哮喘患儿支气管诱导痰液中P物质含量变化的临床研究

目的　研究支气管哮喘患儿急性发作期、缓解期支气管诱导痰液中P物质含量变化及临床意义。方法　用高渗盐水超声雾化吸入法留取研究组及对照组儿童支气管诱导痰液。其中哮喘急性发作期组 34例 (3d内无静脉或口服激素史 ) ;哮喘缓解期组 30例 ;健康对照组 2 2例。用放射免疫方法检测各组支气管诱导痰中P物质含量。结果　哮喘患儿急性发作期支气管诱导痰中P物质含量明显高于缓解期及正常对照组 ,差异显著 ,P均 <0 0 1。缓解期组与正常对照组比较 ,差异无显著性 ,P >0 0 5。结论　哮喘患儿急性发作期支气管诱导痰中P物质含量显著增高 ,缓解期降低 ,接近正常水平 ;提示支气管诱导痰中P物质含量与儿童哮喘的发作及缓解关系密切 ,可做为一种临床监测指标。     

哮喘儿童不同时期痰液细胞的变化及意义

目的分析哮喘患儿不同时期痰液细胞的变化,探讨其在哮喘发病中的作用。方法收集25例急性发作期哮喘患儿、19例缓解期哮喘患儿及10例正常儿童的痰液,比较各组之间痰液细胞成分的差异。结果哮喘患儿痰液中性粒细胞明显增多,尤其在急性发作期,随病情缓解中性粒细胞减少,淋巴细胞增多;哮喘患儿上皮细胞较正常儿童增多;正常儿童诱导痰液细胞分类以巨噬细胞为主。结论中性粒细胞可能在儿童哮喘的发病中扮演重要角色,淋巴细胞可能在维持哮喘慢性气道炎症中发挥作用。     

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目的了解布地奈德联合沙丁胺醇雾化吸入治疗儿童哮喘急性发作前后其气道炎性细胞、白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化,探讨其影响机制。方法对上海市第五人民医院2002-09—2003-12收治的急性哮喘发作患儿采用上述联合治疗1周,共对34例急性发作期、24例缓解期患儿和15名正常儿童的诱导痰液进行炎性细胞计数和分类,测定其中IL-6、IL-8、TNF-α水平。结果急性期哮喘患儿的总细胞数、嗜酸性细胞、中性粒细胞和单核细胞比例及IL-8、IL-6、TNF-α水平均高于正常对照组。缓解期哮喘患儿除嗜酸细胞及淋巴细胞比例明显高于正常对照组外,其余上述炎性细胞比例及细胞因子水平均降至正常。结论布地奈德联合沙丁胺醇雾化吸入可显著降低急性哮喘发作患儿气道分泌物内嗜酸性细胞、中性粒细胞和单核细胞数量及IL-8、IL-6、TNF-α水平。     

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目的探讨诱导痰细胞和白细胞介素8(IL8)、白细胞介素9(IL9)、嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)在儿童哮喘发病中的作用及相互关系。方法以2004年9月至2005年3月重庆医科大学附属儿童医院确诊哮喘的44例患儿为研究对象,其中急性发作期25例、缓解期19例,同时选10例因骨骼畸形入院的患儿作对照组,进行诱导痰的细胞分类检查和ELISA方法检测IL8、IL9、eotaxin。结果哮喘患儿诱导痰细胞总数明显升高,急性发作期诱导痰中性粒细胞数明显高于缓解期和对照组,缓解期淋巴细胞数明显高于急性发作期和对照组,嗜酸性粒细胞各组间比较差异无显著性意义;哮喘患儿诱导痰IL8、IL9质量浓度与对照组比较有明显升高,且IL8、IL9质量浓度与中性粒细胞百分数呈正相关,eotaxin在各组间比较差异无显著性意义。结论与成人过敏性哮喘不同,中性粒细胞在儿童哮喘的发病中扮演重要角色,IL8趋化中性粒细胞聚集于气道,中性粒细胞在IL9的作用下产生和释放IL8,三者相互影响,共同参与哮喘的发病。     

