转化生长因子-β1和甲壳胺联合作用对老年人牙周膜细胞生长分化功能的影响

目的探讨转化生长因子(TGF)-β1和甲壳胺(chitosan,Chi)联合作用对老年人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法用原代培养的老年人牙周膜细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和酶动力学方法检测Chi 0.1 g/L、TGF-β1 1μg/L和Chi(0.1 g/L)加TGF-β1(1μg/L)对老年人牙周膜细胞增殖和ALP的作用。结果①与对照组比较,3 d和5 d时Chi加TGF-β1组和TGF-β1组及7d时Chi加TGF-β1组和Chi组均能明显增强老年人牙周膜细胞的增殖能力(P<0.05,P<0.01),Chi加TGF-β1组的促增殖能力明显强于Chi组和TGF-β1组;②3个实验组的细胞裂解液和Chi加TGF-β1组和TGF-β1组细胞培养液中牙周膜细胞ALP活性均高于对照组(P<0.05,P<0.01),以Chi加TGF-β1组最高(P<0.01)。结论Chi和TGF-β1单独都能增加老年人牙周膜细胞增殖的能力和ALP活性,Chi和TGF-β1联合使用增强老年人牙周膜细胞增殖和ALP活性的能力强于单独使用Chi和TGF-β1。     

炎症因子通过核因子κB通路促进口腔鳞状细胞癌转移的体外研究

目的 探讨炎症因子与核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号转导通路在口腔鳞状细胞癌转移中的意义.方法 应用口腔鳞状细胞癌低转移细胞系Tca8113和高转移细胞系Tb为研究对象,通过蛋白质印迹法和荧光素酶报告基因法检测口腔鳞状细胞癌细胞系中NF-κB通路活性.用NF-κB抑制因子α(inhibitor of kappa B alpha,IκBa)抑制质粒第32、36位丝氨酸磷酸化位点被丙氨酸替代的质粒(pBabe-SR-IκBa)和NF-κB通路抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrolidinedithiecar bamate,PDTC)抑制信号转导通路活性,并用侵袭小室实验(TransweH)检测口腔鳞状细胞癌高转移系Tb细胞侵袭能力的变化.此外,通过酶联免疫吸附法检测pBabe-SR-IκBα和PDTC抑制信号转导通路后,肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白介素(IL)-1a、IL-6、IL-8和粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)等炎症因子的分泌.结果 蛋白质印迹法检测显示:高转移Tb细胞中磷酸化IκBα和磷酸化p65的表达量明显高于低转移细胞系Tea8113,分别为Tea8113细胞的3.19倍和6.81倍.荧光素酶(luciferase)报告基因结果显示,Tb细胞NF-κB的启动子活性为Tca8113的2.12倍(P<0.01),并对TNF-α更为敏感.转染pBabe-SR-IκBα和应用PDTC抑制NF-κB通路后,对Tb细胞的体外侵袭能力抑制率分别为21.9%和69.3%.此外,酶联免疫吸附试验法显示通路抑制后,TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-8和GM-CSF等炎症因子的分泌也明显降低.结论 TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-8和GM-CSF等炎症因子可能通过NF-κB通路促进口腔鳞状细胞癌细胞转移.     

TGF-β1和Smad7在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad7在口腔鳞状细胞癌(OSCC)、正常口腔黏膜组织中的表达和意义。方法通过免疫组织化学SP法检测TGF-β1、Smad7在31例口腔鳞状细胞癌组织和10例正常口腔黏膜组织中的表达,探讨TGF-β1、Smad7在口腔鳞状细胞癌中的表达及相关性因素。结果 TGF-β1、Smad7在口腔鳞状细胞癌中的阳性率高于正常口腔黏膜组织(P<0.05),二者在口腔鳞癌有淋巴结转移组的表达率明显高于无淋巴结转移组的表达率(P<0.05),二者在口腔鳞癌TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期中的阳性表达率低于Ⅲ+Ⅳ期的阳性表达率(P<0.05),与患者年龄和性别无关。TGF-β1和Smad7在口腔鳞癌中的表达呈显著正相关(r=0.379,P<0.05)。结论 TGF-β1、Smad7在口腔鳞状细胞癌组织中呈过表达,可能作为判断口腔鳞状细胞癌预后的指标。     

