LC-MS/MS法测定大鼠口服缩泉胶囊后胆汁中的代谢物（Ⅱ）

目的 研究大鼠灌胃缩泉胶囊后,益智黄酮（杨芽黄素、伊砂黄素、白杨素、山奈素和芹菜素-4＇,7-二甲氧醚）二相结合产物的酶水解。方法 雄性Sprague-Dawley大鼠胆管插管手术完毕后经灌胃给予缩泉胶囊（1.64 g/kg）后收集0~4 h胆汁。胆汁样品经β-葡萄糖醛酸水解酶（1 000 U/ml,pH为5的乙酸钠缓冲液）处理后,利用液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）进行分析。结果 益智黄酮的葡萄糖醛酸结合物在酶水解处理后,代谢物的色谱峰消失,释放出黄酮的原形物质形式。虽然脱甲基反应后形成葡萄糖醛酸结合物也被水解,但并未能检测到脱甲基产物。结论 β-葡萄糖醛酸水解酶处理可进一步确定益智黄酮在大鼠胆汁中的物质形式,也为定量分析奠定基础。     

LC-MS/MS法测定大鼠口服缩泉胶囊后胆汁中的代谢物

目的：研究大鼠灌胃缩泉胶囊后,益智黄酮（杨芽黄素、伊砂黄素、白杨素、山奈素和芹菜素-4＇,7-二甲氧醚）在胆汁中的物质形式。方法：雄性Sprague Dawley大鼠胆管插管手术完毕后,经灌胃给予缩泉胶囊（3.52g/kg）后收集0-4h胆汁。胆汁样品经甲醇沉淀处理后再利用液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）进行分析。结果：大鼠灌胃缩泉胶囊后,益智黄酮在大鼠胆汁中主要以代谢物的形式存在,主要是葡萄糖醛酸结合物为主,检测不到原形物质形式。胆汁中检测不到脱甲基反应形成的代谢中间产物,这些中间代谢产物迅速形成葡萄糖醛酸结合物。结论：大鼠灌胃缩泉胶囊后,经肠道吸收的益智黄酮可通过胆汁进行消除,葡萄糖醛酸结合物是胆汁中的主要物质形式。     

大鼠灌胃缩泉方制剂后尿、粪中的益智活性成分及代谢物的测定

目的：研究大鼠灌胃缩泉胶囊和缩泉丸后,诺卡酮、益智黄酮(杨芽黄素、伊砂黄素、白杨素、山奈素和芹菜素-4',7-二甲氧醚)和益智中二芳基庚烷类成分(益智酮甲、益智酮乙、益智醇)在尿和粪中的物质形式。方法雄性Sprague Dawley经灌胃给予缩泉胶囊(3.54 g/kg)和缩泉丸(3.77 g/kg)后置于代谢鼠笼中,收集12 h的尿液和粪球。粪球称重后加入9倍体积的去离子水,高速匀浆。分别取100μl尿液和粪球匀浆液于离心管中,加入300μl甲醇,漩涡振摇5 min,13000次/min下离心10 min,取上清液,在N2下吹干,残渣用50μl甲醇复溶,再次振摇和离心,取上清液40μl,利用液相色谱-串联质谱联用仪(LC-MS/MS)进行分析。结果根据上述对照品在生物样品中的LC-MS/MS出峰情况,通过比较空白尿、粪样品与给药后相应的尿粪样品,研究发现,大鼠灌胃后,在尿液和粪便中主要检测到原形物质形式,未检测到葡萄糖醛酸结合物等二相代谢产物。结论大鼠尿液中检测到的诺卡酮、益智酮甲以及杨芽黄素等成分,可能是直接作用于膀胱而发挥调节膀胱功能的活性成分。     

LC-MS/MS定性分析大鼠尿液中益智提取物的成分及其代谢产物

目的 通过LC-MS/MS法检测大鼠尿液中益智提取物中10种活性成分的存在形式.方法 采用LC-MS/MS法检测灌胃给药后0~4 h、4~8 h、8~24 h大鼠尿液中的益智代谢产物,与给药前大鼠空白尿液MRM图进行比对.结果 实验组大鼠尿液中9种主要活性成分均以原形化合物的形式存在,而未发现山柰酚及其葡萄糖酸代谢产物.结论 大鼠灌胃益智提取物后,益智活性成分在大鼠尿液中的物质形式以原形为主,为理解这些物质在大鼠体内的消除途径提供部分参考依据.     

