高效液相色谱法测定血液中盐酸安非拉酮浓度

目的：采用ＨＰＬＣ法测定盐酸安非拉酮血药浓度,旨在为盐酸安非拉酮在体内的血药浓度分析和法医学中毒检测提供方法。方法：色谱柱采用ＹＷＧ－ Ｃ１８Φ４．６×１５０ｍ ｍ １０μ,流动相为甲醇－ ０．０１ｍ ｏｌ／Ｌ,醋酸铵（３５：６５,用氨水调ｐＨ７．５）,茶碱为内标,检测波长为２５４ｎｍ ,血浆样品应用ＳＰＥ固相小柱萃取。结果：安非拉酮线性范围为（５～５００）μｇ／Ｌ（ｒ＝ ０．９９９４）,最低检测浓度５μｇ／Ｌ,平均方法回收率为９７．０３％ 。日内、日间ＲＳＤ均小于５％ 。结论：此方法稳定、可靠、可用于血药浓度分析和法医中毒检测     

HPLC法同时测定人血浆中四种氟喹诺酮药物的血药浓度

研究了用ＨＰＬＣ同时测定人血浆中氧氟沙星、诺氟沙星、洛美沙星和环丙沙星血药浓度的方法。采用ＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂＣ（１８）色谱柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ），以甲醇－０．００８ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液－０．５ｍｏｌ／Ｌ四丁基溴化铵（１６：７５：１．４，ｐＨ２．６）为流动相，检测波长２８０ｎｍ，血浆样品用乙腈沉淀蛋白后进样，简便快速，回收率稳定，对氧氟沙星，诺氟沙星，洛美沙星，环丙沙星四种氟喹诺酮药物检测的线性范围分别为：０．１０～５．００μｇ／ｍｌ；０．１１～５．４０μｇ／ｍｌ；０．１３～５．００μｇ／ｍｌ；０．１０～１０．００μｇ／ｍｌ。其方法检测限为：２０ｎｇ／ｍｌ；２０ｎｇ／ｍｌ；２５ｎｇ／ｍｌ及４０ｎｇ／ｍｌ，回收率均高于８６％。应用本法观察了健康人口服氧氟沙星和环丙沙星后的血药浓度变化。     

高效液相色谱法测定急性安定中毒病人血清中安定浓度

采用反相高效液相色谱法测定安定中毒病人血清中安定浓度。血清样品在碱性条件下用乙醚提取，有机相在４０℃下挥干，残渣用１００μｌ流动相溶解。ＨＰＬＣ的流动相为甲醇：水＝７０：３０，检测波长２５４ｎｍ，内标为对二甲氨基苯甲醛。安定的线性范围为０．０８～６．４ｍｇ／Ｌ，ｒ＝０．９９９１，平均回收率９６．６％。     

HPLC法测定经皮渗透接受液中双氯灭痛的浓度

采用ＲＰ－ＨＰＬＣ以４＇－羟基－５－氯双氯灭痛为内标，测定了经皮渗透接受液中双氯灭痛的含量。考察了流动相组成、ｐＨ值等对双氯灭痛色谱行为的影响情况。方法简便准确，回收率为９８．４４％～１０２．３％，ＲＳＤ＜２．４％，双氯灭痛浓度在０．５～１６μｇ／ｍｌ范围内，线性关系良好（ｒ＝０．９９９９），最低检测限５０ｎｇ／ｍｌ。色谱条件为：Ｃ（１８）Ｈｙｐｅｒｓｉｌ（５μｍ，１００ｍｍ×４．６ｍｍ）不锈钢柱，甲醇ｐＨ７．０磷酸盐缓冲液（０．０５ｍｏｌ／Ｌ）（５６：４４）作流动用，检测波长２８０ｎｍ，进样量２０μｌ。     

HPLC法测定凉山杜鹃中槲皮素的含量

目的：应用ＨＰＬＣ法对凉山杜鹃中槲皮素的含量进行测定。方法：选用Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋＣＬＣ－ＯＤＳ分析柱（１５０ｍｍ×６．０ｍｍ,５μｍ）甲醇－０．５％磷酸（５０．５０）为流动相,检测波长为３７０ｍｍ,流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ结果：线性范围：０．０８～０．４μｇ（ｒ＝０．９９９９）平均回收率９６．４８％,ＲＳＤ为１．５％,结论：本法简便,灵敏,准确,重现性好。     

HPLC测定生地黄浓缩颗粒中梓醇的含量

建立测定中药生地黄浓缩颗粒中有效成分梓醇含量ＨＰＬＣ方法。方法：以Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋＣＬＣ－ＯＤＳ－Ｃ１８柱为固定相;０．６％乙腈为流动相,检测波长为２１０ｎｍ。结果：梓醇进样量在２－１０μｇ范围内与峰面积呈线性关系。平均回收率为９９．１％。结论ＨＰＬＣ测定中药生地黄浓缩颗粒中梓醇含量方法简便,结果准确。     

