P75在周围神经损伤后的表达

目的：确定Ｐ７５（神经生长因子低亲合力受体）在坐骨神经操作后周围神经系统的表达分布,方法：切断大鼠右侧坐骨神经再吻合,术后不同的时段上,切取与之相连的Ｌ４￣Ｌ６脊髓节段和两侧不了、左侧坐骨神经、吻合的右侧坐骨神经段作冰冻切片,再生ＬＳＡＢ免疫组化染色光镜下观察、拍照、结果：Ｐ７５在右侧脊髓前角运动神经元胞体、脊神经节感觉神经元胞体和右侧坐骨神经呈免疫组化阳性反应,而左侧均有阴反应。结论：Ｐ７５在坐     

P75NTR的研究进展

P75NTR作为神经营养因子的受体之一,在神经系统的发育过程中发挥着至关重要的生物学作用。随着s-p75NTR, proNGF, proBDNF和sortilin等的发现,P75NTR在凋亡信号转导通路中的重要作用成为研究的热点。     

脑出血血肿周围组织中P75NTR和proNGF的表达及其与细胞凋亡的关系

目的:通过对人脑出血后血肿周围不同区域组织中的P75NTR及proNGF表达的检测,探讨其在脑出血后血肿周围组织细胞凋亡中的作用。方法:本实验采集脑出血血肿清除术患者的脑组织标本,分别运用DNA断裂原位末端标记(TUNEL)法检测血肿周围及远隔部位组织中凋亡细胞、免疫组化技术及WesternBlot检测P75NTR及proNGF的表达。结果:相对于远隔部位组织,脑出血后血肿周围组织中的细胞凋亡率与P75NTR的表达水平明显增加(P0.01),而proNGF的表达水平并没有显著变化(P0.05),P75NTR的阳性细胞率与TUNEL的阳性细胞率呈正相关(R=0.628,P=0.00)。结论:脑出血后,血肿周围组织与远隔的组织相比,细胞凋亡数量明显增多,与此相对应,P75NTR的表达显著增高。至于proNGF的表达量并没有很大变化,则是因为多大比例的proNGF被裂解为mNGF可能决定了是以proNGF发挥凋亡作用还是以mNGF形式发挥促进存活作用,或是因为细胞膜表面P75NTR的表达增加,使更多的proNGF与P75NTR相结合,大量结合的proNGF由于内化的因素而不易被检测。     

尼莫地平对癫痫太鼠海马P75NTR和P513蛋白表达的影响

目的：探讨尼莫地平（NM）对戊四氮（PTZ）点燃癫痫持续状态（SE）大鼠海马P75NTR和P53蛋白表达的影响,以期为临床应用尼莫地平治疗癫痫提供充分的理论依据。方法：动物分为正常对照组,PTZ组和NM组,模型诱导成功后,观察大鼠行为学改变,并取脑常规HE染色,并用免疫组化方法分别检测各组大鼠海马神经元凋亡相关基因P75NTR和P53的表达。结果：PTZ组大鼠有典型的SE发作,其海马P75NTR和P53表达较对照组明显增加（P〈0．05）,与PTZ组比较,NM组大鼠海马P75NTR和P53表达均减少（P〈0．05）。结论：NM有神经保护作用,其机理可能与抑制癫痫大鼠海马凋亡相关基因的发生有关。     

SPARC在db/db小鼠肾脏组织中高表达

目的 检测db/db鼠肾脏组织中的富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)的表达情况.方法 RT-PCR、Western blot及免疫荧光方法检测db/db鼠肾脏组织中的SPARC mRNA及蛋白的表达.结果 SPARC在db/db鼠肾脏组织中呈现高表达.结论 db/db鼠肾脏组织中的SPARC呈现高表达(P＜0.05),可能与糖尿病肾病的发生与发展有关.     

增殖细胞核抗原在小鼠生后肾脏发育中的表达

目的：观察小鼠出生后肾脏发育过程中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达特征,探讨出生后小鼠肾脏发育过程中细胞增殖的规律。方法：应用免疫组织化学技术检测小鼠出生后1、3、7、14、21、28和70d肾脏PCNA的表达。结果：小鼠出生后1～70d,皮质中的生肾区、肾小体、肾小管、髓放线以及髓质中的肾小管和集合管PCNA阳性细胞的表达具有一定的规律,早期PCNA阳性表达丰富,随着肾脏发育逐渐成熟而表达减弱直至消失。在70d成年小鼠肾脏中,没有检测到PCNA阳性细胞。结论：出生后小鼠肾脏皮质中的生肾区、肾小体、肾小管、髓放线以及髓质中小管的细胞增殖规律是由高逐渐降低的,直至成年完全停止。     

