磁性附着体中铁素体不锈钢引起小鼠成纤维细胞L929的死亡模式*★

背景：作为自制磁性附着体外包裹材料的26-1超纯铁素体不锈钢在以往的实验中已初步证实其具有良好的生物学特性，但选用凋亡机制对其生物相容性进行深入研究和评价的报道较少。 目的：应用L929细胞从分子生物学水平探讨26-1超纯铁素体不锈钢引起细胞的死亡模式，评价26-1超纯铁素体不锈钢是否符合临床应用的生物相容性要求。 设计、时间及地点：分子生物学水平，对比观察实验，于2004-06/2005-06在中国医科大学中心实验室完成。 材料：26-1超纯铁素体不锈钢(超低碳，名义成分为Fe-26%Cr-1%Mo)，Tilite(含钛医用合金，名义成分为70%Ni-16%Cr-(4%~ 6%)Ti-其他合金元素)、Co-Cr合金(名义成分为Co-30%Cr-5%Mo)。利用蜡型铸造制备实验用材料，并将材料分别切割成直径12 mm的圆盘样品。 方法：①将3种材料与L929细胞联合培养，阴性对照组为RPMI1640正常培养细胞，孵育18 h和24 h后应用异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白结合碘化丙啶染色双参数技术对细胞死亡类型进行定量检测。②25%，50%，100%浓度的3种材料浸提液体外培养小鼠成纤维细胞L929 24 h后，采用流式细胞术碘化丙啶染色法检测L929细胞的凋亡率及细胞周期分布情况。 主要观察指标：①不同材料引起L929细胞凋亡和坏死的比例。②L929细胞凋亡率及细胞周期分布情况。 结果：各材料组均降低了L929细胞的生存率，其中细胞坏死水平在各材料组与阴性对照组之间差异无显著性意义，说明引起的致细胞病变效应主要是由细胞凋亡引起的，各材料组之间产生的效应差异无显著性意义。并且L929细胞凋亡具有明显的浓度依赖性及时间依赖性。3种实验用金属材料引起的L929细胞凋亡率在各浓度组间差异无显著性意义。 结论：26-1超纯铁素体不锈钢引起细胞的死亡方式主要是凋亡，符合临床应用材料的生物相容性要求。     

牙科四种烤瓷合金对人牙龈成纤维细胞P70S6K表达的影响

摘要 背景：研究已证实[1-3],部分烤瓷冠基底合金在体外具有抑制人牙龈成纤维细胞增殖作用。并诱导其凋亡,但烤瓷冠基底合金抑制细胞的具体机制尚不清楚。 目的：观察四种烤瓷冠基底合金在体外对人牙龈成纤维细胞p70s6k表达的影响,并借其来评价五种烤瓷基底冠合金的生物相容性。 设计、时间及地点：以各组人牙龈成纤维细胞p70s6k的表达量为观察对象,对比观察实验。于2009 07／10在辽宁医学院科技楼免疫组化及免疫印迹实验室完成 材料：取临床上12-18岁且无其他系统疾病的患者因正畸需拔除的健康的第一前磨牙的牙颈部的牙龈缘组织进行原代培养,取其5代对数期的细胞进行指标测定,牙龈组织取之于辽宁医学院附属二院的临床患者。镍铬、纯钛、金合金、钴铬合金由贺立氏古莎齿科有限公司提供。 方法：本实验分为5组,分别为镍铬、纯钛、金合金、钴铬合金四个实验组和一个对照组,对照组用未经合金处理的DMEM完全培养基孵育细胞,实验组即将镍铬、纯钛、金合金、钴铬合金加入DMEM中制备出合金浸提液,以10％ 浓度加入培养的人牙龈成纤维细胞培养液中,处理人牙龈成纤维细胞3天后,通过免疫印迹分析各组p70s6k的表达量。 主要观察指标： 各组合金浸提液干预72h对人牙龈成纤维细胞p70s6k表达量的影响 结果：1.细胞免疫组织化学染色,波形丝蛋白染色阳性、角蛋白染色阴性,证实细胞符合中胚层来源的成纤维细胞特点。 2.免疫印记结果显示,p70s6k表达的平均灰度值在对照组与金合金、钛合金组之间没有明显差异（P>0.05）,在金合金与钛合金组、镍铬与钴铬合金组之间也无明显差异（P>0.05）,而镍铬合金、钴铬合金与对照组、金合金、钛合金组之间均具有明显差异（P<0.01）。 结论：1.体外成功培养了人牙龈成纤维细胞 2.金合金、钛合金对人牙龈成纤维细胞p70s6k的表达无明显的影响,具有良好的生物相容性,与之相比,镍铬、钴铬合金的生物相容性则较差。 关键词：烤瓷合金;生物相容性;人牙龈成纤维细胞;核糖体S6蛋白激酶     

