反相高效液相色谱法同时测定血浆中奥美拉唑和兰索拉唑

目的:建立用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定血浆中奥美拉唑和兰索拉唑的方法.方法:血浆中加入奥美拉唑、兰索拉唑和内标泮托拉唑,以乙酸乙酯提取,进行RP-HPLC检测.色谱柱为Shimpark ODS 6 mm×150 mm,10 μm,流动相为甲醇 - 水(含1%三乙胺,用高氯酸调pH至7.0;60∶ 40,V/V),流速为1 ml/min;岛津SPD-6AV可见紫外检测器,检测波长为302 nm,AUFS为0.01.结果:奥美拉唑和兰索拉唑与内标泮托拉唑达基线分离,血浆中奥美拉唑在10～1 000 μg/L浓度范围内线性关系良好,r=0.999 9,日内、日间精密度RSD均小于10%,最低检测浓度为5 μg/L.血浆中兰索拉唑在30～1 000 μg/L浓度范围内线性关系良好,r=0.999 9,日内、日间精密度RSD均小于10%,最低检测浓度为20 μg/L.结论:该法简单、准确、灵敏,适用于对奥美拉唑及兰索拉唑血药浓度的测定.     

反相-高效液相色谱法检测人血浆盐酸二甲双胍浓度

目的:建立测定盐酸二甲双胍血药浓度的反相高效液相色谱法(RP-HPLC).方法:血浆经乙腈、高氯酸联合沉淀,以ZORBAX Eclipse XDB-C8(4.6 nm×150mm,5 μm)为色谱柱;以乙腈:水:3 mmol/L十二烷基硫酸钠(33:17:50,V/V/V)为流动相,流速为1.0 ml/min;检测波长为234nm.结果:血浆盐酸二甲双胍浓度在0.05～5.0 mg/L范围内线性关系良好(r=0.9999);最低检测限为0.05mg/L:平均相对回收率为(99.67±2.85)%(n=20),日内、日间RSD分别为(2.90±1.17)%和(2.64±1.15)%.结论:该方法简便、快速、准确可靠,适用于人血浆盐酸二甲双胍浓度的测定和药代动力学研究.     

固相萃取-反相HPLC法同时快速测定血浆中4种氟喹诺酮类药物

目的 建立同时快速测定人血浆中4种氟喹诺酮类药物(氟罗沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星)的方法 .方法 采用C<,18>固相萃取小柱萃取血浆中的4种氟喹诺酮类药物.色谱柱为ODS-BP柱(5 μ,250 mm×4.6 mm),流动相为含1.31 g/L L-异亮氨酸和0.80 g/L CuSO<,4>的水溶液-甲醇(80:20,V:V),激发波长为280 nm,发射波长为504 nm,流速为0.8 ml/min. 结果 4种氟喹诺酮类药物可良好分离,分离度达到1.5以上.4种药物的线性范围均是0.1-20 μg/ml,r均大于0.997 5,氟罗沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星的最小检测限依次分别为50 ng/ml、1 ng/ml、100 ng/ml、100ng/ml,萃取回收率均高于87.97%,方法 回收率均在95.40%与101.82%之间,日内RSD均小于3.7%,日间RSD均小于1.5%. 结论 固相萃取-反相HPLC法简便,灵敏度高,准确度高,精密度好,可用于氟喹诺酮类药物的快速测定.     

新型二维高效液相色谱测定人血清伏立康唑浓度方法的建立与应用

目的建立全自动二维高效色谱法(2D-HPLC)测定血清中伏立康唑的浓度并应用于临床。方法第一维色谱柱为ASTON SC2柱(4.6mm×25mm,5μm),流动相为20mmol/L磷酸铵∶乙腈∶甲醇=3∶1∶1(V∶V∶V,磷酸调pH=5.4),流速1.2mL/min;第二维色谱柱为SHIMADZU C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为10mmol/L醋酸铵(三乙胺调pH7.0)∶10mmol/L醋酸铵(三氟乙酸调pH3.0)∶甲醇∶乙腈=30∶10∶10∶50(V∶V∶V∶V),流速1.0mL/min;中间柱为ASTON SH柱(3mm×10mm,5μm),辅助流动相为纯水。样品由一维色谱柱萃取,经中间柱捕获并转移至第二维色谱柱分析,检测波长256nm,柱温40℃,进样量200μL。结果伏立康唑在0.28～22.56μg/mL范围内线性关系良好,r=0.999 9,最低定量限为0.28μg/mL,方法回收率为99.01%～104.62%,提取回收率为85.81%～89.82%,日内、日间精密度RSD均小于9%。结论该方法操作简单、准确、灵敏,符合血清样品的测定要求,适用于伏立康唑临床血药浓度测定。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中青霉素V的浓度

