类(MLSB)抗生素.     

葡萄球菌对红霉素和克林霉素的诱导耐药性研究

目的 了解葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性，测定红霉素对克林霉素诱导耐药率及诱导耐药基因。方法 按美国临床实验室标准化委员会推荐的纸片扩散方法测定并判读金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性，并以D试验测定红霉素对克林霉素的诱导耐药表型，聚合酶链反应检测诱导耐药基因。结果 甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌和甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌对红霉素及克林霉素同时耐药分别占62．7％和54．8％。D试验阳性占所检测葡萄球菌的17．7％。在单一纸片红霉素耐药而克林霉素敏感的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中，D试验阳性即对克林霉素具有诱导耐药性者分别为67．6％和45．3％。红霉素核糖体甲基化酶基因ermC是诱导耐药的主要基因，占74．5％。结论 临床微生物室开展D试验检测葡萄球菌中红霉素对克林霉素的诱导耐药性可帮助临床医生正确选用大环内酯类、林可酰胺类和链阳霉素B类抗生素。     

耐红霉素葡萄球菌和β溶血链球菌的诱导型克林霉素耐药

耐大环内酯类(Macrolide)的葡萄球菌和β溶血链球菌可发生诱导型克林霉素(Clindamycin)和链阳霉素B(strep-togramin B)耐药,即大环内酯类-林可酰胺类-链阳性菌素B类(macrolide-lincosamide-streptogramin group B,MLSB)耐药表型。此种耐药表型可以是结构型的,也可是诱导型的,由不同的耐药基因所决定。诱导型耐药在应用红霉素治疗后会诱导出对克林霉素的耐药。结构型的红霉素或克林霉素耐药用普通的纸片法、MIC法或自动仪器法均可检出,而诱导型的耐药则需用纸片法的D试验来检出。1耐红霉素的葡萄球菌的诱导则克林霉素耐药早在90年代初,…     

甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌对大环内酯类抗生素耐药的研究进展

近年来甲氧西林耐约金黄色葡萄球菌（MRSA）同时对β-内酰胺类抗生素、酶抵制剂复合物抗生素及碳青烯类抗生素耐药，因此临床治疗MRSA感染时常使用大环内酯类（macrolide）如红霉素、林可酰胺类（1ineosamide）如免林霉素和链阳霉素B类（streptagramin type B）抗生素，这也是治疗对青霉素和头孢菌素过敏者的抗生素选择。     

葡萄球菌属对抗菌药物的耐药性分析

目的了解葡萄球菌属临床分离株的耐药性及对大环内酯类、林可霉素类及链阳霉素类（MLS）的耐药表型。方法用Kirby-Bauer法测定葡萄球菌属对14种抗菌药的敏感性，进行D试验测定MLS耐药表型。结果在230株葡萄球菌属中，耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCN）分别为9．9％和79．8％。对青霉素都呈现高度耐药。未发现万古霉素及替考拉宁耐药菌株，126株葡萄球菌属对红霉素耐药，54．8％（23／42）株金葡菌为结构型耐药；在凝固酶阴性葡萄球菌中（CNS），44．0％（37／84）为结构型耐药，41．7％（35／84）为外排型耐药。对红霉素耐药但对克林霉素敏感的葡萄球菌中，17株为诱导型克林霉素耐药。结论应加强对葡萄球菌的耐药性监测，临床微生物实验室应进行D试验。指导临床合理使用抗生素。     

表皮葡萄球菌诱导克林霉素耐药及常见抗生素耐药性分析

目的 分离临床标本中表皮葡萄球菌,检测其对常用抗生素的耐药性,并检测红霉素对克林霉素诱导性耐药的发生率.方法 分离培养临床标本中的表皮葡萄球菌,用k-b法检测其对红霉素及克林霉素等抗生素的耐药性,并做纸片法D试验检测红霉素诱导克林霉素耐药发生率.用头孢西丁法检测MRSE.结果 86株表皮葡萄球菌中MRSE 72株,占83.72%,MSSE 14株 占16.28%.总D试验阳性34株,占39.53%,D试验阴性52珠,占60.47%.所有试验菌株对青霉素耐药率100%,红霉素耐药率88.37%,克林霉素24.42%,利奈唑烷100%敏感,万古霉素100%敏感.结论 临床分离表皮葡萄球菌对青霉素,红霉素和克林霉素等药物耐药率较高,常规D试验检测有助于临床合理使用大环内酯类及林可霉素类抗菌药物.     

金黄色葡萄球菌“D-试验”阳性率调查及其临床意义

目的通过对金黄色葡萄球菌D-试验的阳性率的调查,有助于临床正确使用抗生素。方法按美国临床实验室标准化委员会(NCCLs)规定测定并判读金黄色葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,并以D-试验测定红霉素对克林霉素的诱导耐药表型。结果共测试119株金黄色葡萄球菌,D-试验阳性率为12.6%。其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌D-试验阳性率为14.8%,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌为12.0%。结论开展D-试验检测葡萄球菌中红霉素对克林霉素的诱导耐药性,以帮助医生正确选用大环内酯类及林可霉素类抗生素。     

