重组华支睾吸虫26kDaGST蛋白用于检测特异抗体的研究

目的 评价重组华支睾吸虫26kDaGST蛋白(rCs26GST)在华支睾吸虫病血清学诊断上的价值。方法使用rCs26GST抗原,以酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫增强化学发光法(immuno-enhanced chemilmninescence,immuno-ECL)检测华支睾吸虫病者、其它寄生虫感染者及健康人血清特异性IgG和IgE抗体,分析rCs26GST抗原用于检测的敏感性和特异性。结果使用rCs26GST抗原,ELISA法检测了30份华支睾吸虫感染者血清、肺吸虫病人血清15份、日本血吸虫病人血清20份、无寄生虫感染的健康人血清40份,华支睾吸虫感染者血清IgG的阳性检出率为73．3％(22／30),健康人、肺吸虫病和日本血吸虫病人的阴性率分别为92．5％(37／40)、80．0％(12／15)、85．0％(17／20)。hnmuno-ECL法检测华支睾吸虫感染者血清rCs26GST-特异性IgE的阳性检出率为867％(26／30),肺吸虫病为26．7％(4／15),日本血吸虫病人和阴性对照组的血清未测出,此法的特异度是95．5%。结论 rCs26GST蛋白用于血清特异性IgG和IgE抗体的检测具有较高的敏感性和特异性,可用于华支睾吸虫病的血清学诊断,组合成“鸡尾酒”式的复合诊断抗原之一。     

华支睾吸吸虫尿素溶解性抗原的临床应用

采用ＥＬＩＳＡ法，以华支睾吸虫成虫尿素溶解性抗原和该虫水溶性抗原检测９８份华支睾吸虫病人血清，阳性率分别为９２．８６％和９４．９８％。用这两种抗原检测日本血吸虫病人血清，假阳性率分别为１１．１１％和３３．３３％，肺吸虫病人血清的阳性率分别为０和２０％。结果表明，ＵＳＡ有与ＡＳＡ相似的敏感性，但特异性显著高于后者，具有更好的实用价值。     

华支睾吸虫尿素溶解性抗原的临床应用

采用ＥＬＩＳＡ法，以华支睾吸虫成虫尿素溶解性抗原（ＵＳＡ）和该虫水溶性抗原（ＡＳＡ）检测９８份华支睾吸虫病人血清，阳性率分别为９２．８６％和９４．９８％。用这两种抗原检测日本血吸虫病人血清，假阳性率分别为１１．１１％和３３．３３％，肺吸虫病人血清的阳性率分别为０和２０％。结果表明，ＵＳＡ有与ＡＳＡ相似的敏感性，但特异性显著高于后者，具有更好的实用价值。     

华支睾吸虫重组蛋白应用于ABC-ELISA检测特异性循环抗体的研究

目的 评价重组蛋白在华支睾吸虫病诊断上的价值，探索以重组蛋白替代天然抗原用于ELISA等血清学方法诊断华支睾吸虫感染的可能性。方法 分别使用重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CysB)与华支睾吸虫成虫可溶性抗原(CAA)，以ABC-ELISA检测华支睾吸虫病、其它寄生虫感染及健康人血清特异性IgG．比较两种抗原用于检测的敏感性与特异性。结果 共检测了112份华支睾吸虫感染血清，使用重组抗原CysB与成虫粗抗原CAA的阳性检出率分别为92．9％(104／112)及94．6％(106／112)；分别检测健康人血清56例、日本血吸虫病血清20例及肺吸虫病血清10例．对于两种抗原，华支睾吸虫特异性IgG检测阴性率均相同．上述三类血清的阴性率分别为96．5％(54／56)、95％(19／20)及90％(9／10)。结论 华支睾吸虫重组蛋白CysB用于血清特异性抗体检测具有较高的敏感性及特异性，与成虫可溶性抗原(CAA)的诊断应用价值相近，有望成为应用于华支睾吸虫病诊断的替代抗原之一。     