Nestin及P53在早期胚胎组织中的表达

Nestin(巢蛋白)为神经干细胞的表面标志,在其他组织的前体细胞中也有表达。Nestin作为一种细胞骨架蛋白,在细胞分化结束时表达下降。P53基因具有特异的转录激活作用和肿瘤抑制作用,与生长发育有关。在胚胎发育尤其是早期胚胎发育过程中,Nestin及P53的作用还未见相关的报道。本研究采用免疫组织化学的方法对胚胎早期肝、肾上腺,椎间盘器官组织中Nestin及P53的表达情况进行了研究。     

锌转运体-1在小鼠肾脏的表达

目的研究锌转运体-1(zinc transporter1,ZnT-1)在小鼠肾脏的定位分布。方法应用免疫组织化学技术和免疫印迹技术检测小鼠肾脏中ZnT-1的分布。结果 ZnT-1在肾脏内有丰富表达,其主要分布于远曲小管上皮细胞的近腔侧和基底侧的细胞膜上,而在肾小体、肾小管的其它部分以及髓质中的分布较少。结论小鼠肾脏内含有丰富的ZnT-1,ZnT-1可能参与了锌离子在肾脏的排泄和重吸收过程。     

免疫磁珠法分选P75NTR阳性的人脑胶质瘤细胞

目的:建立免疫磁珠法分选P75NTR阳性的人脑胶质瘤细胞.方法:采用P75NIR单克隆抗体(mAb)以及兔抗鼠IgG1标记的微珠,通过MACS分选器MiniMACS以及MS分选柱分离P75NTR阳性和阴性的人脑胶质瘤细胞,并采用酶免疫染色法鉴定分离的细胞.结果:通过免疫磁珠分选法,成功将p75NTR阳性和阴性的人脑胶质瘤细胞分离(纯度达95％以上),且不影响细胞活性(细胞培养成活).结论:P75NTR阳性细胞的分选和纯化,为下一步进行体内外研究P75NTR对脑胶质瘤的发生、发展及侵袭等的作用提供条件.     

视神经切断联合高眼压增高大鼠视网膜内P75NTR和Sortilin的蛋白表达水平

目的 观察视神经切断联合高眼压状态下,视网膜内p75NTR和Sortilin蛋白表达水平的变化.方法 60只健康雄性Wistar大鼠,随机分为对照(control,n=6)、假手术(sham,n=6)、单纯视神经切断(NT,n=24)和视神经切断联合高眼压(NP,n=24)4组.NT和NP模型组,进一步分为术后第1、3、7和14天组(均n=6).用Western blot法,检测各组大鼠视网膜内P75NTR和Sortilin蛋白表达.结果 NP组大鼠视网膜内,P75NTR及Sortilin蛋白表达量在术后第3、7和14天明显高于对照组、假手术组及单纯视神经切断组(P<0.05).结论 高眼压可使大鼠视网膜内RGC本身合成的Sortilin和P75NTR蛋白量增高,60/50 ku的P75NTR及90 ku成熟Sortilin蛋白可能参与了高眼压所致大鼠视网膜神经节细胞的损伤.     

缺糖损伤的PC12细胞中grp75基因的表达

目的探讨PC12细胞缺糖损伤时应激基因葡萄糖调节蛋白(grp75)的表达变化.方法无葡萄糖培养基培养PC12细胞建立细胞缺糖损伤细胞模型,用RT-PCR、Western blot 和细胞免疫化学法分析缺糖损伤时grp75的表达情况.结果 RT-PCR结果显示细胞缺糖损伤3h起grp75基因转录水平已显著增高,并在缺糖后3～24h间持续上升;蛋白印迹法和细胞免疫化学法证实grp75在细胞缺糖过程中蛋白水平的表达明显高于对照组,且随着缺糖时间推延而进一步升高.结论缺糖损伤时,细胞中的应激基因grp75特异性上调表达.     

