MsPG肾小球IV—Col及LN的免疫组化和定量分析

取１１例系膜增生性肾炎（ＭｓＰＧ）活检新鲜标本，用ＡＢＣ免疫组化方法显示Ⅳ型胶原（Ⅳ－Ｃｏｌ）和层粘连蛋白（Ｌａｍｉｎｉｎ，ＬＮ）在肾小球中的分布，并经计算机图像分析系统进行定量分析。结果表明，实验组基膜的ＬＮ灰度明显高于对照组（Ｐ〈０．０１），而ＬＮ在系膜区的密度以及Ⅳ型胶原在系膜区和基膜的密度与对照组比较无显著性差异。提示ＭｓＰＧ肾小球毛细血管基底膜的ＬＮ含量增多。     

MsPG肾小球Ⅳ－Col及LN的免疫组化和定量分析

取１１例系膜增生性肾炎（ＭｓＰＧ），活检新鲜标本，用ＡＢＣ免疫组化方法显示Ⅳ型胶原（Ⅳ－Ｃｏｌ）和层粘连蛋白（Ｌａｍｉｎｉｎ，ＬＮ）在肾小球中的分布，并经计算机图像分析系统进行定量分析。结果表明，实验组基膜的ＬＮ灰度明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），而ＬＮ在系膜区的密度以及Ⅳ型胶原在系膜区和基膜的密度与对照组比较无显著性差异。提示ＭｓＰＧ肾小球毛细血管基底膜的ＬＮ含量增多。     

移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

摘要：【目的】在大鼠肝脏缺血再灌注模型中,观察移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣ）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（ＨＩＲＩ）的影响。【方法】全骨髓培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞学鉴定,慢病毒载体（ＬＶ３－ｓｈＴＳＧ－６）感染下调ＴＳＧ－６基因的表达;６０只ＳＤ雌性大鼠７０％肝脏缺血再灌注损伤模型的建立,随机分４组,ＰＢＳ组、ＢＭＳＣ组,ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组、ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组;各组大鼠分别于恢复灌注后３、６、２４ｈ取血检测血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量,恢复灌注后６ｈ取中叶肝脏组织,ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测ＴＳＧ－６蛋白表达,切片ＨＥ染色后光镜观察肝组织显微结构。【结果】体外分离培养的ＢＭＳＣ状态稳定,增殖能力强,表达ＣＤ２９及ＣＤ４４,不表达ＣＤ３４及ＣＤ４５,慢病毒感染下调ＢＭＳＣ的ＴＳＧ－６基因表达效率达７３．９９％;大鼠肝脏７０％缺血再灌注损伤模型稳定,各时间点ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均高于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）;ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均低于ＰＢＳ组（Ｐ＜０．０５）;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝脏ＴＳＧ－６蛋白表达低于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）,ＰＢＳ组未见ＴＳＧ－６蛋白表达;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组重,与ＰＢＳ组无明显区别,ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＰＢＳ组明显减轻。【结论】移植ＢＭＳＣ能改善肝缺血再灌注损伤,移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞削弱了其对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。     

P^53,C—erbB—2和PCNA在子宫内膜增生过长和子宫内膜癌中的表达？…

目的 了解抑癌基因Ｐ＾５３、癌基因Ｃ－ｅｒｂＢ－２和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在子宫内膜增生过长和子宫内膜癌中的存在状况及意义。方法 用Ｐ＾５３、Ｃ－ｅｒｂＢ－２和ＰＣＮＡ抗体对５０例子宫内膜癌和２０例子宫内膜增生过长手术标本进行Ｓ－Ｐ免疫组化检测,分析表达率与病理分级的关系。结果 Ｐ＾５３、Ｃ－ｅｒｂＢ－２和ＰＣＮＡ在子宫内膜癌组中的表达分别为５４％、５６％和７２％,均高于子宫同膜增生过长组。Ｐ     

