糖皮质激素对哮喘患者白细胞介素-5mRNA表达与嗜酸性粒细胞激活作用的影响

为了观察糖皮质激素对哮喘患者白细胞介素（ＩＬ）－５ｍＲＮＡ表达与嗜酸性粒细胞激活作用的影响，本研究用逆转录（ＲＴ）－聚合酶链反应（ＰＣＲ）法半定量分析了哮喘患者用糖皮质激素治疗前后外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达水平的变化，检测了血清嗜酸细胞阳离子蛋白（ＥＣＰ）浓度、一秒钟用力呼气容积（ＦＥＶ１）下降２０％时的乙酰甲胆碱（ＭＣＨ）激发浓度（ＭＣＨ－ＰＣ２０值）和基础ＦＥＶ１占用力肺活量比值（ＦＥＶ１％）等指标。结果发现，糖皮质激素不仅能改善哮喘患者的气道高反应性和通气功能，而且还可抑制ＰＢＭＣ中ＩＬ－５ｍＲＮＡ的表达和降低血清ＥＣＰ浓度（Ｐ＜０．０５）；血清ＥＣＰ浓度下降幅度或ＭＣＨ－ＰＣ２０值改善幅度与ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达水平下降幅度之间均呈显著正相关（ｒ分别为０．５４２６和０．４８５７，Ｐ值＜０．０５）。提示糖皮质激素可能是通过抑制ＩＬ－５基因的转录，从而抑制后者对嗜酸性粒细胞的活化，而发挥其抗气道炎症反应和降低气道高反应性的作用。     

哮喘患者外周血单个核细胞中白细胞介素—6mRNA表达与气道炎症的 …

目的 探讨外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中白细胞介素（ＩＬ）－６ｍＲＮＡ表达与血嗜酸细胞阳离子蛋白（ＥＣＰ）和１秒用力呼气容积占用力肺活量比值（ＦＥＶ１％）的关系。方法 对１２例过敏性哮喘发作期患者、８例缓解期患者及９例健康人，采用ＲＴ－ＰＣＲ法和图像分析半定量法检测ＰＢＭＣ中ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达水平及ＥＣＰ和ＦＥＶ１％。结果 发作期患者ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达明显高于缓解期患者和健康人（Ｐ〈０．０     

哮喘患者外周血单个核细胞中白细胞介素-6 mRNA表达与气道炎症的研究

目的探讨外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中白细胞介素（ＩＬ）６ｍＲＮＡ表达与血嗜酸细胞阳离子蛋白（ＥＣＰ）和１秒用力呼气容积占用力肺活量比值（ＦＥＶ１％）的关系。方法对１２例过敏性哮喘发作期患者、８例缓解期患者及９例健康人，采用ＲＴＰＣＲ法和图像分析半定量法检测ＰＢＭＣ中ＩＬ６ｍＲＮＡ的表达水平及ＥＣＰ和ＦＥＶ１％。结果发作期患者ＩＬ６ｍＲＮＡ的表达明显高于缓解期患者和健康人（Ｐ＜００１），而缓解期患者无明显升高。发作期患者ＩＬ６ｍＲＮＡ的表达水平与血清ＥＣＰ呈中度正相关（ｒ＝０６７９，Ｐ＜００１），而与ＦＥＶ１％呈中度负相关（ｒ＝－０５８９，Ｐ＜００５）。结论过敏性哮喘发作期患者ＰＢＭＣ中ＩＬ６ｍＲＮＡ表达水平显著增强。其气道炎症程度与ＩＬ６基因转录增强有关     

吸入皮质激素对哮喘患者血清嗜酸粒细胞和T—淋巴细胞功能的…

为研究吸入皮质激素倍氯米松对哮喘患者体内嗜酸粒细胞、Ｔ－淋巴细胞功能状态的影响，对治疗前后哮喘患者血清嗜酸性阳离子蛋白（ＥＣＰ）、可溶性白细胞介素－２（ｓＩＬ－２Ｒ）浓度及患者乙酰甲胆碱气道反应性进行检测。结果表明，吸入皮质激素６周后，血清ＥＣＰ、ｓＩＬ－２Ｒ浓度降低，肺功能改善，乙酰甲胆碱－ＰＣ２０（ＦＥＶ１下降２０％时的乙酰甲胆碱激发浓度）值增高。提示：糖皮质激素能抑制嗜酸性粒细胞、Ｔ－淋巴细     

