来源于肾上腺髓质素原的不同肽段对大鼠主动脉一氧化氮生成的影响

目的 :观察肾上腺髓质素 (ADM)对大鼠主动脉一氧化氮 (NO)生成的作用 ,以及肾上腺髓质素原N端 2 0肽 (PAMP)和肾上腺升压素 (ADT)对ADM这一作用的影响。方法 :ADM ,PAMP和ADT孵育离体大鼠主动脉 2h后 ,测定孵育液中亚硝酸盐的含量和所孵育组织中一氧化氮合酶 (NOS)的活性 ,其中亚硝酸盐的含量反映NO的生成量。结果 :ADM(10 -9～ 10 -7mol·L-1)浓度依赖地刺激大鼠主动脉组织亚硝酸盐的生成和NOS的活性。 10 -8mol·L-1的ADM孵育血管后 ,每毫克蛋白亚硝酸盐的生成量为 (0 .2 82± 0 .0 4 6) μmol,NOS活性为 (0 .3 2 3± 0 .0 5 6)pmol·min-1,显著高于对照组 [每毫克蛋白 (0 .173± 0 .0 2 6) μmol和 (0 .110± 0 .0 2 8)pmol·min-1,P <0 .0 1]。此浓度的ADM与相同浓度的PAMP或ADT共同孵育血管后 ,每毫克蛋白亚硝酸盐的生成量为 (0 .2 0 4± 0 .0 4 9)或(0 .15 0± 0 .0 3 6) μmol,NOS活性为 (0 .178± 0 .0 2 3 )或 (0 .12 3± 0 .0 3 1) pmol·min-1;ADM ,PAMP和ADT三者共同孵育 ,每毫克蛋白亚硝酸盐的生成量为 (0 .162± 0 .0 2 9) μmol,NOS的活性为 (0 .110± 0 .0 2 4 ) pmol·min-1,均显著低于ADM (10 -8mol·L-1)单独孵育组 (P <0 .0 1)。无论PAMP还是ADT单独孵育血管组织均不影响其亚硝酸盐     

心力衰竭患者肾上腺髓质素和前体N端20肽的改变

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)和肾上腺髓质素前体N端20肽(PAMP)在心力衰竭发生发展病理过程中的变化和临床意义.方法应用特异性放射免疫法检测了45例不同程度的充血性心力衰竭(CHF)患者和7名正常人ADM和PAMP的血浆浓度.结果CHF病人血浆ADM浓度在心功能Ⅱ级者为(51.46±4.52)pg/ml、Ⅲ级者为(70.39±3.22)pg/ml,与正常组[(24.12±1.59)pg/ml]比较有显著性差异(P＜0.05);PAMP血浆浓度在心功能Ⅱ级者为(6.24±1.71)pg/ml、Ⅲ级者为(738±1.28)pg/ml,与正常组[(8.56±2.44)pg/ml]比较无显著性差异(P＞0.05).在心功能Ⅳ级者,ADM和PAMP血浆浓度分别为(36.33±2.17)pg/ml、(2.79±0.89)pg/ml,较心功能Ⅱ级和Ⅲ级者显著下降,其中ADM高于对照组,PAMP低于对照组(P＜0.05).结论ADM和PAMP在心力衰竭不同阶段的变化表明肾上腺髓质素功能片段扩血管活性肽分子内调节紊乱;ADM在心衰的进展过程中可能发挥更重要的作用.     

PAMP对ADM舒张血管作用的初步研究

目的 :观察肾上腺髓质素原来源的两个不同肽段Adrenomedullin (ADM )和 proadrenomedullinN -ter minal 2 0 peptide (PAMP)单独或联合作用对血管张力的影响。 方法 :在孵育的大鼠离体胸主动脉环上预先加入苯肾上腺素使之收缩达最大张力后 ,单独或联合加入不同浓度的ADM和PAMP ,用张力换能器和多导生理记录仪 ,记录其对离体血管环张力作用曲线。结果 :10 - 9～ 10 - 7mol·L- 1的ADM浓度依赖地抑制苯肾上腺素诱导的血管收缩 ;相同浓度的PAMP对苯肾上腺素诱导的血管收缩或基础状态下的血管张力无显著影响。不同浓度的PAMP与ADM联合应用对苯肾上腺素诱导的血管张力反而有增强作用。血管去除内皮或用L -N -硝基精氨酸预先孵育后 ,ADM的舒血管效应及PAMP对其的拮抗作用均消失。结论 :ADM可诱导血管舒张 ,PAMP可拮抗ADM的舒血管效应 ,其作用与NO信号转导途径有关     