聚氰基丙烯酸正丁酯毫微粒中万乃洛韦的含量测定

用混合溶剂将万乃溶韦聚氰基丙烯酸正丁酯毫微粒溶解后，用ＨＰＬＣ测定其中的万乃洛韦含量，分析柱为Ｃ１８－ＯＤＳ柱，流动相为甲醇－０．０２ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾混合液（２０：８０），检测波长２５４ｎｍ，测量线性范围２．０２￣２０．２０μｇ／ｍｌ，回收率为９７．３０％，ＲＳＤ为４．９０％。方法准确可靠，可供该类毫微粒剂药物含量测定参考。     

HPLC法测定血中茶碱浓度

本文建立了一种流动相为甲醇－乙腈－０．０１ｍｏｌ／Ｌ乙酸（７．５：７．６：８５）的ＨＰＬＣ法测定血清茶碱浓度。ＯＤＳＣ－１８反相色谱柱，柱温３０℃．流动相流途１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ／ｖｉｓ检测器，检测被长２７８ｎｍ，用外标沽定量。血浴样品用氯仿／异丙醇（９６：６）提取，水浴蒸干，甲醇６０μｌ重溶。茶碱保留时间约４．８０ｍｉｎ；标准曲线回归方程Ｙ＝０．６０８３＋０．３８６６ｘ，ｒ＝０．９９８１：茶碱浓度１０．０．２０．０．４０．０μｇ／ｍｌ时回收率分别为９４．７１±３．３５．１０８．４２±５．２２和９０．４８±４．３２：最低检测限０．３１２５μｇ／ｍｌ；日内变异系数３．１４％，日间变异系数４．７３％，结果显示，木法分离效果好。而且快速、简便。     

HPLC法测定SHR血清中硝苯地平浓度及其药代动力学研究

目的建立血清中硝苯地平浓度的ＨＰＬＣ测定法，研究其在自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）体内的药动学。方法ＳＨＲ灌胃给与硝苯地平１０ｍｇ／ｋｇ，用ＨＰＬＣ法测定硝苯地平血清浓度。用乙酸乙酯提取出血清中的硝苯地平，在５０℃水浴中用氮气吹干，残渣用流动相溶解后进样。选用ｓｈｉｍＰａｃｋＣＬＣ－ＯＤＳ柱，甲醇－水（６∶４）作流动相，检测波长２３５ｎｍ。结果：硝苯地平最低检出浓度为０．０２μｇ／ｍｌ，标准曲线线性范围为０．０２～５．０μｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９７），血样平均回收率为９８．０９％。硝苯地平在大鼠体内的药动学符合一定开放模型，其参数为Ｔ１／２ｋａ＝０．８２８±０．５５ｈ，Ｔ１／２ｋｅ＝３．１７±２．３２ｈ，Ｔｍａｘ＝２．１２±１．４７ｈ，Ｃｍａｘ＝２．７８±１．５０μｇ／ｍｌ和ＡＵＣ＝２４．５±２９．２ｈ·μｇ／ｍｌ。结论本法能满足血清中硝苯地平浓度测定及药动学研究的需要。     

高效液相色谱法测定人尿乳果糖及甘露醇

目的：建立一项快速、灵敏测定人尿乳果糖（Ｌ）及甘露醇（Ｍ）的实验方法。方法：烧伤病人口服给药：乳果糖１０ｇ，甘露醇５ｇ，高效液相色谱示差（ＨＰＬＣ－ＲＩ）检测法测定各时段Ｌ、Ｍ的排出量。结果：Ｌ、Ｍ的线性范围为４～５００ｍｇ／Ｌ，平均回收率为９６．３９％～９８．３７％，精密度（ＣＶ％）为２．６８～３．７４，最低检测限０．０５ｍｇ／Ｌ。结论：Ｌ／Ｍ的值增大，可示肠通透性增高     

HA230树脂灌流吸附后血中灭多威的清除效率

目的研究血中灭多威的分析方法及血样灌流吸附后对毒物的定量清除率。方法采用HA230树脂灌流装置对中毒血样进行灌流吸附,将吸附后血样经乙酸乙酯萃取后,用带有紫外检测器的高效液相色谱法测定其含量并计算清除率。结果分析方法的检出限为0.02 ng,低、中、高3种浓度的加标回收率为93.32%～103.24%,相对标准偏差为2.63%～4.88%。灌流吸附后血中毒物的清除效率为98.68%～99.64%。结论用HA230树脂吸附剂进行血液的灌流吸附,能清除大部分毒物,迅速降低血中灭多威的浓度,对抢救重度灭多威中毒的危重病人有重要价值。     

