姜黄素PLGA-TPGS纳米粒在小鼠体内分布及肝靶向性研究

[摘要]　目的　研究姜黄素PLGA-TPGS纳米粒（Curcumin-loaded PLGA-TPGS Nanoparticles,CPTN）在小鼠体内的分布及对肝脏的靶向性。〖ＨＴH〗方法　经小鼠尾静脉注射CPTN和姜黄素溶液（Curcumin solutions,CS）,采用反相高效液相色谱法测定不同时间时姜黄素在小鼠血浆、肝、心、脾、肺、肾中的浓度。用靶向指数（targeting index,TI）、选择性指数（selective index,SI）、相对靶向效率（relative targeting efficiency,Re）和靶向效率（targeting efficiency,Te）4个指标全面评价CPTN对肝脏的靶向性。〖ＨＴH〗结果　CPTN组1、2、4 h时肝内药物浓度远高于血浆、脾、肺（P<0.05）和心、肾（P<0.01）,药物持续作用时间明显长于CS组;TI和SI值均>1（SI在0.08 h和0.5 h除外）,CPTN在肝中的AUC是CS在肝中AUC的31.6倍,且CPTN组的Te值均>3。〖ＨＴH〗结论　CPTN对肝脏有良好的靶向作用。     

姜黄素PLGA-TPGS纳米粒的制备和质量评价

目的制备姜黄素乳酸羟基乙酸共聚物-水溶性维生素E纳米粒(CM-PLGA-TPGS-NPs,简称CPTN)并评价其质量。方法用自制的PLGA-TPGS为载体材料,采用超声乳化-溶剂挥发法制备CPTN,通过粒径、Zeta电位、载药量、包封率和体外释放度控制其质量。采用RP-HPLC法,色谱柱为KROMASIL柱(4.6 mm×250 mm,5μm),用乙腈-2%冰醋酸溶液(58∶42)为流动相,检测波长为430 nm。结果自制CPTN的平均粒径为(197.9±6.2)nm,Zeta电位为(-22.3±1.8)mV,载药量为(13.2±0.9)%和包封率为(79.3±1.6)%。体外姜黄素在含0.5%十二烷基硫酸钠的磷酸盐缓冲液(pH7.4)中呈两相释放,30 d时累积释放率为91.3%。结论 CPTN质量稳定可控,体外试验显示具有明显的缓释作用。     

水溶性姜黄素纳米粒的制备

[目的]利用水溶性高分子材料透明质酸(HA)作为药物载体材料增加姜黄素的自身稳定性和溶解度低的问题。[方法]利用化学键结合的方法使姜黄素和透明质酸之间形成酯键制备姜黄素偶合物(HA-Cur)并在水中溶解自组装成纳米粒,用高效液相色谱仪检测姜黄素的含量。[结果]实验中利用核磁共振表征证明我们成功地将姜黄素接枝到透明质酸上,大大增加了姜黄素的水溶性,在水中溶解后具有良好的粒径分布,说明该接枝物在水溶液中自组装成了姜黄素纳米粒,同时我们利用高效液相色谱仪检测该纳米粒子中姜黄素的含量为6.9%。[结论]成功制备透明质酸-姜黄素(HA-Cur)偶合物,该偶合物能够在水中形成姜黄素纳米粒子,增加了姜黄素的水溶性和稳定性,而透明质酸能靶向CD44受体的性质也一定程度上增加了姜黄素抗肿瘤的靶向性。     

姜黄素固体脂质纳米粒制备及体外释放的研究

[目的]以单硬脂酸甘油酯为载体材料制备姜黄素固体脂质纳米粒及其体外释放行为的研究。[方法]采用乳化蒸发-低温固化法制备姜黄素固体脂质纳米粒,高速离心法测其包封率,激光粒径仪测定其粒径、电位,用差示扫描量热仪(DSC)表征其性质,采用透析法考察固体脂质纳米粒中姜黄素的体外释放行为。[结果]姜黄素固体脂质纳米粒的平均粒径为(89.24±2.06)nm,Zeta电位为(-18.77±1.27)m V,药物平均包封率为(89.55±1.84)%,DSC结果表明其理化性质稳定可靠,体外12 h累计释放率为(43.12±1.02)%。[结论]制备的姜黄素固体脂质纳米粒粒径小且分布均匀,具有良好的缓释作用。     