20（S）-原人参三醇及其ocotillol型差向异构体代谢物的排泄

目的：考察20（S）-原人参三醇（PPT）及其ocotillol型差向异构体代谢物（简称为M1、M2）在尿液、粪便中的排泄情况和两代谢物在胆汁中的排泄情况。方法采用LC-MS/MS法分别测定大鼠尿液、粪便样品和其经葡萄糖醛酸酶水解后PPT、M1和M2的浓度,以及大鼠胆汁样品和其经葡萄糖醛酸酶水解后M1和M2的浓度。结果灌胃给予PPT后72 h,PPT、M1和M2的粪便累积排泄量分别为给药剂量的14.88%、1.34%和0.084%,经酶水解后,其累积排泄量分别为14.77%、1.36%和0.085%,它们基本不经尿排泄;灌胃给予M1或M2后72 h粪便累积排泄量分别为给药剂量的4.41%、47.20%,基本不经尿排泄。灌胃给予M1或M2后36 h胆汁累积排泄量分别为给药剂量的3.01%和0.068%,静注给药M1、M2后36 h,其胆汁累积排泄量分别为给药剂量的8.80%、1.24%。结论灌胃给予PPT后,PPT及其代谢物M1、M2少量经粪便排泄,基本不经尿排泄;M1和M2在大鼠的胆汁排泄具有立体选择性差异。     

中药益智仁化学成分的研究

从益智仁的丙酮提取物中分得7个化合物，其中一个为新的二芳基庚烷类化合物，通过光谱方法鉴定了其结构，命名为益智新醇（neonootkatol，Ⅶ），其它6个成分为杨芽黄素（tec－tochrysin，Ⅱ），益智酮甲（yakuchinoneA，Ⅳ），益智酮乙（yakuchinoneB，Ⅴ）和诺卡酮（nootka－tone，Ⅵ），β-谷自醇（Ⅰ），胡萝卜甙（Ⅲ），后2者为首次从该植物中分得。     

杠柳毒苷在大鼠体内排泄的初步研究*

[目的]研究杠柳毒苷在大鼠体内的排泄情况.[方法]建立了液-液萃取后用高效液相色谱测定大鼠尿液、粪便和胆汁中杠柳毒苷含量的方法,并对大鼠静注及灌胃杠柳毒苷后的排泄情况进行分析.[结果]大鼠按12mg/kg剂量灌胃给予杠柳毒苷后,72 h尿中杠柳毒苷和其代谢物的累积排泄量占给药剂量的0.44%,粪中杠柳毒苷和其水解代谢物的累积排泄量占给药剂量的12.39%;按0.74 mg/kg剂量尾静脉注射给予杠柳毒苷后,72 h尿中杠柳毒苷及其代谢物的累积排泄量占给药剂量的6.24%,粪中杠柳毒苷及其水解代谢物的累积排泄量占给药剂量的7.33%;按0.74 mg/kg剂量尾静脉注射给予杠柳毒苷后,21 h内累积经胆汁排泄的杠柳毒苷占给药总量的76.13%.[结论]杠柳毒苷原形药物主要经胆汁排泄,但从尿液和粪便排泄则很少,尿液中可能存在结合代谢物,粪便中主要以肠菌代谢物(杠柳次苷)的形式排泄.     