哮喘患儿外周血T淋巴细胞上前列腺素D2受体改变研究

目的：哮喘的慢性气道炎症与TH2的极化有关,炎症介质前列腺素D2（PGD2）可通过T淋巴细胞上前列腺素D2受体（DP1/CRTH2）调控其极化和分泌功能,而且CRTH2是TH2细胞的特征性受体,研究不同哮喘病期T淋巴细胞上受体改变,对了解哮喘患儿中TH2极化状态和哮喘发病机制有重要意义。方法：正常对照组35例,哮喘急性发作期组42例和临床缓解期组30例。用酶联免疫吸附法测定外周血IL-4,IL-5 和IFN-γ,用放射配体结合分析法测定外周血T细胞上DP1/CRTH2结合容量。结果：哮喘急性发作期和临床缓解期组T淋巴细胞上总结合和CRTH2受体结合容量比正常对照组显著增加（P<0.01）;DP1差异无显著性。哮喘急性发作期和临床缓解期组TH2细胞因子IL-4、IL-5比正常对照组显著增加（P<0.01）;TH1细胞因子IFN-γ比正常对照组显著减少（P<0.01）。结论：支气管哮喘病人临床缓解期和急性发作期外周血T淋巴细胞上CRTH2受体表达增加,外周血中TH2细胞因子分泌增加, TH1细胞因子分泌减少, 提示在哮喘病人中存在TH2的极化状态,应用CRTH2拮抗剂可能是以后哮喘治疗的一个新靶点。［中国当代儿科杂志,2009,11（3）：199-202］     

急性哮喘发作患儿诱导痰液炎性细胞、白细胞介素-6、-8变化的意义

目的 了解儿童哮喘急性发作时气道炎性特征及临床意义 方法 对34例急性发作期、24例稳定期哮喘患儿和15例正常儿童的诱导痰液进行炎性细胞计数和分类,并测定其中白细胞介素-6(IL-6)、IL-8水平,分析炎性细胞与上述细胞因子及最大呼气流速(PEF)的关系 结果 哮喘急性发作组总细胞数较正常对照组明显增高,急性发作组嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞及单核细胞比例均高于正常对照组,淋巴细胞比例明显低于正常对照组,稳定组EOS比例明显高于正常对照组 EOS比例与PEF呈显著负相关,IL-8水平与中性粒细胞呈显著正相关,急性发作期IL-6水平与EOS呈显著正相关 结论 急性哮喘发作患儿气道炎症是由EOS、中性粒细胞及单核细胞参与的炎症,IL-6、IL-8可能是参与此过程的重要细胞因子 痰液EOS数与病情严重程度相关,可作为监测病情及疗效的指标之一 针对这些细胞因子的治疗具有潜在价值     

哮喘患儿CD4+CD25+调节性T细胞及IL-10和TGF-β1的变化

目的：通过测定和分析哮喘急性发作期与缓解期儿童外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞及其相关细胞因子白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF-β1）在哮喘发病中的变化情况,探讨哮喘发作的新的免疫机制。方法：分别采集74例哮喘发作期和28例哮喘缓解期患儿及20例健康儿童外周静脉血,通过流式细胞仪分析及酶联免疫吸附试验（ELISA）测定CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的百分比和血浆中IL-10和TGF-β1水平。结果：①哮喘发作期患儿外周血中CD4+CD25+调节性T细胞百分率及IL-10水平较缓解期及对照组明显降低（P<0.01）,而哮喘缓解期明显升高接近正常水平; ②哮喘急性发作期患儿TGF-β1水平较缓解期及对照组明显升高（P<0.05）。哮喘缓解期患儿TGF-β1水平明显降低,仍高于对照组水平; ③哮喘发作期、缓解期及对照组各组之间CD4+CD25+T细胞百分率与IL-10、TGF-β1无相关性（P>0.05）。结论：哮喘发作期患儿CD4+CD25+调节性T细胞和IL-10数量和分泌水平降低、TGF-β1水平增高,导致了全身和局部对炎症反应的抑制作用减弱,可能是导致哮喘发作的原因之一。［中国当代儿科杂志,2009,11（10）：829-832］     