心力衰竭患者血浆尾加压素Ⅱ与肾上腺髓质素片段的关系

目的 :探讨不同程度充血性心力衰竭 (congestiveheartfailure,CHF)患者血浆尾加压素Ⅱ (UrotensinⅡ ,UⅡ )与肾上腺髓质素N端 2 0肽 (proadrenomedullinNterminal 2 0pep tide ,又称PAMP)的变化、临床意义及其分子之间调节的相互关系 .方法 :采用特异性放射免疫分析法检测 14例正常人、5 2例心力衰竭患者 (心功能Ⅱ级 17例 ,Ⅲ级 15例 ,Ⅳ级 2 0例 )血浆UⅡ和PAMP含量 ;同时用超声心动图测定左心室射血分数 (leftventricularejectionfraction ,LVEF)、左室舒张功能(E/A)比值 .结果 :正常健康人血浆UⅡ含量 (4 .3± 1.2 )ng·L-1,PAMP含量 (2 1.0± 6 .6 )ng·L-1;心力衰竭患者血浆UⅡ含量 (1.5± 1.1)ng·L-1,PAMP含量 (30 .6± 5 .8)ng·L-1,与健康对照组比较均有差异 (P <0 .0 5 ) ;血浆UⅡ含量减低、PAMP含量的升高与心力衰竭严重程度相平行 ;血浆UⅡ含量与PAMP含量分别与左室射血分数、E/A比值有一定的相关性 ;心力衰竭患者治疗后 ,随着心衰症状改善 ,血浆UⅡ含量为 (2 .1± 1.5 )ng·L-1,较治疗前血浆UⅡ含量升高 (P =0 .0 0 1) ,治疗前后血浆UⅡ有正相关关系 (r =0 .5 5 7,P =0 .0 0 0 ) ;而PAMP含量为 (2 5 .6± 5 .1)ng·L-1,较治疗前降低 (P =0 .0 0 0 ) ,治疗前后有显著正相关 (r =0 .90 9,P     

肾上腺髓质素前体肽内不同片段间的相互作用

肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)是1993年由Kitamura等[1]发现的一种心血管活性肽.ADM除具有强大的舒张血管、降低血压、抑制血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)迁移、增殖作用外,还有利钠、利尿和心脏保护等作用,在维持循环稳态和心血管疾病中具有重要意义[1].随后人们发现ADM前体(preproADM,185个氨基酸残基)在体内经内源性肽酶降解后产生的另外3个片段也具有生物学效应:肾上腺髓质素原N末端20肽(preproADM22-41,proADM N terminal20 peptide,PAMP)具有弱的舒张血管、降低血压作用[2];preproADM153-185具有升高血压、促进VSMC增殖的作用[3];preproADM45-92亦具有弱的舒张血管、轻度降低血压的作用[3,4 ].     

不同类型的心绞痛患者冠状动脉循环血浆中肾上腺髓质素前体N端20肽的变化

目的 研究冠心病患者稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛以及心肌梗死患者血浆肾上腺髓质素前体N端20肽(PAMP)浓度在冠脉循环中的变化.方法 用放免方法分别测定不同类型心绞痛的冠心痛患者与对照组外周、冠状静脉窦与主动脉根部血浆中PAMP浓度,利用冠状静脉窦-主动脉根部差值求出经冠脉循环后心脏局部分泌并释放的PAMP浓度.结果 不同类型心绞痛患者外周血浆中PAMP浓度较对照组明显增高,差异均有显著性(P<0.01),冠心病组冠状静脉窦PAMP浓度较主动脉根部及外周血PAMP浓度明显增高,差异均有显著性(P<0.01);冠心病组心脏局部PAMP浓度较对照组明显增高,差异均有显著性(P<0.01).结论 冠心痛患者血浆PAMP浓度明显增高,经冠脉循环后心脏局部有PAMP产生.提示PAMP参与了冠心病的病理生理过程.可能是机体对维持内环境稳态的一种自我保护机制,在冠心病的病程发展过程中有可能是一种较为重要的血管活性物质.     

