突变的MTX耐药基因对骨髓造血干细胞的保护作用

目的研究转染耐药基因后对造血干细胞的保护作用方法以脂质体为载体，把二氢叶酸还原酶（ＤＨＦＲ）突变的对氨甲喋呤（ＭＴＸ）耐药的基因转染到小鼠造血干细胞，再输回至小鼠体内后，对小鼠进行为期９周的大剂量ＭＴＸ化疗。结果转染ＭＴＸ耐药基因组小鼠化疗前后的粒细胞总数及体重均较稳定，而未转染基因组小鼠的粒细胞总数及体重呈明显下降（Ｐ＜０．０５）。小鼠存活率在转染基因组较对照组有明显提高。从小鼠脾脏提取ＤＮＡ，经ＰＣＲ扩增后，证实转染基因组有耐药基因的高效表达。结论此实验为肿瘤患者在大剂量化疗时，进行保护造血功能，提高化疗疗效的实验研究和临床应用，提供有参考价值的资料。     

克服化疗骨髓毒性的新尝试——反转录病毒介导的耐药基因转染

肿瘤化疗所致的骨髓抑制是影响化疗强度的治疗效果的主要限制性因素之一。将化疗耐药相关的某种基因如多药耐药基因（ＭＤＲ１）、多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因或变异型二氢叶酸还原酶（ＤＨＦＲ）基因用反转录病毒构建载体导入骨髓造血干／祖细胞，则可能用于克服一种或多种化疗药物的骨髓毒性，有助于大剂量化疗的实施和提高肿瘤患者的长期无病生存率。     

乳腺癌组织中MDR—1基因检测及临床分析

目的探讨多药耐药基因Ｉ（ＭＤＲ－１）与乳腺癌患者年龄、分期、淋巴结转移等因素的关系。方法采用反转录－聚合酶链反应技术，对２０例乳腺癌组织ＭＤＲ－１基因进行检测。结果年轻乳腺癌患者的ＭＤＲ－１基因表达阳性率显著高于年龄较大者，分别为６０％和２０％，ＭＤＲ－１基因的阳性表达率随着恶性分级的增高而增高。结论提高早期诊断率，尽可能采用手术、放疗、化疗等综合治疗，并采用大剂量的化疗方案，才有可能防止产生获得性耐药，提高肿瘤治疗的效果     

大肠癌多药抗性基因的研究

肿瘤细胞对化疗药物产生抗药性的原因有几种，其中最主要的是多药抗性基因（ＭＤＲ１）过量表达，定量检测分析ＭＤＲ１表达水平可说明病人的抗药能力的高低，判断预后，指导临床化疗。表明ＭＤＲ１扩增量与化疗密切相关，对临床化疗及判断预后有重要的参考价值。     

逆转录病毒载体介导MDR1基因转染人外周血造血干细胞的研究

目的：多药耐药基因（ＭＤＲ１）的异常扩增和过度表达是肿瘤细胞产生多药抗药性的重要原因之一。本研究试图将ＭＤＲ１导入骨髓或外周血造知干细胞并使入获得耐药表型,以用于减轻大剂量化疗对造血细胞的毒性。方法：应用反转录病毒载体ｐＨａＭＤＲ１／Ａ将ＭＤＲ１阳性。ＰＣＲ法检测转染细胞所 ＣＦＵ－ＧＭ落集中,外源ＭＤＲ１阳性比例为１／４;而未转染细胞所形成的ＣＦＵ－ＧＭ集匀为阴性。集落形成试验证明,转染和非转染     