华支睾吸虫ICT和PCR检测方法的建立及其应用研究

目的建立华支睾吸虫的免疫胶体金(ICT)和实时荧光定量PCR检测体系,比较两者检测华支睾吸虫的效果。方法以华支睾吸虫成虫抗原包被胶体金,检测血液样本中的相应抗体,建立华支睾吸虫ICT检测方法;以华支睾吸虫18S r RNA基因作为靶基因,设计RT-PCR的特异性引物和探针,检测粪便样本中的核酸实时荧光定量PCR方法;以两种检测体系与商品化的酶联免疫(ELISA)检测试剂盒平行测定比较,考核检测体系的应用价值。结果对200份华支睾吸虫重点人群样本进行检测,ELISA法检出的华支睾吸虫Ig G抗体阳性例数为20例,阳性率为10.0%;ICT法为16例,阳性率为8.0%,灵敏度为80.0%,特异度为100.0%,符合率为98.0%,ICT和ELISA两种检测方法差异无统计学意义(χ2=2.25,P0.05);RT-PCR法检出的粪便样本中华支睾吸虫核酸阳性例数为18例,阳性率为9.0%,灵敏度为90.0%,特异度为100.0%,符合率为99.0%,RT-PCR和ELISA两种检测方法差异无统计学意义(χ2=0.05,P0.05)。说明ICT、RT-PCR两种检测方法与ELISA的测定结果比较一致。结论建立的ICT及RT-PCR两种检测方法特异性好、灵敏度高,两种检测方法均适用于华支睾吸虫现场的快速检测及定量分析。     

深圳市华支睾吸虫感染现状的调查

目的 了解深圳市淡水鱼及人群华支睾吸虫的感染现状，分析其流行病学特征，为制订深圳市肝吸虫病防治对策提供科学依据。方法 抽检深圳市各区水产品15个品种257份样品，用消化法筛查淡水鱼华支睾吸虫囊蚴；收集3088份人群血清标本，酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中特异性抗体；描速流行病学分析人群华支睾吸虫感染的血清流行病学特征。结果 淡水鱼样品中检出含华支睾吸虫囊蚴45份，检出率为17．50％。在所抽检的15个品种中检出率较高的鱼种依次为鲩鱼40．74％、鲮鱼26．O％、鲤鱼22．5％、大头鱼22．85％、生鱼16．6％、非洲鲫鱼14．5％；深圳5个区淡水鱼的感染率由高到低是龙岗、宝安、南山、罗湖和福田，分别为26．0％、17．9％、15．0％、14．0％和14．0％；检测3088份血清标本，特异性抗体阳性标本105份，总阳性率3．40％；男性阳性率为3．26％，女性为3．93％；20-29岁、30，39岁、40-49岁与50-81岁各年龄段人群的阳性率分别1．16％、2．44％、4．75％和7．67％。结论 深圳市淡水鱼中华支睾吸虫的感染情况严重，尤其是鲩鱼的感染率较高；人群血清抗体阳性率有随年龄增高而上升的趋势，总阳性率与广东省平均感染水平相比较低。     

华支睾吸虫病流行区流行病学研究

目的 为了解广州市番禺区华支睾吸虫流行情况，于2000年6月～2002年10月在番禺沙湾镇的紫坭村和石基镇的前锋村开展了华支睾吸虫病流行病学调查。方法 采用改良加藤氏厚涂片法粪便检查人群华支睾吸虫卵；华支睾吸虫感染静脉采血作转氨酶、乙肝表面抗原、核心抗体检测和腹部B超检查；开展中间宿主和保虫宿主调查。结果 华支睾吸虫总感染率13．7％。其中紫坭村感染率18．2％；前锋村感染率8．O％；男性感染率为22．3％，女性感染率为6．6％，以20～50岁年龄组最高。华支睾吸虫感染HBsAg阳性率为20．9％，HBeAb阳性率为40．3％；42．4％感染出现不同的肝胆道病变；在当地鱼塘的鱼苗中找到华支睾吸虫囊蚴；解剖当地犬、猫中，均发现华支睾吸虫成虫。结论 番禺区是华支睾吸虫重点流行区之一，且华支睾吸虫已对当地群众的身体健康造成了严重危害。     

广州市某医科院校学生华支睾吸虫感染情况调查

目的了解广州某医学院学生华支睾吸虫的感染状况。方法分别采用直接涂片法和酶联免疫吸附试验（ELISA）方法对学生的粪便和血清进行检查。结果粪便检查4438人,华支睾吸虫卵阳性5人,感染率约为0．11％;ELISA法检查415人,血清华支睾吸虫IgG抗体阳性10人,阳性率约为2．41％。结论广州市医科大学生华支睾吸虫感染率低于广州市平均水平,但仍需注意高校学生华支睾吸虫感染的防治工作。     