TGF-β1诱导小鼠成牙本质细胞系MDPC-23细胞凋亡

目的:研究转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1)是否诱导成牙本质细胞系MDPC23细胞凋亡。方法:培养MDPC23细胞,用不同浓度的TGFβ1刺激培养48h后,分别用3种检测细胞凋亡的方法,包括膜联蛋白V(AnnexinV)和碘化丙啶(propidiumiodide,PI)双染色法、细胞凋亡的酶联免疫分析法、以及DNA琼脂糖凝胶电泳法,检测MDPC23细胞凋亡情况。结果:TGFβ1能诱导MDPC23细胞凋亡,且呈剂量依赖性。结论:TGFβ1在成牙本质细胞凋亡过程中发挥一定的作用     

压力作用时间对人牙周膜成纤维细胞合成TGF-β1的影响

目的:探讨压力作用不同时间对人牙周膜成纤维细胞表达TGF-β1的影响.方法:本实验采用细胞加载装置,对人牙周膜成纤维细胞施加1.0MPa的压力,分别持续1Omin、30min、50min、通过酶联免疫吸附实验,分别检测细胞受力后6h、12h、18h、24h时TGF-β1的含量.结果:加载1Omin组在细胞受力后的各个时段TGF-β1含量与对照组相比无显著性差异(P>0.05).加载30min组(0.51±0.06)和加载50min组(0.46±0.06)TGF-β1含量在细胞受力后的第12h同对照组(0.78±0.08)相比明显降低(P<0.05).结论:在一定加载时间内,人牙周膜成纤维细胞合成TGF-β1量随着压力作用时间的延长而有所降低.     

TGF-β2诱导小鼠腭突细胞成软骨分化的研究

目的 探讨转化生长因子β2(transforming growth factor-β2,TGFβ2)诱导小鼠腭突细胞成软骨分化的作用.方法 取胎龄13.5天的小鼠分离培养腭突细胞,并分别加入不同的细胞因子进行成软骨诱导培养.A组为空白对照组,B组为TGFBR1(转化生长因子受体1)抑制剂-SD208组,C组为加入TGF-β2组,D组SD208+TGF-β2组.通过比较蛋白聚糖、蛋白聚糖半定量,以及软骨标志基因的表达水平,评价各组细胞因子诱导腭突细胞成软骨能力大小及作用.结果 在TGF-β2作用下腭突细胞向软骨细胞分化,TGF-β2组蛋白聚糖及软骨相关基因表达量最高,显著高于A、B、D组(P<0.01).B、D组蛋白聚糖及软骨相关基因的表达量较A组明显降低(P<001).结论 腭突细胞在TGF-β2诱导下具有成软骨分化能力.     

模拟微重力条件HN13细胞的生长特点

目的:观察口腔鳞状细胞癌细胞HN13在模拟微重力条件下的形态学特点和生长情况,检测肿瘤细胞分化和侵袭相关基因的表达,并分析其生物学意义。方法:将HN13细胞接种于聚乳酸-羟基乙酸(poly lactic-co-glycolicacid,PLGA),应用旋转细胞培养系统(rotary cell culture system,RCCS)进行模拟微重力培养14d,光学倒置显微镜下观察细胞的形态,以实时定量PCR检测分析立体培养和平面培养细胞中,HIF1α、TGFβ1、VEGF-C、NF-κB和CCND1等基因的表达。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:细胞贴附于PLGA材料表面呈立体生长,表现为典型角化细胞形态,并形成类角化珠样结构,与口腔鳞状细胞癌细胞形态相似。HIF1α,TGFβ1和NF-κB表达降低(P<0.05),VEGF-C表达升高(P<0.05),CCND1表达无显著改变(P>0.05)。结论:模拟微重力条件下三维培养的细胞更接近体内细胞的真实形态,模拟微重力可作为构建体外细胞三维培养模型的方法。     

