IL-4对脂多糖激活的小鼠小胶质细胞炎症相关因子表达的影响

目的探讨白细胞介素4（IL-4）对脂多糖（LPS）诱导激活的小鼠小胶质细胞分泌的肿瘤坏死因子仪（TNF-α）、白细胞介素1β（IL—1β）、白细胞介素6（IL-6）和基质金属蛋白酶（MMP9）表达的影响。方法用IL-4处理经LPS激活的小鼠小胶质细胞24h以酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-6和MMP9的浓度,同时通过RT—PCR技术检测小胶质细胞各种细胞因子mRNA水平的表达。结果LPS能够激活小胶质细胞,使TNF-α、IL—1β、IL-6和MMP9的表达量与对照组相比明显升高;IL-4能够降低LPS激活的小胶质细胞分泌TNF—α、IL-1β、IL-6和MMP9及其mRNA表达的水平。结论小鼠实验结果提示：IL-4可能通过抑制活化的小胶质细胞炎症相关因子的产生而发挥神经保护作用。     

艾司氯胺酮通过上调miR-138-5p表达抑制LPS诱导的星形胶质细胞凋亡和炎症反应的分子机制研究

目的 探讨艾司氯胺酮对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞凋亡和炎症反应的影响及分子机制。方法 星形胶质细胞HA1800分为对照(NC)组,0.5、1.0、2.0μg/mL LPS组,低、中、高剂量组,miR-138-5p组,miR-con组,高剂量+anti-miR-138-5p组、高剂量+anti-miR-con组;流式细胞术检测HA1800细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase-3)蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;反转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测微小RNA(miR)-138-5p表达水平。结果 浓度越高的LPS诱导的星形胶质细胞HA1800凋亡率、Cleaved-caspase-3表达水平、TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高(P<0.05)。剂量越高的艾司氯胺酮处理后,LPS诱导的HA1800细胞的凋亡率、Cleaved-caspase-3表达水平、TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低,miR-138-5p表达水平...     

黄芪多糖对脂多糖诱导人THP21单核细胞MCP-1与IL-6表达的影响

目的通过研究黄芪多糖（astragalus polysaccharide,APS）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导人单核细胞株TI-IP21细胞趋化蛋白1（monocyte chemoattractant protein1,MCP-1）及白介素6（imerleukin．6,IL-6）的表达影响,探讨炎症状态下APS对单核细胞炎症因子表达的调控。方法体外培养人单核细胞THP21,以脂多糖刺激建立炎症细胞模型。以MTT法检测黄芪多糖对细胞的毒性,以荧光定量RT-PCR法检测黄芪多糖对THP21细胞MCP-1与IL-6mRNA水平表达的影响,以ELISA法检测黄芪多糖对THP21细胞MCP-1与IL-6细胞外分泌的影响。结果黄芪多糖在50、100、200μg／mL浓度下对THP21细胞均无明显毒性,100μg／mL的黄芪多糖明显抑制LPS诱导THP21细胞MCP-1与IL-6mRNA表达的增加及培养上清中MCP—1与IL-6的增加。结论黄芪多糖抑制脂多糖诱导的人单核细胞株THP21中MCP-1与IL-6的表达及分泌。     

长链非编码RNA NNT-AS1在肺炎患儿血清中的表达及其对脂多糖诱导的肺上皮细胞损伤的影响

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA) NNT-AS1在肺炎患儿血清中的表达及其对脂多糖（LPS）诱导的肺上皮细胞损伤的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测NNT-AS1相对表达水平。将肺泡上皮细胞BEAS-2B分为对照组、LPS组（1 mg/L的LPS处理细胞）、LPS+si-NC组（转染si-NC,LPS处理细胞）、LPS+si-NNT-AS1组（转染si-NNTAS1,LPS处理细胞）、LPS+si-NNT-AS1+SB203580组（转染si-NNT-AS1,LPS处理和MAPK信号通路抑制剂SB203580细胞）。qRT-PCR检测NNT-AS1相对表达水平，流式细胞术检测细胞凋亡，蛋白质印迹法（Western blot）检测cleaved-caspase3、Bax、p-ERK1/2、p-p38 MAPK蛋白表达，ELISA检测IL-6、IL-1β、TNF-α。结果 NNT-AS1在肺炎患儿血清中的相对表达水平高于健康对照。与对照组相比，LPS组中NNT-AS1相对表达水平、凋亡率、cleaved-caspase3、Bax、p-ERK1/2、p-p38MA...     

