A Herb-Herb Interaction between Aconitum and Trichosanthes Based on Cytochrome P450 in Rat Livers

The study was designed to investigate the influence of Aconitum used combined with Trichosanthes on the enzyme activity quantitated by high performance liquid chromatographic （HPLC） assay （CYP1A2 and CYP2E1） and UV chromatography （CYP3A1/2）, protein expression valued by Western blot, and mRNA level valued by semi-quantitative reverse transcfiptase-polymerase chain reaction （RT-PCR） of cytochrome P450 isoenzymes in rat liver. Pretreatment with Aconiturn in combination with Trichosanthes resulCed in a significant decrease in enzymes activities of CYP3A1/2, CYPIA2, and CYP2E1 with an inhibitory rate, 57.4%, 35.2%, and 35.2%, respectively, and a markedly inhibition of YP1A2, CYP2E1, and CYP3AI protein expression were markedly inhibited pretreated with Aconitum in combination with Trichosanthes. With the help of previous research consequence, a herb-herb interaction between Aconiturn and Trichosanthes can be illustrnted.     

携带DNMT1-shRNA真核表达载体的构建及其对DNMT1表达的影响

目的构建携带针对DNA甲基转移酶1（DNMT1）mRNA的shRNA真核表达载体,检测重组质粒对DNMT1的沉默效应。方法以DNMT1mRNA序列为靶基因设计shRNA和阴性对照序列（HK）,应用基因重组技术将其克隆到真核表达载体7P-Gensil-1中,构建真核表达载体P-DNMT1-shRNA、P-HK。将重组质粒转染到大肠杆菌DH5口中,经筛选后对提取质粒测序鉴定。用构建的重组质粒转染T24细胞,进行RT-PCR和western blot检测,观察DNMT1mRNA和蛋白的变化。结果重组质粒经Sac Ⅰ酶切得到大小两个基因片段,与设计相同,经测序显示插入完全正确;DNMT1mRNA在24h、48h和72h的抑制率为28．44％、52．48％、70．91％;其蛋白在24h、48h和72h的抑制率为24．27％、57．79％、69．74％。结论成功构建了P-DNMT1-shRNA真核表达载体并能有效沉默T24细胞中DNMT1H水NA和蛋白的表达。     

人参多糖和多抗甲素对动物红细胞变形能力的影响

研究了人参多糖、多抗甲素经体内、体外给药对红细胞变形能力的影响。实验表明，人参多糖和多抗甲素均可改善红细胞的变形能力，使其滤过速度增快，与生理盐水组比较均有显著性差异（分别为Ｐ＜０．０１．Ｐ＜０．０５），提示应用人参多糖和多抗甲素对降低血液粘度，抑制血栓形成都有良好的效果。     

红参水提物对哮喘气道炎症小鼠的治疗作用及其机制研究

目的 探讨红参水提物对哮喘气道炎症小鼠模型的治疗作用及其机制。方法 选取BABL/c小鼠75只,采用随机数字表法分为正常组（等量生理盐水）、模型对照组（等量生理盐水）、低剂量组（红参水提物100mg/kg）、高剂量组（红参水提物200mg/kg）、阳性对照组（地塞米松0.5mg/kg）各15只,除正常组外均成功制作哮喘气道炎症小鼠模型,给予对应的处理措施,对比各组小鼠末次激发后24h的肺泡灌洗液（BALF）中的各种炎性细胞因子、血清免疫球蛋白E （IgE）、肺组织中羟脯氨酸含量,并采用HE染色观察各组大鼠肺组织病理变化。结果 模型对照组BALF中白细胞介素-4（IL-4）、IL-5、IL-14、转化生长因子β1（TGF-β1）、血管内皮生长因子（VEGF）、血清免疫球蛋白E （IgE）、肺组织羟脯氨酸均高于正常组（P<0.01）;低剂量组、高剂量组及阳性对照组的BALF中IL-4、IL-5、IL-14、TGF-β1、VEGF水平、血清IgE、肺组织羟脯氨酸均低于模型对照组（P<0.01）;高剂量组BALF中IL-4、IL-5、IL-14、TGF-β1、VEGF水平、血清IgE、肺组织羟脯氨酸均低于低剂量组（P<0.05）。结论 红参水提物主要通过减轻哮喘小鼠模型的气道炎性反应程度达到治疗作用。     

