瘤苗主动免疫对小鼠腹水型肝癌生长和转移的治疗效应

本文采用小鼠腹水型肝癌淋巴道转移模型(H_(22)/F_(23)),观察了特异性主功免疫治疗对肿瘤生长和淋巴道转移的影响,结果表明用MMC处理的瘤苗细胞和非特异性免疫制剂(Cp)对带瘤小鼠进行免疫治疗,不仅能明显抑制肿瘤生长。并可显著降低肿瘤淋巴道转移的发生率。     

两株转移能力不同的小鼠腹水型肝癌(H_(22))某些生物学特性的比较研究

本实验从肿瘤移植成活率、淋巴道转移率、细胞形态学、染色体组成、细胞电泳率等方面在两种不同品系的小鼠之间观察并比较了小鼠腹水型肝癌H_(22)和H_(22)/F_(20)的上述生物学特性及差别。光镜和透射电镜的观察结果提示,H_(22)和H_(22)/F_(20)瘤细胞是来源于上皮组织、分化较低的恶性肿瘤。肿瘤移植成活率和淋巴道转移率的比较观察表明,H_(22)/F_(20)瘤细胞的移植成活率和淋巴道转移率均高于H_(22)瘤细胞。染色体的分析显示H_(22)和H_(22)/F_(20)瘤细胞不仅干系细胞的众数不同(H_(22)为44,H_(22)/F_(20)为43),而且二者的标记染色体的数目及形态也有差别。细胞电泳率的测定结果表明,H_(22)/F_(20)瘤细胞的电泳率显著低于H_(22)细胞。本文讨论了H_(22)和H_(22)/F_(20)瘤细胞的上述表型差别与淋巴道转移率增高之间的可能关系,以及宿主和环境的选择作用对H_(22)瘤细胞的影响。     

小鼠腹水型肝癌不同转移倾向瘤细胞亚株的筛选

本实验用Balb/c小鼠、腹水型肝癌(Hca-F_(25))尾静脉接种所产生的肺转移瘤和淋巴结转移瘤分别重复循环筛选10次(即肺瘤结→尾静脉→肺瘤结……;和淋巴结瘤结→尾静脉→淋巴结瘤结……)得到同一肿瘤内具有不同转移倾向的两个瘤细胞亚群P_(10)(肺转移瘤第10代)和L_(10)(淋巴结转移瘤第10代)。随着循环筛选代数增加,肺转移亚群的肺转移率显著升高,淋巴结转移亚群也有相似变化。经尾静脉,腋皮下和脚掌三途径接种,在前两途径接种中,P_(10)的肺转移率均显著高于L_(10);L_(10)的淋巴结转移率显著高于P_(10)。脚掌接种,P_(10)和L_(10)的转移率无显著差别。两亚群的肺转移灶大多形成于小血管或小支气管周围。细胞侵袭性试验表明P_(10)和L_(10)各自对肺和淋巴结粘附,侵袭增强,可很快侵入深部组织生长。本实验结果提示肿瘤转移的器官亲和性不仅与瘤细胞本身生物学性状有关,也与肿瘤移植部位有关。     

小鼠腹水型肝癌肺转移亚株与淋巴结转移亚株若干生物学特性的比较

本实验用小鼠腹水型肝癌(Hca) 分别经腹水→足垫→淋巴结→腹水……,与腹水→尾静脉→肺→腹水……循环传代10次,得到淋巴结筛选型(HcaSL_(10))和肺筛选型(HcaSP_(10))。将两者均分别向足垫和尾静脉注射,观察各自的淋巴结转移率和肺转移率。发现HcaSL_(10)淋巴结转移率明显高于HcaSP_(10);HcaSP_(10)肺转移率明显高于HcaSP_(10)并对两者进行了细胞形态学,细胞电泳率,促血小板聚集能力等方面的比较。其结果提示HcaSL_(10)与HcaSP_(10)细胞性质存在着差异。     

两株小鼠肝癌细胞增殖状态比较研究

目的：探讨细胞增殖状态与细胞转移力的关系。方法：采用流式细胞术,测定两株腹水型肝癌细胞的ＤＮＡ含量,进而提供细胞增殖状态的信息。结果：Ｆ和Ｐ细胞的ＤＮＡ指数及细胞增殖指数均无显著性差异。Ｆ细胞的淋巴结转移瘤的Ｇ２／Ｍ期比率高于其原发瘤。结论：两株细胞的转移率与细胞的增殖状态无明显的相关性。     