益母草碱对糖尿病脑病海马神经元细胞损伤及炎症的影响

目的 探究益母草碱对糖尿病脑病（DE）海马神经元细胞损伤及炎症的影响。方法 利用高糖诱导的海马神经元（HT-22）细胞建立DE细胞模型,同时给予益母草碱干预,24 h后利用四氮唑盐比色法（MTT）检测海马神经元细胞损伤,利用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平,利用Western blot检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、脑源性神经营养因子（BDNF）蛋白表达情况。结果 益母草碱能显著抑制高糖诱导的HT-22细胞活力,并降低IL-1β、TNF-α、IL-6水平。Western blot实验结果显示,益母草碱可以降低凋亡蛋白caspase-3、Bax的表达,促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,提高高糖诱导的HT-22中BDNF的表达。结论 益母草碱能通过抑制海马神经元凋亡及炎症反应来改善DE中高糖诱导的海马神经元损伤。     

二烯丙基三硫对脂多糖诱导小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S细胞因子生成的影响

目的 探讨二烯丙基三硫（DATS）对脂多糖（LPS）诱导小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S细胞因子生成的影响。方法 体外培养MH-S细胞，用DATS和（或）LPS进行干预。酶联免疫吸附法测定细胞上清液中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）浓度。反转录PCR检测细胞中TNF-α、IL-1β mRNA表迭。结果 LPS（1mg／L）孵育细胞1、2、3、6h，TNF-α、IL-1β的蛋白生成及其mRNA表达均较对照组明显增加（P〈0．01），呈时间依赖性。用DATS（0．1、0．5、2．5、5．0ms／L）预处理细胞30min后再给予LPS刺激3h，可使TNF-α、IL-1β含量及其mRNA表达明显降低，并呈剂量依赖性，其中TNF-α含量仍高于对照组（P〈0．05），但IL-1β含量在2．5、5mg／LDATS作用下可降至对照组水平。单独DATS对TNF-α及IL-1β的生成及其mRNA表达无明显影响（P〉0．05）。结论 DATS通过抑制LPS诱导的小鼠MH-S细胞TNF-α、IL-1β mR-NA表达而减少其蛋白生成，具有直接的抗炎效应，这是DATS预防ALI发生、减轻肺组织损伤的重要机制。     

KLF4在LPS诱导的心肌细胞损伤中的作用研究

背景:KLF4作为一种转录因子在保持血管内皮功能中发挥重要作用，然而其是否能够保护心肌细胞免受脂多糖诱导的损伤尚不清楚。目的探讨KLF4在脂多糖诱导的心肌细胞损伤中的作用。方法:分离培养原代大鼠乳鼠心肌细胞，将其随机（随机数字法）分为5组：空白组，阴性对照组（NC组），NC+脂多糖刺激组（NC+LPS组），KLF4过表达组，KLF4过表达+LPS组。采用MTT法检测细胞活性，采用试剂盒检测细胞活性氧（ROS），超氧化物歧化酶（SOD2），谷胱甘肽过氧化物酶（Gpx）和丙二醛（MDA）的水平；采用酶联免疫吸附法（Elisa）检测细胞中肿瘤坏死因子（TNFa），白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-6的水平。采用Tunel染色检测细胞凋亡。采用免疫印迹检测TLR4和核因子E2相关因子2（NRF2）的蛋白水平。结果:心肌细胞转染KLF4过表达腺病毒后，细胞中KLF4的表达明显高于NC组（ P<0.05）。NC+LPS组细胞活性明显低于NC组（ P<0.05），KLF4过表达+LPS组细胞活性高于NC+LPS组（ P<0.05）。与对照组相比，NC+LPS组中的心肌细胞TNFα、IL-1β、IL-6蛋白表达水平明显升高（ P<0.0001），KLF4过表达+LPS组心肌细胞TNFα、IL-1β、IL-6蛋白表达水平则显著降低（ P<0.0001）。NC+LPS组心肌细胞ROS和MDA水平明显高于NC组，而SOD2和Gpx的活性低于NC组（ P<0.0001）；KLF4过表达+LPS组心肌细胞ROS和MDA水平的水平明显降低，而SOD2和Gpx的活性明显升高（ P<0.0001）。LPS组心肌细胞凋亡数量明显高于NC组，KLF4过表达+LPS组心肌细胞凋亡数量明显降低（ P<0.001）。LPS组心肌细胞TLR4总蛋白水平高于NC组，NRF2的核蛋白水平低于NC组；KLF4过表达+LPS组心肌细胞TLR4的总蛋白水平降低，NRF2的核蛋白水平显著增高（ P<0.001）。 结论：:KLF4可抑制LPS诱导的心肌细胞损伤，其作用机制可能是通过抑制LPS诱导的心肌细胞中TLR4的表达，促进NRF2向细胞核转移来抑制炎症因子释放，减轻氧化应激损伤及抑制细胞凋亡。     

