生物素标记核酸探针检测白血病患者c－myc原癌基因的表达水平

用两种方法制备生物素ｃ－ｍｙｃ癌基因探针，通过ＲＮＡ－ＤＮＡ斑点杂交技术，检测了白血病３０例和２种白血病细胞株中ｃ－ｍｙｃ原癌基因的ＲＮＡ表达水平。结果显示，白血病细胞株、急性白血病和慢性粒细胞性白血病急性变患者的ｃ－ｍｙｃ的ＲＮＡ表达水平明显高于正常人和患其它血液病的患者，提示ｃ－ｍｙｃＲＮＡ水平的判定可提供一些有意义的临床信息；同时探讨了生物素和光敏生物素标记核酸探针的优越性。     

急性非淋巴细胞白血病细胞中原癌基因c—myc的表达

研究急性非淋巴细胞白血病细胞中原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达及临床意义。方法采用蛋白质免疫印渍和单克隆抗体免疫细胞化学染色方法检测３０例ＡＮＬＬ细胞中原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达。结果１９例表达阳性，阳性率为６３％。ＡＮＬＬ中白血病细胞的阳性细胞百分率为２９％－９６％，ｃ－ｍｙｃ在不同病人的白血病细胞中表达水平不一样；ｃ－ｍｙｃ的表达和患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关，和患者年龄，性别，外周血白细胞计数。     

原癌基因c—myc与肿瘤

原癌基因ｃ－ｍｙｃ是ｍｙｃ家族的重要成员，它编码细胞核内磷酸化蛋白质。ｃ－ｍｙｃ基因在维持正常细胞功能活中起重要作用，参与细胞的增殖，分化及凋亡过程。ｃ－ｍｙｃ与人类肿瘤有密切关系，在许多肿瘤组织中均可以检测到原癌基因ｃ－ｍｙｃ及其蛋白表达产的的异常。而且体外实验证实ｃ－ｍｙｃ基因可与其他癌基因协同转化多种细胞。     

急性白血病细胞中原癌基因c－myc的表达

目的探讨原癌基因ｃ－ｍｙｃ在急性白血病中的表达及意义。方法应用免疫印渍及免疫细胞化学染色技术检测ｃ－ｍｙｃ原癌基因在急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）中的表达，以ＨＬ６０细胞作为阳性对照，正常人外周血淋巴细胞作为阴性对照，参照Ｇｒｅｉｌ等（１９８９）所建立的方法对ｃ－ｍｙｃ在急性白血病细胞中的表达进行定量，并对实验数据进行ｔ检验及相关分析。结果ｃ－ｍｙｃ在ＡＬＬ和ＡＮＬＬ中均有表达，阳性率分别为５０％和６３％，ＡＬＬ和ＡＮＬＬ病人白血病细胞中ｃ－ｍｙｃ表达差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。ｃ－ｍｙｃ在不同病人的白血病细胞中的表达水平并不一样，部分病人同一病例在不同白血病细胞上ｃ－ｍｙｃ蛋白分布和表达不同。ＡＬＬ和ＡＮＬＬ白血病细胞中ｃ－ｍｙｃ的表达和患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关（分别ｒ＝０．８８，Ｐ＜０．０１，及ｒ＝０．８，Ｐ＜０．０１），和患者年龄、外周血白细胞计数、血红蛋白、血小板计数均无相关性。结论ｃ－ｍｙｃ在ＡＬＬ和ＡＮＬＬ中表达差异无显著性，急性白血病细胞中ｃ－ｍｙｃ的表达与患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关。ｃ－ｍｙｃ表达高的患者，治疗效果较差。ｃ－ｍｙｃ在急性白血     

急性白血病c—myc反义核酸基因治疗的实验研究

ｃ－ｍｙｃ基因是调控细胞增殖与分化的癌基因,在急性白血病细胞株及急性白血病、恶性淋巴瘤患者细胞中出现高表达,是影响这些恶性肿瘤发生、发展的重要基因之一。反义核酸治疗恶性肿瘤在技术上具有高效、简便、不需载体等特点,原理是根据碱基互补,将具有特异序列的反义寡核苷酸导入肿瘤细胞与靶基因上的相应部位结合,抑制和阻断相应基因的转录表达。　目的　应用针对ｃ－ｍｙｃ基因的两个反义核酸１５ｍ ｅｒ和１８ｍ ｅｒ作用于急性白血病细胞株和原代细胞,研究反义核酸对白血病细胞的生长、增殖,ｃ－ｍｙｃ ｍ ＲＮＡ 表达以及Ｐ６５ ｃ－ｍｙｃ蛋白表达率的改变,以及对细胞凋亡、分化方面的影响。　方法　采用锥虫蓝染色法测定细胞的拒染率,绘制细胞的生长曲线,用０．８％ 甲基纤维素半固体培养法进行克隆形成试验;用流式细胞仪检测在反义核酸作用前后的Ｐ６５ ｃ－ｍｙｃ 蛋白及凋亡率;用ＲＴ－ＰＣＲ 法检测ｃ－ｍｙｃｍ ＲＮＡ 的表达相对水平;电镜观察凋亡细胞的超微结构;ＤＮＡ 电泳分析凋亡片段;光镜下瑞特染色、ＮＢＴ染色观察细胞分化水平,流式细胞仪检测分化抗原表达,同时ＲＴ－ＰＣＲ检测分化细胞的ｍ ＲＮＡ 表达;ＭＴＴ 法检测反义核酸与化疗药物对细胞联合作用后对     

