补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢微血管密度的影响

目的:探讨"补益阳明津气"延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理,并以此佐证中医传统经典理论"五七,阳明脉衰"在绝经前期生殖轴机能衰老中的重要影响,为促进绝经前期妇女健康、延缓绝经前期卵巢机能衰老、防治相关病症提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据.方法:4～6个月龄雌性大鼠为正常对照组,10～12个月龄、阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型.模型动物随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组、六味地黄丸组.灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢用于检测卵巢血管.结果:与模型对照组比较,补益阳明津气可使卵巢内微血管数目增加,改善卵巢局部微循环,增加卵巢血供.结论:益胃汤具有改善卵巢局部血供的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一.     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢Caspase3表达影响的实验研究

目的:探讨"补益阳明津气"延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理,并以此佐证中医传统经典理论"五七,阳明脉衰"在绝经前期生殖轴机能衰老中的重要影响。为促进绝经前期妇女健康,延缓绝经前期卵巢机能衰老,防治相关病症,提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据。方法:4~6个月龄雌性大鼠为正常对照组;10~12个月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为:(1)益胃汤高剂量组;(2)益胃汤中剂量组;(3)益胃汤低剂量组;(4)己烯雌酚组;(5)模型对照组;(6)六味地黄丸组。灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢用于检测卵巢Caspase3。结果:与模型对照组比较,使卵巢Caspase3表达减少。结论:实验研究提示益胃汤具有抑制卵巢细胞凋亡的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一。     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢门血管影响的实验研究

目的探讨“补益阳明津气”对初老雌性大鼠卵巢门血管的影响,并以此佐证中医传统经典理论“五七,阳明脉衰”在绝经前期生殖轴机能衰老中的重要影响。为促进绝经前期妇女健康、延缓绝经前期卵巢机能衰老、防治相关病症提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据。方法4-6月龄雌性大鼠为正常对照组;10—12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组和六味地黄丸组。灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢用于检测卵巢门血管。结果与模型对照组比较,益胃汤高、中剂量组卵巢门血管壁变薄,管腔扩大,卵巢血供增加。结论实验研究提示益胃汤具有改善卵巢局部血供的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机制之一。     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢流式细胞双标百分比的影响

目的:探讨"补益阳明津气"延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理.为促进绝经前期妇女健康,延缓绝经前期卵巢机能衰老,防治相关病证,提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据.方法:4～6月龄雌性大鼠为正常对照组;10～12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型.模型动物随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组、六味地黄丸组;灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢检测卵巢流式细胞双标百分比.结果:与模型对照组比较,益胃汤可使卵巢流式细胞双标百分比降低.结论:实验研究提示,益胃汤具有抑制卵巢细胞凋亡的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一.     

补益阳明津气方药对雌性初老大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响

目的:经实验研究探讨“补益阳明津气”方药对雌性初老大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响。方法:4月龄～6月龄雌性大鼠为正常对照组;10月龄～12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性犬鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为:(1)益胃汤高剂量组、(2)益胃汤中剂量组、(3)益胃汤低剂量组、(4)己烯雌酚组、(5)模型对照组。各模型组灌药4周后,下丘脑制成匀浆,荧光分光分析法测定5-HT、NE、DA。结果:与模型对照组比较,“补益阳明津气”方药益胃汤能明显升高下丘脑5-HT水平及5-HT/NE比值,降低下丘脑DA水平及DA/NE比值。结论:“补益阳明津气”方药益胃汤能调节雌性初老大鼠下丘脑神经递质的紊乱,进而起到延缓生殖轴机能衰老的作用。     

补益阳明津气方药对雌性初老大鼠神经内分泌影响的实验研究

1材料与方法1·1实验动物SD雌性大鼠,10月龄~12月龄,符合初老模型动物60只,体重310g±20g;4月龄~6月龄,体重230g±20g,10只;由成都中医药大学实验动物中心提供。1·2药品与试剂益胃汤由成都中医药大学药学院根据文献工艺制备。己烯雌酚:1mg/片由成都制药二厂生产,批号20021106。超敏雌二醇放免试剂盒购自天津天硕公司;孕酮、睾酮、促卵泡生成激素、促黄体生成激素放免试剂盒购自天津德普生物技术和医学产品有限公司;β-内啡肽放免试剂盒购自海军放免技术中心;ERrabbit polyclonal IgG1、FSHR goat polyclonal IgG1、GnRHgoat polyclon…     