哮喘发作患儿诱导痰液中炎性细胞及IL-6、IL-8、TNF-α水平分析

目的 了解儿童哮喘急性发作时气道炎性特征及临床意义。方法 对34例哮喘急性发作期、24例哮喘缓解期患儿和15例正常儿童的诱导痰液进行炎性细胞计数和分类，并测定其中白细胞介素6、8(IL-6、8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平，分析炎性细胞与上述细胞因子及最大呼气流速(PEF)之间的关系。结果 急性组的总细胞数、嗜酸性细胞、中性粒细胞单核细胞比例及IL-8、IL-6、TNF-α水平均高于正常对照组。缓解组除嗜酸细胞及淋巴细胞比例明显高于正常对照组外，其余上述炎性细胞比例及细胞因子水平均降至正常。嗜酸性细胞比例与PEF呈显著负相关，IL-8水平与中性粒细胞呈显著正相关，急性组IL-6水平与嗜酸性细胞呈显著正相关。结论 除嗜酸细胞和单核细胞外，中性粒细胞也参与了哮喘发作患儿的气道炎症过程，IL-6、IL-8、TNF-α可能是参与这种过程的重要细胞因子。诱导痰液中上述炎性细胞及细胞因子的变化，可用于判断病情及指导治疗。     

诱导痰液与哮喘患儿气道炎症的关系探讨

目的探讨简便有效的诱导痰液及细胞分析方法,了解儿童哮喘发作期气道炎症的特点。方法运用高渗盐水雾化吸入诱导痰液的方法,收集３７例哮喘发作期患儿、４８例正常儿童（对照组）痰液。一部分痰液经二硫苏糖醇（ＤＴＴ）液化后,在血球计数板上行细胞总计数;另一部分痰液涂片经瑞氏、甲苯胺蓝染色行细胞分类计数。结果哮喘组８４％取痰成功,诱导过程中呼气峰流速（ＰＥＦ）未见下降（Ｐ＞００５）。痰液细胞总计数哮喘组为（１１２±８９）×１０９／Ｌ,对照组为（７１±６２）×１０９／Ｌ（Ｐ＜００５）。嗜酸性粒细胞、肥大细胞在哮喘发作期气道中明显升高（Ｐ＜００１）。结论诱导痰液分析、评判哮喘患儿气道炎症是一种安全、可靠的新研究方法;嗜酸性细胞、肥大细胞为哮喘发作的主要效应细胞。     

