一种贵州豆豉酶提取物的溶栓活性及溶栓机理研究

目的:探讨贵州豆豉酶提取物的溶栓活性和溶栓机理.方法:用纤维蛋白平板法和溶解血凝块试验法研究贵州豆豉酶提取物的溶栓活性,用加热和未加热纤维蛋白平板分别检测豆豉酶提取物在这两种条件下的溶栓活性,以纤维蛋白平板上透明溶栓圈直径的变化来阐明豆豉酶提取物的溶栓机理.结果:贵州豆豉酶提取物在20 h内溶解血凝块,3批酶提取物样品溶栓效价平均值分别为19 250 U/g(n=3, RSD=1.03%)、20 664 U/g(n=3, RSD=0.81%)和20 263 U/g(n=3, RSD=0.63%);贵州豆豉酶提取物在未加热纤维蛋白平板上溶栓圈直径大于加热平板,存在显著差异.结论:贵州豆豉酶提取物具有溶栓活性,可直接溶解纤维蛋白,也可通过激活血纤维蛋白溶酶原间接溶解纤维蛋白.     

免疫球蛋白测定和免疫电泳在多发性骨髓瘤的诊断中的临床应用

目的 探讨免疫球蛋白定量检测、免疫蛋白电泳和免疫固定电泳在多发性骨髓瘤（MM）诊断中的应用与价值。方法 收集在2020年6月-2021年6月期间就诊于本院确诊为MM患者58例血清,检测血清免疫球蛋白定量[IgG,IgA,IgM,κ轻链（kappa light chain）和λ轻链（lambda light chain）],并进行血清蛋白电泳及免疫固定电泳,评价上述检测指标在MM诊断中的临床应用价值。结果 58例MM患者中41人经蛋白电泳检测发现存在M蛋白,检出阳性率为70.7%,经免疫固定电泳检测后;54例检测阳性,阳性率93.1%,差异有统计学差异。另外IgG型32例（55.2%）、IgA型8例（13.8%）、IgM型3例（5.1%）、轻链型8例（13.8%）,同时相应对类型的免疫球蛋白和轻链增高并伴其它组分免疫球蛋白及轻链降低。结论免疫球蛋白及轻链检测、免疫蛋白电泳是临床初筛多发性骨髓瘤的重要方法,而免疫固定电泳能够快速、准确的对MM进行诊断及分型,可作为MM常规检测方法之一。     

青蒿发酵豆豉与传统发酵豆豉中大豆异黄酮含量研究比较

目的：对青蒿豆豉与传统豆豉中异黄酮含量进行研究比较,寻找最适合异黄酮提取的豆豉材料。方法以民间传统方法添加中药青蒿发酵制备豆豉;并对其异黄酮含量进行测定。结果添加青蒿发酵豆豉中大豆异黄酮含量为0.205%;对照豆豉中大豆异黄酮含量为0.115%,是对照豆豉含量的2倍。结论在传统的豆豉发酵过程中添加一定量的青蒿可显著改善发酵效果,缩短发酵时间,使豆豉中的大豆异黄酮含量明显提高。     

911例血红蛋白电泳结果分析

目的探讨血红蛋白电泳在地中海贫血(地贫)筛查中的作用。方法对9315例育龄人群初筛出红细胞脆性降低者,应用法国Sebia全自动电泳分析系统进行血红蛋白电泳,通过自动扫描系统分析,检测Hb各组分的含量,初步分为属于α地贫或β地贫,再通过基因诊断确诊。结果在9315例育龄人群中,红细胞脆性降低者911例(9.78%)。进一步通过血红蛋白电泳分为α地贫表型阳性727例,阳性率7.8%,β地贫表型阳性177例,阳性率1.9%。基因诊断结果显示,α地贫初筛符合率60.5%,β地贫初筛符合率80%。结论血红蛋白电泳能够定量检测HBA、HbF、HbA2含量,将地贫进行初步分类为α地贫或β地贫,有效地筛查出高危夫妇,为进一步进行基因诊断和遗传咨询提供基础。     

钙调蛋白结构域来源小分子多肽的构建

目的 构建钙调蛋白结构域来源小分子多肽(EF-hand 4,a.a 113-148),建立一种简便、直观、快速检测EF-hand 4的电泳方法.方法 通过固相合成法构建EF-hand 4.采用分离胶为16.5％T的Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳法检测多肽,CS Analyzer 3.0软件对EF-hand 4...     