细胞间粘附分子1mRNA在哮喘豚鼠支气管组织中的原位表达

为了解哮喘豚鼠支气管组织中的细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）ｍＲＮＡ表达情况，将实验豚鼠随机分为正常对照组、氟美松组和哮喘组，采用原位杂交方法显示ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ的表达变化，用ＨＥ染色方法来测定炎细胞在支气管粘膜中的浸润程度。原位杂交结果显示，ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ主要在支气管粘膜下的小血管、毛细血管内皮细胞以及支气管上皮细胞的胞浆内表达。定量分析结果表明，哮喘组豚鼠支气管组织表达ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ较正常对照组及氟美松组显著增加（Ｐ＜０．０２，Ｐ＜０．０５），哮喘豚鼠支气管组织ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ的表达量与炎细胞总数之间显著相关（Ｐ＜０．０５）。提示支气管粘膜组织ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ表达与哮喘支气管粘膜嗜酸细胞为主的炎细胞浸润有关，糖皮质激素能够抑制细胞粘附分子的表达。     

呼吸道合胞病毒感染对哮喘患儿单个核细胞表达白细胞介 …

目的 观察呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）感染对哮喘患儿螨诱导单个核细胞（ＰＢＭＣ）表达白细胞介素４（ＩＬ－４）和ＩＬ－５的影响及其与哮喘的关系。方法 用 联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及逆转录（ＲＴ）－聚合酶链反应（ＰＣＲ）法 ３０例螨过敏哮喘患儿「其中ＲＳＶ感染者１６例（Ａ组），无ＲＳＶ感染者１４例（Ｂ组）」和１０名年龄组正常对照组（Ｃ组）的外周血ＰＢＭＣ经螨诱导表达ＩＬ－４及ＩＬ－５的水平，并分析其与     

地塞米松对哮喘患者IL—4,IL—5及IgE合成的抑制作用观察

观察了地塞米松（Ｄｅｘ）对哮喘患考外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）合成白介素－４（ＩＬ－４）、白介素－５（ＩＬ－５）和免疫球蛋白Ｅ（ＩｇＥ）的抑制作用。结果证明，哮喘１组（仅用植物血凝素，简称ＰＨＡ）ＰＢＭＣ合成ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩｇＥ较对照组（仅用ＰＨＡ）明显增高（Ｐ＜０．０１），哮喘２组（ＰＨＡ＋Ｄｅｘ）ＰＢＭＣ合成ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩｇＥ较哮喘１组显著下降（Ｐ＜０．０５）。认为Ｄｅｘ治疗哮喘的机理，部分是通过减少ＩＬ－４ＩＬ－５、ＩｇＥ的合成而达到抗炎的目的。     

哮喘和慢性阻塞性肺疾病患者糖皮质激素治疗前后痰液炎性标志物的变化

目的探讨哮喘和慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）患者吸入糖皮质激素治疗前后痰液中细胞因子和嗜酸细胞阳离子蛋白（ＥＣＰ）浓度及糖皮质激素对其影响。方法采用荧光酶联免疫法检测糖皮质激素治疗前后痰液中白细胞介素（ＩＬ）５、ＩＬ８、ＥＣＰ浓度及嗜酸细胞和嗜中性粒细胞计数。结果哮喘患者经糖皮质激素治疗后ＥＣＰ浓度由（５００．３±４９．６）μｇ／Ｌ降至（５９．８±１０．９）μｇ／Ｌ,嗜酸细胞数由（１１．６±１．７）×１０－２降至（４．１±０．７）×１０－２,ＩＬ５浓度较治疗前差异有显著性（Ｐ＜０．０１）;ＣＯＰＤ患者ＩＬ５浓度下降不明显。结论哮喘气道炎症与嗜酸细胞激活、ＥＣＰ和ＩＬ５释放增多有关。ＣＯＰＤ气道炎症以嗜中性粒细胞数增高为主。哮喘病人吸入糖皮质激素治疗后可调节炎性细胞数量和功能,抑制细胞因子生成,从而抑制气道炎症,治疗效果优于ＣＯＰＤ患者。     