胆汁中胆红素的沉淀过程及β-葡萄糖醛酸苷酶、胆盐、葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸氢钾对它的影响

胆色素类结石在我国比胆固醇类结石常见,治疗也更困难。它的主要成分是胆红素。应用胆汁沉淀试验研究胆红素等胆石组分由胆汁中沉淀出来的过程表明,胆汁中胆酸盐含量的增高,对这一过程可能有抑制作用,而胆红素含量的增高则可能有利于沉淀过程的进行。槙哲夫等认为:胆汁中的β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,简写为β-G),能促使直接胆红素水解为间接胆红素进而形成结石。而葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸则对β-G活性有抑制作用。因此,我们在体外向胆汁中加入胆盐、葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸,以进一步探讨其对胆红素沉淀生成的影响。     

复方双黄连颗粒与黄芩颗粒剂中黄芩苷在大鼠胆汁中代谢的比较研究

目的:比较复方双黄连颗粒剂和黄芩单味药材提取物中黄芩苷在大鼠胆汁中代谢的差异.方法:运用高效液相色谱法和液质联用技术检测黄芩苷的代谢产物种类和数量,并初步确定其结构.结果:从给药后的大鼠胆汁中,发现了几个主要代谢产物并初步鉴定了其化学结构.黄芩颗粒剂和复方双黄连颗粒剂中黄芩苷经肝脏代谢后其主要的相同代谢物为5,6,7-三羟基黄酮-6-O-葡萄糖醛酸苷-7-O-葡萄糖醛酸苷,5,6,7-三羟基黄酮-6-O-硫酸酯-7-O-葡萄糖醛酸苷和5,7-二羟基-6-甲氧基黄酮-7-O-葡萄糖醛酸苷,胆汁中,黄芩单方代谢有原型黄芩苷和5,6,7-三羟基-6-O-葡萄糖醛酸苷,而复方双黄连颗粒剂则无.结论:黄芩颗粒剂与双黄连颗粒剂在黄芩苷的代谢产物存在明显差异,复方配伍促进了总黄芩素在胆汁中的排泄.     

金丝桃素在大鼠体内的代谢产物

分离鉴定金丝桃素在大鼠胆汁中的代谢产物以及在坏死肝脏组织中的存在形式。正常大鼠和肝脏缺血再灌注损伤模型大鼠经静脉注射10 mg/kg金丝桃素后,收集正常大鼠0~12 h胆汁以及坏死模型大鼠24 h坏死肝脏组织,对生物样品预处理后,采用高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱(HPLC-TOF/MS)联用技术进行分析。在大鼠胆汁中鉴定出金丝桃素原形(M0)和3个葡萄糖化代谢产物(M1、M2、M3),而在坏死肝脏组织中仅鉴定出金丝桃素原形。结果表明,金丝桃素在大鼠胆汁中主要以原形和葡萄糖化形式存在,在坏死组织中主要以原形存在。     

胆汁内源性β－葡萄糖醛酸酶真实活力的观察

胆汁内源性β－葡萄糖醛酸酶真实活力的观察陈道纯，陈锡谋，林谷珍关键词：β－葡萄糖醛酸酶，胆汁，胆结石胆汁内源性β－葡萄糖醛酸酶（β－Ｇ）与胆道的结石、炎症和损伤等有密切关系，本文观察胆汁β－Ｇ活力受胆汁成分干扰的程度，探讨β－Ｇ真实活力的观察方法，并...     