苯丁酸钠对人舌鳞状细胞癌细胞凋亡影响机制的探讨

目的 探讨苯丁酸钠对人舌鳞状细胞癌Tca8113和TCSSA细胞株的生长、凋亡的影响及其分子机制,为临床治疗提供理论依据.方法 应用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测苯丁酸钠对人舌鳞状细胞癌细胞株的抑制作用,采用流式细胞仪研究苯丁酸钠对人舌鳞状细胞癌细胞株的细胞周期阻滞和诱导凋亡作用,应用蛋白质印迹法和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测p21和生存素基因的转录和表达.结果 苯丁酸钠对两种细胞株增殖均有明显的抑制作用;流式细胞仪检测显示苯丁酸钠诱导细胞株G1期阻滞,碘化丙啶-异硫氰酸荧光素标记的磷脂酰结合蛋白双标结果表明,苯丁酸钠能诱导细胞株凋亡,使p21的mRNA及蛋白质表达升高,与对照组比较,Tca8113细胞株的p21 mRNA及蛋白质分别增加0.09±0.08和0.72±0.10,TCSSA细胞株的p21mRNA及蛋白质分别增加1.34 4±0.12和1.56±0.09(P<0.05).生存索的mRNA及蛋白质表达下降.与对照组比较,Tca8113细胞株的生存素mRNA及蛋白质分别降低1.10±0.05和1.14±1.10,TCSSA细胞株的生存素mRNA及蛋白质分别降低1.02±0.08和0.94±0.09(P<0.05).苯丁酸钠诱导p21表达上升和生存素表达下降,二者的mRNA水平变化呈显著负相关(rs=-0.532,P<0.001),蛋白表达变化同样呈显著负相关(rs=-0.564,P<0.001).结论 苯丁酸钠能抑制人舌鳞状细胞癌细胞株增殖,诱导细胞G1期阻滞和细胞凋亡.     

十字孢碱对口腔鳞状细胞癌CAL27细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨十字孢碱(staurosporine,ST)对人口腔鳞状细胞癌细胞株CAL27增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度的ST对CAL27细胞增殖的抑制作用,DAPI荧光染色法观察不同浓度的ST对CAL27细胞凋亡的改变,流式细胞术检测不同浓度ST对CAL27细胞凋亡率和周期分布的影响;蛋白免疫印迹法检测不同浓度ST对CAL27细胞周期蛋白cyclin D1、Cdk4、Cdk6、p21表达的影响。结果 ST对CAL27细胞的增殖有明显抑制作用(P<0.05),抑制作用具有药物浓度依赖性。通过DAPT染色,ST能明显诱导细胞凋亡及凋亡形态改变。CAL27细胞出现Annexin V-FITC/PI流式细胞术观察发现与对照组相比,ST可诱导CAL27细胞凋亡率明显增加(P<0.05),并引起细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.05)。蛋白免疫印迹法检测结果显示,经ST处理细胞后,cyclin D1、Cdk4和Cdk6蛋白表达明显降低,p21蛋白表达升高(P<0.05)。结论 ST可显著抑制口腔鳞状细胞癌CAL27细胞增殖并诱导其凋亡,其机制考虑是通过阻滞细胞周期于G2/M期,进而抑制肿瘤细胞生长并促进细胞凋亡。     

Smad7反义寡核苷酸对TGF-β1调控人牙髓细胞生长和分化的影响

目的 :观察Smad7反义寡核苷酸对转化生长因子 β1(transforminggrowthfactor -β ,TGF -β1)调控人牙髓细胞生长和分化的影响。方法 :细胞培养 ,细胞转染 ,MTT比色测定法和碱性磷酸酶活性测定法。结果 :Smad7反义寡核苷酸促进TGF -β1对人牙髓细胞增殖的诱导作用和对碱性磷酸酶活性的抑制作用。 结论 :Smad7参与介导TGF -β1对人牙髓细胞增殖和ALP活性的调控 ,提示TGF -β1调控人牙髓细胞生长和分化可能是通过Smad信号途径发生的     