原钙黏附蛋白7在脂多糖诱导的肾小管上皮细胞焦亡中的作用

目的 探讨原钙黏附蛋白7（PCDH7）是否参与脂多糖（LPS）刺激引起的肾小管上皮细胞（HK-2）焦亡过程。方法 构建LPS刺激HK-2损伤模型,使用RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测细胞中PCDH7、NLR家族Pyrin域蛋白3（NLRP3）、caspase-1、和IL-1β蛋白的表达变化。MTT法测定细胞活力,TUNEL法确定细胞焦亡率,ELISA法检测细胞分泌TNF-α、IL-6水平,全自动生化分析仪检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH）含量。结果 与Control组比较,LPS组细胞生存率下降,细胞凋亡率升高,炎症因子TNF-α和IL-6水平升高,细胞损伤指标LDH含量明显升高,PCDH7的蛋白和mRNA表达明显下调,细胞焦亡指标NLRP3、caspase-1、IL-1β蛋白和mRNA表达明显上调（P均< 0.05）。结论 LPS通过下调PCDH7的表达,促进肾小管上皮细胞发生明显细胞焦亡损伤。     

KLF4在LPS诱导的心肌细胞损伤中的作用研究

背景:KLF4作为一种转录因子在保持血管内皮功能中发挥重要作用,然而其是否能够保护心肌细胞免受脂多糖诱导的损伤尚不清楚。目的探讨KLF4在脂多糖诱导的心肌细胞损伤中的作用。方法:分离培养原代大鼠乳鼠心肌细胞,将其随机（随机数字法）分为5组：空白组,阴性对照组（NC组）,NC+脂多糖刺激组（NC+LPS组）,KLF4过表达组,KLF4过表达+LPS组。采用MTT法检测细胞活性,采用试剂盒检测细胞活性氧（ROS）,超氧化物歧化酶（SOD2）,谷胱甘肽过氧化物酶（Gpx）和丙二醛（MDA）的水平;采用酶联免疫吸附法（Elisa）检测细胞中肿瘤坏死因子（TNFa）,白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-6的水平。采用Tunel染色检测细胞凋亡。采用免疫印迹检测TLR4和核因子E2相关因子2（NRF2）的蛋白水平。结果:心肌细胞转染KLF4过表达腺病毒后,细胞中KLF4的表达明显高于NC组（ P<0.05）。NC+LPS组细胞活性明显低于NC组（ P<0.05）,KLF4过表达+LPS组细胞活性高于NC+LPS组（ P<0.05）。与对照组相比,NC+LPS组中的心肌细胞TNFα、IL-1β、IL-6蛋白表达水平明显升高（ P<0.0001）,KLF4过表达+LPS组心肌细胞TNFα、IL-1β、IL-6蛋白表达水平则显著降低（ P<0.0001）。NC+LPS组心肌细胞ROS和MDA水平明显高于NC组,而SOD2和Gpx的活性低于NC组（ P<0.0001）;KLF4过表达+LPS组心肌细胞ROS和MDA水平的水平明显降低,而SOD2和Gpx的活性明显升高（ P<0.0001）。LPS组心肌细胞凋亡数量明显高于NC组,KLF4过表达+LPS组心肌细胞凋亡数量明显降低（ P<0.001）。LPS组心肌细胞TLR4总蛋白水平高于NC组,NRF2的核蛋白水平低于NC组;KLF4过表达+LPS组心肌细胞TLR4的总蛋白水平降低,NRF2的核蛋白水平显著增高（ P<0.001）。 结论：:KLF4可抑制LPS诱导的心肌细胞损伤,其作用机制可能是通过抑制LPS诱导的心肌细胞中TLR4的表达,促进NRF2向细胞核转移来抑制炎症因子释放,减轻氧化应激损伤及抑制细胞凋亡。     