含MDR基因的人乳腺癌MCF 7/pZMDR多药耐药细胞株的构建

目的：肿瘤细胞的多药抗药性（ＭＤＲ）是化疗失败的主要原因之一，Ｐ－糖蛋白高表达是ＭＤＲ的主要机制，逆转ＭＤＲ成为肿瘤治疗亟待解决的问题。目前用于研究抗药性和筛选逆转抗药性药物的模型较少，本实验拟构建多药抗药性细胞株。方法：采用基因工程技术，重组ＭＤＲ１基因ｃＤＮＡ于逆转录病毒载体ｐＺＩＲ－ＮｅｏＳＶ（Ｘ）的克隆位点，并用脂染胺（ｌｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ）介导的ＤＮＡ转移技术，将其转入包装细胞ＰＡ３１７中，收集含病毒子的培养上清液感染对药物敏感的人乳癌细胞株ＭＣＦ－７，经筛选培养基筛选，ＰＣＲ、免疫组化及阿霉素在细胞内的分布等实验。结果：含ＭＤＲ基因的逆转录病毒载体ｐＺＭＤＲ的构建方法证明是正确的，ＭＤＲ１ｃＤＮＡ已整合在染色体基因组中并表达Ｐ－糖蛋白。结论：建立的ＭＣＦ－７／ｐＺＭＤＲ细胞为一特异表达Ｐ－糖蛋白的多药抗药性转基因细胞株     

MRC—5细胞株支持脐带血和外周血CD34^＋细胞增殖分化的研究

运用Ｄｅｘｔｅｒ体外细胞长期培养法，对脐带血和外周血造血干细胞进行独培养，用ＭＲＣ－５细胞株作为基底层与之混合培养，将二者进行对照研究。结果发现外周血和脐带血不含或仅含极少数基质细胞、单独培养时造血干细胞的增殖分化受到影响；而用ＭＲＣ－５细胞株作为基底层的混合培养中，ＣＤ３４＾＋可以在５周￣６周内持续存活，并得到增殖分化，揭示ＭＲＣ－５细胞具有基质细胞的支持作用，为脐带血和外周血ＣＤ３４＾＋在体外     

子宫内膜癌多药耐药基因(MDRI)的表达及其意义

目的探讨子宫内膜癌多药耐药基因（ＭＤＲ１）的表达及其意义。方法利用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），对３７例初治子宫内膜癌、１０例正常子宫内膜及１０例正常子宫肌层组织ＭＤＲ１基因的表达进行检测，同时用ＭＴＴ法对宫内膜癌进行肿瘤细胞体外药敏试验。结果３７例子宫内膜癌和１０例正常子宫内膜组织ＭＤＲ１表达均为阳性，ＭＴＴ药敏试验表明绝大多数子宫内膜癌对化疗药物具有交叉耐药性。结论子宫内膜癌对化疗的耐药可能是一种固有性ＭＤＲ，这可能与ＭＤＲ１基因的表达有关。     

贲门癌组织中多药耐药基因和多药耐药相关蛋白基因表达的临床研究

目的了解多药耐药基因（ＭＤＲ１）和多药耐药相关蛋白基因（ＭＲＰ）在贲门癌组织中的表达及其临床意义。方法采用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测了４６例贲门癌及癌旁组织中ＭＤＲ１和ＭＲＰ６４表达。结果癌组织中ＭＤＲ１和ＭＲＰ表达的阳性率分别６３％和５０％,均高于癌旁组织（Ｐ＜０．０５）;术前化疗的ＭＤＲ１ｍＲＮＡ和ＭＲＰｍＲＮＡ表达水平高于未化疗者（Ｐ＜０．０５）;中低分化肿瘤的ＭＤＲ１ｍＲＮＡ和ＭＲＰｍＲＮＡ表达水平高于高分化肿瘤（Ｐ＜０．０５）;结论贲门癌组织中具有内源和获得性多药耐药性;ＭＤＲ１和ＭＲＰ表达与贲门癌的ＴＮＭ分期无关,其高表达状态可预示肿瘤组织的分化不良。     

造血系统恶性肿瘤P-糖蛋白表达的临床研究进展

造血系统恶性肿瘤Ｐ－糖蛋白表达的临床研究进展周其锋１综述戚仁铎２审校对于绝大多数造血系统恶性肿瘤患者，由于瘤细胞对多种化疗药物产生耐药而导致的化疗失败，仍是临床上迫切需要解决的难题之一。本文就ｒａｓ、ｐ５３基因与ＭＤＲ１基因、ＣＤ３４＋细胞与Ｐ－糖蛋...     