原癌基因c-myc和白血病

近年研究表明,白血病的发生与细胞原癌基因的激活和抑癌基因的缺失或突变有着密切的关系。其中原癌基因c-myc是目前研究最为广泛的癌基因之一,其基因扩增和过度表达,可促进细胞增殖、抑制细胞分化。在某些因素引起细胞增殖停滞时,c-myc基因的持续表达还可促进细胞凋亡。并且发现c-myc在白血病中高度表达与白血病的发生、发展及预后有关。笔者就c-myc基因的结构、功能及其在白血病中的表达与意义作一综述。1.c-myc基因的结构和功能myc基因家族成员有3个:cell-myc(c-myc)、human-myc(N-myc)和myc-related-gene(L-myc)。它们具有类似的结构和…     

原癌基因c—myc和EGFR在人类皮肤鳞癌中的表达及意义

目的 通过观察皮肤鳞癌c-myc及EGFR（表皮生长因子）的表达，探讨其在皮肤鳞癌发生、发展中的作用。方法 应用免疫组化SABC技术分别检测皮肤鳞癌及正常皮肤中c-myc、EGFR的表达。结果 皮肤鳞癌c-myc表达率高于正常组（P＜0.05),c-myc蛋白在低分化、中分化、高分化鳞癌及正常组织中的阳性表达率分别为70.8%、66.%、55.3%、20％。EGFR在鳞癌中表达率高于正常组（P＜0.05)，EGFR在低分化、中分化、高分化鳞癌及正常组织中的阳性表达率分别为83.3%、72.2%、52.6%、30%。结论 c-myc及EGFR的过度表达在皮肤鳞癌的发生中起重要的作用。     

人衰老成纤维细胞c—myc原癌基因的损伤修复

目的；观察人衰老成纤维细胞特异因基ｃ－ｍｙｃ的损伤修复，方法采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法。结果；衰老细胞能有效地修复ｃ－ｍｙｃ基因。结论；衰老细胞有效地修复对细胞存亡至关重要的基因。     

小儿急性淋巴细胞白血病bcl—2和c—myc转录水平表达及其意义

采用原位分子杂交方法，检测了５４例小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）的ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平，并与患儿临床表现进行对比分析，结果表明：小儿ＡＬＬｂｃｌ－２ＭＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达与非白血病对照组比较普遍增高，呈显著性差异（Ｐ〈０．０１）；ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ与ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平呈明显相关（ｒ＝０．８０４８，Ｐ〈０．０１）；两者的表达水平表明复发病例明显高于初诊病     

白血病患者治前骨髓塑料包埋切片c-myc原癌基因表达的初步研究

目的 探讨急、慢性白血病治疗前骨髓塑料包埋切片内ｃ－ｍｙｃ原癌基因表达的变化。方法 使用冷丙酮固定结合简易三步塑懈体系,观察了２２例急、慢性白血病患者骨髓活检ＧＭＡ地切片内白血病细胞ｃ－ｍｙｃ表达的检测结果。结果 急性髓系白血病（ＡＭＬ）时,１９％￣６９％白血病细胞内含有ｃ－ｍｙｃ蛋白,其含是在每例患者中多变。比较之下,治前的急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和慢性髓系白血病（ＣＭＬ）慢性期中就罕有检出     

反义核酸对人白血病HL—60细胞中c—myc基因表达的抑制

研究两个反义核酸（１８ｍｅｒ，２１ｍｅｒ）对人白血病ＨＬ－６０细胞中ｃ－ｍｙｃ基因表达的抑制作用。用ＨＬ－６０活细胞计数，ＲＮＡ含量的ＲＴ－ＰＣＲ测定和ｃ－ｍｙｃ基因蛋白的免疫组化染色检查，结果：两个反义核苷酸都以抑制ＨＬ－６０细胞的增殖，增殖抑制率为１１－７５％。反义核酸还抑制ｃ－ｍｙｃＲＮＡ和Ｍｙｃ蛋白的表达，而对ｃ－ｍｙｃ基因正常表达的红白血病细胞Ｋ５６２的增殖和ＰＨＡ刺激的人淋巴细胞的增殖     