超高效液相色谱-质谱联用分析波尔定在大鼠体内的代谢产物

目的分析鉴定波尔定在大鼠体内的主要代谢产物与代谢途径。方法收集波尔定灌胃后大鼠的血浆、尿液、粪便和胆汁,采用超高效液相色谱-质谱联用分离鉴定其主要代谢产物。结果在大鼠血浆、尿液、粪便和胆汁中共检测到5个代谢产物,为波尔定葡萄糖醛酸和硫酸结合物。结论波尔定在大鼠体内代谢途径主要是Ⅱ相结合代谢,生成葡萄糖醛酸结合物和硫酸结合物。     

粉防己碱及5-溴粉防己碱在大鼠体内的代谢产物分析

目的研究粉防己碱(Tet)及5-溴粉防己碱(BrTet)在大鼠体内的代谢物。方法大鼠分别ivTet及BrTet(20mg/kg)后采集尿液、粪便、胆汁和肝脏,用电喷雾离子阱多级质谱法(LC/MSn)对Tet及BrTet在大鼠体内的代谢产物进行分析。结果大鼠ivTet后,在体内可测到2个单去甲基、1个双去甲基、2个单羟化代谢物和2个氮氧化物;大鼠iv BrTet后,在体内可测到3个单去甲基、2个双去甲基、2个单羟化代谢物和2个氮氧化物,还测到脱溴代谢物(Tet)和进一步脱甲基代谢物,另外还测到4个相代谢物,分别是BrTet双去甲基硫酸结合物,单去甲基葡萄糖醛酸结合物,单羟化硫酸结合物和单羟化葡萄糖醛酸结合物。结论Tet和BrTet在大鼠体内广泛代谢,二者具有相似的代谢途径,其代谢物的结构有待于进一步分析后确证。     

大鼠灌胃灯盏花素后血浆、胆汁、尿液以及粪便中代谢产物的鉴定

目的对大鼠灌胃灯盏花素后收集的血浆、胆汁、尿液以及粪便中存在的灯盏乙素的代谢产物进行鉴定。方法通过使用HPLC结合光电二极管阵列检测器(DAD),采用梯度洗脱的方法,对比分析给药组大鼠和空白组大鼠的血浆、胆汁、尿液以及粪便样品,并且在相同的液相色谱条件下与对照品的保留时间和紫外吸收特征进行对照来鉴定主要代谢产物。结果从大鼠ig 20、200 mg/kg灯盏花素的血浆中鉴定了代谢产物野黄芩素-6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6-O-β-D-glucuronide,M5);从大鼠ig 20、200 mg/kg灯盏花素的胆汁中鉴定了代谢产物野黄芩素-6,7-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6,7-di-O-β-D-glucuronide,M1)、6-O-甲基-灯盏乙素(6-O-methyl-scutellarin,M3)、野黄芩素-6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6-O-β-D-glucuronide,M5)和灯盏乙素(黄芩素苷,scutellarin,M7),从大鼠ig 20 mg/kg灯盏花素的尿液中鉴定了代谢产物野黄芩素-6,7-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6,7-di-O-β-D-glucuronide,M1),从大鼠ig 200 mg/kg灯盏花素的尿液中鉴定了代谢产物野黄芩素-6,7-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6,7-di-O-β-D-glucuronide,M1)、野黄芩素(scutellarein,M2)和灯盏乙素(scutellarin,M7);从大鼠ig 200 mg/kg灯盏花素的粪便中鉴定了代谢产物野黄芩素(scutellarein,M2)。结论灯盏乙素在大鼠体内发生了广泛的代谢,并且主要以其代谢产物的形式存在;灯盏乙素在大鼠体内产生的代谢产物主要通过尿液和胆汁排泄。     