姜黄素纳米粒的制备及药动学研究

目的 研究姜黄素纳米粒大鼠尾静脉注射后的药动学特性。方法 采用乳化溶剂扩散法制备姜黄素纳米粒,大鼠尾静脉注射姜黄素纳米粒和游离姜黄素后,利用HPLC测定不同时间点血浆中药物浓度,DAS 3.0软件处理数据,求算药动学参数。结果 姜黄素纳米粒给药后的药时曲线下面积AUC显著提高,分布容积和清除率显著降低。采用较大分子量聚合物制备的纳米粒具有更高的AUC、更低的分布容积和清除率,显示了更加优异的长循环特性,与体外释放的结果相吻合。结论 姜黄素纳米粒在大鼠体内消除慢,能显著提高姜黄素的生物利用度。      

姜黄素纳米粒促进药物支架植入后内皮功能恢复的实验研究

目的 探讨姜黄素纳米粒在促进药物支架植入后内皮功能恢复的可行性.方法 雷帕霉素支架植入后以每周2次的频率静脉注射姜黄素纳米粒,于4周后评价内皮功能.结果 4周后联用姜黄素纳米粒的支架组内皮功能明显优于不使用姜黄素纳米粒的支架组.结论 姜黄素纳米粒可显著提高支架植入后内皮功能的恢复速度,有望降低药物支架不良事件的发生率.     

新型姜黄素纳米粒对Lewis肺癌细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨一种新型的姜黄素纳米粒(curcumin nanoparticles,Cur-NPs)对Lewis肺癌细胞LLC增殖与凋亡的影响。方法游离姜黄素(curcumin,Cur)和Cur-NPs分别作用于LLC细胞24 h,MTT检测其对LLC细胞的增殖抑制作用。20μmol/L的药物作用于细胞24 h后,流式细胞术检测Cur-NPs对细胞周期、细胞凋亡、细胞内活性氧、细胞内钙离子浓度、细胞线粒体膜电位的影响,并与Cur进行对照。结果 Cur-NPs可以明显增强Cur对LLC细胞的增殖抑制,IC50从34.91μmol/L降为10.65μmol/L(P<0.05)。Cur-NPs明显提高了Cur诱导LLC细胞凋亡(P<0.05)、抑制细胞周期于S期(P<0.05)、升高细胞内钙离子浓度(P<0.05)、升高细胞活性氧浓度(P<0.05)、降低细胞线粒体膜电位(P<0.05)的能力。结论新型姜黄素纳米粒可明显提高游离姜黄素对LLC细胞的体外增殖抑制作用,可能与其促进细胞凋亡有关。     

聚糖纳米粒阿霉素对移植瘤小鼠的体内抑瘤作用探讨

目的:探讨聚糖纳米粒载导的阿霉素移植瘤小鼠的体内抑瘤作用。方法:利用研制的聚乳酸阿霉素纳米粒对移植瘤小鼠的抑瘤作用,并选取生理盐水、空白脂质体以及游离阿霉素作为对照组,观察各组体内抑瘤情况。结果:聚乳酸阿霉素纳米粒组动物平均瘤重较对应游离阿霉素组明显减轻,药物抑瘤率显著提高(P<0.05),两组治疗组较生理盐水对照组、空白脂质体对照组抑瘤率有显著提高(P<0.05),而空白脂质体组与生理盐水对照组抑瘤率无显著差异(P>0.05)。结论:聚糖纳米粒阿霉素对移植瘤小鼠的体内抑瘤作用较游离阿霉素效果显著,作用时间更持续长久。     

新型姜黄素纳米粒制备、表征及其体外抗肿瘤活性评价

目的制备高载药量姜黄素纳米粒,并考察其体外稳定性和抗肿瘤活性。方法用油酸(OA)对姜黄素(Cur)进行化学修饰。采用改良的溶剂挥发法制备聚乙二醇聚乳酸乙酸酯(mPEG-PLGA)载Cur-OA2纳米粒(mPEG-PLGA-Cur-OA2,PPCO)。并以纳米粒载药量(drug loading,DL)、包封率(entrapment efficiency,EN)为指标,通过3因素3水平正交试验对工艺进行优化。采用正交确定工艺制备3批载药纳米粒,应用动态光散射粒度仪和透射电镜测定载药纳米粒的zeta电位、粒径与形态。采用体外37℃水浴降解特性来评价其稳定性。最后利用MTT法对纳米粒体外抗肿瘤活性进行初步评价。结果正交实验,包封率影响因素为:有机相与水相的量(B)>超声时间(C)>药物与材料比(A)。载药量影响因素为:有机相与水相的量(B)>药物与材料比(A)>超声时间(C)。利用正交设计筛选出的方法制备纳米粒,其载药量达(24.870±0.029)%,包封率为(81.250±0.101)%,zeta电位-23.9±1.6mV,平均粒径235.0±25.8nm,粒度分布均匀,呈单峰分布。载药纳米粒在37℃,前4h降解了20%,而其后的70h里,只降解了5%左右,相比姜黄素稳定性得到了极大提高。纳米粒体外抗肿瘤活性研究表明,所制备的纳米粒对HepG2细胞仍然具有较好的抑制作用,经48h处理后,其IC50为40.61μmol/L,但相比姜黄素15.76μmol/L有所下降,表现为减毒效应。结论 PPCO纳米粒呈均匀球形、载药量高,稳定性好,并有较好的体外抗肿瘤活性。     