miR-204-3p靶向CYP2E1介导脂多糖诱导的肾小管上皮细胞损伤

目的探讨miR-204-3p靶向细胞色素P450家族2亚家族E成员1(CYP2E1)介导脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞炎症反应及细胞凋亡的分子机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,qRT-PCR与Western blot分别检测miR-204-3p、CYP2E1的表达量;实验分组:Con组、LPS组、LPS+miR-NC组、LPS+miR-204-3p组、LPS+si-NC组、LPS+si-CYP2E1组、LPS+miR-204-3p+pcDNA组、LPS+miR-204-3p+pcDNA-CYP2E1组;ELISA检测IL-6、TNF-α的水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证miR-204-3p与CYP2E1的靶向结合关系;Western blot检测Bcl-2、Bax的表达量。结果与Con组比较,LPS组细胞中miR-204-3p的表达水平降低,CYP2E1的表达量升高,IL-6、TNF-α的水平升高,凋亡率和Bax蛋白水平升高,Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与LPS+miR-NC组比较,LPS+miR-204-3p组IL-6、TNF-α水平降低,凋亡率和Bax蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与LPS+si-NC组比较,LPS+si-CYP2E1组IL-6、TNF-α的水平降低,凋亡率和Bax蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-204-3p能够靶向结合CYP2E1;与LPS+miR-204-3p+pcDNA组比较,LPS+miR-204-3p+pcDNA-CYP2E1组IL-6、TNF-α的水平升高,凋亡率和Bax蛋白水平升高,Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-204-3p过表达可靶向调控CYP2E1的表达从而抑制LPS诱导的肾小管上皮细胞炎症反应及细胞凋亡。     

PAI-1招募中性粒细胞调控IL-6/STAT3信号通路促进脂多糖诱导的肺细胞损伤

目的探讨纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)对细菌脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞（alveolar epithelial typeⅡcell, AECⅡ）损伤的调控作用及机制。方法 采用免疫印迹法和ELISA检测LPS处理后原代胎鼠AECⅡ细胞内、外PAI-1的表达量。通过CCK8和细胞迁移实验（Transwell）,用PAI-1重组蛋白和PAI-039(PAI-1的抑制剂)检测PAI-1对中性粒细胞活力、趋化的影响。收集Transwell下室的细胞培养液和AECⅡ,采用ELISA检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)和血小板/内皮黏附因子（platelet/endotheli...     