异常血红蛋白电泳室内质量控制的临床初探

目的:初步探讨异常血红蛋白电泳室内质量控制的可行性方案与临床实践。方法:选择临床检测中所得血红蛋白电泳包括Hb Bart's、Hb H、Hb E、Hb F及Hb CS五种临床常见异常血红蛋白,且经由PCR基因确诊的血液标本,自制成血红蛋白质控物,于不同贮存时间点对各异常血红蛋白组分进行检测,记录检测结果并统计分析,评估室内质量控制效果。结果:自制异常血红蛋白电泳质控物在-20℃至少可稳定12个月,各时间段检测数据与相应的全血标本比较,差异无统计学意义(P>0.05),质控结果稳定。结论:自制异常血红蛋白电泳质控物性质稳定,借此质控物可对临床血红蛋白电泳的异常血红蛋白进行室内质量控制。     

全自动血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的应用价值

目的探讨全自动血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用。方法对我院送检1248份患者标本应用意大利696PC全自动电泳分析系统进行血红蛋白电泳检测地中海贫血,通过自动扫描系统分析,检测血红蛋白（Hb）各组分的含量。结果在送检的1248例标本中,应用全自动血红蛋白电泳检出α地中海贫血表型阳性57例,阳性率为4.57%;β地中海贫血表型阳性68例,阳性率为5.45%,其他血红蛋白病2例,阳性率0.16%。结论全自动血红蛋白电泳电泳区带清晰,扫描定量准确,可以定量检测HbA,HbF,HbA2的含量。可以将地中海贫血初步分类为α地中海贫血或β地中海贫血,有效地筛查出高危患者,为地中海贫血的诊断提供重要依据。     

78例多发性骨髓瘤的实验室诊断分析与评价

目的：探讨血清免疫固定电泳、血清蛋白电泳、免疫球蛋白测定在多发性骨髓瘤中的诊断价值。方法：78例多发性骨髓瘤患者的血清同时做免疫固定电泳、血清蛋白电泳和免疫球蛋白含量测定进行分析比较。结果：78例免疫固定电泳全为阳性,72例血清蛋白电泳出现M带。免疫分型IgG占52.6%,IgA占29.5%,IgM占1.3%,游离轻链型占15.1%,双链型占2.5%。其中IgG、IgA型以κ型为主,但首诊以肾功能不全入院的患者中以λ链为主。免疫球蛋白和轻链测定显示同型免疫球蛋白和轻链的含量明显升高并常伴有其他组分异常。结论：免疫固定电泳能对M蛋白进行准确分型鉴定、特异性好、灵敏度高,对多发性骨髓瘤的临床诊断及治疗有重要意义,同时可减少漏诊、误诊。     

东莞地区新生儿地中海贫血筛查结果分析

目的：结合户籍资料了解东莞地区新生儿人群中地中海贫血的发生率,探讨开展新生儿地中海贫血筛查的必要性。方法选择在该院出生新生儿,共14910例,对其采取血红蛋白电泳法对地中海贫血进行筛查,以基因检测结果作为标准对电泳法筛查准确性进行评价。结果经血红蛋白电泳法共筛查出α-地贫阳性率为4.55%,β-地贫阳性率为1.72%。与基因检测结果的符合率分别为73.77%和80.65%。采用血红蛋白电泳检测和基因检测在确诊率比较上差异无统计学意义（P〉0.05）。结论血红蛋白电泳技术电泳结果区带清晰,扫描定量结果准确,在新生儿地贫筛查中发挥了重要的作用,值得推广应用。     

用PCR扩增16Sr RNA基因鉴定幽门螺杆菌的细胞壁缺陷型

目的：探讨幽门螺杆菌及其稳定L型的检测与鉴定方法。方法：用抗生素诱导、滤菌器过滤、非高渗透压培养基培养获得幽门螺杆菌稳定L型纯培养物,对幽门螺杆菌及其稳定L型进行16SrRNA基因的PCR扩增及序列测定。结果：幽门螺杆菌及其稳定L型的16SrRNA基因PCR扩增产物经1%琼脂糖电泳,在紫外检测仪下可见550 bp的DNA条带,测序结果经NCB I B last分析比对,基因同源性可达100%。结论：16SrRNA基因PCR检测可用于幽门螺杆菌L型及其他形态变异的菌种鉴定。     