参麦注射液对DPPH自由基所致兔离体心脏功能损伤的保护作用

目的 :在兔离体灌流心脏观察参麦注射液对DPPH自由基所致心功能损伤的保护作用。方法 :离体兔心采用Langendorff法灌流 ,记录左室内压 (LVP)、左室内压上升速率 (+dp/dtmax)、左室舒张末压 (LVEDP)、心率(HR) ,定时收集冠脉流出液测量冠脉流量 (CF)和肌酸激酶 (CK)活性。结果 :用含 0 .2 5 μmol/LDPPH的K H液灌流心脏 1 0min ,LVP ,+dp/dtmax明显降低 ,LVEDP升高 ,冠脉流量中的CK值明显增加。用含参麦注射液(1 :32 0 )的K H液灌流心脏 1 0min ,可显著减轻DPPH所致的心功能损伤 ,减少CK的释放。结论 :参麦注射液对DPPH自由基所致心功能损伤具有明显保护作用     

肾上腺髓质素前体肽段(45-92)的心血管效应

目的：观察肾上腺髓质素前体肽段45-92（proAdm45－92）的心血管效应。方法：离体大鼠血管灌流，离体心脏灌流和整体动物心血管功能测定。结果：人proAdm45-92呈浓度依赖地（10-10~10-7mol／L）舒张大鼠胸主动脉，且具有部分内皮依赖性。对于离体心脏，2．5X10－8mol／LproAdrn45－92可使冠脉流量增加（54．4±2．3）％（P＜0.05），使左室内压增加（21±4）％（P＜0.05），但对心率、LVdP／dtmax无明显影响。静脉注射5nmol／kgproAdm45－92可降低大鼠平均动脉血压（1．4±1．0）kPa（P＜0．05），对心率和左室内压无明显作用。结论：人proAdm45－92对大鼠具有舒张血管、轻度降低血压的作用，对心肌可能无直接作用。     

心力衰竭患者血浆肾上腺髓质素前体N端20肽的变化

肾上腺髓质素前体N端 2 0肽 (PAMP)是近年来发现的一种具有强大扩血管、降压、抑制血管紧张素II刺激的醛固酮分泌等作用的血管活性肽。本研究旨在探讨慢性充血性心力衰竭 (CHF)患者PAMP血浆含量变化及其临床意义。一、对象与方法1 慢性CHF患者 45例 ,男 30例 ,女 15例 ,年龄 30～ 80岁 (平均 6 4岁 )。按纽约心脏协会 (NYHA)心功能分级标准分为 3组 :( 1)Ⅱ级组 10例 ,男 5例 ,女 5例 ,平均年龄 6 8岁 ;②Ⅲ级组 15例 ,男 9例 ,女 6例 ,平均年龄 6 9岁 ;( 3)Ⅳ级组2 0例 ,男 15例 ,女 5例 ,平均年龄 6 2岁。排除急性心肌梗死、肿瘤…     

参麦注射液对DPPH自由基所致兔离体心脏功能损伤的保护作用

目的：在兔离体灌流心脏观察参麦注射液对DPPH自由基所致心功能损伤的保护作用。方法：离体兔心采用Langendorff法灌流，记录左室内压(LYP)、左室内压上升速率( dp／dtmax)、左室舒张末压(LVEDP)、心率(HR)，定时收集冠脉流出液测量冠脉流量(CF)和肌酸激酶(CK)活性。结果：用含0．25μmol／L DPPH的K-H液灌流心脏10min，LVP， dp／dtmax明显降低，LVEDP升高，冠脉流量中的CK值明显增加。用含参麦注射液(1：320)的K-H液灌流心脏10min，可显著减轻DPPH所致的心功能损伤，减少CK的释放。结论：参麦注射液对DPPH自由基所致心功能损伤具有明显保护作用。     

Cardioprotective effects of morphine on rat heart suffering from ischemia and reperfusion

Objective To investigate the cardioprotective effects of morphine on ischemic reperfused rat heart in vitro and its mechanism.Methods The isolated rat heart was perfused in a Langendorff apparatus. Infarct myocardium was determined by TTC. Coronary flow (CF), heart rate (HR), left ventricular pressure (LVP), the first derivative of ventricular pressure (LVP/dtmax) and infarct size after ischemia and reperfusion in rat heart given 0.3 μmol/L morphine were observed. The effects of naloxone and glibenclamide on the cardioprotection of morphine were also measured.Results After ischemia and reperfusion, CF, HR, LVP and LVP/dtmax of isolated rat hearts decreased significantly (P&lt;0.01). After morphine preconditioning, HR, LVP and LVP/dtmax increased (P&lt;0.01) and infarct size was reduced significantly (P&lt;0.01), while no significant change in CF (P&gt;0.05). The cardioprotective effects of morphine were abolished by naloxone or glibenclamide completely.Conclusions Morphine can reduce ischemia-reperfusion injuries in isolated rat heart. The cardioprotective effects of morphine are mediated by a local opioid receptor-KATP channel linked mechanism in rat hearts.     