Foxp3表达与CD+4CD+25调节性T细胞在儿童哮喘发病中的作用

目的研究Foxp3基因表达与CD+4CD+25调节性T细胞在哮喘发病中的作用.方法以确诊哮喘的患儿为研究对象,急性发作期15例、缓解期15例,同期选10例正常儿童作对照,提取外周血单个核细胞(PBMC)进行CD4、CD25表面标志及血浆、培养上清液IL-4、IFN-γ、IL-10和TGF-β等细胞因子的ELISA检测,同时收集哮喘患儿和正常儿童的诱导痰,用RT-PCR方法检测PBMC及诱导痰中转录因子Foxp3-mRNA的表达.结果 PBMC CD+4CD+25T细胞百分率在哮喘急性发作期、缓解期分别为(10.1±2.1)%、(11.7±2.5)%,低于对照组的(15.5±2.7)%(P分别<0.01、<0.05);对照组PBMC在体外培养后CD+4CD+25细胞百分率显著升高,同培养前比较差异有统计学意义(P<0.01).PBMC Foxp3-mRNA表达水平(Foxp3/β-actin) 在哮喘急性发作期、缓解期分别为0.46±0.14 、0.50±0.19,低于对照组0.77±0.22,诱导痰Foxp3-mRNA表达水平哮喘患儿也低于对照组;PBMC在体外培养后对照组Foxp3-mRNA表达水平较培养前升高(P<0.05),而哮喘患儿培养前后Foxp3-mRNA表达水平无显著变化.血浆及培养上清液IFN-γ、TGF-β在哮喘急性发作期、缓解期低于对照组 (P<0.05),且IFN-γ、TGF-β与PBMC Foxp3-mRNA水平、CD+4CD+25细胞百分率呈正相关. 哮喘患儿血浆及培养上清液IL-4显著高于对照组,急性发作期血浆IL-10显著高于对照组,而缓解期与正常组无显著性差异;IL-4、IL-10与PBMC Foxp3-mRNA水平、CD+4CD+25细胞百分率无相关性.结论哮喘患儿的TGF-β分泌不足、Foxp3基因表达降低、CD+4CD+25调节性T细胞数量减少及分化发育障碍可能在儿童哮喘的发病中起重要作用.     

Vascular endothelial growth factor overexpression in induced sputum of children with bronchial asthma

Vascular endothelial growth factor (VEGF) induces angiogenesis and increases vascular permeability participating in narrowing of the airway lumen that follows lung injury. We sought to investigate the expression of VEGF in induced sputum during and after recovery from acute episodes of bronchial asthma in children. Eighteen asthmatic children with acute attacks of varying severity were subjected to VEGF estimation by an enzymatic immunoassay in induced sputum. They were followed up till complete remission of symptoms and signs and were then retested. VEGF was also estimated in sputum induced from age 34 and sex-matched healthy children enrolled as a control group. The sputum VEGF levels during acute asthma [median = 71 ng/ml; mean (s.d.) = 114.6 (121.8) ng/ml] were significantly higher than the levels estimated during remission [median = 50 ng/ml; mean (s.d.) = 45.7 (24.2) ng/ml] and both were higher than the corresponding levels of the control group [median = 36 ng/ml; mean (s.d.) = 31.3 (17.2) ng/ml]. VEGF levels during asthmatic episodes correlated positively to the recovery levels (r = 0.6, p = 0.009). The patients' VEGF expression did not vary with asthma severity, serum total IgE concentration, peripheral blood eosinophil count, or erythrocyte sedimentation rate of patients. Children on corticosteroids inhalation therapy at enrollment had sputum VEGF levels that were comparable to those on other therapies. The increased expression of sputum VEGF in asthmatic children reinforces the concept that it might have a pathogenetic role in bronchial asthma and may represent a biomarker of airway inflammation.     

Vascular endothelial growth factor overexpression in induced sputum of children with bronchial asthma

Vascular endothelial growth factor (VEGF) induces angiogenesis and increases vascular permeability participating in narrowing of the airway lumen that follows lung injury. We sought to investigate the expression of VEGF in induced sputum during and after recovery from acute episodes of bronchial asthma in children. Eighteen asthmatic children with acute attacks of varying severity were subjected to VEGF estimation by an enzymatic immunoassay in induced sputum. They were followed up till complete remission of symptoms and signs and were then retested. VEGF was also estimated in sputum induced from age 34 and sex-matched healthy children enrolled as a control group. The sputum VEGF levels during acute asthma [median = 71 ng/ml; mean (s.d.) = 114.6 (121.8) ng/ml] were significantly higher than the levels estimated during remission [median = 50 ng/ml; mean (s.d.) = 45.7 (24.2) ng/ml] and both were higher than the corresponding levels of the control group [median = 36 ng/ml; mean (s.d.) = 31.3 (17.2) ng/ml]. VEGF levels during asthmatic episodes correlated positively to the recovery levels (r = 0.6, p = 0.009). The patients' VEGF expression did not vary with asthma severity, serum total IgE concentration, peripheral blood eosinophil count, or erythrocyte sedimentation rate of patients. Children on corticosteroids inhalation therapy at enrollment had sputum VEGF levels that were comparable to those on other therapies. The increased expression of sputum VEGF in asthmatic children reinforces the concept that it might have a pathogenetic role in bronchial asthma and may represent a biomarker of airway inflammation.     