胶原蛋白硫酸肝素支架移植入猪脑后对其神经元凋亡的影响

本实验研究胶原蛋白硫酸肝素支架移植入猪脑后对其神经元凋亡的影响,测定体内试验中该支架和 猪脑组织的生物相容性。实验组通过微创手术将胶原蛋白硫酸肝素支架移植入猪的脑内。对照组行假手术。分别于术后1天、3天、7天、14天或者30天手术处死动物,取组织标本行组织学分析（包括免疫组织化学法检测Bax 和Bcl-2）。HE染色发现移植后随即出现轻度组织反应。通过末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记分析法于术后第1、3、7、14天在两组动物脑组织中都发现小量凋亡细胞;但是Bax 和Bcl-2呈低表达。在术后3天和7天,实验组和对照组间有显著差异,但是在术后30天两组间差异不明显。该支架和猪的脑组织具有组织相容性,能作为生物学底物安全地用于中枢神经系统组织工程。     

周期性张应力对成纤维细胞凋亡的影响及其调控机制

背景：在体内条件下,细胞力学的功能研究因其所处生理环境的复杂性、实验条件的不易控制而很难得到满意结果。 目的：探讨周期性张应力对成纤维细胞凋亡的作用及影响机制。 方法：采用多通道细胞牵张应力加载系统,以成纤维细胞为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型。加力组成纤维细胞分别给予周期性张应力刺激6,12,24 h,力值定为12% surface elongation,频率为6 cycles/min,每一循环包括 3 s stretch/3 s relaxation,并设立正常对照组。采用Hoechst33258染色检测细胞凋亡情况,以流式细胞仪分析细胞周期,应用酶标仪测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的活性。 结果与结论：正常对照组细胞核为弥散均匀的圆形或椭圆形荧光,加力组细胞核或细胞质内可见致密浓染的颗粒、新月体或环状荧光。与正常对照组比较,加力组细胞周期显著延长(P < 0.01);与加力6 h组比较,加力12,24 h组细胞周期均显著缩短(P < 0.01),而加力24 h组细胞周期略长于加力12 h组。与正常对照组比较,加力组细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性均显著升高(P < 0.01);加力12 h组细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性显著高于加力6 h组(P < 0.01)。表明周期性张应力可以诱导成纤维细胞凋亡,在12 h内加力时间越长,早期凋亡越明显,且能够改变其细胞周期,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3参与了此过程。     

碱性成纤维细胞生长因子对脑出血大鼠神经细胞凋亡和BaX、Bcl-2基因表达的影响

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠脑出血后神经细胞凋亡及血肿周围大脑皮质和出血侧海马Bax、Bcl-2基因表达的影响。方法采用脑内注射胶原酶建立大鼠脑出血模型,应用TUNEL法测定大鼠大脑皮质、海马神经细胞凋亡数目。及应用采用半定量逆转录酶聚合链反应(RT-PCR),检测脑出血后血肿周围大脑皮质和出血侧海马的Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达。结果(1)bFGF组的皮质和海马神经细胞凋亡数比生理盐水(NS)对照组明显减少(P<0.05)。(2)bFGF组的血肿周围大脑皮质和出血侧海马Bax mRNA表达比NS对照组明显减少(P<0.05);而Bcl-2 mRNA表达比NS对照组明显增高(P<0.05)。结论bFGF提高大鼠脑出血后大脑组织和海马Bcl-2 mRNA的表达,降低Bax mRNA的表达,抑制脑出血后神经细胞凋亡。     

碱性成纤维细胞生长因子对癫痫大鼠海马神经元凋亡的影晌

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对致痫大鼠的神经保护作用及可能机制。方法给予戊四氮（PTZ）致痫大鼠每日腹腔注射bFGF（bFGF组，n=36）、生理盐水（NS组，n=36），分别于痫性发作后6h、12h、24h、48h、3d、5d处死取脑，切片进行bcl-2、caspase-3染色，用原位末端标记（TUNEL）方法检测海马神经元凋亡细胞。结果痫性发作6h后两组海马CA1、CA3区的bcl-2、caspase-3、TUNEL染色阳性表达差异无统计学意义（P〉0．05）；12～48h表达逐渐增强，bFGF组bcl-2、TUNEL的表达显著高于NS组，bFGF组caspase-3的表达显著低于NS组（P均〈0．01）；3d后表达减弱，bFGF组与NS组的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论bFGF能显著减轻癫痫所致的海马神经元凋亡，提示可能通过调控bcl-2和caspase-3基因的表达发挥作用。     