益胃汤对初老雌性大鼠卵巢细胞凋亡线粒体通路的影响

目的 探讨益胃汤延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理.方法 4~6月龄雌性SD大鼠为正常对照组;10~12月龄、阴道细胞学表现动情期延长的雌性SD大鼠作为初老大鼠模型,随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组.灌药4周后,取左侧卵巢用于检测卵巢Bcl-2、Bax、Caspase3、细胞色素C.结果 与模型对照组比较,益胃汤可使卵巢Bcl-2表达增强,Bax表达减弱,Bcl-2/Bax比例增加(P<0.05),Caspase表达减少,细胞色素C减少,卵巢细胞凋亡减少,但达不到正常对照组水平(P＞0.05),且益胃汤高、中、低剂量组在实验中呈现一定的量效关系.结论 益胃汤通过抑制线粒体通路引起的级联反应抑制初老雌性大鼠卵巢细胞凋亡,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一.     

补经合剂对初老大鼠卵巢细胞Fas、Caspase-3表达的影响

目的:补经合剂具有补肾益精、养血益气的功效,临床上用于治疗月经后期或伴量少属肾虚血亏者。本研究着重以该方对大鼠卵巢卵泡细胞凋亡的影响,拟从分子生物学水平探讨该方的作用机理。方法:以雌性初老大鼠为自然肾虚模型,采用免疫组织化学方法观察了补经合剂对肾虚大鼠卵巢的卵泡细胞 Fas表达、凋亡蛋白酶 Caspase-3表达的影响。结果:补经合剂高剂量组(相当于原生药31g/kg)能抑制肾虚大鼠卵巢的卵泡细胞凋亡蛋白酶 Caspase-3表达(P<0.05);同时中成药乌鸡白凤丸也具有相似的作用。结论:补经合剂临床上用于治疗月经后期或伴量少的机理,可能与该药抑制肾虚大鼠卵巢的卵泡细胞凋亡蛋白酶Caspase-3表达水平有关。     

补益阳明津气对围卵巢早衰女性卵巢藏泻的影响

有研究表明,卵巢早衰是一个渐进的过程,从卵巢储备功能下降到卵巢功能衰竭闭经大约需要1—6年,临床上中医多以补肾为大法用治疗。近年来,临床上发现患者多以津亏血燥血瘀为主。我们根据中医传统经典理论“五七,阳明脉衰”,探讨在“补益阳明津气”的基础上清热疏肝活血对围卵巢早衰及卵巢储备功能下降妇女卵巢功能的影响,望为延缓卵巢机能衰老、防治卵巢早衰相关病症提供一种新的论治思路,现报道如下。     

瓜石汤对初老雌陛大鼠卵巢血管变化的影响

目的：探讨瓜石汤对初老雌性大鼠卵巢血管的影响及机制。方法：筛选10～12月龄初老大鼠随机分组,灌药4周后．取血检测血管内皮生长因子（VEGF）;剖腹取卵巢常规HE染色,光镜观察其组织形态学变化,测量卵巢血管壁厚度、血管腔面积及卵巢直径。结果：在升高初老大鼠血清VEGF方面,各用药组均有效,与模型组比较有统计学意义（P〈0．05）;各用药组大鼠卵巢直径均有所增加．且瓜石汤高剂量组、六味地黄丸组与模型组比较,其差异有统计学意义（P〈0．05）;瓜石汤中、高剂量组与六味地黄丸组可使初老大鼠卵巢血管腔面积增加,降低大鼠卵巢血管壁厚度面积比,与模型组比较均有统计学意义（P〈0．05）。结论：瓜石汤可以升高初老模型大鼠血清VEGF水平,促进初老大鼠卵巢血管再生,增加卵巢门血管腔面积、扩张血管,增加卵巢血液供给．调节血流,改善衰老卵巢组织的缺血、缺氧状况。     

重复制动应激对雌性大鼠卵巢功能的影响

目的观察重复应激对雌性大鼠卵巢功能的影响,同时观察更年期动物卵巢功能的变化,并对二者进行比较.方法选用性成熟雌性大鼠每天制动应激 1次,连续 15 d,通过阴道涂片观察性周期变化,同时观察血浆雌二醇及孕酮水平的变化.结果 重复应激可引起雌性大鼠卵巢功能紊乱或减退,性周期表现为延长或无生理规律或无性周期交替而持续处于间情一期;卵巢分泌雌二醇功能减退,分泌孕酮功能明显紊乱,性周期中各阶段血浆雌二醇水平显著降低和 /或生理周期失常或消失,孕酮水平显著升高和生理分泌模式失常,部分动物血浆孕酮水平向更年期动物变化.结论 应激可诱导卵巢功能紊乱和退化,此模型适用于防治女性卵巢功能紊乱和退化性疾病的药物药效学研究.     

