性激素对人卵巢颗粒细胞凋亡的作用

目的通过探讨雌、雄激素对人卵巢颗粒细胞凋亡的作用,阐明其调节人类卵泡闭锁的分子机制。方法应用细胞培养、选择性ＤＮＡ抽提和琼脂糖凝胶电泳技术分析闭锁卵泡和发育中卵泡颗粒细胞的凋亡状况,及雌激素（１μｇ／ｍｌ）、雄激素（１μｇ／ｍｌ）对体外培养发育中的卵泡颗粒细胞凋亡的作用;用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术检测经雌、雄激素刺激后发育中的卵泡颗粒细胞ｂｃｌ－２基因ｍＲＮＡ表达的变化。结果闭锁卵泡颗粒细胞均出现凋亡,ｂｃｌ－２基因ｍＲＮＡ表达下降,雌激素则可致相反的效应。结论卵泡闭锁的本质可能是其细胞发生凋亡;雄激素促进卵泡闭锁、雌激素对抗雄激素作用及促进卵泡发育的机理,可能与调节内源性核酸内切酶的活化和ｂｃｌ－２基因表达有关     

骨形态发生蛋白15(BMP15)/生长分化因子9(GDF9)在卵巢功能及女性生育过程中的作用

人类卵巢功能的调节机制极其复杂,是由多个卵巢内旁分泌信号整合的中枢神经系统、垂体及卵巢之间进行复杂对话的过程。卵子来源的骨形态发生蛋白15(BMP15)及生长分化因子9(GDF9)是近年来新发现的卵巢内旁分泌调节机制相关调节分子,已逐渐成为卵巢功能维持及卵子发生调节的研究热点。BMP15/GDF9在女性生育中的主要的生物学功能包括:1促进卵泡生长及成熟(从不依赖于促性腺激素的原始卵泡期开始);2调节颗粒细胞对促卵泡生成素(FSH)作用的敏感性,决定卵泡排出的比例;3预防颗粒细胞凋亡;4促进卵泡的发育潜能。BMP15/GDF9异常将导致Tunner综合征、卵巢功能不全,还可能与PCOS,异卵双胎有关;而卵泡液中BMP15水平是预测卵巢低反应患者IVF结局的一个潜在指标。     

卵泡膜细胞与卵巢功能的调控

卵泡膜细胞作为卵巢中组成卵泡的3种主要细胞之一,在卵巢的各项功能如甾体合成、卵泡发育和卵泡闭锁中都发挥了一定的作用。卵泡膜细胞起源于卵巢中类似成纤维细胞样的基质细胞,其可分泌雄激素,与卵泡刺激素(FSH)相互作用促进颗粒细胞增殖,促进卵泡的发育。有研究认为应当把卵泡膜细胞在基底膜外开始分化作为卵泡生长的起点。某些卵泡膜细胞源性生长因子可促进有丝分裂,阻止颗粒细胞凋亡,在卵泡闭锁过程中发挥重要的调控作用。故探讨卵泡膜细胞在卵巢功能调控中的作用有临床实际意义。     

条件基因敲除技术在卵泡发育调控机制研究中的应用进展

卵泡发育是受内分泌、旁分泌及基因调节的复杂生理过程。条件基因敲除能选择去除调控特定发育阶段特定细胞或器官的基因,是在体基因功能研究的主要手段。近年来该技术被广泛应用于卵泡发育调控机制的研究。本文综述了条件基因敲除技术在始基卵泡激活、卵母细胞成熟、排卵、黄体形成及早期胚胎发育等机制研究中的应用进展。     

βB2晶状体蛋白对小鼠卵巢发育及动情周期的影响

目的:初步探讨βB2晶状体蛋白(Crybb2)参与调节生殖过程的作用机制。方法:选取11-13周龄βB2基因敲除(KO组,n=19)与野生型C57BL/C(WT组,n=23)雌性小鼠,阴道涂片观察动情周期变化;HE染色观察卵巢病理变化;光学显微镜下计数卵巢最大切面原始卵泡、初级卵泡、闭锁卵泡;Western blotting和免疫组织化学确定βB2晶状体蛋白在卵巢组织中的表达与定位。结果:βB2晶状体蛋白主要表达在WT组小鼠卵巢颗粒细胞内。与WT组小鼠相比,KO组小鼠卵巢相对重量减轻,动情周期紊乱,原始卵泡、初级卵泡减少,闭锁卵泡增多。结论:βB2基因敲除小鼠的动情周期及卵巢发育异常,βB2晶状体蛋白对小鼠卵巢的发育有重要影响。     