致敏豚鼠气道及肺组织c—myc基因的表达与哮喘发病的关系

研究原癌基因在哮喘发病中的作用。方法以卵蛋白致敏诱发豚鼠哮喘建立实验模型。用分子杂交技术分别观察正常及哮喘发作后ｃ－ｍｙｃ在豚鼠气道及肺组织中的表达水平。结果：原癌基因ｃ－ｍｙｃ在豚鼠哮喘发作后即刻表达增强，且呈时间依赖关系，并可被糖皮质激素部分抑制。     

胰岛素对血管平滑肌细胞增殖及原癌基因c－fos，c－myc异常表达的实验研究

我们观察了不同浓度的胰岛素对体外培养人血管平滑肌细胞增殖的影响，及其该过程中原癌基因ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ的表达。结果表明，胰岛素能促进血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖，即：ＳＭＣ数目的增多，ＳＭＣＤＮＡ的合成；胰岛素能促进原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ的异常表达；且以上作用均存在着剂量－效应关系。这些结果提示，高胰岛素血症促进动脉粥样硬化（ＡＳ）发生、发展可能是通过促进某些原癌基因异常表达，进而促进ＳＭＣ增殖而实现的。这也许是某些基因治疗ＡＳ的基础。     

脂质体介导c—myc反义核酸对HL—60细胞作用的研究

原癌基因ｃ－ｍｙｃ参与调控细胞的增殖、分化和凋亡过程,在白血病细胞株ＨＬ－６０ 中有很高的表达。ｃ－ｍｙｃ通过扩增活化或基因重排而异常激活,在白血病的发生和发展中可能起着重要的作用。　目的　通过脂质体介导ｃ－ｍｙｃ反义核酸转染ＨＬ－６０ 细胞,观察其抑制细胞生长增殖、促进分化、诱导凋亡,降低ｃ－ｍｙｃｍ ＲＮＡ 和蛋白表达水平,探讨反义核酸的抗肿瘤作用机制。　方法　ＨＬ－６０ 细胞在３７℃、５％ＣＯ２ 条件下,培养于１０％ 小牛血清１６４０ 培养液中,细胞接种密度为４×１０７／Ｌ,反义核酸终浓度为１μｍ ｏｌ／Ｌ,反义核酸与脂质体比例为１ μｍ ｏｌ（６．５ μｇ）∶１０ μｇ,无血清转染６ ｈ。实验同时设置空白组、无义组、反义组、脂质体组、脂质体无义组等对照组。连续培养４ 天。通过锥虫蓝拒染实验测定细胞的生长能力;ＮＢＴ还原实验和瑞特－姬姆萨染色测定细胞的分化能力;免疫细胞化学染色检测ｃ－ｍｙｃ蛋白表达;ＲＴ－ＰＣＲ法检测ｃ－ｍｙｃ ｍ ＲＮＡ 水平;吖啶橙／溴化乙锭染色观察凋亡细胞形态;流式细胞仪检测凋亡率;ＤＮＡ抽提及电泳观察凋亡细胞ＤＮＡ降解片段的形成。　结果　脂质体转染ｃ－ｍｙｃ反义核酸的作用：（１）抑制ＨＬ－６０     

老年急性淋巴细胞白血病细胞中c—myc基因的表达及其临床意义

目的：探讨c-myc基因在老年急性淋巴细胞白血病细胞中的表达及其临床意义。方法：采用免疫细胞组织化学染色方法,检测28例老年急性淋巴细胞白血病病人化疗前后及26例非白血病的c-myc基因的表达水平。结果：急性淋巴细胞白血病组c-myc基因表达较非白血病明显增高,两者呈显著性差异（P＜0．01）,急性淋巴细胞白血病组中,化疗后完全缓解与不缓解病人c-myc基因的表达有显著差异（P＜0．05）,结论：c-myc基因在老年急性淋巴细胞白血病细胞中高表达,而且与化疗疗效密切相关,提示c-myc基因对于老年急性淋巴细胞白血病的诊断,疗效评价及预后估计均有一定意义。     

c—myc反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的影响

目的 研究c-myc反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的影响。方法 用针对c-myc mRNA 5'端非翻译区的一个18bp的反义寡核苷酸与HL60细胞、分离的急性粒细胞白血病病人白细胞共培养10h,用凋亡细胞计数、DNA凝胶电泳、ELISA、流式细胞仪等方法测白血病细胞的调亡。结果 c-myc反义寡核苷酸能够诱导HL60细胞凋亡,且此作用随着作用浓度的提高而增加;此反义核酸只诱导白血病患者的白血病细胞凋亡,对正常白细胞的凋亡无影响。结论 c-myc反义核酸可以通过诱导白血病细胞凋亡来治疗急性粒细胞白血症,且该作用的特异性好。