益气活血中药对急性肺损伤模型大鼠血液流变学指标的影响

目的探讨益气活血中药（黄芪与丹参）对急性肺损伤模型大鼠血液流变学的影响。方法 SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、中药组,予以益气活血中药黄芪与丹参干预,采用LPS气管滴入法制备急性肺损伤模型,检测各组大鼠血液流变学指标的变化。结果中药组血液黏度、红细胞压积和纤维蛋白原含量均低于模型对照组,与正常对照组比较无显著差异。结论益气活血中药（黄芪和丹参）可能是通过降低血液黏度、改善其肺循环,从而起到对模型大鼠的防治作用。     

益气活血中药对脑出血大鼠脑组织Tie-2受体蛋白表达的影响

目的测定补阳还五汤及其益气组分、活血组分干预后脑出血大鼠脑损伤区组织Tie-2的表达,初步探讨益气活血中药治疗脑出血的作用机制。方法SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、益气活血组、益气组和活血组。用Ⅶ型胶原酶诱导脑出血大鼠模型。各组分别灌服相应益气活血法代表方补阳还五汤全方及其益气组分、活血组分药物,于术后1、4、7、14、21和28d分别检测血肿侧脑组织Tie-2的表达。结果正常组、假手术组各时间点Tie-2的表达未见明显阳性信号;模型组、益气组、活血组及益气活血组脑出血后1d即有Tie-2表达,模型组在21d达到高峰、随后下降,益气组、活血组及益气活血组表达高峰时间提前至14d,益气活血组各个时间点表达均高于同时间点其它组。结论益气活血中药可能通过使脑出血血肿周围脑组织Tie-2受体的表达增强,而促进脑出血损伤区血管新生和成熟的作用,并促进脑出血大鼠神经功能的恢复。     

益气活血中药对急性肺损伤大鼠炎症因子及Toll样受体4 mRNA表达的影响

目的:观察和探讨益气活血中药对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠支气管肺泡灌洗液中(BALF)炎症因子及肺组织中Toll样受体4(TLR-4)mRNA表达的影响。方法:SD雄性大鼠72只,随机分成正常组、模型组、地塞米松组、益气活血中药组4组,每组18只;除正常组气管内滴注生理盐水,其余各组滴注LPS(5 mg·kg~(-1))制备ALI模型,造模前后3 d各组予以相应药物或生理盐水灌胃;每组分别于造模后8,24,72 h各处死6只,苏木素-伊红(HE)染色光镜下观察各组大鼠肺组织病理学改变,酶联免疫(ELISA)法检测BALF中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL~(-1)β),IL-6的浓度,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)测定肺组织中TLR-4 mRNA的表达。结果:肺组织病理学评分:与正常组比较,同时相的LPS各组均显著升高(P0.01);与模型组比较,地塞米松组和中药组均降低(P0.05,P0.01),且72 h组降低最为明显。大鼠BALF中TNF-α,IL~(-1)β,IL-6浓度:LPS造模各组均明显高于同时相的正常组(P0.01),模型组均高于中药组和地塞米松组(P0.01),且随着时间的延长,模型组逐渐上升,而药物干预组逐渐降低(P0.05,P0.01)。肺组织TLR-4mRNA相对表达量:与正常组比较,LPS造模各组同时相肺组织TLR-4 mRNA的相对表达量均显著升高(P0.01),以模型组8 h点为最高;与模型组比较,中药组各时间点表达均降低(P0.05,P0.01)。结论:益气活血中药能够降低急性肺损伤大鼠BALF中TNF-α,IL~(-1)β,IL-6的水平,减轻肺组织的病理损伤,其防治ALI的作用机制可能与抑制TLR-4 mRNA的表达有关。     