葡萄球菌对克林霉素诱导耐药表型及基因型检测研究

目的了解葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,测定红霉素诱导克林霉素耐药状况和基因型特征。方法收集我院2005～2007年分离到的350株葡萄球菌采用K-B法做药敏试验,对红霉素耐药、克林霉素敏感和中介葡萄球菌临床分离株做D试验检测,PCR检测细菌的ermA、ermB、ermC、msrA、msrB和linA/linA’基因。结果350株葡萄球菌中克林霉素诱导耐药64株,D试验阳性为18.3%。基因型分别是ermA9株、ermB2株、ermC48株、msrA7株、msrB11株、全部阴性的5株、linA/linA’64株、ermC＋msrB7株。结论红霉素核糖体甲基化酶基因ermC是诱导耐药的主要基因,检测葡萄球菌中红霉素对克林霉素的诱导耐药性可帮助临床医生正确选用大环内酯类、林可酰胺类和链阳霉素B类抗生素。     

金黄色葡萄球菌"D-试验"阳性率调查及其临床意义

目的通过对金黄色葡萄球菌D-试验的阳性率的调查,有助于临床正确使用抗生素.方法按美国临床实验室标准化委员会(NCCLs)规定测定并判读金黄色葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,并以D-试验测定红霉素对克林霉素的诱导耐药表型.结果共测试¨9株金黄色葡萄球菌,D-试验阳性率为12.6%.其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌D-试验阳性率为14.8%,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌为12.0%.结论开展D-试验检测葡萄球菌中红霉素对克林霉素的诱导耐药性,以帮助医生正确选用大环内酯类及林可霉素类抗生素.     

肺炎链球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素的耐药监测及耐药机制研究

目的研究肺炎链球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素类抗菌素的耐药机制。方法K-B纸片法测定肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、泰利霉素和喹奴普汀/达福普汀的耐药性。对全部红霉素耐药菌株和部分红霉素敏感菌株用聚合酶链反应(PCR)检测ermB和mefA基因。结果97株肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、泰利霉素和喹奴普汀/达福普汀的耐药率分别为60.8%、58.8%、0和0。59株红霉素耐药菌株均检出ermB和/或mefA基因,其中34株(57.6%)ermB阳性,18株(30.5%)ermB和mefA同时阳性,7株(11.8%)mefA阳性。5株敏感菌株ermB和mefA基因均为阴性。结论本研究显示肺炎链球菌对泰利霉素和喹奴普汀/达福普汀高度敏感,而对红霉素和林可霉素则表现出较高的耐药性。肺炎链球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素的耐药机制以ermB基因介导的靶位改变为主。     

葡萄球菌耐药性监测

目的 监测本院葡萄球菌属临床分离株的耐药性,为临床抗感染治疗提供依据.方法 用K-B法测定葡萄球菌属对8种常用抗生素的敏感性,进行D试验测定大环内酯、林可和B型链阳霉素耐药表型.结果 在85株葡萄球菌属中,耐甲氧西林金葡菌和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌分别占12.2%和77.3%.未发现万古霉素耐药菌株,耐甲氧西林葡萄球菌对抗生素的耐药率显著高于甲氧西林敏感葡萄球菌.对红霉素耐药但对克林霉素敏感的葡萄球菌中,4株为诱导型克林霉素耐药.结论 应加强对葡萄球菌的耐药性监测,指导临床合理使用抗生素.     

葡萄球菌中诱导型克林霉素耐药株的检测及分析

目的用克林霉素诱导耐药实验（D实验）调查湖南沅陵县南方医院葡萄球菌中诱导型克林霉素耐药菌株的发生率,以期为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法应用TDR半自动微生物分析系统及VITEK一2全自动微生物分析系统对临床分离葡萄球菌进行鉴定及药敏分析,按照美国临床实验室标准化委员会（CLSL／NCCLS2011版）标准进行D试验。结果临床收集的104株对红霉素耐药而对克林霉素敏感葡萄球菌标本中有55株（52．88％）产生诱导型耐药,其中在MRSA中为77．78％,高于MssA（61．90％）和CONS（22．85％）。结论临床标本中分离出的对红霉素耐药而对克林霉素敏感的葡萄球菌在进行常规药敏实验的同时,应开展D实验检测葡萄球菌对克林霉素的耐药性,可帮助临床医生正确的选用大环内酯类、林克酰胺类、链阳霉素B类抗生素。     

一株金黄色葡萄球菌红霉素耐药基因的检测

金黄色葡萄球菌是医院感染重要病原菌。2002-2003年度全国14家三级甲等医院的革兰阳性球菌耐药状况监测发现，金黄色葡萄球菌临床分离率为24．3％，对大环内酯类（红霉素）耐药率为70．5％。大环内酯、林可酰胺和链阳霉素B类（MLSB）抗菌药物是经常用于治疗葡萄球菌感染的药物，但随着耐药菌株的增加使得该类药物的使用受到限制。葡萄球菌对大环内酯耐药的机制主要有靶位修饰和药物外排两种。我国对葡萄球菌的介导靶位修饰的红霉素甲基化酶（erm）基因检出报道较多，但未见有关检出调节外排机制的基因报道。     

葡萄球菌对大环内酯类药物耐药检测分析

目的了解医院各病区临床标本分离出的葡萄球菌对大环内酯类药物耐药性。方法采用K—B琼脂扩散法检测葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性，D-试验检测克林霉素诱导型耐药。结果34株耐红霉素的金黄色葡萄球菌，对克林霉素耐药者24株，敏感者10株，克林霉素诱导耐药者6株。261株耐红霉素的凝固酶阴性的葡萄球菌对克林霉素耐药者182株，敏感者79株，其中克林霉素诱导型耐药者46株。结论对大环内酯类药物耐药的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌分离株对克林霉素敏感的菌株出现诱导型耐药，对于这些菌株应加做D-试验，以免盲目将药敏结果报告给临床，造成临床治疗失败。