持续正压通气治疗阻塞型睡眠呼吸暂停合并糖尿病

阻塞型睡眠呼吸暂停综合征 (ＯＳＡＳ)可引起多系统功能损害[1] ,但对血糖和胰岛素 (Ｉｎｓ)的影响我国研究尚少。Ｋａｔｓｕｍａｔａ等[2 ] 研究表明 ,ＯＳＡＳ可致糖代谢紊乱 ,使Ⅱ型糖尿病 (ＤＭ)发病率增高 ,我们采用持续正压通气 (ＣＰＡＰ)治疗这类ＤＭ病因ＯＳＡＳ ,纠正缺氧 ,观察血糖和Ｉｎｓ变化 ,探讨ＯＳＡＳ与ＤＭ的关系及ＣＰＡＰ治疗对其的影响。一、对象与方法1 对象 :我院睡眠中心门诊和住院部行多导睡眠监测(ＰＳＧ)患者 382例 ,按ｋｉｎｇｍａｎ诊断标准[3 ] ,确诊ＯＳＡＳ并配合ＣＰＡＰ治疗患者为ＯＳＡＳ组 ,不接受Ｃ…     

MASPs的结构与功能研究现状

甘露聚糖结合凝集素 (ｍａｎｎａｎｂｉｎｄｉｎｇｌｅｃｔｉｎ ,ＭＢＬ)是先天免疫应答的关键分子 ,它通过结合病原微生物表面的糖基而以ＭＢＬ途径机制激活补体。即与经典途径的Ｃｌｒ和Ｃｌｓ类似 ,通过ＭＢＬ相关的丝氨酸蛋白激酶 (ＭＢＬａｓｓｏｃｉａｔｅｄｓｅｒｉｎｅｐｒｏ ｔｅａｓｅｓ,ＭＡＳＰｓ)固定补体 ,一旦激活 ,ＭＡＳＰｓ切割下游成分 ,产生瀑布效应 ,通过末端补体成分的装配介导的溶解复合物或是通过调理吞噬而使外来异物得以清除[1] 。ＭＡＳＰｓ属于丝氨酸蛋白激酶家族 (ｓｅｒｉｎｅｐｒｏｔｅａｓｅｆａｍｉｌｙ) …     

MCP-1在肾小球肾炎中的表达及其意义

目的：探讨肾小球肾炎患者肾组织单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）的表达及其与肾间质中浸润的单核细胞（ＭＣ）数、肾小管病理损伤、尿蛋白量之间的关系。方法：用免疫组化技术检测５例正常及３１例原发性肾炎肾组织中ＭＣＰ－１、ＣＤ６８的表达。结果：正常肾组织有极少量ＭＣＰ－１表达及ＭＣ浸润;膜性肾小球肾炎（ＭＮ）组肾小球内未见ＭＣＰ－１、ＣＤ６８表达;系膜增生性肾小球肾炎（ＭｓＰＧＮ）、膜性增生性肾小球肾炎     

人子宫内膜癌单克隆抗体的制备及鉴定

1　实验资料人子宫内膜腺癌细胞ＡＮ3ＣＡ来自中国典型培养物保藏中心 .培养基及牛血清购自Ｇｉｂｃｏ公司 ;ＨＲＰ酶标抗体及ＡＢＣ试剂盒购自Ｚｙｍｅｄ公司 ;ＢＡＬＢ/ｃ小鼠购自中国医学科学院实验动物中心 .把人子宫内膜腺癌细胞ＡＮ3ＣＡ与Ｆｒｅｕｎｄ佐剂混合后免疫 8ｗｋ龄ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 .加强免疫 4次 .用聚乙二醇 (Ｍｒ 4 0 0 0 ,Ｍｅｒｅｋ) ,按常规方法将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞ＳＰ2 / 0 Ａｇ8.6 35细胞融合 .杂交瘤细胞培养于 10 0ｍＬ·Ｌ-1牛血清 ＨＡＴ ＲＰＭＩ选择性培养基 .采用酶联免疫吸附实验 (ＥＬＩＳＡ)…     