TGF-β1对MDPC-23细胞增殖和细胞周期的影响

目的：研究转化生长因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)对成牙本质细胞系MDPC—23增殖和细胞周期的影响。方法：细胞培养，MTT比色测定法和流式细胞仪(flow cytometry，FCM)分析技术。结果：TGF-β1能明显抑制MDPC—23细胞增殖，无剂量依赖性，但呈时间依赖性；FCM结果显示，TGF-β1作用后，MDPC—23细胞G1％升高，而S％显著降低，反映细胞增殖活性的增殖指数Prl值(S G2M)％增高。结论：TGF-β1抑制成牙本质细胞系MDPC—23细胞增殖和DNA合成。     

转化生长因子β1及Smad7蛋白表达在口腔扁平苔藓上皮细胞中的作用

目的 通过对口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)中转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1、Smad7蛋白表达和细胞凋亡情况的研究,进一步探讨OLP的发病机制.方法 对17例OLP组织分别应用免疫组化SP法定位检测TGF-β1和Smad7的表达和原位末端转移酶标记法检测细胞凋亡情况.结果 TGF-β1在OLP上皮中呈中等阳性表达,Smad7在OLP上皮中呈强阳性表达,其表达强度均明显高于对照组(P＜0.05);OLP中上皮内细胞凋亡指数[(14.26±2.32)%]明显高于对照组[(6.69±0.63)%],多局限于基底层及基底上层,且TGF-β1表达强度与细胞凋亡呈正相关(r=0.691,P＜0.05).结论 OLP中上皮内TGF-β1、Smad7表达增高提示TGF-β1-Smad信号转导通路调节紊乱,可能促使上皮细胞凋亡异常,从而导致OLP的发生.     

转化生长因子β1诱导人舌鳞状细胞癌细胞上皮-间质转化及其顺铂耐药性研究

目的 利用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人舌鳞状细胞癌(TSCC)细胞CAL27、顺铂耐药细胞CAL27-res发生上皮-间质转化(EMT),建立TSCC细胞发生EMT的实验研究模型.研究EMT对TSCC细胞顺铂耐药性及细胞增殖、凋亡的影响.方法 10 ng/ml的TGF-β1处理CAL27、CAL27-res细胞8 d,观察细胞形态学变化,Western blot 和细胞免疫荧光验证EMT相关上皮标记蛋白及间质标记蛋白表达的变化,划痕试验检测细胞迁移能力的变化,MTT法检测细胞半抑制率(It50),免疫荧光检测MDR、MRP、Topo Ⅱβ的表达,流式细胞仪分析细胞周期及凋亡.结果 TGF-β1 可诱导CAL27、CAL27-res向间质细胞形态转化,并且下调上皮相关标记蛋白E-cadherin的表达,上调间质相关标记蛋白Vimentin的表达,细胞的迁移能力明显增强.IE50分别提高2.31倍(CAL27)和1.72倍(CAL27-res),MDR和MRP表达升高,Topo Ⅱβ表达降低.细胞增殖指数(PI)均明显降低(CAL27:χ2=16.799,P<0.001;CAL27-res:χ2=25.375,P<0.001),细胞凋亡指数(AI)均明显升高(CAL27:χ2=165.0797,P<0.001;CAL27-res:χ2=196.5640,P<0.001).结论 TGF-β1能够成功诱导CAL27、CAL27-res发生EMT并且明显增强细胞对顺铂的耐药性,同时抑制细胞增殖,促进凋亡.     