咳嗽变异型哮喘患者11例咳嗽受体敏感性观察

目的　探讨咳嗽变异型哮喘（ＣＶＡ）的咳嗽机制。方法　对１１ 例咳嗽变异型哮喘患者、７ 例哮喘稳定期患者、１０ 例急性支气管炎迁延期患者和１０ 例健康成年人,以组胺吸入进行激发感应ＦＥＶ１ 下降２０ ％ 的浓度（ＰＣ２０ＦＥＶ１）和吸入酒石酸测定咳嗽受体敏感性（ＣＲＳ５）。结果　ＣＶＡ患者、哮喘稳定期患者、急性支气管炎迁延期患者和健康成年人的ＰＣ２０ＦＥＶ１ 分别为（３－７５ ±１－５８）ｇ／Ｌ、（２－０１ ±１－４６）ｇ／Ｌ、（１７－４ ±１－５２）ｇ／Ｌ 和（１８－０３ ±１－６９）ｇ／Ｌ,ＣＶＡ 患者显著降低（ Ｐ ＜ ０－０１）;ＣＲＳ５ 分别为（３８－０１ ±２－０４）ｇ／Ｌ、（８２－２８ ±１－４５）ｇ／Ｌ、（３５－８８ ±２－１８）ｇ／Ｌ、（１１４－８１±１－３３）ｇ／Ｌ,ＣＶＡ 患者显著降低（ Ｐ＜ ０－０１） 。结论　ＣＶＡ 患者咳嗽受体敏感性的阈值明显降低。     

内源性一氧化氮对哮喘患者白细胞介素(IL)-4、IL-5及γ干扰素表达的影响

为探讨哮喘发病中Ｔｈ１和Ｔｈ２细胞间功能不平衡的原因及调节机制,本组观察了哮喘发作期患者外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）白细胞介素（ＩＬ）４、ＩＬ５和γ干扰素（ＩＦＮγ）ｍＲＮＡ表达及分泌水平的变化,并观察体外实验中左旋精氨酸（ＬＡｒｇ）及Ｎω左旋精氨酸甲酯（ＬＮＡＭＥ）对其的影响。一、对象与方法１．对象：哮喘组：根据１９９７年全国哮喘会议制订的诊断标准［１］诊断的１０例哮喘发作期患者,男女各５例,平均年龄３４岁,均为支气管舒张试验１秒钟用力呼气容积占用力肺活量比值（ＦＥＶ１％）＞１５％或乙…     

慢性HBV感染者外周血单个核细胞中白细胞介素-12 mRNA的表达

１．资料与方法：（１）病例为我科２０００年２－８月收治的５１例门诊及住院慢性ＨＢＶ感染者,男４２例,女９例,平均（３５±８）岁。诊断按１９９５年全国病毒性肝炎诊断标准,排除ＨＣＶ、ＨＤＶ、ＨＩＶ感染。（２）外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）总ＲＮＡ提取及ＩＬ—１２ Ｐ４０ ｍＲＮＡ基因扩增：常规分离ＰＢＭＣ按ＲＮＡ提取试剂盒（Ｐｒｏｍｅｇａ公司）操作说明提取ＰＢＭＣ中总ＲＮＡ;一步法ＲＴ－ＰＣＲ（试剂盒购于Ｑｕｉａｇｅｎ公司）进行ＩＬ－１２ Ｐ４０和β肌动蛋白（β－ａｃｔｉｎ）基因扩增,引物序列为ＩＬ－…     

吸入皮质激素对哮喘患者血清嗜酸粒细胞和T－淋巴细胞功能的影响

为研究吸入皮质激素倍氯米松对哮喘患合体内嗜酸粒细胞、Ｔ－淋巴细胞功能状态的影响，对治疗前后哮喘患者血清嗜酸性阳离子蛋白（ＥＣＰ）、可溶性白细胞介素－２（ｓＩＬ－２Ｒ）浓度及患者乙酰甲胆碱气道反应性进行检测。结果表明。吸入皮质激素６周后，血清ＥＣＰ、ｓＩＬ－２Ｒ浓度降低，肺功能改善、乙酰甲胆碱－ＰＣ＿（２０）（ＦＥＶ＿１下降２０％时的乙酰甲胆碱激发浓度）值增高。提示：糖皮质激索能抑制嗜酸性粒细胞、Ｔ－淋巴细胞激活。具有抗炎和降低气道高反应性的作用。     