小儿恶性淋巴瘤20例病理分析

本文分析 2 0例小儿淋巴瘤的组织学分型 ,并对肿瘤组织进行了免疫组化染色 ,结合患者预后资料 ,分析了小儿淋巴瘤的主要类型与预后情况。1 材料与方法2 0例标本来自本院和南通医学院附属医院 ,所有标本经 1 0 %福尔马林固定 ,常规制片染色 ,其中 1 9例用Ｓ-Ｐ法进行免疫组化标记 ,非霍奇金淋巴瘤 (ＮｏｎＨｏｄｇｋｉｎＬｙｍｐｈｏｍａ,简称ＮＨＬ) ,做ＬＣＡ ,ＣＤ2 0 ,ＣＤ3标记 ,有瘤巨细胞者加做ＣＤ68,霍奇金病 (ＨｏｄｇｋｉｎＤｉｓｅａｓｅ,简称ＨＤ)组做ＣＤ30标记 ,所有试剂购自上海中达公司。2 结　　果临床资料　本组 2 0例 …     

卵巢癌细胞膜流动性与化疗增敏作用的相关性研究

研究化疗增敏剂三苯氧胺、环孢菌素Ａ（ＣｓＡ），水杨酸偶氮磺胺嘧啶（ＳＳ）。两性霉素Ｂ（ＡｍＢ）、维拉帕米（ＶＰＭ）及利尿酸钠（ＥＡ）对人卵巢癌细胞膜流动性的影响，探讨其与化疗增敏的关系。结果表明：（１）ＴＡＭ降低肿瘤细胞膜流动性，ＡｍＢ、ＣｓＡ和ＳＳ增加膜流动性。随药物浓度增高，膜流动性改变增大；（２）ＴＡＭ引起膜流动性降低与ＣＤＤＰ聚积量无关（Ｐ〉０．０５），而ＡｍＢ，ＣｓＡ和ＳＳ使用膜流动性增     

体外检测近交系小鼠HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞方法的建立

通过磷酸钙法用含ＨＢＶＳ基因的质粒ｐＲｃ／ＣＭＶＳ与含筛选标记基因—ｎｅｏｒ基因的质粒ｐＳＶ２ｎｅｏ对ＢＡＬＢ／Ｃ近交系小鼠肥大细胞瘤细胞株—Ｐ８１５细胞进行了质粒共转染，并经Ｇ４１８筛选得到了Ｇ４１８抗性细胞，即Ｐ８１５Ｓ细胞。斑点杂交和免疫组化实验分别证实Ｐ８１５Ｓ细胞内有ＨＢＶＳ基因的存在；Ｐ８１５Ｓ细胞浆内和膜上有ＨＢｓＡｇ的表达。表明了Ｐ８１５Ｓ细胞可作为体外检测ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠ＨＢｓＡｇ特异性ＣＴＬ的靶细胞。进一步对Ｐ８１５Ｓ细胞成功地进行５１Ｃｒ标记，以及标记靶细胞５１Ｃｒ最大释放值和自然释放值的测定表明：利用５１Ｃｒ释放法体外检测近交系小鼠（ＢＡＬＢ／Ｃ）ＨＢｓＡｇ特异性ＣＴＬ功能的方法被建立。     

快速免疫组织化学染色技术

为探索免疫组织化学染以全程最短时间，采用微波技术，用ＥＭＡ、Ｋｅｒａｔｉｎ、Ｄｅｓｍｉｎ、Ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ、ＬＣＡ、Ｓ－１００、ＧＦＡＰ７种抗体和ＡＢＣ、ＳＡＢＣ、Ｓ－ＰＫｉｔ，对不同的肿瘤组织进行免疫组化染色，并与常规免疫组化方法比较。结果显示：快速免疫组化全程时间在６０￣８０ｍｉｎ左右；除膜抗原外，其余抗体的染色效果与常规免疫组化相同或更优；生物素化二抗和酶联亲和素试剂盒则以Ｓ－ＰＫｉｔ最好     