外源性碱性成纤维细胞生长因子对放射诱导神经干细胞凋亡的抑制效应

背景：已证实放射性神经干细胞损伤是放射性脑损伤的可能途径之一,而碱性成纤维细胞生长因子对放射性损伤具有保护作用,但其机制尚不清楚。 目的：观察外源性碱性成纤维细胞生长因子对放射诱导C17.2神经干细胞凋亡的抑制作用。 设计、时间及地点：随机分组设计,对比观察,于2006-11/2008-06在中山大学附属第二医院林百欣实验中心完成。 材料：C17.2神经干细胞系为小鼠小脑祖细胞永生化后构建的神经干细胞系。 方法：以直线加速器进行总量为8 Gy外照射C17.2神经干细胞建立离体放射性损伤模型,以1×107 L-1的细胞浓度接种C17.2神经干细胞悬液至96孔板,每孔加细胞悬液200 μL,按0,25,50,100 μg/L(0 μg/L作对照)分别加入碱性成纤维细胞生长因子干预。 主要观察指标：四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性并拟合生存曲线,流式细胞仪检测细胞凋亡率。 结果：随碱性成纤维细胞生长因子浓度升高,C17.2神经干细胞增殖比明显增加(P < 0.01),呈现明显剂量-效应关系。碱性成纤维细胞生长因子浓度为100 μg/L时活性最强,未显示细胞毒性。流式细胞仪检测结果显示：对照组细胞凋亡率高于25,50 μg/L碱性成纤维细胞生长因子组(P < 0.01),25,50,100 μg/L碱性成纤维细胞生长因子组组间相比,差异具有显著性意义(P < 0.05~0.01)。 结论：外源性碱性成纤维细胞生长因子对放射诱导的C17.2神经干细胞凋亡具有明显抑制作用。     

小檗碱对小鼠全脑缺血后神经元凋亡的影响

目的观察小檗碱能否对小鼠全脑缺血后细胞凋亡产生抑制作用.方法利用改良的Pulsinelli-Brierley4血管闭塞法制成小鼠全脑缺血再灌注动物模型.TUNEL法原位检测特征性DNA片段.琼脂糖凝胶电泳技术检测DNA梯度带.结果小檗碱组与再灌流各时间段缺血组相比,海马CA1区TUNEL阳性细胞数明显减少(P<0.01).缺血组再灌注24h、48h可见典型的DNA梯度带,分别在180、360、540bp等处.小檗碱组未见特征性DNA梯度带.结论小檗碱可以减少小鼠全脑缺血后海马CA1区细胞凋亡的发生.     

细胞外钾离子对小鼠神经干细胞凋亡的影响

目的 探讨细胞外钾离子对体外培养神经干细胞增殖活性及凋亡的影响.方法 无血清悬浮培养方法分离培养神经干细胞,取第3～5代培养细胞随机分为对照组,低、中、高浓度氯化钾组,利用MTT法检测不同浓度氯化钾对细胞活性的影响,通过Western Blot检测Caspase-3表达和原位末端标记(TUNEL)技术分析各组细胞凋亡上的差异.结果 干预24 h后,各试验组细胞增殖活性均降低,且与对照组相比有统计学差异(P＜0.01),高浓度氯化钾作用下TUNEL阳性细胞率为27.3%,显著高于对照组7.0%(P＜0.01),而低浓度氯化钾和中等浓度氯化钾作用后TUNEL阳性细胞率分别为4.8%和5.4%,与对照组无显著升高(P＞0.05),且高浓度氯化钾可以上调Caspase-3表达增加.结论 提高细胞外钾离子可以抑制神经干细胞增殖,且高浓度钾离子可以诱导神经干细胞的凋亡.     