基于液相色谱-串联质谱法的轻症和重症急性胰腺炎差异的血清代谢组学研究

背景 轻症急性胰腺炎（MAP）有一定的概率转变为重症急性胰腺炎（SAP）,SAP一旦发生,将对患者造成较大的危害,探讨MAP与SAP的转化机制对临床诊治急性胰腺炎（AP)具有一定意义。 目的 探讨MAP与SAP的差异代谢物,寻找异常代谢通路,探索区别MAP和SAP的潜在生物标志物,为SAP的早期诊断、治疗提供参考依据。 方法 收集2020年8月至2021年3月于湖南省人民医院住院的AP患者68例为研究对象,根据2012年修订版亚特兰大分类（RAC）标准分为MAP组40例、SAP组28例,利用液相色谱-串联质谱法（LC-MS）,通过单变量分析〔t检验、差异倍数（FC）〕,多变量分析〔主成分分析（PCA）、偏最小二乘判别分析（PLS-DA）〕,最终以变量权重值（variable important in projection,VIP）>1、FC>1.5且P<0.05筛选出两组间的差异代谢物,分析两组间差异代谢物及代谢通路。 结果 经PCA、PLS-DA分析发现MAP与SAP代谢物轮廓具有明显差异。结合VIP>1、FC>1.5且P<0.05,在两组之间筛选出50种差异代谢物,5条代谢通路,其中牛磺酸和亚牛磺酸代谢、萜类骨架生物合成为影响最大的两条代谢通路;结合受试者工作特征（ROC）曲线进行分析发现,ROC曲线下面积（AUC）>0.9的差异代谢物有8种,分别为：2-苯基-1,3-丙二醇单氨基甲酸酯、苯海拉明N-葡萄糖醛酸、rac-5,6-环氧-视黄酰-β-D-葡萄糖醛酸、六氟异丙醇、NNAL-N-葡萄糖醛酸、赤藓醇四硝酸酯、3-羟基丁酸、四氢脱氧皮质酮,其中在SAP患者中表达升高的有：2-苯基-1,3-丙二醇单氨基甲酸酯、rac-5,6-环氧-视黄酰-β-D-葡萄糖醛酸、六氟异丙醇、赤藓醇四硝酸酯、3-羟基丁酸、四氢脱氧皮质酮,表达下调的有:苯海拉明N-葡萄糖醛酸、NNAL-N-葡萄糖醛酸。 结论 MAP与SAP患者的血清代谢物存在明显差异,其中2-苯基-1,3-丙二醇单氨基甲酸酯、苯海拉明N-葡萄糖醛酸、rac-5,6-环氧-视黄酰-β-D-葡萄糖醛酸、六氟异丙醇、NNAL-N-葡萄糖醛酸、赤藓醇四硝酸酯、3-羟基丁酸、四氢脱氧皮质酮对MAP和SAP的鉴别诊断效能较高,可能为区别二者的潜在生物标志物。     

基于超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术研究苦参醇提物致大鼠肝毒性的尿液代谢组

目的 观察苦参醇提物（Sophora flavescens alcohol extract,SFAE）对大鼠尿液代谢轮廓的影响,探讨SFAE可能的肝毒性机制。方法 将雄性SD大鼠分为3组,每组6只,分别灌胃给予SFAE 0、1.25、2.5 g/kg,14 d后,采用超高效液相色谱-高分辨质谱（ultra-performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometry,UPLC-HRMS）检测大鼠尿液中代谢物的变化。采用主成分分析（principal components analysis,PCA）和正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA）对组间代谢物进行多元统计分析,筛选潜在的生物标志物,并分析相关的代谢通路。结果 3组大鼠尿液中代谢物在14 d后得到很好的区分,发现并鉴定出15个主要的差异代谢物,其中N6,N6,N6-三甲基-L-赖氨酸、胆酸、甘氨胆酸、脱氧胆酸、马尿酸和肌酸与肝脏毒性关系密切,二氢鞘氨醇和酮戊二酸表达水平降低,其余13种差异代谢物表达水平升高,苦参主要干扰大鼠体内胆汁酸代谢、能量代谢和氨基酸代谢等代谢通路。结论 SFAE对大鼠产生肝毒性,且肝毒性与给药剂量呈正相关。     