目的 建立液相色谱一串联质谱法(1iquid chromatography-mass spectrometry/mass spectrometry,LC-MS/MS)测定人血浆中青霉素V的浓度,并用于人体药代动力学研究.方法 以甲醇和乙腈沉淀蛋白处理样品,采用C18色谱柱,流动相为5 mmol/L.醋酸胺+0.5%甲酸水溶液一乙腈(55:45,v/v),以氯硝西泮为内标,电喷雾离子源,选择正离子多离子反应监测模式,检测离子分别为m/z 351.10→m/z 160.10(青霉素V)和m/z 316.00→m/z270.00(内标).并测定了19名健康志愿者口服单剂量青霉素V钾片0.472 g后血药浓度.结果 青霉素V在0.05～20.00 mg/L浓度范围内线性关系良好,相对回收率大于96.7%,提取回收率大于94.9%,日内相对标准差(relative standard deviation,RSD)小于2.3%,日间RSD小于10.4%.结论 本法准确可靠专属性强,可作为人血浆中青霉素V的测定方法 .     

高效液相色谱法测定患者血浆中霉酚酸浓度

目的:建立霉酚酸(MPA)血浆浓度测定的高效液相色谱法。方法:采用SHI MADZU Shi m-pack vp-ODS(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.05%磷酸(34:66,V/V);柱温30℃、流速1.0ml/min、检测波长216nm。结果:MPA在0.25~16mg/L范围内线性关系良好(r=0.9999,n=7),最低检测浓度为0.25mg/L;回收率为96.00%~104.13%;日内、日间RSD分别为3.40、1.70、3.40%和6.40、2.34、2.94%。结论:本法灵敏、快速、准确,专属性好,可用于MPA血药浓度监测。     

肿瘤细胞内外长春新碱的高效液相色谱法测定

目的:建立测定肿瘤细胞内外长春新碱(Vincristini sulfas,VCR)浓度的反相高效液相色谱法.方法:色谱柱,C18(4.6mm×250 mm,5μm);流动相,0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH=6.6):甲醇(30:0),流速0.8 ml/min;检测波长:267 nm;柱温:30℃.结果:长春新碱样品在12.5～160.0μg/ml范同和0.125～12.5 μg/ml范围内线性关系良好.细胞外液平均提取回收率为73.84%,平均加样回收率为99.83%,日内RSD为3.14%,日间RSD为3.99%;细胞内液日内RSD为2.15%,日间RSD为1.77%.最低检测限为0.04μg/ml.结论:本法简单、快速、选择性好,适合长春新碱含量的测定.     

高效液相色谱法测定复方利福平制剂的利福平血浆浓度

目的 用高效液相色谱法测定复方利福平制剂的利福平血浆浓度.方法 采用反相高效液相色谱法进行检测.色谱柱为Chromasil C18(4.6 mm×250 mm,ID 5μm);流动相:甲醇0.02 mol/L,磷酸二氢钾0.01mol/L,十二烷基磺酸钠(68∶28∶4,V∶V);流速:1.0 ml/min;检测波长333 nm.结果 利福平的回归方程为:C=5.37×10-6A 0.15,r=0.9991;线性范围:0.60～12.00 ng/L;最低检测浓度为0.30 ng/L;高、中、低浓度(12.00mg/L、7.20 mg/L、0.60 mg/L)回收率为(100.01±2.42)%、(98.23±2.05)%、(100.52±5.81)%;日内变异及日间变异均＜10%.结论 本方法可准确、快速测定血浆中利福平的浓度,可用于复方利福平制剂的生物等效性试验和药代动力学研究.     

高效液相色谱/质谱/质谱法测定血浆中3种常用药物的浓度

目的:建立测定血浆中卡马西平、苯妥英钠、茶碱浓度的高效液相色谱/质谱/质谱分析方法。方法:①液相色谱流动相为甲醇-0.01 mmol/L乙酸铵水溶液(60∶40),流速0.2 mL/min;色谱柱为SYMMETRY C18(2.1 mm×50 mm,3.5μm),柱温30℃。②质谱电喷雾电离源,采用多反应监测方式进行检测,卡马西平质荷比237→194,苯妥英钠253→182,茶碱181→124。血浆样本经固相萃取小柱萃取处理后进样分析。结果:卡马西平在(1~20)μg/mL浓度范围内线性关系良好,萃取回收率100.9%~107.0%。日内误差(RSD)小于2.0%;苯妥英钠在(2~40)μg/mL浓度范围内线性关系良好,萃取回收率96.5%~102.4%。RSD小于1.9%;茶碱在(2~40)μg/mL浓度范围内线性关系良好,萃取回收率95.8%~106.0%,RSD小于3.0%。结论:本方法具有特异性高,灵敏度好,测定快速等优点。     

高效液相色谱法测定法莫替丁注射液中的有关物质和含量

目的 建立高效液相色谱法测定法莫替丁注射液中的有关物质和含量.方法 色谱柱:HypersilODS(250.0mm×4.6 mm,5μm);流动相:庚烷磺酸钠溶液-乙腈-甲醇=25:6:1(V/V/V);检测波长:254mm;流速:1.0mL/min;进样量:20μL.结果 样品经酸、碱、氧化、热及光照破坏后所产生的杂质峰均能与主峰有效分离,最低检测限为1.0 ng.法莫替丁在80.32～120.48μg/mL的浓度范围内与峰面积成良好的线性关系,平均回收率为99.76%,RSD为0.73%.结论 本法方法简便、快速,专属性强,待测溶液稳定,测定结果准确.     