miR-142-3p在感染后肠易激综合征中的表达及意义

目的 探讨微RNA（miR）-142-3p在感染后肠易激综合征（PI-IBS）中的表达及意义,进一步阐明miR-142-3p调控PI-IBS发生发展的分子机制。方法 使用脂多糖（LPS）刺激后,在大鼠肠上皮细胞上考察miR-142-3p对高迁移率族蛋白B1（HMGB1）-Toll样受体4（TLR4）靶基因的作用;通过TargetScan预测软件分析发现HMGB1是miR-142-3p的靶基因,之后采用旋毛虫感染建立PI-IBS模型,原代肠上皮细胞进行小干扰RNA（siRNA）转染实验,提取肠上皮细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR检测,检测细胞中 miR-142-3p、HMGB1和TLR4的mRNA表达水平,考察miR-142-3p对HMGB1-TLR4靶基因的作用,并进一步验证HMGB1在miR-142-3p抗炎中的介导作用。结果 炎症基因NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α均为HMGB1-TLR4的靶基因。使用LPS刺激后,施加miR-142-3p大大抑制了HMGB1-TLR4靶基因（NLRP3、IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α）的表达（P均< 0.01）。使用siRNA对肠上皮细胞中的HMGB1靶向敲低后,细胞中的HMGB1表达降低超过80%,HMGB1-TLR4靶基因（NLRP3、IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α）的表达均无明显变化（P均> 0.05）。结论 miR-142-3p在肠上皮细胞中具有抗炎作用,其抗炎作用依赖于HMGB1。     

基于TLR4-NF-κB信号通路的槐果碱改善人支气管上皮细胞炎症和黏液高分泌的机制

目的 基于TLR4-NF-κB信号通路探讨槐果碱（SC）体外抗炎作用及其抗哮喘的潜在效应机制。方法 采用脂多糖（LPS）刺激人支气管上皮细胞NCI-H292诱导体外炎症模型，给予不同浓度SC进行治疗。采用MTT法筛选LPS和SC对NCI-H292细胞的安全浓度；设Control组、LPS组（10μg/mL LPS）、SC组（10μg/mL LPS+不同浓度SC）,ELISA法检测细胞中黏蛋白5AC(MUC5AC)的表达和上清液中白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的分泌情况；RT-PCR法检测细胞中MUC5AC、IL-6、IL-8、髓样分化因子（MyD88）和核因子-κB(NF-κB p65)mRNA的表达；Western blot方法检测细胞中Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)、磷酸化p38(p-p38)和磷酸化p65(p-p65)以及细胞核内NF-κB p65的蛋白表达。结果 MTT结果显示，LPS和SC分别在0～10μg/mL、0～40μg/mL浓度范围内对细胞活力无影响；ELISA结果表明，与Control组相比，LPS组细...     

LPS通过促进FGFR1磷酸化诱导肺上皮细胞炎症反应及凋亡*

摘要:目的探讨脂 多糖(LPS)通过促进成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)磷酸化的方式诱导肺上皮细胞炎症反应及凋亡。方法培养肺上皮Beas-2B细胞并进行以下分组处理,以不含药物的培养基处理作为对照组,用5 mg/L LPS刺激作为LPS组,另加入不同浓度FGFR1选择性抑制剂AZD4547(2.5 5.0、10.0 μmol/L)作为AZD4547 组。采用CCK8法检测各组细胞的增殖活力,Tunel法检测细胞凋亡率，ELISA法检测细胞培养基中TNF-c、IL_1βJL-6的含量,Westernblot检测各组细胞总蛋白中磷酸化成纤维细胞生长因子受体1(p-FGFR1)、B淋巴细胞瘤-2基因( Bcl-2)蛋白、Bel-2相关X蛋白( Bax)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶- 3( cleaved caspase-3)以及核蛋白中p65核因子-kB(NF-kB)的表达水平。结果LPS 组Beas-2B细胞的增殖活力及Bel-2 水平均显著低于对照组(t分别为11.421 、17.784,P<0.05),而Beas-2B细胞的细胞凋亡率、p-FGFR1、Bax、cleaved caspase-3 、p65 NF-KB水平及培养基中TNF-ax、IL-1β、IL-6 含量均高于对照组(t分别为9.126、11.329、12.684、13.147、15.027 、11.621 8.925 .9.726, P<0.05);2.5、5.0、10.0 μmol/L浓度AZD4547组Beas-2B细胞的增殖活力及Bcl-2水平均显著高于LPS组(F分别为45.012 .72.286, P<0.05),而细胞凋亡率、p-FGFR1、Bax、cleaved caspase-3、p65 NF-KB水平及培养基中TNF-a JIL-1β、IL-6含量均显著低于LPS组(F分别为43.527, 94.166, 113.028, 102.515, 41.091, 51.301, 30.280, P<0.05),且AZD4547浓度越高,上述变化趋势越显著。结论LPS 诱导肺上皮细胞炎症反应及凋亡激活的作用可能与促进FGFR1磷酸化有关。     