实验感染华支睾吸虫家兔血清抗体动态的初步观察

我们曾应用竦根过氧化物酶联葡萄球菌A蛋白(HRP—SPA)为第二抗体做酶联免疫吸附试验(ELISA)检测感染华支睾吸虫病人及感染动物血清的特异性抗体,已经取得较好效果。但对于感染华支睾吸虫后抗体水平的变化尚不了解。本文采用此法对家兔感染华支睾吸虫后血清抗体消长动态进行了初步观察,现将结果报告如下:     

深圳市公务员华支睾吸虫感染情况调查

目的调查深圳市公务员华支睾吸虫感染情况。方法采用系统抽样方法抽取1918份公务员血清样本,以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其华支睾吸虫IgG抗体。结果共调查1918人,血清华支睾吸虫IgG抗体阳性者为126人,感染率6.6%。其中男性感染率为6.8%,女性感染率为5.2%。在各年龄组中以50～59岁年龄组感染率最高。结论公务员华支睾吸虫感染率高于居民总体感染水平,应将公务员作为华支睾吸虫病防治的重点人群。     

4种抗原用于斑点免疫金银染色试验诊断日本血吸虫病的比较

采用斑点免疫金银染色(Dot-IGSS)试验对4种日本血吸虫抗原的敏感性及特异性进行比较。结果显示粗提成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(JWU)、硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)和可溶性虫卵抗原(SEA)检测40例日本血吸虫病人血清抗体的敏感性均达100.0％,40例正常人血清的可疑阳性反应分别为2.5％、0、2.5％和0,40例肝吸虫病人血清的可疑交叉率分别为2.5％、0、2.5％和0,表明在高敏感的IGSS检测系统中,粗提成虫抗原的敏感性和特异性与部分纯化者和虫卵抗原无显著性差异(P>0.05)。     

免疫金银染色法检测系统性红斑狼疮患者血清中抗ds─DNA抗体的初步研究

本研究首次采用ＩＰＡ－胶体金为探针的免疫金银染色法检测系统性红斑狼疮病人血清中的抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体，结果表明：应用该法大大提高了抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体的检出率，在其它结缔组织病的病人血清中也检出一定量的抗ｄｓ－ＤＮＡ，其意义有待于进一步观察研究。     

免疫金银染色检测IgM类抗核抗体及临床意义

以胶体金标记羊抗人IgM,对系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿关节炎(RA)等病患者160份血清和40份正常人血清作免疫金银染色,以检测IgM类抗核抗体(ANA-IgM),并与IgG类ANA作对照比较。结果表明,在RA,ANA以IgM类为主,检出率88.9％,高于IgG类的63％,滴度则两类相当,对RA的特异性以IgM类高;在SLE,ANA则以IgG类为主,尤其活动性者IgG类检出率(100.0％)与滴度显著高于IgM类(检出率82.1％),对SLE的特异性两类相当。ANA-IgM在有重要组织脏器损害的SLE的检出率显著高于无损害者,还可出现于严重肾损者尿中。故临床检测ANA-IgM很有意义。     

免疫金银染色法用于检测系统红斑狼疮患者血清抗核抗体和抗双链DNA抗体

目的 探讨检测抗核抗体（ANA）、抗双链DNA抗体（A－dsDNA)对系统性红斑狼疮（SLE）的诊断意义。方法 采用免疫金银染色法（IGSS）和用斑点免疫金银染色法（Dot-IGSS)，检测SLE病人血清中ANA和A－dsDNA。结果 113例活动期SLE患者血清ANA阳性率97．3％，A－dsDNA阳性率71．7％；35例非活动期SLE患者血清ANA阳性率74．3％，A－dsDNA阳性率14．3％。活动期ANA、A－dsDNA阳性率与非活动期比较均有显著性差异（P＜0．01）。活动期ANA平均滴度明显高于非活动期，A－dsDNA阳性组肾损害明显高于A－dsDNA阴性者（P＜0．01）。结论 IGSS和Dot-IGSS检测ANA、A－dsDNA有高度特异性、敏感性与稳定性，较高滴度A－dsDNA提示有肾损的可能。     