姜黄素固体脂质纳米粒的制备及表征

目的：制备姜黄素（Cur）固体脂质纳米粒（SLN）。方法：用薄膜超声法制备Cur-SLN,以m_cur︰m_{单硬脂酸甘油酯}、m_{单硬脂酸甘油酯}︰m_卵磷脂、聚山梨酯-80质量浓度、超声时间为考察因素,以包封率为指标,用正交试验优选处方,并考察其粒径分布、Zeta电位。结果：当m_cur︰m_{单硬脂酸甘油酯}=1︰3、m_{单硬脂酸甘油酯}︰m_卵磷脂=1︰2.5、聚山梨酯-80质量浓度2.5%、超声时间12 min时,所制得的Cur-SLN平均粒径为（145.6±5）nm,Zeta电位为（－31.9±1.5）mV,包封率为（97.42±0.39）%,载药量为(7.92 ± 0.05)%。结论：采用薄膜-超声法制备Cur-SLN可行,为开发姜黄素新型给药系统提供试验依据。     

Box-Behnken响应面法优化索拉非尼PLGA-TPGS聚合物纳米粒的处方与工艺

目的 优化索拉非尼聚乳酸-羟基乙酸共聚物［poly（lactic-co-glycolic acid）,PLGA］-维生素E-聚乙二醇1000琥珀酸酯（D-ɑ-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate, TPGS）聚合物纳米粒的处方与制备工艺。方法 采用乳化-溶剂挥发法制备纳米粒,以包封率和载药量为评价指标,采用Box-Behnken响应面法考察索拉非尼与PLGA的质量比、有机相与水相的容积比、乳化剂维生素E-聚乙二醇1000琥珀酸酯（TPGS）的浓度因素对制备的影响,得到最优工艺参数,并对最优处方与工艺下纳米粒药物的体外释放、形态和粒径进行考察。 结果 最佳处方为：索拉非尼与PLGA的质量比为1∶11.56;有机相与水相的容积比为1∶5.56;乳化剂TPGS的浓度为0.03%。制备的优化纳米粒形态均一,平均粒径为249.6 nm,包封率为89.78%,载药量为9.41%。体外索拉非尼在含1%吐温-80的磷酸盐缓冲液（pH 5.0、pH 7.4）中呈二相释放,120 h累积释放率分别为80.69%±4.70%和40.67%±3.77%。结论 所优选的索拉非尼PLGA-TPGS纳米粒处方与工艺合理可行,体外实验具有明显的缓释作用,可为后期体内、体外研究提供实验基础。     

胆舒颗粒的主要药效学研究

目的 研究胆舒颗粒的主要药效作用.方法 采用胆固醇诱导家兔胆结石模型、手术引流家兔胆汁流量、新斯的明致家兔胆总管Oddi括约肌痉挛模型分别观察胆舒颗粒抗胆结石形成、利胆、解痉作用.结果 胆舒颗粒可防治胆结石形成,促进胆汁引流,缓解Oddi括约肌痉挛.结论 胆舒颗粒对胆道感染合并结石有一定的防治作用.     

金鸡制剂药效学研究

[目的]对金鸡制剂的药效学作进一步研究。[方法]以大鼠异物性子宫炎模型考察其对靶器官的抗炎作用；以体内试验法考察其对免疫功能以及抗茵作用的影响；以小鼠耳廓法考察其对微循环的影响。[结果]金鸡制剂能明显抑制大鼠异物性子宫炎；显增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能并能促进PHA诱导小鼠淋巴细胞转化的作用；对小鼠耳廓小血管也有明显的扩张作用；但对CRBC诱导小鼠血清溶血素生成无明显影响，对大肠杆菌、金黄色葡萄球茵感染感染小鼠无明显保护作用。[结论]金鸡制剂具有明显的抗炎、改善微循环和增强免疫功能作用。     

定坤丹胶囊的药效学研究

目的探讨定坤丹胶囊的药效作用。方法采用皮下注入肾上腺素加冰水复制血瘀模型，测定全血黏度、血浆黏度和血细胞比容；采用塑料环和二甲苯法，测定肉芽肿和耳肿胀；采用腹腔注射醋酸法，测定小鼠扭体次数；采用小鼠断头法，测定鼠头存活时间；采用子宫称重法，测定小鼠子宫发育状态。结果定坤丹胶囊可显著降低全血黏度、血浆黏度和血细胞比容，减轻肉芽肿和耳肿胀程度，减少小鼠扭体次数，延长耐缺氧时间，对小鼠子宫发育有显著促进作用。结论定坤丹胶囊具有较好的活血化瘀、抗炎、止痛、抗缺氧和促进子宫发育的作用。     