诱导痰IL-5水平与儿童哮喘发作严重程度的关系

目的　 观察急性发作期哮喘患儿诱导痰中白细胞介素 5 (IL 5 )水平变化及其与哮喘发作期病情分度的关系 ,探讨其在哮喘发病机制中的作用和在临床诊治中的应用意义。 方法 　按随机分层设计 ,84例急性发作期哮喘患儿分为轻、中、重度发作组 ,3 0例健康儿童作为对照组。采用超声雾化高渗盐水诱导痰液 ,以酶联免疫法 (ELISA)测定诱导痰中IL 5水平 ,同时进行诱导痰中嗜酸细胞 (EOS)计数 ,测定肺通气功能指标FEV1 %。 结果 　哮喘急性发作期患儿诱导痰中EOS计数、IL 5水平均高于健康儿童组 ,FEV1 %则低于健康儿童组 ,均具有显著性差异 (P <0 0 1)。急性发作期哮喘患儿轻、中、重度各组均明显升高 ,轻、中、重度发作各组间两两比较差异均有显著性 (P <0 0 5 )。且痰液中IL 5水平与嗜酸细胞 (EOS)计数之间呈显著正相关 (r =0 482 ,P <0 0 1) ,与FEV1 %值之间呈显著负相关 (r=-0 64 7,P <0 0 1)。 结论 　检测诱导痰中IL 5水平可能较EOS计数更能准确反映哮喘患儿气道炎症和哮喘发作时的病情程度 ,可作为临床评价哮喘病情和药物疗效的准确灵敏的指标。     

尿白三烯E4检测在监测儿童支气管哮喘转归中的应用

目的 探讨尿白三烯E4(LTE4)检测在监测儿童支气管哮喘(哮喘)转归中的作用及哮喘患儿尿LTE4与呼吸道阻力(Rint)、外周血嗜酸性粒细胞(EOS)计数的关系.方法 选取30例1～5岁未服用过白三烯受体拮抗剂孟鲁司特钠的哮喘患儿(哮喘组),分为急性发作期、慢性持续期(服用孟鲁司特钠1个月)及临床缓解期(服用孟鲁司特钠3个月);另选取20例健康儿童作为健康对照组.采用竞争性ELISA法检测4组儿童尿LTE4水平,并测定Rint与EOS.结果 哮喘组急性发作期、慢性持续期及临床缓解期患儿尿LTE4及Rint水平均明显高于健康对照组(Pa＜0.01);3个哮喘组尿LTE4,Rint及外周血EOS比较差异均有统计学意义(F=870.08、496.58、195.98,Pa＜0.01).急性发作期哮喘患儿的尿LTE4水平与Rint无相关性(r=0.11,P＞0.05).与EOS亦无相关性(r=-0.12,P＞0.05).结论 哮喘患儿急性发作期尿LTE4水平明显升高,随着哮喘症状的好转,尿LTE4水平也逐渐下降;动态监测哮喘患儿尿LTE4水平,可以为儿童哮喘的临床诊断,白三烯受体拮抗剂治疗哮喘的疗效评估提供客观依据.     