碱性成纤维细胞生长因子荧光真核表达载体构建及对过氧化氢诱导血管内皮细胞凋亡的影响

背景：已证实外源性碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor , bFGF)可抑制血管内皮细胞凋亡。 目的：构建表达bFGF的荧光真核表达载体,探讨其对过氧化氢(H2O2)诱导的血管内皮细胞凋亡和凋亡相关蛋白的影响。 方法：通过基因亚克隆构建荧光真核表达载体pcDNA3.1-bFGF-GFP,利用脂质体介导将bFGF 基因导入人脐静脉内皮细胞内,通过荧光观察和RT-PCR检测基因的表达。实验分为3组,对照组(转染pcDNA3.1)、过氧化氢组(转染pcDNA3.1+ H2O2)和bFGF转染+过氧化氢组(转染pcDNA3.1-bFGF-GFP+H2O2),流式细胞术测定细胞凋亡率,Western blot检测caspase-3 P17活性亚单位和Bax蛋白表达。 结果与结论：成功构建荧光真核表达载体pcDNA3.1-bFGF-GFP,该载体转染人脐静脉内皮细胞后,bFGF mRNA显著增加,并可观察到绿色荧光。与对照组相比,过氧化氢组细胞凋亡率和caspase-3 P17活性亚单位、Bax蛋白的表达量都明显增加(P < 0.01),而bFGF 转染+过氧化氢组的细胞凋亡率和caspase-3 P17活性亚单位、Bax蛋白的表达量则比过氧化氢组显著降低(P < 0.01)。证实bFGF基因转染能抑制过氧化氢诱导的血管内皮细胞凋亡,其作用机制可能与调控Bax蛋白表达和caspase-3活性有关。     

种植材料生物学特性对牙种植体生物相容性的影响

牙种植体材料主要分为：钛及其合金、生物活性陶瓷、碳和高分子材料。文章从这几种材料的生物学特性入手，介绍了这几种材料的优点及存在的问题；探讨了种植体表面形态、种植体的长度和直径对应力分布的影响；证实了种植体表面的涂层、种植体的生物力学对种植体材料的生物相容性都发挥着不同程度的作用。     

利多卡因对肿瘤坏死因子α诱导中性粒细胞凋亡的影响

背景：利多卡因被认为有抗炎作用,而其作用机制不清。核转录因子κB是炎症反应的关键环节。 目的：观察利多卡因对人体中性粒细胞核转录因子κB激活和中性粒细胞凋亡的影响。 设计、时间及地点：对比观察,于2006-10/2007-02在江苏省麻醉学重点实验室完成。 材料：肿瘤坏死因子α(O127:B8)购于Sigma公司;外周血标本健康者,受试者知情同意。 方法：人体中性粒细胞分为5组：生理盐水对照组、肿瘤坏死因子α组、肿瘤坏死因子α+ 利多卡因 1.0 mmol/L组、肿瘤坏死因子α+ 利多卡因2.0 mmol/L组、肿瘤坏死因子α+ 利多卡因 4.0 mmol/L组,共同孵育3 h。 主要观察指标：以反转录聚合酶链反应及免疫印迹法检测利多卡因对核转录因子κB mRNA和I-κB mRNA表达及蛋白含量的影响。孵育12h 和24h,以流式细胞术分析对中性粒细胞凋亡的影响。 结果：利多卡因组核转录因子κB mRNA表达显著降低,而I-κB mRNA表达显著增加。并且利多卡因2.0 mmol/L组和4.0 mmol/L组显著优于1.0 mmol/L组(P < 0.05),而 2.0 mmol/L组和4.0 mmol/L组之间差异不显著(P > 0.05)。利多卡因在12 h和24 h都可以显著抑制肿瘤坏死因子α诱导的外周血中性粒细胞凋亡(P < 0.05),而4.0 mmol/L组显著优于1.0 mmol/L组(P < 0.05)。 结论：利多卡因1.0,2.0,4.0 mmol/L都可以显著下调肿瘤坏死因子α诱导的外周血中性粒细胞P65 mRNA的表达,并且在12和24 h可以部分逆转肿瘤坏死因子α诱导的中性粒细胞凋亡。     