副流感病毒治疗小鼠腹水型肝癌,小鼠肉瘤S180腹水瘤的实验研究

副流感病毒－Ⅱ型治疗小鼠腹水型肝癌Ｈ２２，小鼠肉瘤Ｓ１８０腹水型荷瘤小鼠，经体内实验观察，将小鼠接种腹水瘤次日，采用腹腔注射副流感病毒－Ⅱ型，连续６天，存活率达１００％。     

小鼠肝癌（HCa）两株克隆细胞系转移表型的比较

来自同一祖先的两株不同亚克隆细胞系Ｈｃａ－１６Ａ３－Ｆ（Ｆ）和ＨＣａ－Ａ２－Ｐ（Ｐ），在两种不同小鼠体内经不同途径接种所得的转移率和转移部位显示有差别：Ｃ３／ｈｅ小鼠皮下组，Ｆ呈现高淋巴道转移（８０．０％），而Ｐ未出现转移，Ｃ３Ｈ／ｈｅ小鼠尾静脉组，Ｆ在卵巢（２８．６％）和淋巴结（２８．６％）有较低的转移率，Ｐ权出现一例（１４．３％）卵巢转移，然而，在裸鼠体内却出现了异常的变化，Ｆ呈现高血道（肺脏７１．４％）转移而不出现淋巴道和其他部位转移，但Ｐ却出现高淋巴道转移（８５．７％）兼有低血道（肺脏２８．６％，卵巢１４．３％，肾脏２８．６％）转移。体内实验结果提示：ＨＣａ细胞中含有转移、浸润能力不同的亚群；Ｆ细胞在体内具有较强的浸润力与转移力，且有淋巴道转移的倾向；Ｐ细胞的浸润力和转移力则低于Ｆ细胞，但若给其提供适当的到达器官的通路，完全能形成实验性转移灶。Ｃ３Ｈ／ｈｅ小鼠也是ＨＣａ细胞生长和转移的理想宿主。     

小鼠肝癌肺转移模型的建立

目的 探讨通过小鼠尾静脉注射肝癌H22细胞建立小鼠肝癌肺转移模型的可行性。方法 2020年9月至2021年1月，笔者根据小鼠尾静脉注射H22细胞数量的不同，将Balb/c小鼠分为对照组(生理盐水200μl)、低浓度组(2×10⁴个/200μl)和高浓度组(2×10⁵个/200μl)。每组均于注射瘤细胞后7d、14d、21d处死小鼠，提取小鼠肺脏进行大体及镜下形态观察，并对肺组织进行增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)免疫组织化学染色。结果 对小鼠尾静脉注射瘤细胞后7d,结果显示高浓度组与低浓度组小鼠肺组织内成瘤率分别为30%和20%;注射瘤细胞后14d,结果显示高浓度组与低浓度组小鼠肺组织内成瘤率分别为70%和40%;注射瘤细胞后21d,结果显示高浓度组小鼠肺组织内成瘤率为90%,明显高于7d成瘤率，差异有统计学意义(P=0.006,P<0.01),而低浓度组小鼠肺组织内成瘤率仅为60%。瘤结节大小不一，散在分布于肺组织内。21d时瘤细胞PCNA增殖指数在40%～50%。对照...     

重组东亚钳蝎镇痛抗肿瘤肽协同5-氟尿嘧啶对小鼠H22肝癌的抑制作用

目的：探讨重组东亚钳蝎镇痛抗肿瘤肽（recombinant analgesic-antitumor peptide,rAGAP）增强5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）对肝癌H22细胞的抑制作用及机制。方法：SPF级雄性小鼠120只,采用接种H22肝癌小鼠腹水方法建立模型,随机分为4组：rAGAP组（予rAGAP 0.03 mg/kg）、5-FU组（予5-FU 10 mg/kg）、联合组（予rAGAP 0.03 mg/kg, 5-FU 10 mg/kg）,模型组（予等体积生理盐水）,每4 d腹腔注射1次,用药持续24 d。用药结束后取出肿瘤组织标本,检测各组瘤体组织重量和抑瘤率,Western blot方法检测PI3K、AKT、PTEN蛋白表达。结果：与模型组相比,其他各组小鼠瘤体组织重量均明显降低（P＜0.05）;联合组抑瘤率明显高于rAGAP组和5-FU组（P＜0.05）。与模型组相比,其他各组PI3K、p-Akt表达均明显减弱,PTEN表达明显增强（P＜0.05）;与5-FU组、rAGAP组相比,联合组PI3K、p-Akt表达均明显减弱,PTEN表达明显增强（P＜0.05）。结论：rAGAP能增强5-FU对肝癌组织的抑制作用,其机制可能与影响PI3K/AKT/PTEN信号通路,进而抑制肝癌细胞的增殖有关。     