神经激肽A在哮喘患儿血浆含量变化的动态研究

目的　动态研究哮喘患儿血浆神经激肽A(NKA)含量变化规律 ,探讨NKA与小儿哮喘的关系。方法　用酶联免疫方法 ,动态测定 35例不同严重程度哮喘小儿血浆NKA在哮喘发作期及其临床症状缓解期的含量变化。结果　 (1 )小儿哮喘发作期血浆NKA含量 [(2 56± 1 53)ng/L]高于自身症状缓解期 [(70± 66)ng/L]及正常对照组 [(38± 6)ng/L] ,差异有非常显著意义 (q分别为9 497、8 599,P均 <0 0 1 ) ;哮喘症状缓解期血浆NKA含量较正常对照组差异无显著意义 (q =1 2 4 5 ,P >0 0 5)。 (2 )哮喘小儿病情加重 ,血浆NKA含量亦随之增高 ,重度哮喘发作时血浆NKA含量 [(2 96± 1 70 )ng/L]明显高于轻、中度哮喘发作时含量 [(1 90± 99)ng/L] ,差异有显著意义 (q =3 77,P <0 0 5)。结论　小儿哮喘发作期血中NKA含量明显增高 ,病情愈重增高越明显 ,随哮喘症状缓解血中NKA含量下降至正常水平 ;血中NKA含量的变化与小儿哮喘的发作及缓解关系密切     

哮喘患儿血清IL 12 TGFβ1 与IgE 水平变化的研究

目的：检测哮喘患儿不同病期的白细胞介素12 ( IL-12) 、转化生长因子β1 ( TGFβ1 ) 与免疫球蛋白E( IgE) 水平变化的规律,并探讨不同病期IL-12,TGFβ1水平与IgE水平的相关性,据此阐述它们在哮喘中的临床意义。方法：采用ELISA 方法检测85例哮喘患儿及30例正常儿童的血清IL-12,TGFβ1与总IgE 水平。结果：哮喘组血清IL-12,TGFβ1水平明显低于对照组,而IgE 水平则哮喘组明显高于对照组,且发作期IL-12,TGFβ1 水平（28.42±10.73 ng/L,40.25±11.73 pg/mL）明显低于缓解期（40.42±15.26 ng/L,65.41±22.38 pg/mL）,差异有显著性 (P< 0. 01),缓解期血清IL-12,TGFβ1 水平明显低于对照组（67.42±20.58 ng/L,178.54±90.56 pg/mL）,差异有显著性(P<0.01),发作期血清IgE 水平（280.35±80.54 IU/mL）明显高于缓解期（145.67±51.25 IU/mL）, 差异有显著性(P< 0.01), 缓解期血清IgE 水平明显高于对照组（53.61±13.32 IU/mL）, 差异有显著性(P<0.01),哮喘患儿血清IL-12,TGFβ1水平与IgE呈负相关(P< 0.01)。结论：哮喘患儿存在IL-12,TGFβ1及IgE 水平失衡,提示IL-12,TGFβ1 在哮喘的发病中起着重要作用,检测它们的水平可为哮喘的诊断及判断病情提供依据。     

哮喘患儿诱导痰Clara细胞分泌蛋白与嗜酸性粒细胞阳离子蛋白检测的意义

目的探讨Clara细胞分泌蛋白（CCSP）与嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（ECP）在儿童支气管哮喘发病机制中的作用,评价其反映哮喘呼吸道炎症的价值。方法本院哮喘专科患儿31例。男18例,女13例;年龄3.7-12.0岁,平均7.6岁;均按全球哮喘防治创议（GINA）方案系统吸入糖皮质激素治疗,在慢性持续期和临床缓解期分别留取诱导痰标本。用酶联免疫吸附法（ELISA）测定CCSP水平,以Pharmacia UniCAP系统检测ECP水平。结果哮喘慢性持续期患儿诱导痰CCSP质量浓度明显低于临床缓解期（P〈0.001）,而ECP水平明显高于临床缓解期（P〈0.001）,且二者之间呈负相关（r=-0.676P〈0.001）。结论CCSP在哮喘的发病过程中起抗炎作用,而ECP起促炎作用,同时监测诱导痰CCSP、ECP的变化,可较好地反映呼吸道炎症情况,评价疗效及预后。