高效液相法测定视力健咀嚼片中原花青素的含量

目的:采用高效液相色谱法对视力健咀嚼片中原花青素的含量进行了测定.方法:采用高效液相法,色谱柱:迪马公司产Diamonsil C18柱(4.6mm×200mm,5μm),柱温:25℃,流动相:V( 乙腈):V(水)=8:92,检测波长:280nm,进样量:10μL,流速:1ml/min.结果:原花青素在(0.32~2.56)mg/mL范围内具有良好的线性关系,回收率为98.71%,RSD=0.76%(n=6).结论:本方法简便、快速、准确、可靠,可用于视力健咀嚼片中原花青素的含量测定的方法.     

粉防己碱脂质体药物含量及包封率的测定

目的:建立Tet脂质体药物含量测定及包封率测定的反相高效液相色谱法.方法:反相高效液相色谱法.采用Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-乙腈-水-0.8%冰醋酸(30:15:55);进样量:20 μl;流速:1.0 ml/min;紫外检测波长:280 nm.采用葡聚糖凝胶G-50柱色谱法分离Tet脂质体和游离药物.结果:在本色谱条件下Tet与辅料及溶剂峰分离良好,Tet在2.0 mg/L～100.0 mg/L范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=3),平均回收率在100.0%～101.0%之间.日内精密度RSD及日间精密度RSD均小于2%(n=5).结论:该方法准确可靠、简便易行,可用于Tet脂质体药物含量及包封率的测定.     

反相高效液相色谱法测定神经酸片剂中神经酸含量

目的建立神经酸片剂中神经酸的反相高效液相色谱含量测定方法。方法色谱柱为UltimateR XB-C8 (4. 6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.1%(V/V)磷酸水溶液-乙腈(93:7),检测波长为203 nm,流速1.0 m L/min,柱温25℃。结果神经酸与其他组分分离良好,神经酸浓度在0.01～0.2 mg/m L范围内线性关系良好(Y=3 000 000 X (mg/m L)+4 795.9,P=0.000,R2=0.999 9,n=5),该方法精密度实验RSD为1.80%(n=6)。样品溶液在24 h稳定,峰面积RSD为1.52%(n=6)。回收率为96.94%～104.46%(RSD在0.81%～3.80%之间)。结论首次采用C8柱,建立了一种反相高效液相色谱方法,实现了对片剂中神经酸含量的快速准确测定。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测梯度洗脱法测定黄芪药材中黄芪甲苷的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)梯度洗脱法测定膜荚黄芪中黄芪甲苷含量.方法:黄芪药材经甲醇-氨水(9:1,V/V)超声提取60 min,确定实验条件并进行方法学考察;色谱条件:依利特Hypersil ODS 2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:A相为乙腈,B相为水,梯度洗脱;流速:1.0 ml/min;柱温:室温;进样量:20 μl.蒸发光散射检测器条件:漂移管温度:40℃,载气(空气)压力:3.5 bar(1 bar＝105Pa),增益值:7.结果:黄芪甲苷的理论塔板数为214 798,分离度为1.858,拖尾因子为1.011.回归方程为Y=1.415 X 7.509,r=0.999 4,线性范围在6.930～693.0 μg/ml之间.方法学考察结果表明,日内和日间精密度的RSD均小于2.0%,48 h内稳定性试验的RSD分别为1.24%,重复性试验的RSD分别为1.26%(n=5),最低检测限为0.693 0 μg/ml,加样回收率为97.05%,RSD＝0.17%(n=3).膜荚黄芪中黄芪甲苷的含量均符合<中国药典>标准.结论:该方法缩减了黄芪药材的前处理步骤,测定结果准确,适用于黄芪药材中黄芪甲苷含量测定的研究.     