小鼠腹水型肝癌高、低转移细胞系的超微结构定量分析

本文对小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系（Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－１６Ａ３）和低转移细胞系（Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－Ａ２）的超微结构进行了比较观察，并应用体视学方法进行了定量分析。结果表明Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－１６Ａ３细胞剖面平均直径、核质比较均Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－Ａ２大。Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－１６Ａ３细胞的分裂相、核畸形、核仁边集较多见，胞质中粗面内质网、游离核糖体较丰富，细胞表面微绒毛较多。表明不同转移能力的Ｈｃａ瘤细胞在形态上也有差异。     

正常C_(57)鼠肝、H_(22)肝癌及S_(180)肉瘤LD_5的纯化及其性质研究

以正常C_(57)鼠肝、H_(22)肝癌及S_(180)肉瘤,经一系列离子交换层析及亲和层析,获得了高纯度的LD_5。对三种组织的LD_5的部分酶动力学参数、亚基分子量及等电点的比较研究表明:H_(22)肝癌及S_(180)肉瘤的LD_5对丙酮酸的K_m值较正常C_(57)鼠肝LD_5显著降低,而LD_5含量(mg/g组织)、LD_5占LDH总活性的百分率均较正常高;三种组织的兔抗鼠LD_5间呈现交叉免疫反应。本研究所获的三种兔抗鼠LD_5抗体为进一步研究癌变时LD_5活性升高的分子机理奠定了基础。     

Morphological Observation and DNA Quantitative Analysis of Murine H_(22) Hepatoma after Injection of Hematoporphyrin Derivatives in Different Pathways and Light Irradiation

By means of light and electron microscopy and texture analysissystem, the morphologic changes and the content of DNA after injection ofhematoporphyrin derivatives (HPD) in different pathways and the lightirradiation on mice H_(22) hepatoma were observed. This study showed thatintravenous injection of HPD and local administration in the tumor andred-light irradiation could result in obvious injury of tumor cells, especiallythe tumor local injection and light irradiation. In order to reduce variousside-effects, tumor local injection and light irradiation may be used inclinical treatment. This article provides morphological basis for reference.     

小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系HCa-P/L6细胞模型的建立及其药物敏感性的评价

[目的]建立小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系HCa-P/L6细胞模型并应用姜黄素对该模型的药物敏感性进行评价。[方法]将小鼠腹水型肝癌淋巴道低转移细胞株（HCa-P）经615小鼠腹中线皮下接种的方法获得淋巴结转移瘤1代细胞HCa-P/L1,再经小鼠淋巴系统筛选5次,筛选高转移细胞系HCa-P/L6。用15～240μmol·L^-1姜黄素（Curcumin,Cur）分别处理人肝癌细胞系（SMC7721和HepG2）和小鼠腹水型肝癌细胞（HCa-P/L6和HCa-P）48h,以MTT法考察4种细胞的药物敏感性。以非细胞毒性最大剂量Cur作用于HCa-P/L6和HCa-P,以生长曲线和群体倍增时间评估药物对细胞生长的影响,以流式细胞仪检 测药物对细胞周期分布的影响,考察两株小鼠腹水型肝癌细胞与姜黄素作用敏感性的差异。[结果]从HCa-P中筛选出具有多部位转移特性的淋巴道高转移细胞系HCa-P/L6,转移率为100%。Cur明显抑制小鼠腹水型肝癌和人肝癌细胞的增殖,并呈 剂量依赖性（方差分析P〈0.05）。在30～120μmol·L^-1,Cur对小鼠肝癌的抑制作用强于对人肝癌的抑制作用;在60～240μmol·L^-1范围内,Cur对HCa-P/L6的抑制作用强于对HCa-P。在非细胞毒性最大剂量15μmol·L^-1 Cur作用下,HCa-P/L6和HCa-P的生长受到抑制（t检验P〈0.05）,并且呈时间依赖性（方差分析P〈0.01）,HCa-P/L6和HCa-P的群体倍增时间延长（卡方检验P〈0.01）,Cur对HCa-P/L6的抑制作用大于对HCa-P;细胞周期被重新分布,HCa-P/L6被阻滞在S期,HCa-P被阻滞于S期和G2/M期。[结论]从HCa-P中筛选出了淋巴道高转移细胞系HCa-P/L6。小鼠腹水型肝癌比人肝癌对姜黄素作用敏感,而且高转移细胞株系HCa-P/L6较低转移细胞株HCa-P对Cur更为敏感。HCa-P/L6为肿瘤淋巴道转移机制和中药活性成分筛选的研究提供了一个新的敏感模型。     