P162对食管癌细胞株Eca109的放射增敏作用及其对p75NTR表达的影响

 目的：研究靶向Ras-GTP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白(G3BP)的新药P162对人食管癌细胞株Eca109的放射增敏作用及其对p75神经营养因子受体(p75NTR)表达的影响。方法：CCK-8法检测P162对食管癌细胞株Eca109增殖抑制的影响;集落形成实验检测P162对Eca109细胞的放射增敏效应,单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算放射增敏比;倒置显微镜观察细胞形态学改变;流式细胞术检测p75NTR的表达。结果：P162对食管癌细胞株Eca109有增殖抑制作用,且呈时间和剂量依赖性,2.5、5.0、10 μmol/L P162对Eca109细胞的放射增敏比分别为1.54、2.35和2.33。随着照射剂量的增加,食管癌细胞中p75NTR的表达增加,经5 μmol/L P162处理的实验组中p75NTR的表达明显低于未经处理的对照组。结论：P162对Eca109细胞有放射增敏作用,并且能抑制食管癌干细胞p75NTR的表达。P162的增敏作用可能与抑制食管癌干细胞有关。     

神经生长因子低亲合力受体在肝纤维化患者和大鼠肝星状细胞的表达

目的探讨神经生长因子低亲合力受体（P75）在肝纤维化患者和大鼠肝星状细胞（HSCs）的分布及作用机制。方法对四氯化碳（CCL）法制备的肝纤维化大鼠肝组织及肝穿刺获取的肝纤维化患者肝组织,常规石蜡包埋;大鼠离体培养的活化HSCs离心涂片,行免疫组织化学染色,确定P75的表达分布。结果P75在大鼠离体培养的活化HSCs膜,免疫组织化学染色呈阳性,在肝纤维化患者HSCs膜和肝细胞膜,免疫组织化学染色呈阳性,在肝纤维化大鼠HSCs膜和肝细胞膜,免疫组织化学染色呈阳性,在健康人和正常对照大鼠HSCs膜,免疫组织化学染色呈阴性,表明人和大鼠活化的HSCs膜表达P75。结论P75为肝纤维化的治疗提供了新的靶点。     

P53在急性肾损伤小鼠肾脏的表达及其与细胞凋亡的关系

 目的：探讨缺血再灌注致急性肾损伤（AKI）小鼠肾脏不同部位P53的表达及其与细胞凋亡的关系。方法：采用随机对照动物实验方法,将18只小鼠随机分为假手术组、AKI组及P53抑制剂pifithrin-alpha（PFT-α）组,每组6只。采用双侧肾蒂夹闭45 min后松开动脉夹的方法建立小鼠AKI模型,PFT-α组于建模前5 min腹腔注射PFT-α  2.2 mg/kg,并于建模后48 h采血检测尿素氮和肌酐,取肾脏组织行HE染色观察肾组织病理学变化,采用Western blotting法测定P53蛋白含量,免疫荧光法确定肾脏不同部位P53的表达,TUNEL法检测肾脏细胞凋亡,免疫组化方法检测肿瘤坏死因子受体（TNFR）、caspase-3及Bcl-2蛋白水平 。结果：（1）PFT-α组和AKI组小鼠血尿素氮和肌酐水平均明显高于假手术组,而PFT-α组与AKI组比较血尿素氮和肌酐水平明显降低（P<0.05）;肾组织HE染色显示假手术组肾组织细胞形态完整,排列整齐,无明显病理改变,AKI组肾小管上皮细胞刷状缘脱落、空泡及滴状变性,皮髓质间有明显淤血带;PFT-α组肾小管上皮部分刷状缘脱落消失,空泡及滴状变性减轻,皮髓质间无明显淤血带;（2）假手术组小鼠肾脏有少量P53表达且未检测到凋亡细胞,而AKI组小鼠缺血再灌注48 h后P53蛋白水平及凋亡细胞明显增加（P<0.05）,并且均主要定位在肾皮质,PFT-α组较AKI组小鼠肾脏P53蛋白含量及凋亡细胞指数均减少（P<0.05）;（3）与假手术组相比,AKI组小鼠肾脏TNFR蛋白及caspase-3蛋白水平升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白水平下降（P<0.05）,PFT-α组较AKI组小鼠肾脏TNFR蛋白及caspase-3蛋白水平降低（P<0.05）,Bcl-2蛋白水平升高（P<0.05）。结论：急性肾损伤时,肾组织P53表达增加,主要定位于皮质,通过调控凋亡蛋白Bcl-2和TNFR的水平,促进caspase-3的释放,从而介导细胞凋亡。     

Role of class II P fimbriae and cytokine response in the pathogenesis of Escherichia coli kidney infection in diabetic mice

Background

The role of class II P fimbriae (P fimbriae II) in diabetic kidney infections is uncertain, although some genetic and epidemiological studies suggest a lower prevalence of P fimbriae II genes in Escherichia coli strains isolated from diabetic patients with complicated kidney infections.