高效液相色谱法同时测定芦荟中芦荟苷和芦荟大黄素的含量

目的:建立用高效液相色谱法同时测定芦荟中芦荟苷和芦荟大黄素含量的方法.方法:采用ZORBAXSA-C18柱(5 μm,200 mm×4.6 mm),以甲醇-水(体积比60:40)溶液为流动相,在360 nm处测定芦荟苷的含量,在430 nm处测定芦荟大黄素的含量.结果:芦荟苷在线性范围0.002～0.050 mmol/L内线性关系良好(r=0.999 74),精密度良好(RSD=0.24%),平均加样回收率为102.5%(RSD=1.1%);芦荟大黄素在线性范围0.001～0.040 mmol/L内线性关系良好(r=0.999 77),精密度良好(RSD=0.39%),平均加样回收率为101.4%(RSD=1.0%).结论:该方法快速、简便、准确,能同时测定芦荟苷和芦荟大黄素的含量.     

HPLC法间接测定肿瘤患者外周血DPD的活性

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)间接测定肿瘤患者外周血二氢尿嘧啶脱氢酶(DPD)活性的方法.方法 采用HPLC法测定肿瘤患者血浆中内源性物质二氢尿嘧啶(H2U)和尿嘧啶(U)的比值,间接估算DPD的活性.色谱柱:Xterra RPC18 (250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钠(pH4.0),比例为5∶95;流速为1.0 mL/min,H2U和U检测波长分别为204 nm、260 nm.结果 H2U线性范围为62.5 ～2 000μg/L,线性方程为:Y=7.48×10 -4X+ 1.24×10-1,r=0.999 7(n=6),批内RSD小于7.7％,批间RSD小于13.8％,方法学回收率为99.63％ ～ 103.02％;U线性范围为15.625 - 500 μg/L,线性方程为:Y=3.42×10-3X+2.58×10-2,r=0.999 3(n=6),批内RSD小于8.3％,批间RSD小于13.4％,方法学回收率为98.38％～109.08％.结论 本方法可用于肿瘤患者外周血DPD活性的常规监测.     

青霉素V钾片含量测定中流动相影响因素的探讨

目的:改进青霉素V钾片含量的测定方法.方法:采用Dikma C18(4.6 mm×200 mm,5 μm),Shiseido MG(4.6 mm×200 mm,5μm),Waters C18(4.6 mm×μ200 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-0.1 mo/L磷酸二氢钾溶液一三乙胺(40:60:0.1),用冰醋酸调pH至4.0;检测波长:268 nm;流速1.0 ml/min;柱温:26℃.结果:青霉素V钾在1.12～36.05μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率99.70%,RSD=0.32%(n=6).结论:本方法简便、准确、重现性好,可用于青霉素V钾片中青霉素V的质量控制.     

UPLC法测定复方虎黄喷剂中虎杖苷、黄芩苷、欧前胡素

目的利用梯度洗脱,建立同时测定复方虎黄喷剂中3种指标成分虎杖苷、黄芩苷和欧前胡素的UPLC检测方法。方法采用UPLC法,Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm),流动相:乙腈(A)和0.05%磷酸水溶液(B)梯度洗脱;流速:0.4mL/min;检测波长:280nm;柱温:35℃。结果虎杖苷的线性范围为0.59~59.0mg/L(r=0.999 2),平均回收率为100.6%,RSD为1.56%;黄芩苷的线性范围为1.128~112.8mg/L(r=0.999 9),平均回收率为101.5%,RSD为1.68%;欧前胡素的线性范围为0.109~10.9mg/L(r=0.999 9),平均回收率为100.6%,RSD为2.75%。结论本方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于复方虎黄喷剂的质量控制。     

HPLC法测定头孢羟氨苄甲氧苄啶片中头孢羟氨苄和甲氧苄啶的含量

目的:建立一种头孢羟氨苄甲氧苄啶片中头孢羟氨苄和甲氧苄啶的含量测定方法。方法:采用ODS色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),以0.01mol/L氯化铵溶液甲醇冰醋酸(741∶258∶1)为流动相,检测波长为230nm,柱温为室温。结果:本方法头孢羟氨苄与甲氧苄啶可充分分离,头孢羟氨苄和甲氧苄啶线性范围分别为12.5～150μg/ml(r=0.9999)和2.5～30μg/ml(r=0.9998),头孢羟氨苄含量回收率为99.44%～100.59%,RSD小于1%;甲氧苄啶含量回收率为98.15%～100.34%,RSD小于2%。结论:本方法简便、灵敏、准确,可同时测定头孢羟氨苄和甲氧苄啶的含量。     

高效液相色谱法测定夫西地酸眼用乳剂的含量

目的:建立测定夫西地酸眼用乳剂含量的高效液相色谱法.方法:采用Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱:流动相为0.01 mol/L磷酸溶液-乙腈-甲醇(16:64:20);流速为1.0 ml/min;检测波长为235 nm;柱温为40℃.结果:夫西地酸在20～120 mg/L浓度范围内线性关系良好(r=0.999 6),平均回收率为99.57%,RSD为1.53%.结论:本方法专属性强、操作简便、结果准确,可用于夫西地酸眼用乳剂的含量测定.