左旋氧氟沙星滴眼液的药效学研究

目的研究0.3%左旋氧氟沙星(LVFX)滴眼液的体内外抗菌作用.方法采用试管双倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),并观察0.3%LVFX滴眼对兔眼实验性金葡菌和绿脓杆菌角膜炎的治疗效果.结果 0.3%LVFX滴眼液对金葡菌、表葡菌、大肠杆菌、绿脓杆菌等10种菌301株,均有较强的抗菌作用;对兔眼金葡菌和绿脓杆菌角膜炎均有显著疗效,与生理盐水对照组相比较P<0.01.结论 0.3%LVFX滴眼液是治疗敏感细菌所致外眼感染的有效药物.     

壳聚糖包覆米托蒽醌脂质体在荷瘤小鼠体内的组织分布及药效学

考察了壳聚糖包覆米托蒽醌脂质体(CL-MTO)的体外释放以及在荷黑色素瘤小鼠体内的组织分布及药效。采用透析法测定CL-MTO的体外释放度,通过荷瘤小鼠尾静脉注射米托蒽醌溶液剂(I-MTO)、米托蒽醌脂质体(L-MTO)和CL-MTO,考察3种制剂的体内分布特征和靶向性,通过抑瘤率评价药效。结果表明,CL-MTO和L-MTO在pH 6.0～7.4的释放介质中24 h累积释放百分率分别为30.81%～16.15%和41.84%～32.51%。壳聚糖包覆延缓了脂质体的体外释放。与I-MTO相比,两种脂质体的血浆AUC显著增加,心、肾分布减少;CL-MTO的血液AUC与网状内皮系统AUC之比是L-MTO的1.70倍,肿瘤相对摄取率为L-MTO的1.74倍,且药效增强。壳聚糖包覆增加了脂质体的体内外稳定性以及肿瘤靶向性,提高了疗效。     

二姜丸超临界萃取物药效初步研究

目的研究二姜丸超临界萃取物的抗溃疡和镇痛抗炎作用。方法采用大鼠幽门结扎型胃溃疡、大鼠应激性胃溃疡动物模型研究二姜丸超临界提取物抗溃疡作用;采用化学刺激法研究其镇痛抗炎作用。结果二姜丸超临界萃取物各剂量组对大鼠幽门结扎型急性胃溃疡、水浸拘束型大鼠应激性胃溃疡有明显抑制作用;对乙酸、热刺激所致小鼠疼痛均有明显的抑制作用;对乙酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高以及大鼠蛋清性足肿胀均有明显抑制作用。结论二姜丸超临界萃取物具有一定的抗溃疡以及镇痛、抗炎作用。     

伟剑的主要药效学及毒性研究

目的：研究伟剑的主要药效学及毒性，为临床应用提供理论基础。方法：应用电刺激阴茎等手段研究伟剑对大小鼠性功能的影响，观察大鼠经口灌服及腹腔注射伟剑的急性毒性和长期毒性情况。结果：伟剑能明显缩短去睾丸大鼠的电刺激阴茎勃起潜伏期，明显缩短去睾丸小鼠的性交潜伏期，并增加去睾丸小鼠的性交次数，增加交配后雌性小鼠的精栓出现率；急性毒性试验测得伟剑的口服半数致死量（LD50）为901.53mg/kg，腹腔注射的LD50为319.60mg/kg；长期毒性试验研究表明该药在大剂量时可轻度升高谷丙转氨酶，轻度降低血糖、总胆红素及胆固醇，而对其他血液生化指标无影响。结论：伟剑具有较明显的增强性功能的作用，且毒性较小。     

追风舒经活血片的药效学研究

目的 :观察追风舒经活血片 ( ZFSHJHXP)的抗炎镇痛作用和对血液流变学的影响。方法 :采用二甲苯诱发小鼠耳廓肿胀法 ,角叉菜胶致足跖肿胀法 ,棉球肉芽肿法研究其抗炎作用 ;用乙酸扭体法研究其镇痛作用 ;用 WTP- B1型毛细血管血液粘度计测定血液流变学指标。结果 :追风舒经活血片对二甲苯所致的小鼠耳水肿及大鼠角叉菜胶所致足肿胀有明显抑制、镇痛作用 ,可明显抑制棉球肉芽增生 ;可降低全血高切、低切比粘度。结论 :追风舒经活血片具有明显的抗炎、镇痛和改善血液流变性的作用 ,适用于关节炎等风湿痹证的临床治疗。