灭多威在土壤中降解规律的研究

本文对灭多威在土壤中的降解规律进行了研究。结果表明，灭多威在土壤中的降解符合动力学一级反应，按推荐量施药，灭多威在土壤中降解较迅速，降解半衰期为５．０４天，施药后第１５天，灭多成在土壤中的降解率为９７．７％，施药量与残留量呈正相关，相关系数为０．９９９８。提示：按推荐量施药，灭多成对土壤污染较轻。     

高血浓度茶碱致心律失常的临床观察

目的：观察高血浓度茶碱对心律失常的影响,探索安全合理使用茶碱方法。方法：收集１９４例住院治疗的病例,测定其血液茶碱浓度及作心电图检查,并按血浓度分为高浓度组（Ａ组）和治疗浓度组（Ｂ组）,同时选择５６例未使用氨茶碱作对照组（Ｃ组）。结果：Ａ组及Ｂ组引起窦性心动过速发生率分别为５７．７％、３９．８５％,房纤及房扑发生率分别是４４．４％、２．１５％,房性早搏发生率分别为４４．４％、４．３０％,室性早搏     

妊娠时血清甲胎蛋白水平检测的临床评价

目的:探讨妊娠血清甲胎蛋白(AFP)含量在异常妊娠诊断中的临床应用价值.方法:应用磁性微粒分离的酶联免疫法(IEMA)检测AFP,同时和放射免疫法(RIA)相比较,并对4 748名孕妇血清AFP含量进行回顾性分析.结果:该方法检测AFP线性范围在0.20～250 IU/ml,批内CV为4.48%,日间CV为4.0%,高、中、低三个浓度平均重现率为98.5%,与RIA法相关性良好(r=0.980,P＜0.001).异常妊娠患者AFP含量明显高于同期正常妊娠孕妇血清AFP含量.结论:IEMA法适用于对孕妇AFP进行监测,在优生优育检查中可作为一项有价值的实验室筛查方法.     

骨髓间充质干细胞治疗大鼠骨关节炎的实验研究

目的：研究不同浓度骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs）对骨关节炎（osteoarthritis,OA）的治疗效果,并探究其治疗机制。方法：8周龄近交系SD大鼠32只随机分成4组,每组8只,均采用自身双侧对照研究：对照组、高浓度组（1×10⁷/mL BM-MSCs）、低浓度组（5×10⁶/mL BM-MSCs）及高/低浓度对比组。应用改良Hulth方法诱导膝关节OA。对照组一侧行手术,另一侧行假手术,其余各组均行双侧手术。术后4周处死对照组大鼠采集双侧膝关节标本。各试验组大鼠膝关节内注入相应浓度的BM-MSCs或磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution,PBS）,切断大鼠双侧坐骨神经及股神经使下肢制动,注射3周后处死各组大鼠并收取双侧膝关节标本。应用Mankin组织学评分评价OA病变程度,RT-PCR检测软骨Ⅱ型胶原mRNA表达,荧光显微镜观察荧光蛋白标记的BM-MSCs在膝关节内分布情况。结果：高浓度组、低浓度组BM-MSCs侧软骨组织标本Mankin评分均明显低于对照侧（5.40±0.51 vs. 9.60±0.51;6.60±0.40 vs. 10.00±0.32;P均<0.05）,高/低浓度对比组高浓度侧Mankin评分略低于低浓度侧（6.40±0.51 vs. 7.60±0.75,P>0.05）。RT-PCR结果显示,高浓度组、低浓度组BM-MSCs侧软骨Ⅱ型胶原mRNA含量分别为对照侧的108%±1%和106%±1%,高/低浓度对比组高浓度侧Ⅱ型胶原mRNA含量是低浓度侧的102%±1%。荧光显微镜显示,在软骨表面未见绿色荧光蛋白表达,而在滑膜组织内可见绿色荧光表达。结论：关节腔内注入BM-MSCs可能通过间接机制对OA软骨病变起到保护作用,两种浓度治疗效果无差异。     

更年安片质量标准提高的研究

目的 :进一步提高更年安片质量标准。方法 :采用薄层色谱法(TLC法)鉴别制剂中的茯苓、泽泻、牡丹皮、钩藤;采用高效液相色谱法(HPLC法)测定五味子中五味子醇甲的含量。色谱柱:Kromasil-C18(4.6 mm×200 mm,5μm);流动相:甲醇(A)-水(B)=64∶36;流速:1 m L/min;检测波长:250 nm;柱温:30℃。结果:TLC法能对茯苓、泽泻、牡丹皮、钩藤进行鉴别;五味子醇甲的含量在3.0~24.0μg/m L(r=0.999 9)范围内与峰面积呈良好的线性关系,五味子醇甲的加样回收率平均值为98.28%,RSD=1.03%。结论:该方法能有效检测更年安片的质量标准,可更好地控制其质量。     