人脐血间质干细胞静脉输注对60Coγ射线照射小鼠脾脏细胞生物学效应的影响★

背景：研究发现，脐血间质干细胞对辐射损伤有一定的防护作用。 目的：实验拟观察脐血间质干细胞静脉输注对照射小鼠脾脏细胞生物学效应的影响，验证其防辐射损伤作用。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007-04/10在广东医学院实验动物中心完成。 材料：将体质量(20.0±1.5) g的雌性昆明种小鼠随机分为正常对照组、单纯照射对照组、60Coγ射线照射前静脉注射脐血间质干细胞组，每组30只。新鲜脐带血来源于本院妇产科健康产妇。 方法：以无菌塑料采血袋按密闭式方法采集足月新生儿脐带血80～140 mL，无菌条件下将脐带血液采集到含有ACD-B保养液的无菌采血袋内，并按照卫生部检测血液的标准检测每一份脐带血液，采集、分离间质干细胞。60Coγ射线照射小鼠，通过尾静脉将分离获得的人脐血间质干细胞输注入小鼠体内，细胞数≥ 1×108/份，照射后当天再次输注人脐血间质干细胞。 主要观察指标：应用流式细胞仪检测脾脏细胞的凋亡指数和免疫参数。 结果：与单纯照射组相比，60Coγ射线照射前静脉注射脐血间质干细胞组的G0/G1期细胞比例下降，而S、G2M期细胞比例均有不同程度的升高。经照射后，小鼠脾细胞的凋亡率明显增加，脐血间质干细胞对细胞的凋亡有一定保护作用，同时能够提高细胞的增殖率。单纯照射组的NK细胞、CD4+和CD8+标记率明显低于正常对照组，而脐血间质干细胞能显著地提高它们的活性。 结论：脐血间质干细胞静脉输注对辐射造成的脾细胞损伤有一定保护作用，可促进脾脏细胞的分裂增殖，加速脾脏细胞的修复，其作用机制可能与提高NK细胞活性和CD4+、CD8+数量有关。     

血液透析膜材料的生物相容性

血液透析是急慢性肾功能衰竭主要治疗措施，透析膜材料是影响血液透析治疗效果的关键因素。理想的透析膜应该与血管内皮非常接近，但目前还不能达到这一目标，所以血液和异体的透析膜接触后必然相互作用。文章对透析膜引起补体、白细胞、单核细胞及细胞因子的释放、凝血、血管活性物质、β2 -微球蛋白以及其他方面的变化进行相应探讨。     

组织工程材料的表面改性研究及应用：等离子体改性和接枝改性

组织工程材料的表面物理化学性质对材料的组织相容性有着重要影响。因而对材料的表面进行改性，在保持材料物理机械性能的前提下引入可促进细胞黏附和生长的基团或生物活性分子，可显著改善材料的细胞相容性。目前，细胞相容性聚合物的表面改性方法主要有：等离子体改性、接枝改性等方法。文章从等离子体改性、接枝改性等方面论述了组织工程材料的表面改性方法及其在组织工程中的应用。     

纳米羟基磷灰石及其复合材料对牙周膜细胞的影响

目前研究的纳米羟基磷灰石复合材料可分为3类：纳米羟基磷石灰天然复合材料、纳米羟基磷石灰半合成复合材料和纳米羟基磷石灰合成复合材料。文章按照纳米羟基磷灰石及其复合材料的分类介绍了纳米羟基磷灰石及其复合材料生物学特性，证实了纳米羟基磷灰石及其复合材料可以更好地促进人牙周膜细胞的生长，从而修复破坏的牙槽骨，建立牙周新附着。将纳米磷石灰及其复合材料应用于牙周膜细胞，将材料技术应用到牙周细胞的分化、牙骨的形成、牙齿的矫正及牙齿新附着的建立研究方面有着非常广阔的应用前景。     

蛋白激酶C在细胞及肿瘤细胞凋亡中的作用

蛋白激酶C属于丝/苏氨酸蛋白激酶家族,在介导细胞的增殖、分化和凋亡等信号传导中发挥重要作用,并与肿瘤的发生、发展和侵袭转移等过程密切相关。蛋白激酶C是信号转导通路中发挥关键作用的蛋白激酶之一,做为信号分子,它的活化是一系列细胞级联信号传导途径的关键环节,既介导多种细胞信息的传递,又参与调节基因的表达与功能,影响细胞周期,对肿瘤细胞的生长、分化、增殖与凋亡起调节作用。因此,采用抗细胞信息传递药物可能为抗肿瘤治疗提供更加广阔的前景。     