体外检测近交系小鼠HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞方法的建立

通过磷酸钙法用含ＨＢＶＳ基因的质粒ｐＲｃ／ＣＭＶＳ与含筛选标记基因－ｎｅｏ基因的质粒ｐＳＶ２－ｎｅｏ对ＢＡＬＢ／Ｃ近交系小鼠肥大细胞瘤细胞株Ｐ８１５细胞进行了质粒共转染，并经Ｇ４１８筛选得到了Ｇ４１８抗性细胞，即Ｐ８１５－Ｓ细胞，斑点杂交和免疫组化实验分别证实Ｐ８１５－Ｓ细胞内有ＨＢＶＳ基因的存在；Ｐ８１５－Ｓ细胞浆内和膜上有ＨＢｓＡｇ的表达。表明了Ｐ８１５－Ｓ细胞要作为体外检测ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠Ｈ     

蚂蚁提取液纤溶活性的实验研究

实验中发现蚂蚁有抗炎、镇痛、改善微循环等药理作用。本实验就是通过ＰＢＳ平皿法证明其活血化瘀作用。1　实验材料1 .1　试剂与样品拟黑多刺蚁 (ＰｏｌｙｒｈａｃｈｉｓＶｉｃｉｎａＲｏｇｅｒ) ,购自安徽亳州药材公司 ;ＮａＣｌ、ＫＣｌＮａ2 ＨＰＯ4· 7Ｈ2 Ｏ、ＫＨ2 ＰＯ4购自南京医药集团 ,均为ＡＲ级 ;人纤维蛋白原、凝血酶购自南京医药集团 ;尿激酶 ,由中国药品生物制品检定所提供 ;拟黑多刺蚁的水提取浓缩液 ,用ＧＰＢＳ液稀释成 1ｍＬ相当于原生药0 .1ｇ。1 .2　试剂配制①ｐＨ 7.3的ＰＢＳ缓冲液 ( 80ｇＮａＣｌ、1 1 .5ｇＮａ2…     

PDGF—B基因的膜型表达产物促进血管平滑肌细胞增殖和胶原合成

考察ＰＤＧＦ－Ｂ基因的膜型表达产物对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）增生、胶原合成的影响。制备供转导人ＰＤＧＦ－Ｂ基因的重组逆转录病毒，感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，受染ＮＩＨ３Ｔ３细胞经筛选、扩增后，制备细胞膜上表达产物ＰＤＧＦ－ＢＢ以观察其对ＶＳＭＣｓ生长的影响，并以３Ｈ－ＰｒｏＬｉｎｅ掺入率评估该重组蛋白对ＶＳＭＣｓ胶原合成的影响。结果：重组逆转录病毒介导ＰＤＧＦ－Ｂ基因转移并表达出具有生物学活性的重组ＰＤＧＦ－ＢＢ，免疫荧光细胞化学染色证实其表达；该膜型重组蛋白可促进ＶＳＭＣｓ增殖和胶原合成。     

肝外胆管癌组织中的HBsAg和HCV NS5抗原检测

1　材料和方法11　材料　51例肝外胆管癌(ＥＢＤＣ)选自解放军总医院外科手术切除标本,均为不同分化程度的腺癌,经10%甲醛固定、脱水,常规石蜡包埋。其中2例血清ＨＢｓＡｇ阳性(39%),9例抗ＨＣＶ阴性,2例同时检测了血清ＨＣＶＲＮＡ和ＨＢＶＤＮＡ,均为阴性,40例无血清ＨＣＶ相关检查。鼠抗ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶＮＳ5抗体、生物素化二抗、ＨＲＰ标记的链霉亲合素(ＳＡ/ＨＲＰ),购自北京中山生物技术有限公司。12　方法　采用酶标链霉亲合素生物素(ＳＰ)方法。切片脱蜡至水,微波炉抗原修复,血清封闭,加1抗(1∶50稀释),4℃过夜,加二抗(1∶200稀…     