黄柏中盐酸小檗碱提取工艺的改进

目的:以黄柏中小檗碱提出率为指标,考察了Ca(OH)2溶液浓度、盐析量、温度等因素对小檗碱提取工艺的影响。方法:碱提法,并用紫外分光光度计测定精品中小檗碱的含量。结果:最佳工艺是浓度为1%Ca(OH)2溶液浸泡、20%NaCl溶液盐析、低温(10℃)放置。结论:应用该工艺提取效率高,稳定性好,成本低,适合工业化生产。     

光纤化学传感快速测定复方氯唑沙宗片两组分含量

目的：建立光纤化学传感技术快速监测固体复方制剂两组分含量的测定方法。方法：分支光纤一端连接光源，公共端部探头浸入溶出液，另一端连接检测器，计算机记录并处理数据。结果：复方氯唑沙宗片中对乙酰氨基酚的高、中、低浓度组回收率分别为98．3％、102．3％、103．1％；RSD分别为1．0％、1．4％、0．4％；氯唑沙宗的高、中、低浓度组回收率分别为108．6％、98．7％、97．7％；RSD分别为1．7％、1．6％、1．3％。本法可在线快速监测药物两组分含量。结论：光纤化学传感技术能够有效地测定固体药物两组分的含量，可为药品质量的控制提供技术支持。     

d-α-生育酚对高糖诱导的人腹膜间皮细胞己糖激酶表达的调节作用

目的探讨d-α-生育酚对高糖诱导的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelium cell,HPMC)己糖激酶(hexokinase,HK)及其同工酶表达的调节作用。方法胰蛋白酶消化法分离培养HPMC,免疫细胞化学染色及扫描电镜对培养细胞进行鉴定。第3代HPMC分为正常对照组(0．1％葡萄糖,相当于5．5 mmol／L)、高糖组(0．5％、1．0％、1．5％、2．5％、4．25％的葡萄糖)及d-α-生育酚干预组。培养24 h后,利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶耦联比色法和温度敏感实验检测HK及其同工酶的活性;免疫细胞化学染色检测HK蛋白的细胞内定位;Western印迹及逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)法分别检测HK蛋白及mRNA的表达。己糖激酶法检测培养液内葡萄糖的消耗量作为细胞对葡萄糖净利用指标。结果角蛋白和波形蛋白在HPMC的胞质呈阳性表达,扫描电镜可见细胞表面有丰富的微绒毛。1．5％、2．5％及4．25％葡萄糖组,HK总活性上调,与正常对照组(20．6±2．5)U／g蛋白比较,相对活性分别为115．4％、129．1％及155．2％,并以HKⅡ增加为主(P<0．05)。50 mmol／L d-α-生育酚干预组,HK总活性下调,是2．5％葡萄糖组的82．1％(P=0．001),其中HKⅡ受抑为主;d-α-生育酚干预后HPMC对葡萄糖的净利用由(25．3±3．9)mmol／L降至(17．3±2．1)mmol／L(P= 0．018)。正常状态下,HKⅡ蛋白在胞质呈棕色淡染;随葡萄糖浓度的增加(葡萄糖≥1．5％),HKⅡ在核周积聚、浓染,呈珠链样;d-α-生育酚预处理后,HKⅡ在核周的积聚变淡。HKⅡ蛋白及mRNA的表达与HKⅡ活性同步。结论d-α-生育酚抑制了高糖对HKⅡ活性、蛋白及mRNA表达上调的作用,并减少HPMC对葡萄糖的净利用;可能成为增加腹膜透析超滤的手段之一。     

非结核分枝杆菌肺病的回顾性分析

目的：分析湖南省长沙市中心医院近3年来非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)肺病 患者的临床特征及耐药情况。方法：回顾性分析2014年2月至2017年5月于湖南省长沙市中心医院确诊的153例 NTM肺病患者临床资料,根据药敏试验浓度分为低浓度组和高浓度组,检测两组的药物敏感性及耐药状况。 结果：153例患者中男79例(51.63%),女74例(48.37%),年龄为(60.27±19.46)岁;NTM 肺病常见于支气管扩张患者, 病程较长(平均7.8年), 临床症状无特异性,极易误诊为肺结核(92.81%)。菌种以鸟/胞内分枝杆菌(56.21%)和龟/脓肿 分枝杆菌(20.92%)多见;对一线、二线抗结核药的耐药率高,多数耐 8 种药物以上,其中低浓度组38.56%的患者全部耐药,高浓度组25.49%的患者全部耐药。结论：NTM肺病极易误诊,且耐药率高,NTM的菌种鉴定和药物敏感性检测对临床的诊断和治疗有重要的指导作用。