二氧化硫对大鼠离体灌注心脏心功能的影响

目的 观察二氧化硫(SO2)对大鼠离体心脏心功能的影响及可能的机制.方法 应用Langendorff大鼠离体心脏灌流模型,以不同浓度SO2供体(Na2SO3/NaHSO3)(1、10、100、1000μmoL/L)或0.5 μmol/L天冬氨酸异羟肟酸(HDX)灌流心脏5 min,并以生理浓度SO2供体(NA2SO3/NaHSO,)(10 μmol/L)持续灌流20 min,测量心率、左心室内压差(左心室收缩末压-舒张末压)、左心室内压变化速率(±dp/dtmax)以及冠脉流量;应用钙离子通道阻断剂尼卡地平预灌流后再给予生理剂量SO2供体(Na2SO3/NaHSO3)灌注,观察尼卡地平是否可以阻断SO2的心脏效应.结果 SO2呈浓度依赖性地抑制左心室±dp/dtmax、左心室内压差、心率以及冠脉流量(均P＜0.01);生理剂量SO2供体(Na2SO3/NaHSO3)持续灌流20 min,灌流20 min时,左心室内压差,+dp/dtmax、-dp/dtmax及心率分别为:(15±3)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),(485 ±74)mm Hg/s,(339 ±64)mm Hg/s,(114 ±26)次/min;均明显低于灌流5 min时的左心室内压差[(23±7)mm Hg]、+dp/dtmax[(595±93)mm Hg/s]、-dp/dtmax[(436±83)mm Hg/s]及心率[(159±31)次/min],均P＜0.05;0.5 μmol/L HDX灌注后左心室内压差降低,左心室±dp/dtmax减少、冠脉流量减少(P＜0.05或P＜0.01);尼卡地平可阻断生理剂量SO2对心功能的抑制效应.结论 外源性SO2对大鼠离体心脏的心功能具有负性肌力作用,其作用机理与电压门控钙通道有关.     

丹红注射液减轻DPPH所致离体心脏功能损伤的作用研究

[目的]在大鼠离体心脏灌流系统上观察丹红注射液对二苯基三硝基苯肼(DPPH)自由基所致心功能损伤的保护作用。[方法]大鼠离体心脏采用Langendorff灌流,基础平衡30 min后进行各组预给药10 min后,用含0.25μmol/L DPPH的K-H液灌流心脏10 min,造成心脏功能损伤,最后用K-H液灌流10 min进行恢复。记录灌注压(PP)、左心室舒张压(LVEDP)、左心室收缩压(LVSP)、心率(HR)、左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax),并计算心率压力乘积(RPP)。[结果]丹红注射液灌注10min可以显著降低灌注压,扩张冠状动脉。DPPH自由基损伤后RPP、+dp/dtmax显著降低,-dp/dtmax显著升高。用含丹红注射液的K-H液预处理10min,丹红2.5μL/mL组、丹红5μL/mL组可以减轻DPPH自由基导致的心脏功能损伤。[结论]在离体心脏模型中丹红注射液能扩张冠状动脉,减轻外源性自由基对心脏功能的损伤。     