MRC-5细胞株支持脐带血和外周血CD_(34)~+细胞增殖分化的研究

运用Ｄｅｘｔｅｒ体外细胞长期培养法，对脐带血和外周血造血干细胞进行单独培养，用ＭＲＣ－５细胞株作为基底层与之混合培养，将二者进行对照研究。结果发现外周血和脐带血不含或仅含极少数基质细胞，单独培养时造血干细胞的增殖分化受到影响；而用ＭＲＣ－５细胞株作为基底层的混合培养中，ＣＤ＋３４可以在５周～６周内持续存活，并得到增殖分化，揭示ＭＲＣ－５细胞株具有基质细胞的支持作用，为脐带血和外周血ＣＤ＋３４在体外的长期培养提供了简便可行的技术方法。     

多药耐药基因与泌尿系肿瘤

多药耐药基因的异常表达是目前发现的癌症化疗失效的主要原因。ＭＤＲ１为有功能耐药基因，通过其编码产物Ｐ－糖蛋白发挥作用。本文综述了ＭＤＲ基因在泌尿系肿瘤中的研究近况。     

非小细胞肺癌多药耐药基因表达及环孢菌素A对其逆转作用

研究非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者多药耐药基因（ＭＤＲ１）表达与化疗疗 间的关系,观察环孢霉素逆转ＭＤＲ１的疗效及毒性。方法利用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测４６例ＮＳＣＬＣ患者肿瘤细胞和外周血淋细胞ＭＤＲ１表达,根据检测结果将患者分成ＭＤＲ１阳性逆转组、ＭＤＲ１阳性对照组和ＭＤＲ１阴性组。所有患者接受至少２个周期的化疗,阳性逆转组患者在化疗同时给予ＣｓＡ,剂量为４ｍｇ／ｋｇ。结果肿瘤细胞同阳性率为６５．２     

高聚金葡素对中晚期肝癌患者多药抗药性基因表达及NK细胞活性 …

研究高聚金葡素对中晚期肝癌患者多药抗药性（ＭＤＲ）基因表达及ＮＫ细胞活性的影响，结果显示化疗联合高聚金葡素治疗（５０例）较单纯化疗组（３０例）可明显抑制ＭＤＲ基因过度表达，升高ＮＫ细胞活性，临床疗效显著优于对照组，副反应发生率明显降低。     

高聚金葡素对中晚期肝癌患者多药抗药性基因表达及NK细胞活性的影响

研究高聚金葡素对中晚期肝癌患者多药抗药性（ＭＤＲ）基因表达及ＮＫ细胞活性的影响。结果显示化疗联合高聚金葡素治疗组（５０例）较单纯化疗组（３０例）可明显抑制ＭＤＲ基因过度表达，升高ＮＫ细胞活性，临床疗效显著优于对照组，副反应发生率明显降低     

定量检测多药耐药基因在胃癌、大肠癌组织中的表达及其临床意义

应用逆转录多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，定量检测了６８例胃癌，５８例大肠癌组织中多药耐药基因（ＭＤＲ１）的表达水平，并对１１例胃癌及大肠癌患者进行了追踪检测。结果表明：化疗后肿瘤组织细胞中ＭＤＲ１的表达量（＞０．５）明显高于化疗前（＜０．５），ＭＤＲ１的表达量化疗后与化疗前比较差异显著（Ｐ＜０．０１），而且随化疗疗程数的增加，ＭＤＲ１表达量有上升的趋势。患者化疗效果与ＭＤＲ１的表达密切相关，与ＭＤＲ１的表达量成反比。ＭＤＲ１的表达可成为临床医生监测病情、选择有效的化疗药物、判断预后的重要参考指标。此法以临床标本为样品直接进行检测，以ＭＤＲ１／β２Ｍ为ＭＤＲ１的表达量，排除了实验过程中诸多因素的干扰，使样本之间的比较更加合理，结果准确、可信。     