益气活血药物对脑梗死恢复期大鼠c-fos基因表达的影响

目的:基于c-fos mRNA观察益气活血药物对脑梗死恢复期大鼠的影响。方法:以Longa的方法略作改良制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞模型,按照随机数字表的方法随机分为正常组、模型组、假手术组、益气组、活血组、益气活血组、ERK抑制剂7组,采用RT-PCR技术,在治疗28 d观察益气活血药物对脑梗死恢复期大鼠梗死皮层c-fos mRNA表达的影响。结果:在治疗28 d后,模型组较正常组c-fos mRNA表达明显下降(P0.05),益气活血组与ERK抑制组较模型组有一定程度提高(P0.05),活血组与模型组比较,无明显统计学意义(P0.05),益气组的c-fos mRNA表达低于其他各组(P0.05)。结论:在脑梗死恢复期,益气活血药物在一定程度上可改善脑缺血,优于单纯益气与单纯活血,其疗效机制可能与提高c-fos mRNA的表达有关。     

六经气津互化论

气与津皆生于水谷,气生于水,水化于气,津即为水。由于气津互化的密切关系,故任何一方的改变,都会影响到另一方,即所谓水化于气,亦能病气;气生于水,亦能病水。因此,太阳经气可概括为两大功能,即卫外和气化,是由气津互化而体现的;阳明气津之间,表现为相互制约;少阳经的气津互化,关系到少阳气机的条达舒畅及三焦水道的通调运使;太阴脾气的健旺,可使津液化生有源;少阴心肾精血充沛,滋养有时,才可使心肾之气化生有源;而厥阴之气的条达顺畅,又可维持津液代谢的平衡状态。     

苗药天门冬对衰老大鼠卵巢保护作用

目的:探讨天门冬对衰老雌鼠卵巢沉默信息调节因2相关酶1(SIRT1)、p53水平变化。方法:以18只清洁级SD雌性大鼠为研究对象,对照组和衰老组雌鼠自由饮用自来水、天门冬组饮用天门冬水煎剂,每3 d对雌鼠进行称重,于6和72周股动脉取血处死。光镜下计数卵巢闭锁卵泡和黄体,采用qPCR检测SIRT1 mRNA,免疫组化法检测p53水平。结果:与对照组比较,衰老组和天门冬组体重逐渐增加,差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,衰老组和天门冬组闭锁卵泡和p53蛋白明显增加,差异均有统计学意义(P0.05)。天门冬组闭锁卵泡和p53蛋白低于衰老组,差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,衰老组和天门冬组黄体和SIRT1 mRNA明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。衰老组黄体和SIRT1 mRNA低于天门冬组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:衰老可促进卵泡闭锁,黄体退化,SIRT1表达降低,p53水平增高。通过给予天门冬干预,可降低卵泡闭锁,缓解黄体退化,SIRT1表达增高,p53水平降低。     

益气活血药对心肌梗死大鼠心脏结构和Cx43表达的影响

目的 探讨益气活血药对心肌梗死（myocardial infarction,MI）大鼠心脏结构及心肌电偶联的关键结构缝隙连接蛋白43（connexin 43,Cx43）表达的影响.方法 结扎雄性SD大鼠冠状动脉前降支建立MI模型,将30只MI大鼠随机分为模型组、益气活血组（参芍片0.25 g/kg联合复方丹参片0.75 g/kg）和倍他乐克组（12 mg/kg）,每组10只,于造模成功后24 h开始灌胃,1次/日,连续4周.另设假手术组10只,给予等量去离子水灌胃.4周后取材进行苏木素-伊红染色观察心肌组织病理,图像分析测量左室内径和心肌梗死百分比,免疫组织化学法检测心肌Cx43的表达.结果 与假手术组比较,术后4周模型组大鼠左室内径明显增大,心肌Cx43表达的平均光密度值（average optical density,AOD）、阳性表达面积（Area）和积分光密度（integral optical density,IOD）明显降低（P〈0.01）.与模型组比较,益气活血组和倍他乐克组的左室内径和心肌梗死百分比均明显减少（P〈0.05或P〈0.01）,在心肌Cx43的表达上,仅益气活血组心肌Cx43表达的AOD和IOD明显增加（P〈0.05或P〈0.01）.结论 益气活血治疗能减少MI大鼠左室内径和心肌梗死百分比,增加心肌Cx43表达强度和部分好转Cx43弥散表达状态,对MI后缺血心肌有保护作用,可能是稳定MI后心肌细胞间电偶联的机制之一.