转染Podoplanin对口腔白斑细胞增殖和细胞周期的影响

目的 探讨转染外源性Podoplanin基因对口腔白斑细胞增殖和细胞周期的影响,以证实Podoplanin在白斑癌变中的作用.方法 以口腔黏膜白斑细胞系Leuk-1、转染pCMV-Podoplanin表达质粒白斑细胞系A4-1和转染空白载体pCMV的白斑细胞系B4-1为细胞模型,应用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测转染目的基因后细胞中Podoplanin mRNA水平的变化.激光共聚焦显微镜和蛋白质印迹法观察转染目的基因后细胞中Podoplanin蛋白的定位和表达水平.甲基噻唑基四唑(MTT)法检测转染目的基因细胞增殖活性的变化.流式细胞仪检测过表达外源性Podoplanin后细胞周期分布的变化情况.结果 转染外源件Podoplanin基因的A4-1细胞,mRNA相对表达量为0.022,明显高于B4-1细胞的0.001及Leuk-1细胞的0.002(P<0.05);A4-1细胞Podoplanin蛋白表达水平较B4-1和Leuk-1细胞明显提高.免疫荧光结果表明,3种细胞的胞质及胞膜均可见Podoplanin蛋白的表达,A4-1细胞的蛋白表达量(绿色荧光强度)明显高于B4-1和Leuk-1细胞.细胞生长曲线分析结果表明,A4-1细胞生长速度明显高于Leuk-1细胞,A4-1接种后3 d增殖活性比Leuk-1细胞高40.4%(P<0.05).细胞周期检测结果显示,A4-1细胞处于G_2～M期比例为(24.89±4.55)%,明显高于B4-1[(4.13±5.24)%]和Leuk-1细胞[(4.69±7.42)%],P<0.05;A4-1细胞增殖指数(0.57±0.06)高于B4-1(0.41±0.04)及Leuk-1(0.40±0.02),P<0.05.结论 口腔白斑细胞过表达外源性Podoplanin蛋白后,细胞生长和增殖能力明显增强;Podoplanin町能是口腔白斑细胞癌变的关键基因之一.     

EMP1基因对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭影响的体外研究

目的:体外观察EMP1基因对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:构建pEGFP-N1-EMP1表达载体,稳定转染口腔鳞癌细胞系Tb3.1,并以野生型Tb3.1和pEGFP-N1稳转的Tb3.1为对照,用MTT检测细胞增殖,绘制细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞周期变化;用Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭能力;组间比较采用单因素方差分析。结果:相比野生型Tb3.1和Tb3.1-pEGFP-N1细胞,Tb3.1-pEGFP-N1-EMP1细胞生长受到抑制,同时其S+G2-M期细胞比例减少(P＜0.05),迁移和侵袭细胞数目减少(P＜0.05)。结论:EMP1在口腔鳞癌的发生、发展中作为抑癌基因可能对口腔鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭起抑制作用。     

RNA干扰双泛素对舌鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响

目的 应用RNA干扰技术抑制人舌鳞状细胞癌细胞株Tca8113中双泛素(diubiquitin)的表达,探讨双泛素表达下调对舌鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响.方法 构建针对双泛素特异性小干扰RNA( small interfering RNA,siRNA)真核表达载体pU-双泛素-siRNA,将其转染至Tca8113细胞,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法检测转染后的Tca8113细胞中双泛素的表达.通过流式细胞仪分析siRNA对舌鳞状细胞癌细胞周期的影响,并通过细胞侵袭能力实验观察siRNA对Tca8113细胞恶性生物学行为的变化.结果 siRNA干扰Tca8113细胞后,双泛素的表达无论是在mRNA水平还是在蛋白质水平均显著下降[mRNA:实验组(0.36±0.03)、空白对照组(0.92±0.07)、空载体组(0.95±0.05);蛋白:实验组(0.39±0.04)、空白对照组(0.64±0.05)、空载体组(0.69±0.05)](P＜0.05),细胞周期被阻滞在G1期,细胞生长缓慢,体外侵袭能力下降(P＜0.05).结论 通过RNAi技术阻断双泛素的表达,可抑制Tca8113细胞的生长、增殖、侵袭,提示双泛素在舌鳞状细胞癌的发生、发展过程中起重要作用.     

新型矿化胶原膜的体外细胞相容性评价

目的 观察新型矿化胶原膜对MG63成骨样细胞体外细胞相容性的影响.方法 采用体外仿生矿化技术构建新型矿化胶原双层膜,致密层为Ⅰ型胶原,疏松层为纳米羟基磷灰石-胶原.进行HE染色和扫描电镜(SEM)观察MG63细胞在新型矿化胶原膜表面的生长和黏附情况;以新型矿化膜浸提液培养MG63细胞,另设空白对照组,检测MG63细胞的细胞周期和凋亡率.采用SPSS 17.0软件对数据进行统计学分析.结果 HE染色可见大量细胞附着在矿化胶原膜表面;SEM下观察细胞在胶原膜上生长良好,通过突起与粗糙表面紧密接触;细胞周期检测显示,对照组细胞的G0/G1期、S期、G2/M期比率分别为(74.05±0.45)％、(17.03±1.34)％、(8.93±1.02)％,矿化胶原膜组为(75.11±0.97)％、(16.32±0.89)％、(8.13±0.46)％,差异无统计学意义(P>0.05);对照组细胞的凋亡率为(4.25±1.26)％,矿化胶原膜组为(4.27±0.36)％,差异也无统计学意义(P>0.05).结论 矿化胶原膜对MG63细胞生长无抑制作用,具有良好的生物学性能.     