白血病融合基因与微小残留病的研究进展

随着急性白血病化疗方案的改善和造血干细胞移植的进展 ,急性白血病的完全缓解 (ＣＲ)率明显提高。然而仍有许多ＣＲ患者在数年内复发 ,其主要原因是血液学ＣＲ后体内仍残留 10 6～ 10 9白血病细胞 ,称为微小残留病(ＭＲＤ)。有学者认为ＭＲＤ是血液学ＣＲ乃至持续完全缓解(ＣＣＲ)期间白血病复发的根源[1] 。如何早期准确地诊断ＭＲＤ ,是防治急性白血病复发的前提。目前已用于检测ＭＲＤ的技术主要有流式细胞计数法和聚合酶链反应法(ＰＣＲ) ,敏感性都可达到 10 3 (10 3 细胞中有 1个肿瘤细胞 )以上。应用最广的是ＰＣＲ技术 ,其关键是…     

用微血管内皮细胞体外扩增的骨髓造血干细胞重建大剂量化疗后的小鼠造血功能

目的探索造血干细胞体外培养扩增的新方法。方法采用磁性细胞分离技术纯化小鼠骨髓血管内皮细胞,将其与骨髓造血细胞一起培养。培养的骨髓细胞移植给大剂量化疗后的小鼠,观察其造血重建功能。结果纯化的血管内皮细胞具有鹅卵石样细胞形态,表达多种内皮细胞相关抗原如ＣＤ３１,ＣＤ３４,ＩＣＡＭ１,ＶＣＡＭ１和凝集素ＢＳ１结合位点。将内皮细胞与骨髓造血细胞共同培养后,骨髓细胞数明显增加,其中６０％为原始的造血细胞,后者移植后能有效重建血功能。结论骨髓微血管内皮细胞能促进造血干细胞体外扩增,并有效阻止其分化。扩增的造血干细胞具有造血重建功能。     

子宫内膜癌多药耐药基因（MDRI）的表达及其意义

目的 探讨子宫内膜癌多药耐药基因（ＭＲＤＩ）的表达及其意义。方法 利用逆转 录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），对３７例初治子宫内膜癌、１０例正常子宫内膜及１０例正常子宫肌层组织ＭＤＲＩ基因的表达进行检测，同时用ＭＴＴ法对宫内膜癌进行肿瘤本外药敏试验。结果 ３７例子宫内膜癌和１０例正常子宫内膜组织ＭＤＲ１表达均为阳性，ＭＴＴ药敏试验表达绝大多数子宫内膜癌对化疗药物具有交叉耐药性。结论子宫内膜癌对化疗的     

大剂量化疗加造血干细胞移植治疗侵袭性非霍奇金淋巴瘤

１９９３年在法国里昂举行了关于恶性肿瘤强烈化疗加造血干细胞移植的第一次国标协调会。当时由于资料不足,未能确定大剂量化疗加自体干细胞移植对非霍金淋巴瘤疗效是否优于常规联合化疗。这些年来,一些随机试验已完成对大剂量化疗加干细胞移植（ＨＤＴ）治疗侵袭性非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）若干重大问题的研究。鉴于此,１９９８年４月召开了有关这方面的第二次国际协调会,对ＨＤＴ的适应证和最佳方式进行了评估。ＨＤＴ的适应证：①根据随机前瞻性ＰＡＲＭＡ研究（１０９例５年无病存活率,ＨＤＴ为４６％,常规化疗１２％,Ｐ＝０．０…