单核细胞凝血/纤溶因子的测定在冠心病血瘀症中的应用及与脂类水平的关系

动脉粥样硬化 (ＡＳ)是冠心病 (ＣＨＤ)的发病基础 ,高脂血症作为ＡＳ的独立危险因子已被广泛认可。近年来 ,随着对人体凝血 /纤溶物质的深入研究 ,对人外周血单核细胞 (ＰＢＭＣ)在ＣＨＤ高凝状态的形成及在ＡＳ基础上的血栓形成过程中的作用越来越受到重视[1] 。本文测定了ＣＨＤ血瘀症和非血瘀症患者ＰＢＭＣ表达的促凝活性 (ＰＣＡ)、组织型纤溶酶原激活物 (ｔ -ＰＡ)及其抑制物 (ＰＡＩ - 1)活性 ,并与血浆脂类水平关系进行了分析。现报道如下 :1　材料与方法1 1　对象　本组冠心病血瘀症组和非血瘀症组各2 0例 ,冠心病诊断按ＷＨＯ诊…     

急性颅脑损伤患者脑脊液中髓鞘碱蛋白的变化及其意义

目的：为探讨急性颅脑损伤患者脑脊液（ＣＳＦ）中髓鞘碱蛋白（ＭＢＰ）的变化及意义。方法：用放射免疫分析法测定３４例急性颅脑损伤组患者ＣＳＦ中ＭＢＰ。结果：ＣＳＦ中ＭＢＰ在急性颅脑损伤组明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）,在ＡＤＣＩ患者明显高于ＡＬＣＩ患者（Ｐ＜０．０１）;ＡＤＣＩ患者入院时ＧＣＳ明显低于ＡＬＣＩ患者,而ＧＯＳ明显差于ＡＬＣＩ患者（Ｐ＜０．０１）;ＭＢＰ与ＧＣＳ和ＧＯＳ均呈明显负相关（ｒ＝－０．６１２,ｒ＝－０．５９８,Ｐ＜０．０１）。结论：急性颅脑损伤患者ＣＳＦ中ＭＢＰ升高,测定ＣＳＦ中ＭＢＰ有助于估计急性颅脑损伤患者病情轻重及预后;有助于ＡＤＣＩ的诊断。     

奥曲肽对SGC-7901细胞中Bcl-2和Bax基因的调控作用

我们以前研究发现奥曲肽可诱导人胃癌细胞株ＳＧＣ 790 1细胞凋亡 ,但其作用机制目前国内外未见报道。为此 ,我们就奥曲肽对ＳＧＣ 790 1细胞中Ｂｃｌ 2和Ｂａｘ基因的调控作用进行了研究。1　材料与方法1.1　主要试剂及仪器　　奥曲肽由瑞士Ｓａｎｄｏｚ药厂惠赠 ,人胃癌细胞株ＳＧＣ 790 1由本科培养 ,逆转录试剂盒ＡｓｃｃｅｓｓＲＴ ＰＣＲＳｙｓｔｅｍ (Ａ12 5 0 )购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司 ,ＴｒｉｐｕｒｅＴＭＩｓｏｌａｔｉｏｎＲｅａｇｅｎｔｋｉｔ购自德国宝灵曼公司 ,2 40 0型ＰＣＲ循环仪为美国Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ公司产品 ,…     

静吸复合麻醉中不同小剂量芬太尼对脑电边缘频率和双波谱指数的影响

目的　研究静吸复合麻醉中不同小剂量芬太尼对脑电边缘频率 (ＳＥＦ)和双波谱指数 (ＢＩＳ)的影响。方法　随机将ＡＳＡⅠ～Ⅱ级病人 30例分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 ,于全麻诱导吸入安氟醚达 0 8ＭＡＣ后 ,3组分别静注芬太尼 3μｇ·ｋｇ-1、5 μｇ·ｋｇ-1、7μｇ·ｋｇ-1,于给药后 6ｍｉｎ记录每组病人的ＭＡＰ、ＨＲ、ＳＥＦ及ＢＩＳ。结果　 3组组内、组间ＭＡＰ、ＨＲ相比均无显著性差异 (Ｐ >0 .0 5 )。与给药前相比 ,Ⅰ组给药后ＳＥＦ显著性降低 (Ｐ <0 .0 5 ) ,ＢＩＳ无显著性差异 (Ｐ >0 .0 5 ) ,Ⅱ组给药后ＳＥＦ、ＢＩＳ均显著性降低 (…