水律汤对小鼠H22肝癌腹水模型尿中K~+、Na~+、Cl~-离子浓度的影响

目的观察水律汤对小鼠H22肝癌腹水模型尿中K+、Na+、Cl-离子浓度的影响。方法取H22肝癌细胞接种于小鼠腹腔造成肝癌腹水模型,随机分为空白对照组(NS)、模型组(M)、水律汤低剂量组(TA)、水律汤高剂量组(TB)、模型+NO供组(NO)、水律汤高剂量组+NOS抑制剂组(NOS),造模后第5天起用水律汤连续灌胃5天,检测小鼠尿K+、Na+、Cl-离子浓度。结果TA组、TB组、NO组尿液中K+、Na+、Cl-离子浓度较正常组均升高(P0.01),与模型组比较也是升高的(P0.01),腹腔内注射NOS抑制剂尿中平均Na+、K+、Cl-浓度则明显低于TB组(P0.01)。结论水律汤能使小鼠H22肝癌腹水模型尿中Na+、K+、Cl-排出增加,减轻水钠潴留,可能是其消腹水作用机制之一。     

PTPN22基因多态性与中国广东汉族人群RA发病的相关性研究

目的检测中国广东地区汉族人群中类风湿关节炎(RA)发病与蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22(PTPN22)基因Arg620Trp/1858C>T多态性的关系。方法采用PCR-RFLP技术分析了广东汉族人群中148例散发RA患者和150例健康对照者PTPN22 1858位点基因型。结果在中国广东地区汉族人群中PTPN22 1858位点仅存在等位基因C,与RA的发病无关。结论中国广东地区汉族人群中,PTPN22 Arg620Trp多态性与RA的发病无关;PTPN22基因可能存在其他多态性位点,需作进一步探讨。     

NAD(P)H氧化酶P22phox亚基C242T多态性与蒽环类药物治疗弥漫大B细胞淋巴瘤化疗疗效的相关性研究

目的探讨NAD(P)H氧化酶P22phox亚基C242T基因多态性与以蒽环类药物为基础的化疗方案治疗弥漫大B细胞淋巴瘤化疗疗效的关系。方法收集经病理形态学和免疫组织化学确诊DLBCL患者32例,采用PCR-RFLP技术检测C242T位点的基因型,观察其不同基因型与化疗效果的关系。结果 32例DLBCL患者中,CC基因型22例(68.8%),CT基因型10例(31.2%),其中16例完全缓解,9例部分缓解,近期缓解率为78.1%。其中CC型有效20例(62.5%),CT型有效5例(15.6%),差异有统计学意义(P=0.019)。结论野生基因型(CC)对以蒽环类为基础化疗敏感,临床疗效优于突变型。     

血卟啉衍生物不同途径给药并光照小鼠移植瘤的形态观察及DNA定量测定

用光镜、电镜和扫描图像分析仪,对比观察静脉注射与肿瘤局部注射血卟啉衍生物并光照,小鼠皮下型H_(22)肝癌细胞的形态学和DNA含量的改变。结果显示,两种给药法并光照对瘤细胞均有杀伤效应,后者更为显著。本实验为治疗某些体表肿瘤采用局部注药光照法,减少全身用药量和毒副作用提供了形态学依据。     

热休克小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes的制备及其蛋白组成的初步研究

目的:探讨热休克对小鼠肝癌细胞H22分泌的Exosomes产量及蛋白组分的影响,为进一步研究Exosomes在生产和免疫治疗方面的改进提供理论依据.方法:经超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化得到H22细胞分泌的Exosomes和经热休克处理后H22细胞分泌的Exosomes(Heat shocked Exosomes,HS-Exo),透射电镜观察其形态,SDS-PAGE电泳分析其蛋白带组成,Western Blot检测两者所含有的免疫分子情况.结果:在透射电镜下,HS-Exo与Exosomes形态相似,直径约20～90nm的膜性囊泡,结构完整;经热休克处理后小鼠肝癌细胞H22分泌的Exosomes产量增多,且在HS-Exo中表达的热休克蛋白70(HSP70)、热休克同源蛋白70(HSC70)、热休克蛋白60(HSP60)、粘附相关蛋白(ICAM-1)与在Exosomes中的表达相比显著上调(P<0.05).结论:超速分级离心及蔗糖密度梯度离心提取纯化热休克小鼠肝癌细胞H22源的Exosomes的方法具有可行性;HS-Exo中HSP70、HSC70、HSP60、ICAM-1的表达比Exosomes更为丰富,提示HS-Exo可能比Exosomes具有更强的免疫活性.