三种羧甲基壳聚糖防粘连膜的降解及其生物相容性

背景：羧甲基壳聚糖膜降解快，降解率不容易测量，体外模拟与动物实验的相关性尚存在较大问题。 目的：找出适合体内降解的体外模型，并通过体内实验观察3种羧甲基壳聚糖膜的生物降解性与生物相容性。 设计、时间及地点：对比观察实验，于2007-09/2008-08在中国药品生物制品检定所医疗器械检测中心完成。 材料：1号样品：纯的羧甲基壳聚糖膜；2号样品：羧甲基壳聚糖︰纤维素︰聚乙烯醇=80︰10︰10︰3号样品：羧甲基壳聚糖︰纤维素︰聚乙烯醇=90︰5︰5，所有防粘连膜均采用水流延成型的方法制备。 方法：体外模拟：采用模拟体液和溶菌酶磷酸盐缓冲溶液作为降解介质；分别将3种膜样品定量后，浸泡于上述两种模拟介质中（质量︰体积< 1︰30）。定期取样，计算膜的降解百分率。体内试验：①取SD大鼠15只，背部皮下植入3种样品，样品间隔为1 cm以上，分别于7，15，33 d大体观察样品降解情况。②30只SD大鼠随机分为3组，每组10只。将样品放置进聚甲基丙烯酸甲酯管子中植入各组大鼠背部皮下，分别于7，15，22，33，77 d处死，每个时间点2只，从背部取出管子，计算降解率。③24只SD大鼠随机分为3组，每组8只。皮下埋植3种样品，分别于7，15，30，100 d处死，每个时间点2只，取埋植点组织，苏木精-伊红染色观察组织病理变化。 主要观察指标：①通过大体观察和质量损失率进行降解性能的研究。②观察植入后的组织病理情况。 结果：①两种体外降解模型都可以在一定程度上反映羧甲基壳聚糖膜的降解，酶解较模拟体液降解速度快，模型较为符合体内降解的真实情况。②添加少量纤维素和聚乙烯醇的羧甲基壳聚糖膜并不能很好地改善其降解性，但可以稍微改善降解后膜的完整性。③羧甲基壳聚糖由于降解快，会产生大量吞噬细胞和纤维细胞，导致出现一定的炎症；添加纤维素和聚乙烯醇的膜不仅不能够减小炎症，而且会延长愈合期，尤其是2号样品，炎症稍重。 结论：①利用溶菌酶模拟体内降解效果更好，有利于提高检测效率。②纯羧甲基壳聚糖防粘连膜炎性周期短，愈合快。     

腹膜透析管材料特征及相关性感染

腹膜透析是急、慢性肾衰竭的主要替代疗法之一,与血液透析相比,它具有操作简单,可自行透析和最大限度保护残存肾功能的特点,目前已在国内外广泛开展。腹膜透析相关性感染是影响患者透析疗效和病死率的主要原因。资料显示,腹膜透析相关性感染与多种因素有关,包括操作方法、患者的营养状况、家居环境、文化程度及肠道因素等,而腹膜透析管材料特征所导致的感染越来越受到重视。腹膜透析管类型、临床置管操作方法的不统一以及熟练程度都会影响腹膜透析患者的治疗效果及远期预后。     

异种骨支架材料的研制及相关表征

背景：异种脱蛋白松质骨因其来源广泛和独特的生物学特性使其有望成为较好的骨组织工程支架,不同处理方法可使其免疫原性和力学性能产生差异。 目的：对异种脱蛋白松质骨的制备工艺及免疫学和力学性能进行论证。 设计、时间及地点：对比观察实验,于2008-02/10在黑龙江省纤维化生物治疗重点实验室完成。 材料：取成年猪新鲜股骨远端松质部分,所截取骨块内不含软骨及皮质骨成分,初制为3 cm×0.5 cm×0.5 cm大小,其长轴与所取松质骨骨小梁排列方向一致,取材各骨块的表观孔隙密度基本相同。 方法：骨块于1∶1氯仿甲醇液脱脂24 h,50 ℃蒸馏水震荡冲洗,体积分数为0.2的H2O2浸渍24 h。反复3次。将处理后的骨块蒸馏水于室温下浸泡透析24 h,烘干。 主要观察指标：大体形态结构和组织学特点,氨基酸含量,生物力学性能。 结果：经脱蛋白处理的松质骨立体空间结构并无大的破坏,由羟基磷灰石和胶原网架构成大小不等、相互交通、开放的孔隙和高度的孔隙间连接。材料中胶原类氨基酸与新鲜松质骨无明显差异,而芳香族氨基酸如酪氨酸、蛋氨酸波峰消失。脱蛋白松质骨弹性模量高于新鲜松质骨(P < 0.05)。 结论：异种脱蛋白松质骨具有良好的孔隙与孔隙率,低免疫原情况下可以保持良好的力学性能。