NO与肝脏缺血再灌注损伤预处理保护效应

目的：研究缺血预处理对SD大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护机制中NO的作用;方法：建立大鼠肝脏缺血再灌注模型并进行缺血预处理,实验分组如下：假手术组（Sham-operation,S组）;缺血再灌注组（Ischemic Reperfusion,I/R组）;缺血预处理组（Ischemic Preconditioning,PC组）;预处理加左旋硝基精氨酸组（Preconditioning L-NNA,PC L组）,各组再灌注后检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）及丙二醛（MDA）含量,肝组织石蜡切片HE染色及电镜观察;结果：PC组ALT及MDA含量明显低于I／R组（P＜0．01）,肝组织损伤程度明显减轻;PC＋L组在0－3h阶段ALT和MDA含量与I／R组无显著区别（P＞0．05）,而在6－48h阶段则显著低于I／R组（P＜0．01）但仍高于PC组（P＜0．05）。结论：缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤具有明显保护作用,0－3h为早期保护效应,可能为NO所触发或介导。     

人参根及茎叶皂苷对群养及隔离孤独饲育小鼠神经精神药理作用的研究

人参根及茎叶皂苷 ５０～２００ ｍｇ／ｋｇ能使群养小鼠的自发运动量明显增加,８周隔离饲育小鼠比群养小鼠自发运动量明显增加,人参根皂苷能使其剂量依赖性降低,而人参茎叶皂苷影响不明显;对戊巴比妥钠所致睡眠试验中,隔离孤独饲育小鼠比群养小鼠睡眠时间明显缩短（ｔ＝４．３５６,Ｐ＜０．００１）。人参根皂苷 ５０～２００ ｍｇ／ｋｇ使孤独饲育小鼠的睡眠时间随剂量增加而延长,２００ ｍｇ／ｋｇ组与对照组比较,ｔ＝３． ６６５,Ｐ＜０．０１。并能使 ８周隔离饲育的小鼠 ２０ ｍｉｎ内连续攻击时间有意义地下降（ｔ＝４．５４０,Ｐ＝０．００１）,但人参茎叶皂苷效果不明显。证明人参根及茎叶皂苷具有中枢兴奋作用,同时人参根皂苷还具有中枢镇静作用。     

人参和枳椇子对小鼠乙醇急性中毒保护作用及其机制研究

目的研究人参和枳椇子对小鼠乙醇中毒的保护作用,观察并比较其药效和主要作用靶点。方法人参组和枳椇子组小鼠分别以人参8 g生药／kg和枳椇子5 g生药／kg灌胃给药3 d,末次给药后30 min空白对照组给等容量双蒸水外,其余各组均以7．11 g／kg乙醇灌胃。记录小鼠翻正反射消失时间,120 min后取血测乙醇浓度,取肝、肠检测乙醇脱氢酶(ADH)和细胞色素P4502E1(CYP2E1)活性。结果与乙醇对照组相比,人参明显延长小鼠翻正反射消失时间,降低血乙醇浓度,提高肠ADH活性,降低肠和肝CYP2E1 活性;枳椇子明显延长小鼠翻正反射消失时间,降低血乙醇浓度,提高肝ADH活性。结论人参及枳椇子对小鼠急性中毒均有保护作用,人参主要抑制乙醇经CYP2E1代谢,促进乙醇经ADH代谢,而枳椇子则主要促进乙醇经ADH代谢。     

人大肠癌PTEN基因mRNA和蛋白表达的相关性研究

目的:探讨PTEN基因的表达在人大肠癌发生发展及浸润转移过程中的作用。方法:应用RT-PCR和Western blot的方法,对75例人大肠癌及癌旁组织中PTEN mRNA和蛋白的表达进行分析。结果:PTEN mRNA在大肠癌癌旁肠粘膜,早期癌及进展期癌中的阳性表达率分别为93.3%,75.0%和47.6%,PTEN蛋白在上述组织中的表达率则分别为96.0%,66.7%和49.2%。PTENmRNA和蛋白的表达均与大肠癌癌细胞的分化程度,肿瘤的Dukes分期及有无淋巴结转移密切相关(P<0.05)。PTEN mRNA在进展期癌中的表达明显低于早期癌(P<0.05)。PTENmRNA与PTEN蛋白的表达呈显著正相关(r=0.99,P<0.01)。结论:PTEN mRNA与蛋白表达的减少与大肠癌的发生和进展密切相关。     

The inhibitory effects of siRNA expression vector on CXCR4 expression in prostate carcinoma cell lines