免疫金银染色法检测自身免疫性疾病患者抗核抗体研究

目的探讨免疫金银染色法检测抗核抗体（ANA）对自身免疫性疾病患者的诊断价值。方法采用免疫金银染色法（IGSS）和间接免疫荧光法（IIF）检测自身免疫性疾病患者血清中ANA。结果80例自身免疫性疾病患者血清免疫金银染色法检测抗核抗体（ANA）阳性率97．3％，间接免疫荧光法检测抗核抗体（ANA）阳性率98．2％，x^2=1.006。P=0．316〉0．05）。两种方法结果有良好一致性。结论IGSS可用于检测自身免疫性疾病患者血清抗核抗体（ANA）。     

大肠良、恶性病变的癌胚抗原表达及其价值

应用 CEA 单克隆抗体,借助 BA 及 IGSS 染色技术,对20例大肠正常粘膜、87例息肉及34例癌组织进行免疫组化研究,结果显示:多数大肠正常粘膜 CEA 为阴性,少数为弱阳性,其 CEA的分布呈极向性.多数大肠癌组织 CEA 呈较强阳性,CEA 的分布失去极向性,癌组织 CEA 的分布类型与大肠癌患者的顶后有密切关系。大肠息内尤其是腺瘤的 CEA 表达介于前两者之间,腺瘤组织异型程度越重,其 CEA 表达越近似于大肠癌,表明 CEA 免疫组化染色可辅助病理形态学来判断腺瘤癌变的危险性,对大肠癌二级防治具有一定意义.本文 IGSS 染色的结果与 BA 法相近似,IGSS 法具有较多优点,值得推广应用.     

免疫金银染色法检测SLE患者血清抗核抗体和抗双链DNA抗体的临床研究

目的　探讨检测系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清抗核抗体 (ANA)和抗双链DNA抗体 (A -dsDNA)的临床意义。方法　用免疫金银染色法 (immunogold -silverstaining ,IGSS)和斑点免疫金银染色法 (dot -immunogold -silverstaining ,Dot-IGSS)同步检测SLE患者血清ANA和A -dsDNA。结果　 16 9例活动期SLE患者血清ANA和A -dsDNA的阳性率分别为 98.2 %和 77.2 % ;4 4例非活动期患者ANA和A -dsDNA的阳性率分别为 72 .2 %和15 .9% ,两组比较 ,阳性率有显著性差异 (P <0 .0 1)。活动期病人的血清滴度也较非活动期患者高 (P <0 .0 1) ;A -dsDNA阳性患者的肾损害率明显高于A -dsDNA阴性者 (P <0 .0 1)。结论　ANA、A -dsDNA阳性且滴度高提示SLE处于活动期 ,A -dsDNA阳性提示有肾损害的可能 ;但A -dsDNA阴性亦不能排除SLE。     

Analysis of the relation between serum immunoglobulin and auto-antibody levels in patients with rheumatoid arthritis]

OBJECTIVE: To explore the relationship between serum immunoglobulin (Ig) levels and the positivity rate for auto- antibodies in patients with rheumatoid arthritis (RA). METHODS: The levels of immunoglobulins (IgG, IgM, IgA) and rheumatoid factor (RF) were measured using Olympus AU600 system, and indirect immunofluorescence and immunoblotting methods were employed respectively for detecting the autoantibodies in the serum from 40 RA patients and 30 normal adults. Statistical analysis of the relation between the Ig levels and autoantibodies was performed. RESULTS: Compared with normal control group, significantly higher serum IgA, IgG and IgM levels were detected in RA patients (P < 0.01), and at least one autoantibody was present in the serum sample from 26 out of the 40 RA patients, who had the highest RF positivity rate of 20% (8 cases). The serum IgA level in autoantibody-positive patients was significantly higher than that in autoantibody-negative ones (P < 0.01), and in the 18 patients with serum IgA level beyond the normal range, 15 (83.3%) were positive for autoantibody, while in the 22 patients with normal serum IgA level, the autoantibody positivity rate was only 50% (11/22), showing significant difference (P < 0.05). CONCLUSION: Serum immunoglobulins A (IgA) level is closely associated with the positivity rate for autoantibodies in RA patients, and RA patients with serum IgA level beyond the normal range was more likely to be positive for the autoantibodies.