丹参酮ⅡA调节Fas/FasL信号通路对脂多糖诱导的牙髓干细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)调节脂肪酸合成酶（Fas）/脂肪酸合成酶配体（FasL）通路对脂多糖（LPS）诱导的牙髓干细胞增殖和凋亡的影响。方法 鉴定从需正畸的18～20岁患者第三磨牙中分离的人牙髓干细胞（hDPSCs）。用低、中、高剂量TanⅡA处理LPS诱导的hDPSCs后，再用人重组FasL蛋白（rh FasL）干预高剂量TanⅡA作用后的LPS诱导的hDPSCs，检测hDPSCs增殖、凋亡、hDPSCs上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素（IL）-6水平及hDPSCs中增殖细胞核抗原（PCNA）、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)、Fas、FasL蛋白表达。结果 成功分离出hDPSCs。TanⅡA可促进LPS诱导的牙髓干细胞增殖，抑制凋亡，上调PCNA蛋白表达，抑制TNF-α、IL-6水平及Cleaved Caspase-3、Fas、FasL蛋白表达，且呈剂量依赖性，rh FasL对LPS诱导的牙髓干细胞的影响与上述对应指标变化趋势相反（P <0.05）;rh FasL减弱了高剂量TanⅡA对LPS诱导的牙髓干...     

辛伐他汀对脂多糖诱导人THPL-1单核细胞MCP-1表达的影响

【目的】研究辛伐他汀对脂多糖（LPS）诱导人THP-1单核细胞表达单核细胞趋化蛋白-1（MCP1）的影响，探讨辛伐他汀的抗炎作用。【方法】体外培养人THP-1单核细胞，分为对照组、LPS组、辛伐他汀低、中、高浓度组，辛伐他汀三组加入不同浓度辛伐他汀预孵2h与LPS组均加入LPS刺激24h，应用Western blot与ELISA法分别检测各组细胞蛋白与培养基上清中MCP-1水平。【结果】LPS诱导人THP-1单核细胞MCP-1表达显著增加，辛伐他汀呈浓度依赖性显著抑制LPS诱导人THP-1单核细胞MCP-1表达。【结论】辛伐他汀能够抑制LPS诱导人THP-1单核细胞MCP-1表达，提示其具有抗炎作用。     

DPP4/CD26抑制剂对脂多糖致胰岛β细胞炎症反应的影响

目的探讨DPP4抑制剂Sitagliptin对脂多糖(LPS)诱导胰岛β细胞炎症反应的影响及可能机制。方法 Sitagliptin与LPS同时或分别处理RINm细胞一定时间,采用RT-PCR法检测IL-6 mRNA水平,Western blot法检测细胞内IL-6水平及I?Bα蛋白磷酸化水平。结果 RT-PCR结果显示,LPS+Sitagliptin组与LPS组相比IL-6 mRNA水平明显下降(P<0.01)。Western blot结果显示,LPS+Sitagliptin组较LPS组IL-6蛋白水平稍有下降,但无统计学意义(P>0.05);LPS+Sitagliptin组细胞内I?Bα蛋白磷酸化水平较LPS组明显降低(P<0.01)。结论 DPP4/CD26抑制剂在一定程度上能够抑制LPS诱导的IL-6 mRNA表达及I?Bα蛋白磷酸化,其作用机制可能与DPP4/CD26抑制剂干扰NF-κB炎症通路有关。     