INTRODUCTION Ithasbeendemonstratedthatchemokinesandtheirreceptorsarecloselyrelatedtomalignantbehavior oftumorcells.Especially,thechemotaxiscausedby CXCR4anditsligandstromalcellderivedfactor1(SDF1)inthetumorcells,suchasleukemiacells,lungcarcinomacellsandovarycarcinomacells,isthe mostinteresting[13].Ithasalsobeenindicatedthat CXCR4isexpressedinmanykindsofnasopharyngeal carcinomacellsandprostatecarcinomacells[46].CXCR4andSDF1canalsobeexpressedsimultaneouslyinsome kindsoftumorcells.The…     

Plk1在肝癌组织中表达及意义

目的:探讨Plk1在原发性肝细胞性肝癌中的表达及其意义。方法:用半定量RT-PCR、Western blot的方法检测21例原发性肝细胞性肝癌中Plk1的表达情况,并分析其与肝癌临床病理因素的关系。同时取肝硬化及正常肝组织各7例做对照。结果:肝癌组织中Plk1mRNA表达比值(Plk1/β-actin)为0.572±0.144,明显高于肝硬化组织中的0.250±0.057和正常肝组织的0.218±0.073(P<0.01)。Plk1 mRNA表达水平在肿瘤直径大于5 cm组中为0.641±0.110,而在肿瘤直径小于5 cm组中为0.458±0.120,两组之间比较有统计学差异(P<0.01)。其在有门静脉癌栓患者中的表达为0.652±0.107,明显高于无门静脉癌栓者中的表达0.522±0.144(P<0.05)。而与有无包膜,肿瘤病理分级和AFP阳性与否无明显相关。肝癌组织Plk1蛋白表达明显高于肝硬化及正常肝组织中的Plk1蛋白表达量。结论:原发性肝癌组织中Plk1mRNA及蛋白表达均明显增加;Plk1的表达高低与原发性肝癌的肿瘤直径大小及脉管侵犯有明显相关,提示其在肝癌生长及侵袭中发挥重要作用,为进一步研究肝癌的生长侵袭机制提供了思路。     

基于细胞药代动力学的中西药相互作用研究新思路与新方法

中西药联用已成为国内外临床治疗的普遍现象,但相关评判尚缺乏完备的科学数据支撑.传统的药物代谢动力学研究局限于血浆药物浓度,无法阐明药物在靶部位的代谢处置过程,由此造成血浆药动-药效不相关的局限性.近年来,越来越多的研究着眼于定量分析药物经血液进入靶组织/靶细胞/亚细胞器的药代动力学过程,将药代动力学研究从"宏观"的血浆...     

基于CYP450酶的复方苦参注射液代谢及其与紫杉醇相互作用的研究

目的 基于细胞色素P450酶（CYP450s）的代谢,考察复方苦参注射液体外与紫杉醇的相互作用,为临床应用提供参考。方法 将不同体积百分比浓度的复方苦参注射液与CYP2C8同工酶的探针底物紫杉醇及人肝微粒体共同孵育,采用LC-MS/MS检测特异性探针底物代谢物6α-羟基紫杉醇的生成量,计算半数抑制浓度（IC₅₀)。结果 复方苦参注射液在0.600 g/mL时对CYP2C8的抑制率为100.0%,其IC₅₀值为0.052 8 g/mL。结论 复方苦参注射液在体外与紫杉醇注射液之间存在基于CYP2C8的代谢性相互作用,为临床应用两药抗肿瘤提供了参考。     

加味补中益气汤治疗大鼠肺孢子虫肺炎的疗效观察

目的探讨加味补中益气汤治疗大鼠肺孢子虫肺炎(PCP)的疗效。方法按国内公认的PCP造模方法,建立大鼠PCP动物模型。设中药治疗组和预防组,同时建立西药对照组、PCP模型对照组及正常对照组。通过观察各组大鼠存活率、体重、肺内肺孢子虫包囊的数量和肺组织病理学变化考核药物疗效。结果中药组大鼠存活率高于PCP模型组,但低于正常组;中药治疗组和预防组大鼠平均体重高于PCP模型组,包囊数低于PCP模型对照组;中药治疗组和预防组大鼠肺组织炎症反应明显轻于PCP模型对照组。结论加味补中益气汤对大鼠肺孢子虫肺炎,有一定的疗效。     

复方参芪颗粒治疗儿童呼吸道反复感染疗效分析

目的:观察复方参芪颗粒对儿童呼吸道反复感染治疗效果。方法:81例呼吸道反复感染患儿随机分治疗组和对照组,治疗组应用复方参芪颗粒,对照组应用玉屏风颗粒,比较两组疗效。结果:治疗组患儿41例中显效30例,有效8例,总有效率为92.7%;对照组患儿40例,显效22例,有效7例,总有效率为72.5%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:复方参芪颗粒治疗儿童呼吸道反复感染疗效优于玉屏风颗粒。     