纤维蛋白原对内皮细胞t-PA和PAI-1 mRNA表达的影响

目的 探讨纤维蛋白原（Ｆｇ）对内皮细胞（ＥＣ）组织型纤溶酶原激活物（ｔ－ＰＡ）和纤溶酶原灭活剂（ＰＡＩ－１） ｍＲＮＡ表达的影响。方法 不同浓度Ｆｇ与ＥＣ孵育不同时间后,用单管逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）半定量法检测ｔ－ＰＡ和ＰＡＩ－ｍＲＮＡ的表达。结果 用２０,２００,２０００ｍｇ／Ｌ Ｆｇ与ＥＣ孵育１、１２、２４ｈ、ＰＡＩ－１ ｍＲＮＡ的相对表达水平分别为同时相对照组的１．７,３．６,２     

转化生长因子-β1在肝细胞性肝癌中表达增强

目的转化生长因子－β１（ＴＧＦβ１）在细胞生长的负性调节上有重要作用,是肝细胞生长和增殖的强抑制物但肝癌（ＨＣＣ）患者肝组织中ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达高．现检测ＨＣＣ患者外周血中ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达,血清ＴＧＦβ１水平,以及肝组织中ＴＧＦβⅡ型受体（ＴＧＦβＲⅡ）的表达．方法ＨＣＣ患者外周血分离单个核细胞（ＰＢＭＣ）,提取总ＲＮＡ,用反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术扩增ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ．血清ＴＧＦβ１水平测定用Ｐｒｏｍｅｇａ公司产的试剂盒．肝组织ＴＧＦβＲⅡ表达的分析用原位杂交法．结果ＨＣＣ患者２０例ＰＢＭＣＴＧＦβ１ｍＲＮＡ用ＲＴＰＣＲ检测阳性率达７０％,对照组阴性．ＨＣＣ患者４０例血清ＴＧＦβ１水平（２７５８ｍｇ／Ｌ±８１０ｍｇ／Ｌ）明显高于对照组（８２７ｍｇ／Ｌ±３７２ｍｇ／Ｌ）．原位杂交表明,ＴＧＦβＲⅡ在ＨＣＣ细胞的胞质中有弱表达．结论ＨＣＣ患者ＴＧＦβ１基因在转录水平和翻译水平上均显示表达增强．ＰＢＭＣ有可能代替肝组织用以检测ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ的表达应用于基础与临床的研究．     

原发性肾病综合征患者IL—3血浆水平和基因表达的研究

目的：探讨成人原发性肾病综合征（ＮＳ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＩＬ－１３ｍＲＮＡ表达及ＩＬ－１３血浆水平变化。方法：选择１０名健康正常对照者和１６名ＮＳ患者。采用反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，对ＮＳ患者ＰＢＭＣ中ＩＬ－１３ｍＲＮＡ表达量进行分析。同时应用ＩＬ－１３特异的酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定ＩＬ－１３血浆水平。结果：ＮＳ患者ＰＢＭＣ中ＩＬ－１３ｍＲＮＡ表达量及血浆ＩＬ     

慢性重型肝炎患者外周血单个核细胞内干扰素和白细胞介素的表达及意义

目的探讨慢性重型肝炎（ＣＳＨ）病人外用血单个核细胞（ＰＢＭＣ）内干扰素－γ（ＩＦＮ－γ）及白细胞介素－４（ＩＬ－４）的表达及其临床意义。方法常规分离ＰＢＭＣ,在ＰＭＡ、Ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ、Ｍｏｎｅｎｓｉｎ的刺激下,采用流式细胞术（ＦＡＣＳ）,对１７例ＣＳＨ患者及１９例正常健康者ＣＤ４＋Ｔ细胞内ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４的表达进行分析,并应用荧光定量聚合酶链反应检测ＨＢＶ ＤＮＡ含量。结果 ＣＤ４＋Ｔｈ１、 Ｔｈ２细胞在ＣＳＨ组分别为７．２％—２６．３％（平均１５％）和０、ｌ％—１０．９％（平均２．０％）,正常对照组则分别为２．２％—１１．９％（平均５．９％）和０．４％—３．９％（平均２．２％）;ＣＤ４＋Ｔｈ１细胞百分数两组间差异有显著意义（Ｐ＜０．０１）。荧光定量ＰＣＲ结果表明ＣＳＨ组中１３例ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性,其ＨＢＶ ＤＮＡ的含量与ＩＦＮ－γ表达细胞百分数呈负相关。结论 Ｔｈ１细胞与肝脏的炎症活动明显相关,ＩＦＮ－γ的表达对ＨＢＶ复制可能具有一定的影响。     