干细胞因子与卵泡发育的关系

干细胞因子(SCF)是酪氨酸激酶受体的配体，能够促进细胞的增殖和分化。卵巢组织可表达SCF。在卵泡发育过程中，SCF可诱导原始卵泡发育、启动生殖中心发生，同时促进卵泡和卵母细胞发育，与卵泡发育过程中类固醇激素的产生有一定的关系。表明SCF可能是重要的卵巢功能局部调节因子之一。     

骨形态发生蛋白4/Smad信号通路在小鼠原始卵泡发育中的作用及作用机制

目的:探讨骨形态发生蛋白4(BMP4)/Smad信号通路在小鼠原始卵泡发育中的作用及作用机制。方法:取3日龄昆明雌性小鼠卵巢体外培养,添加重组BMP4,并以不添加BMP4为对照,采用HE染色和TUNEL法,检测BMP4在原始卵泡存活和发育中的作用;采用免疫组织化学、Westernblotting与RT-PCR检测BMP4对原始卵泡中p-Smad1/5/8、sohlh2及c-kit表达的影响。结果:①BMP4组卵巢直径明显变大(1.17±0.24 mm vs 0.65±0.13 mm,P<0.05),原始卵泡数(45.3±4.2枚)明显低于对照组(55.0±5.0枚)(P<0.05),而初级卵泡的数(25.3±2.5枚)明显多于对照组(19.0±1.0枚)(P<0.05)。②TUNEL结果显示BMP4组凋亡卵母细胞比例明显低于对照组(P<0.05)。③免疫组织化学、Western blotting与RT-PCR结果显示,与对照组相比,BMP4组原始卵泡卵母细胞中p-Smad 1/5/8、Sohlh2及C-kit的表达均显著升高(P<0.01)。结论:BMP4/Smad信号通路可促进小鼠原始卵泡向初级卵泡转变,并抑制卵母细胞的凋亡;其可能通过上调Sohlh2及C-kit基因的表达而发挥作用。     

颗粒细胞与卵母细胞自噬对卵泡发育和闭锁的调控

卵巢早衰(POF)、多囊卵巢综合征(PCOS)等卵巢生殖疾病发病率日益增高,已经成为严重危害女性身心健康的疾病。目前研究表明卵巢生殖疾病中各时期卵泡的闭锁由颗粒细胞(GCs)和卵母细胞凋亡引起,随着对卵泡发育中分子机制研究的深入,揭示了GCs和卵母细胞的凋亡并不是导致卵泡闭锁的唯一因素,自噬的诱导同时参与了卵泡的生长、闭锁和分化,介导了颗粒细胞和卵母细胞的程序性死亡。本文就当前GCs与卵母细胞自噬的诱导进行系统回顾,总结卵巢卵泡发育和闭锁过程中细胞自噬机制,旨在为后续研究提供参考。     

IGFs和EGF对卵泡发育的调控

胰岛素样生长因子(insulin-like grouth factors,IGFs)和表皮生长因子(epidermalgrouth factor,EGF)对卵泡发生的启动,生长,成熟,闭锁以及卵泡发育异常均发挥了重要作用。IGFs和EGF在卵巢内与受体相互作用,通过调节类固醇激素分泌、FSH和LH的表达,间接地调节卵泡发育。同时,它们的过量表达,又可能引起卵巢囊肿、卵巢肿瘤等生殖疾病。     

干细胞因子与卵泡发育的关系

干细胞因子（SCF）是酪氨酸激酶受体的配体，能够促进细胞的增殖和分化。卵巢组织可表达SCF。在卵泡发育过程中，SCF可诱导原始卵泡发育，启动生殖中心发生。同时促进卵泡和卵母细胞发育，与卵泡发育过程中类固醇激素的产生有一定的关系。表明SCF可能是重要的卵巢功能局部调节因子之一。