肾上腺髓质素原N端20肽对血管紧张素刺激心肌成纤维细胞生成NO的影响

目的探讨肾上腺髓质素原N端20肽(PAMP)对血管紧张素II刺激心肌成纤维细胞(CFs)生成NO的影响及意义。方法采用胰酶消化、差速贴壁法培养新生SD大鼠CFs,以硝酸还原法测定细胞培养液中NO的浓度,分别观察不同浓度AngII、PAMP、及AngII PAMP对CFs生成NO的影响。结果(1)10-9、10-8、10-7、10-6μmol/LAngII组细胞培养液中的浓度是:(73.88±2.23)、(64.34±3.02)、(54.12±2.82)、(40.21±1.45)μmol/L,各组之间有显著性差异(P<0.01)。(2)10-9、10-8、10-7、10-6μmol/LPAMP组细胞培养液中NO的浓度分别为(74.40±3.42)、(74.91±2.66)、(75.77±3.31)、(74.23±2.43)μmol/L,而空白组为(74.57±2.49)μmol/L。各组之间无显著性差异(P>0.05)。(3)10-7μmol/LAngII (10-9、10-8、10-7、10-6μmol/L)PAMP组培养液中NO合成浓度分别为(66.15±2.95)、(80.58±3.77)、(88.67±1.46)、(96.22±2.96)μmol/L,各组间有显著性差异(P<0.01)。结论随AngⅡ浓度增加可显著抑制CFs分泌NO,而PAMP对CFS合成NO无明显影响,但PAMP与AngII共同培养时,随PMAP浓度增加,NO的合成呈依从性增多。     

茶多酚改善大鼠缺血/再灌注心脏功能和能量代谢并抑制体外培养心肌细胞的钙内流

目的：探讨茶多酚对缺血/再灌注心脏损伤的保护作用,并研究心脏能量代谢和心肌细胞钙内流是否参与了心脏缺血/再灌注损伤的保护作用。方法在大鼠Langendorff离体心脏上实施缺血/再灌注各30 min,用一导管经压力换能器连接放大器记录心功能指标;用31P NMR技术测定心脏的能量代谢,全细胞膜片钳技术记录心肌细胞钙内流。结果与对照组比较,茶多酚（2.5 mg/L）能使缺血/再灌注心脏的心室发展压、左心室压最大收缩速率（+dp/dtmax）、左心室压最大舒张速率（-dp/dtmax）和冠脉流量显著增加（P<0.05）,并显著改善缺血/再灌注心脏的能量代谢,增加心肌ATP和PCr含量（P<0.05）。浓度为2.5和5.0 mg/L的茶多酚均能显著抑制培养心肌细胞的钙内流（P<0.01）。结论茶多酚对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的保护作用可能与其改善心肌能量代谢、抑制心肌细胞钙内流的作用有关。     

Cardioprotective effects of mitochondrial KATP channels activated at different time

Backgroud Recent studies in adult hearts have indicated that KATP channels in the inner mitochondrial membrance are responsible for the protection. And we investigated whether opening of mitochondrial KATP channels (mKATP) could provide myocardial protection for immature rabbits and determined its role in cardioprotection.Methods Thirty-four 3-4-week-old rabbits, weighing 300-350 g, were divided randomly into five groups: Group Ⅰ (control group, n=8); Group Ⅱ ［diazoxide preconditioning group; n=8; the hearts were pretreated with 100 μmol/L diazoxide for 5 minutes followed by 10-minute wash out with Krebs-Henseleit buffer (KHB)］; Group Ⅲ ［diazoxide+5-hydroxydeconate (5-HD) preconditioning group; n=5; the hearts were pretreated with 100 μmol/L diazoxide and 100 μmol/L 5-HD); Group Ⅳ (diazoxide+cardioplegia group; n=8; cardioplegia containing 100 μmol/L diazoxide perfused the hearts for 5 minutes before ischemia); Group Ⅴ (diazoxide+5-HD+cardioplegia group; n=5; the cardioplegia contained 100 μmol/L diazoxide and 100 μmol/L 5-HD). All hearts were excised and connected to langendrff perfusion system and passively perfused with KHB at 38℃ under a pressure of 70 cmH2O. After reperfusion, the recovery rate of left ventricular diastolic pressure (LVDP), ±dp/dtmax, coronary flow (CF), the creatinine kinase (CK), lactate dehydrogenase (LDH), aspartate aminotransferase (AST) in coronary sinus venous effluent and the tissue ATP were measured. Mitochondria were evaluated semiquantitatively by morphology.Results After ischemia and reperfusion (I/R), the two groups that were treated by diazoxide only (Groups Ⅱ and Ⅳ) had a significant improvement in LVDP, ±dp/dtmax, and CF recovery. AST, LDH, and CK were decreased, and the levels of tissue ATP in the two groups were higher. Mitochondria was protected better in Group Ⅳ than in other groups. Conclusions Activating mKATP channels before and during ischemia can similarly protect immature rabbit hearts, and the mechanism is related to the direct protective effect on mitochondria. Opening of mKATP channel during ischemia provides a better protection for mitochondria than it does before ischemia.