二多糖胶囊对实验性胰岛素抵抗大鼠的药效学实验

目的：探讨中药制荆黄芪多糖和麦门冬多糖在对降低血糖和改善胰岛素抵抗方面的影响。方法：将60只大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、二多糖胶囊高剂量组、二多糖胶囊中剂量组、二多糖胶囊低剂量组、优降糖（阳性对照药）组。除空白对照组外，其他组应用地塞米松腹腔内注射建立大鼠胰岛素抵抗（高血糖）模型，其中二多糖组大鼠每天给予不同剂量的二多糖胶囊药物灌胃，优降糖（阳性对照药）组大鼠每天灌胃优降糖；高血糖对照组大鼠每天同样体积生理盐水灌胃，灌胃体积各组均为10mL／kg体重。以上各组大鼠在灌胃药物的同时隔天腹腔内注射1次地塞米松，注射剂量同上。4周后处死，取血检测血浆中血糖和胰岛素的含量。结果：模型对照组大鼠的血糖和胰岛素含量显著高于正常对照组（P〈O．01），而二多糖胶囊高、中、低剂量组和优降糖组的大鼠血糖和胰岛素含量明显低于模型对照组（P〈O，01或P〈0．05）。结论：二多糖胶囊对胰岛素抵抗（高血糖）有治疗作用。     

黄芪的化学成分及其药理作用

1 化学成分 皂甙类:黄芪中含有大量的皂甙类及三萜类化合物,约有50种左右(包括近属植物),它们大多属于四环三萜类,其中含量较多的为黄芪皂甙Ⅳ。 多糖类及其他成分:从多种黄芪中分得的多糖经水解后均得到5种单糖,已鉴定的4种为:葡萄糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。另外含有蔗糖、微量叶酸、胆碱、甜菜碱、β-谷甾醇、亚油酸、亚麻酸等。     

微波辐射合成1,4-二酮化合物

目的：研究在微波辐射下经Stetter反应合成1，4-二酮化合物的新方法。方法：以β-酮酸酯为原料，经胺解、与芳基甲醛缩合得α-芳基亚甲基-β-酮酰胺，在微波辐射下，对氟苯甲醛与α-芳基亚甲基-β-酮酰胺经Stetter反应加成得2-异丁酰基（或环丙甲酰基）-3，4-二芳基-4-氧代丁酰胺类1，4-酮化合物。结果：设计并合成了10个1，4-二酮化合物，其结构经IR、^1H NMR和MS确证。结论：微波合成技术应用于Stetter反应合成1，4-二酮化合物方法可行，比传统合成方法反应时间短且收率更高。     

缩泉固尿方对压力性尿失禁模型大鼠TGFβ-3表达的干预研究

目的研究缩泉固尿方对SUI模型大鼠的干预作用及揭示其治疗压力性尿失禁的可能机理。方法分娩+阴道扩张2次+卵巢切除法复制模型,将模型成功SD大鼠随机分为模型组、缩泉固尿方（低、中、高）剂量组、阳性对照组,另设正常对照组。造模1个月后药物干预,缩泉固尿方组每日予相应剂量缩泉固尿水煎液、阳性对照组予等效盐酸米多君、正常对照组和模型组予等量生理盐水进行灌胃,连续1个月。各组大鼠在给药前后分别行腹压漏尿点压（ALPP）检测,给药结束后用RT-PCR法检测各组大鼠阴道前壁和肛提肌中转化生长因子β-3（TGFβ-3）m RNA的表达含量。结果缩泉固尿方低、中、高剂量组及阳性对照组较正常对照组、模型组ALPP差值有非常显著差异性（P<0.01）。模型组阴道前壁中TGFβ-3 m RNA的表达,与正常对照组、阳性对照组、缩泉固尿方高剂量组比较,有非常显著性差异（P<0.01）;与缩泉固尿方中剂量比较,有显著性差异（P<0.05）;模型组肛提肌中TGFβ-3 m RNA的表达,与正常对照组、缩泉固尿方高剂量组比较,有非常显著性差异（P<0.01）;与阳性对照组、缩泉固尿方中剂量比较,有显著性差异（P<0.05）。结论缩泉固尿方治疗压力性尿失禁有效,其机理可能与升高SUI模型大鼠阴道前壁、肛提肌中TGFβ-3的表达含量有关。