人子宫颈粘液抗菌多肽的分离

The acid-soluble extract of human cervical mucus was obtained by solving mucus with 5% acetic acid in the presence of protease inhibitor. The antibacterial activity of the acid-soluble extract was analyzed by gel overlay technique. The result showed that two protein bands which were designated human cervical protein-1 (Hcp-1), human cervical protein-2(Hcp-2) were potently antibacterial against E. coli 25922 and S. aureus 25923. Tricine-SDS-PAGE analysis indicated that Hcp-1, Hcp-2 actually contained three and four protein bands respectively. The molecular weights of Hcp-1 were 6.7 kd, 10 kd, 15.4 kd; these of Hcp-2 were 4.4 kd, 6.7 kd, 9 kd, 15.4 kd. Our studies suggested that human cervical mucosa might secrete some currently-unknown antibacterial polypeptides which play an important role in the cervical defense against infection.     

悬铃木属花粉的纯化及免疫活性分析

目的对悬铃木属花粉变应原进行初步纯化并对其主要成分进行免疫学活性分析。方法悬铃木属花粉变应原粗制浸液经过凝胶过滤层析，收集主要蛋白质，SDS-PAGE检测各段蛋白质分子量，并用免疫印记法分析7例悬铃木属花粉过敏的支气管哮喘患者血清。结果悬铃木属花粉变应原粗制液经层析柱洗脱得两个洗脱峰，第一峰及第二峰升段富含蛋白，而第二峰降段蛋白含量甚微，收集各段进行SDS—PAGE。出现6条蛋白区带，分子量分别为7、50、35、39、22和16kd。第一峰主要含22-71kd蛋白质，峰2升段以14-16kd之蛋白质为主。对7例花粉过敏的支气管哮喘患者血清免疫印记分析可见4条sIgG反应带，蛋白分子量为50、39、22和16kd，病人血清结合百分比分别为100％、28．57％、57．14％和14．29％。结论悬铃木属花粉变应原含有6种主要蛋白成分，第一峰的50、39和22kd的蛋白质为主要致敏组分，第二峰升段的16kd蛋白质为次要致原。     

大鼠胚胎小脑提取液蛋白质成分分析

目的：探讨不同胎龄大鼠小脑组织所含蛋白成分的差异。方法：制备１６ｄ、１８ｄ胚胎（Ｅ１６、Ｅ１８）及新生１ｄ（Ｐ１）大鼠小脑提取液（ｃｅｒｅｂｅｌｌｕｍｅｘｔｒａｃｔｓ，ＣＥ），采用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定ＣＥ内的蛋白成分差异。结果：Ｅ１６和Ｅ１８ＣＥ含有Ｐ１ＣＥ所没有的蛋白带，分子量分别约为２５．８，４５．１，８９．１和１７９．５ｋｄ。结论：为寻找新的神经营养因子提供了线索，并为选择最佳移植物供体提供了依据。     

固相微萃取法分析黔产覆盆子挥发油

目的:分析和鉴定贵州产覆盆子挥发油的化学成分。方法:采用固相微萃取法从贵州产覆盆子中提取挥发油,并用气相色谱-质谱法(GC-MS)对化学成分进行分析鉴定。结果:共鉴定出56个成分,用峰面积归一化法测定其相对含量。相对含量占挥发油总量的98.37%。含量最高的组分是芳樟醇(40.22%),萜品烯醇-4(7.16%),乙酸芳樟酯(5.83%)。结论:覆盆子的挥发油有一定的药用价值。     

大鼠胚胎小脑提取液蛋白质成分分析

为探讨不同胎龄大鼠小脑组织所含蛋白成分的差异,制备16d和18d胚胎(E16,E18)及新生1d(P1)大鼠小脑提取液(cerebellum extracts,CE),采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法鉴定CE内的蛋白成分差异。结果发现E16与E18含有P1 CE所没有的蛋白带,分子量分别约为25.8kd,45.1kd,89.1kd和179.5kd。本研究为寻找新的神经营养因子提供了线索,并为选择最佳移植物体提供了依据。     