莫西沙星治疗成人支原体肺炎检测bFGF、FN的临床意义

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、纤维连接蛋白（FN）在莫西沙星治疗支原体肺炎患者中的临床意义。方法通过免疫吸附试验（ELISA）及Western blot方法检测我院2007年1月—2010年1月期间住院的108例成人支原体肺炎（实验组）bFGF及FN水平,以同期住院的102例细菌性肺炎患者为对照组。实验组在莫西沙星治疗后3个月再次检测bFGF及FN水平。结果实验组bFGF及FN水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。实验组在莫西沙星治疗后各指标明显低于治疗前,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 肺炎支原体感染可使肺组织bFGF水平增加,而bFGF可进一步诱导FN表达增加。我们发现莫西沙星治疗可阻断该过程,在肺炎支原体感染所致肺间质纤维化过程中有重要临床意义。     

复方红参与阿斯匹林对冠状动脉硬化性心脏病患者血液流变学、血脂影响的比较

观察复方红参（红参、当归、川芎、赤芍）对３６例冠状动脉硬化性心脏病患者的疗效．结果表中复方红参改善血小板和血脂的异常，降低红细胞比容、血浆粘度、红细胞聚集性和刚性、血沉，减低纤维蛋白原含量，抑制血小板聚集，降低血浆甘油三酯含量，增加高密度脂蛋白含量，提高血浆６ Ｋｅｔｏ 前列腺素Ｆ１α含量．复方红参对血液流变学和血脂异常的疗效显著优于单用阿斯匹林的疗效，而与复方红参加阿斯匹林的相仿     

PI3K-Akt信号通路与大鼠肝脏缺血预处理保护作用关系的研究

目的 研究PI3K-Akt信号转导系统在大鼠肝缺血再灌注(IR)及缺血预处理(IPC)后的激活规律,探讨其与IPC保护作用的关系.方法 将68只SD雄性大鼠随机分成空白对照组(Sham)、缺血再灌注组(IR)、缺血预处理组(IPC)、阻断剂组(LY)、溶剂对照组(DMSO)5组,于复灌0、1/2、1、2、4h各不同时间点取材,应用免疫组化和免疫印迹法测定肝组织中Akt1、p-Akt1等信号蛋白的表达;HE染色观察肝组织显微结构;同时测定血清肝功酶水平.结果 IR组大鼠在各复灌时间点上都显示明显肝细胞损伤,并随复灌时间延长加重;肝细胞质内有p-Akt1(Thr-308)表达.IPC组大鼠血清肝功酶指标在复灌0、2、4h较IR组明显降低(P＜0.01),p-Akt1(Thr-308)表达更强、时程延长;同时,IPC使Akt1下游底物Bad(Ser-136)磷酸化水平增强、caspase-3的活化减少.应用PI3K特异性阻断剂LY294002阻断PI3K-Akt信号系统活化的同时,也抑制了IPC的保护作用.结论 IPC通过对PI3K-Akt信号转导通路的调控发挥了对肝脏的保护作用;该信号通路的激活水平上调,可能是肝IPC保护作用的机制之一.     

免疫印迹法检测高温作业工人血清中热应激蛋白70ku抗原和抗体方法的研究

热应激蛋白70ku（heatstressprotein，HSP70）是主要的热应激蛋白。用已纯化的HSP70抗原和已制备好的HSP70抗体，采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳的高分辨率和抗原抗体反应的特异性相结合的免疫印迹法（westernblot）检测17名高温作业工人和17名对照组人群血清中HSP70抗原和抗体。结果，与对照组相比，高温作业工人血清中HSP70含量增加，HSP70抗体阳性率为23.5％。结果表明westernblot法用于检测工人血清中HSP70抗原和抗体是可行的。     

淫羊藿、人参耐缺氧、耐疲劳及抗氧化作用的实验研究

目的 探讨淫羊藿、人参耐缺氧、耐疲劳及抗氧化作用。方法 采用单独和联合给药的方法对老龄小鼠进行抗缺氧实验,耐疲劳实验,按硫代巴比妥法测定血浆和组织MDA,按EistnerFF法测定红细胞SOD的活性。结果与结论 人参能提高小鼠耐缺氧的能力,淫羊藿可加强其作用;两者都能提高小鼠耐疲劳的能力。淫羊藿和人参均有抗氧化作用,可使血浆和组织中的MDA降低,红细胞的SOD活性增加。两药配伍使用有协同作用。