趋化因子CCL19对体外培养人头颈鳞癌细胞活性的影响

目的:探讨趋化因子CCL19在人头颈鳞癌细胞活性中的作用。方法:应用噻唑蓝比色(MTT)法检测不同浓度顺铂对人头颈鳞癌原发细胞系(PCI-4A)及淋巴结转移细胞系(PCI-4B)的生长抑制作用,观察不同浓度的CCL19对顺铂作用的影响,应用透射电镜技术观察4B细胞形态学变化,流式细胞仪(FCM)检测CCL19对顺铂诱导的4B细胞周期及凋亡率的影响。使用SPSS11.0软件包进行统计学分析。结果:顺铂对4B细胞的生长抑制率高于4A细胞,CCL19可以显著降低顺铂对4B细胞的生长抑制(P<0.05),但对4A细胞无明显作用(P>0.05),CCL19对顺铂作用的4B细胞的影响是通过形态学上向正常状态转化、减少细胞在G1期的停滞、减少细胞的凋亡率而产生的。结论:顺铂在人头颈鳞癌淋巴结转移细胞(PCI-4B)中的作用强于原发细胞(PCI-4A),CCL19可以显著降低顺铂在PCI-4B细胞中的作用,提高细胞的活性,这为探讨临床头颈鳞癌的化疗耐药机制提供了一个新的思路。     

转化生长因子β对骨形成蛋白-2基因转染细胞生物学行为的影响

目的:探讨骨形成蛋白-2(BMP-2)和转化生长因子β(TGFβ)对细胞增殖分化的调控作用及其机制。方法:构建含有人BMP-2基因的噬菌粒表达载体pBK-B2,利用脂质体转染方法将其导入NIH3T3细胞,通过G-418筛选获得阳性细胞克隆。细胞原位杂交、免疫组化法检测BMP-2基因的稳定转染及表达,并检测了外源性TGFβ对转染细胞增殖活力及碱性磷酸酶活性和骨钙素含量的影响。结果:TGFβ(50ng/ml)促进BMP-2转染细胞的增殖,但是抑制其碱性磷酸酶活性和骨钙素的含量。结论:TGFβ的生物学效应与多种因素密切相关,BMP和TGF-β在细胞生长分化过程中具有协同作用     

转化生长因子β1壳聚糖不对称膜的制备及其对小鼠成牙本质细胞增殖的影响

目的制备转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)壳聚糖不对称膜,研究其对小鼠成牙本质细胞(MDPC-23)生长和增殖的影响.方法用自然干燥法和冷冻干燥法,复合TGF-β1壳聚糖微球,制备TGF-β1壳聚糖不对称膜,利用扫描电镜进行形态学观察.TGF-β1壳聚糖不对称膜与小鼠成牙本质细胞共培养,2 d后扫描电镜观察细胞在材料上的黏附、生长,并绘制7 d内的细胞生长曲线.结果壳聚糖不对称膜为双层结构,具有致密膜和多孔层,孔径60-160 μm,孔隙率为83.26%,与水的结合能力为15.6g水/g多孔膜.TGF-β1壳聚糖微球均匀分布于多孔层的孔隙中.MDPC-23在TGF-β1壳聚糖不对称膜的多孔层黏附生长,细胞的增殖能力显著提高,培养7 d,细胞数量由(2.03±0.04)×104增至(18.31±0.60)×104.结论壳聚糖不对称膜具有理想的物理性能,复合TGF-β1壳聚糖微球后形成TGF-β1三维缓释系统,可促进细胞的增殖.