人子宫颈粘液抗菌活性多肽的分离纯化

目的　从人子宫颈粘液分离纯化新的抗菌多肽。方法　用 5 %乙酸提取人子宫颈粘液可溶物 ,经电泳凝胶琼脂糖弥散法抗菌试验发现 ,子宫颈粘液酸溶性提取物有一条主带对大肠杆菌耐氨苄株 ML - 35 P有强抗菌活性 ,命名为 HCP。应用制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术及洗脱电泳技术得到构成该主带的混合物 ,最后应用反相高效液相色谱技术分离纯化多肽。经 Tricine- SDS- PAGE鉴定其相对分子质量 ,并运用琼脂糖弥散法鉴定其抗菌活性。结果　从子宫颈粘液酸溶性提取物中纯化出一多肽 ,相对分子质量约为 14× 10 3,命名为 HCP- 1,具有抗耐药性大肠杆菌和绿脓杆菌的活性。结论　 HCP- 1可能是宫颈粘液天然免疫机制中的新的效应分子     

低分子量尿蛋白在原发性肾小球肾炎中的作用

目的 探讨低分子量混合性尿蛋白在肾小球及小管间质损伤中的意义,评估尿蛋白分型的特征对诊断的价值。方法 采用薄层十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对尿蛋白分型,将101例肾活检证实是原发性肾小球肾炎患者,分为70、150、23、10kd组,分别测定血清肌酐(Scr)、24h尿蛋白、尿视黄醇结合蛋白水平(RBP)及小管间质损害分数。结果 10kd组34.29％患者的Scr高于正常范围,且与其他三组相比有显著性差异(P<0.05)。四组患者24h尿蛋白均有不同程度的升高,其中23kd组和10kd组升高尤为显著,与另二组比较均有显著性差异(P<0.05)。在RBP及小管间质损害分数测定中,10kd组与其他三组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论 当原发性肾小球肾炎患者出现分子量很低的23kd和10kd的混合性尿蛋白类型时,肾小球滤过功能和小管重吸收功能均受到损伤,后者可能预后更差。     

贵州省部分少数民族线粒体DNA 9bp序列缺失频率研究

目的: 研究中国贵州省部分少数民族线粒体DNA 9 bp 序列缺失情况.方法: 采用PCR法扩增线粒体基因组细胞色素氧化酶II和tRNAlys基因间非编码序列中含9bp序列缺失的片段,3%琼脂糖凝胶电泳检测缺失情况.结果: 各少数民族线粒体DNA 9 bp序列缺失频率为7.4%～23.4%,最低为银屏壮族,最高为沙井苗族.结论: 贵州省部分少数民族线粒体DNA 9bp 序列缺失频率较高,各民族DNA 9 bp序列缺失频率有一定差异.     

中国仓鼠V79细胞系的oua^R和oua^S细胞蛋白质组分的双向电泳..

In the sense of gene expression, the primary and direct change in mutant cells should be involved in the protein component. Two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis has been used to compare the protein components of ouabain resistant mutant cells (ouaR) and sensitive wild type cells (ouaS) of chinese hamster lung cell line V79. The procedure is based on O'Farrell's method and we have made some modifications. In order to make the study reliable, we took twenty polypeptide spots as a reference marker. These marker spots could always be reproduced in a series of parallel experiments with both mutant and wild cells. In addition, these markers covered different small areas, representing different isoelectric point (pI) and molecular weight (MW) on the electrophoretogram. With reference to these marker spots, some polypeptide spots showed variations in their position, size and density. It is notable that the changes appeared in the small area 4 (pI/MW:5.0/28-30kd) and the small area (pI/MW:6.3/39kd) is highly reproducible and significant, so that these changes might be specific to ouabain resistant mutant of V79 cells. Since the level of genetic polymorphism of mammalian cells on two-dimensional gel electrophoresis is quite low, these specific changes might reflect the differences in gene structure and expression. This primary study should enhance the usefulness of two-dimensional gel electrophoresis for mutagenesis research with cultured mammalian somatic cells.