哮喘豚鼠肺组织粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子mRNA表达及雷公藤的影响

目的探讨粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）在哮喘嗜酸细胞（Ｅｏｓ）炎症中的作用。方法建立哮喘豚鼠实验模型，用雷公藤处理，观察肺组织Ｅｏｓ密度，斑点分子杂交检测支气管肺组织ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ含量。结果哮喘组肺组织Ｅｏｓ浸润密度增加，ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达水平增高，与对照组相比差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。雷公藤处理后ｍＲＮＡ表达显著降低，但Ｅｏｓ浸润密度减少不明显。结论ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达增加可能是导致哮喘Ｅｏｓ气道炎症的原因。雷公藤能抑制ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达，可能具有哮喘抗炎治疗的潜在应用价值。     

雷公藤内酯醇对人近端肾小管上皮细胞单核细胞趋化因子合成的影响

目的：观察雷公藤内酯醇对炎症因子刺激下人肾小管上皮细胞单核细胞趋化因子（ＭＣＰ－１）产生的影响。方法：以ＩＦＮ－γ（２００μｇ／Ｌ）及ＴＮＦα（２０μｇ／Ｌ）联合刺激人近端小管上皮细胞,细胞ＭＣＰ－１蛋白含量以流式细胞仪检测,培养上清中ＭＣＰ－１的分泌量以双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法测定,细胞ＭＣＰ－１ ｍＲＮＡ含量采用半定量ＲＴ－ＰＣＲ法进行测定。结果：普通培养人近端肾小管上皮细胞及培养上清中有少量ＭＣＰ－１分泌,ＩＦＮ－γ（２００μｇ／Ｌ）及ＴＦＮα（２０μｇ／Ｌ）联合刺激２４ｈ,人近端小管上皮细胞合成ＭＣＰ－１明显增加。雷公藤内酯醇可以抑制肾小管上皮细胞ＭＣＰ－１分泌,并使细胞ＭＣＰ－１ ｍＲＮＡ含量明显降低,该抑制效应呈剂量依赖性。结论：雷公藤内酯醇可以抑制炎症刺激下人近端肾小管上皮细胞合成ＭＣＰ－１,这可能     

哮喘豚鼠肺组织中嗜酸细胞凋亡与白细胞介素5mRNA表达？…

目的 探讨哮喘时嗜酸细胞（ＥＯＳ）凋亡与肺组织白细胞介素５（ＩＬ－５）ｍＲＮＡ表达的关系。方法 将豚鼠随机分为对照组（正常组７只）、哮喘组（８只）、地塞米松组（８只），应用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术和原位杂交方法，检测支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中不同密度ＥＯＳ凋亡百分比和肺组织ＩＬ－５ｍＲＮＡ的表达。结果 （１）正常对照组ＢＡＬＦ中低密度ＥＯＳ、正常密度ＥＯＳ凋是     

哮喘患者外周血单个核细胞白细胞介素—4和介素—5的基因表达

为进一步了解激素抵抗型哮喘的发病与细胞免疫功能紊乱的关系，应用地高辛标记ｃＤＮＡ探针、抗地高辛抗体－碱性磷酸酶检测系统行细胞涂片原位杂交，测定了１５例激素抵抗（ＳＲ）型和１５例激素敏感（ＳＳ）型哮喘患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）中白细胞介素（ＩＬ）－４和ＩＬ－５基因的ｍＲＮＡ表达。结果显示：（１）单独培养的ＳＲ型和ＳＳ型哮喘患者的外周血单个核细胞中ＩＬ－４ｍＲＮＡ和ＩＬ－５ｍＲＮＡ阳性细胞率差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。（２）与氟美松（１０－７ｍｏｌ／Ｌ）共同培养４８小时后，ＳＳ型哮喘患者的外周血单个核细胞中ＩＬ－４ｍＲＮＡ和ＩＬ－５ｍＲＮＡ阳性细胞率较单独培养时明显减少（Ｐ＜０．０１）；而在ＳＲ型患者中则无明显改变（Ｐ＞０．０５）。提示氟美松不能有效地抑制ＳＲ型哮喘患者的外周血单个核细胞中ＩＬ－４和ＩＬ－５基因的ｍＲＮＡ表达，这可能是发生激素抵抗的机制之一。