miR-204-5p靶向TRIB3对脂多糖诱导的肺微血管内皮细胞损伤的影响

目的 探讨miR-204-5p对脂多糖(LPS)诱导的肺微血管内皮细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法 采用LPS诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)建立细胞损伤模型，实验分组：NC组、LPS组、LPS+miR-con组、LPS+miR-204-5p组、LPS+si-con组、LPS+si-TRIB3组、LPS+miR-204-5p+pcDNA组、LPS+miR-204-5p+pcDNA-TRIB3组；MTT法检测细胞活力；qRT-PCR、Western blot检测miR-204-5p、TRIB3表达；流式细胞术检测细胞凋亡；ELISA检测TNF-α、IL-6水平；双荧光素酶实验检测miR-204-5p与TRIB3的靶向关系。结果 与NC组比较，LPS组细胞活力、miR-204-5p表达量降低(1.00±0.10比0.43±0.04),细胞凋亡率、TRIB3 mRNA(1.00±0.09 vs 2.13±0.18)和蛋白(0.40±0.04 vs 0.83±0.08)水平、TNF-α、IL-6水平升高(P<0.05);过表达miR-204-5p或敲低TRIB3可升高细胞活力，...     

银杏叶提取物通过激活PI3K/AKT通路抑制IL-1β诱导血管内皮细胞的凋亡

目的研究银杏叶提取物对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的血管内皮细胞凋亡的抑制作用及其作用机制。方法对人脐静脉血管内皮细胞进行培养,用IL-1β诱导血管内皮细胞建立细胞凋亡模型:分为对照组、IL-1β组、不同剂量的银杏叶提取物处理组(20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml),对照组为空白对照,IL-1β刺激组给予10 ng/ml IL-1β处理细胞,银杏叶提取物处理组给予相应剂量银杏叶提取物处理细胞。通过CCK-8法检测不同剂量的银杏叶提取物对IL-1β诱导的血管内皮的增殖影响,流式细胞术检测银杏叶提取物对细胞凋亡的影响,Western blot检测通路蛋白PI3K、AKT、p-AKT和凋亡蛋白caspase 3、Bax和Bcl-2的表达情况,RT-PCR检测凋亡相关基因caspase 3、Bax和Bcl-2的表达变化。结果不同剂量的银杏叶提取物能显著提高IL-1β诱导血管内皮细胞的增殖能力,尤其是200μg/ml的银杏叶提取物组对IL-1β诱导血管内皮细胞的增殖能力作用非常显著。与对照组比较,IL-1β组细胞凋亡率、凋亡相关蛋白caspase 3和Bax的表达明显上升,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显下降。与IL-1β组比较,银杏叶提取物预处理组细胞凋亡率、凋亡相关蛋白caspase 3和Bax的表达明显下降,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显上升(P 0. 05)。同时与对照组比较,IL-1β组细胞通路蛋白PI3K和p-AKT蛋白的表达明显下降,而给予银杏叶提取物预处理后,其PI3K和p-AKT蛋白的表达明显上升(P 0. 05)。结论银杏叶提取物对IL-1β诱导的血管内皮细胞的凋亡具有一定的抑制作用,且其具体的抑制机制与激活PI3K/AKT信号通路有关。     

血管平滑肌细胞中ABCA1对炎症因子的调节及其意义

目的:观察在8-Br-cAMP作用下,ABCA1对血管平滑肌细胞中细胞问黏附分子-1(ICAM-1)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)mRNA和蛋白质及IL-1β蛋白质表达的影响,在细胞水平证实ABCA1对动脉粥样硬化(AS)的影响.方法:复苏培养人主动脉平滑肌细胞CC2571,8-Br-cAMP(0.5 mmol/L)刺激3、6、12、24h后,荧光定量RT-PCR、Western蛋白印迹法及ELISA法检测ABCA1、ICAM-1、MCP-1及IL-1β mRNA和蛋白质表达量;用ABCA1的反义寡核苷酸(100 nmol/L)抑制ABCA1的表达,观察8-Br-cAMP刺激下上述指标的改变.结果:予8-Br-cAMP刺激后,主动脉平滑肌细胞CC2571中ABCA1、ICAM-1、MCP-1的mRNA和蛋白及IL-1β蛋白质表达均增高,给予反义寡核苷酸转染后8-Br-cAMP刺激3、6 h上述指标的mRNA表达降低,12、24 h蛋白质表达降低.结论:在主动脉平滑肌细胞,ABCA1可增加8-Br-cAMP诱导的炎症因子表达,参与AS的发生.