一种贵州豆豉酶提取物的溶栓活性及溶栓机理研究

目的:探讨贵州豆豉酶提取物的溶栓活性和溶栓机理.方法:用纤维蛋白平板法和溶解血凝块试验法研究贵州豆豉酶提取物的溶栓活性,用加热和未加热纤维蛋白平板分别检测豆豉酶提取物在这两种条件下的溶栓活性,以纤维蛋白平板上透明溶栓圈直径的变化来阐明豆豉酶提取物的溶栓机理.结果:贵州豆豉酶提取物在20 h内溶解血凝块,3批酶提取物样品溶栓效价平均值分别为19 250 U/g(n=3, RSD=1.03%)、20 664 U/g(n=3, RSD=0.81%)和20 263 U/g(n=3, RSD=0.63%);贵州豆豉酶提取物在未加热纤维蛋白平板上溶栓圈直径大于加热平板,存在显著差异.结论:贵州豆豉酶提取物具有溶栓活性,可直接溶解纤维蛋白,也可通过激活血纤维蛋白溶酶原间接溶解纤维蛋白.     

青蒿发酵豆豉与传统发酵豆豉中大豆异黄酮含量研究比较

目的：对青蒿豆豉与传统豆豉中异黄酮含量进行研究比较,寻找最适合异黄酮提取的豆豉材料。方法以民间传统方法添加中药青蒿发酵制备豆豉;并对其异黄酮含量进行测定。结果添加青蒿发酵豆豉中大豆异黄酮含量为0.205%;对照豆豉中大豆异黄酮含量为0.115%,是对照豆豉含量的2倍。结论在传统的豆豉发酵过程中添加一定量的青蒿可显著改善发酵效果,缩短发酵时间,使豆豉中的大豆异黄酮含量明显提高。     

长白蝮蛇毒纤溶组分的纯化及理化性质的研究

采用DFAE-Sepharose-CL-6B离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶过滤层析,从长白蝮蛇毒中分离到五种具有纤溶活性的组分,并对其理化性质进行了较为深入的研究。结果表明,长白蝮蛇毒各纤溶组分具有纤溶酶和纤溶酶原激活因子的双重作用,能被金属酶抑制剂EDTA-Na_2完全抑制。已纯化的三种纤溶组分,无出血活性。     

重组葡激酶N端缺失突变体对纤溶酶原的激活作用

目的 比较重组葡激酶（ＳＡＫ）及其Ｎ端缺失突变体地纤溶酶原（ＰＬＧ）激活作用的酶动力学常数,探讨ＳＡＫＮ端结构与功能的关系,以进一步改造ＳＡＫ分子。方法 采用酶反应动力学方法结合生物传感器测定ＳＡＫ、△ＮＳＡＫ与ＰＬＧ、纤溶酶（ＰＬＭ）作用的动力学常数。结果 两者与ＰＬＭ形成的复合物催化ＰＬＧ的Ｋｍ值分别为６．２９、４．６μｍｏｌ／Ｌｍ,Ｋｃａｔ值分别为０．７２５ｓ＾－１、０．３１２ｓ＾－１;两者     

红细胞己糖激酶同工酶琼脂糖电泳测定法及初步临床应用

本文介绍一种使用普通仪器和琼脂糖，电泳测定红细胞己糖激酶（ＨＫ）同工酶的方法。其特点是使用巴比赛巴比妥钠不连续缓冲体系，并适当延长电泳时间。本文还对影响实验结果的几种因素及部分肿瘤患者的实验结果进行了分析。     

乙酸纤维膜电泳法快速分离磷酸肌酸激酶同功酶

采用乙酸纤维膜(涤沦基型)电泳法对CPK同功酶进行分离。所用缓冲液为Tris-巴比妥—巴比妥钠缓冲液,pH8.8,离子强度0.029M。电泳电压300V,时间10min。该方法不仅操作简便,分离效果好,重复性强,更重要的是省时价廉,适合临床急诊工作的需要。     

SDS-PAGE及转移电泳鉴别纤溶酶原激活剂及其分子量测定

纤溶酶原激活剂(PA)经SDS-PAGE分离后,在凝胶中用Triton X-100取代SDS,使PA复活。在温和条件下转移到纤维蛋白板上,则纤维蛋白板上出现与PA对应的溶解带。该法不仅可以用来测定PA的分子量,鉴别PA的类别,而且灵敏度不低于溶解圈法,UK可以测到0.005IU,t-PA可以测到0.03IU。     

重组葡激酶治疗急性心肌梗死的疗效观察

目的 比较重组葡激酶(r-SAK)和重组组织型纤溶酶原激活物(r-tPA组)溶栓治疗急性心肌梗死(AMI)的疗效.方法 选择2003年12月至2004年12月我院收治的无溶栓禁忌征的首次急性心肌梗死患者48例,随机分为试验组(r-SAK组)和对照组(r-tPA组)各24例.两组溶栓后90分钟行CAG,以TIMI血流分级法进行再灌注评估,判断血管是否开通.结果 r-SAK组血管开通率(83.33%vs70.83%,p=0.308),TIMI 3级率(75.00%vs 62.25%,p=0.355),差异均无统计学意义.r-SAK组出血并发症发生率略低于r-tPA组(8.33%vs 25.00%,p=0.125),但无统计学意义.结论 急性ST段抬高性心肌梗死应用r-SAK溶栓治疗具有相当于r-tPA同等效果的IRA血管开通率.     

高活力蚯蚓纤溶酶的纯化及性质研究

由电泳得知赤子爱胜蚓ＥｉｓｅｎｉａＦｏｅｌｉｄｅ有６种纤溶酶同工酶。经纯化从中得到一种具强纤溶活性的单组分酶。收率为粗酶粉总活力的１９．１％。该酶分子量为３００００Ｄ,比活为６６６７Ｕ／ｍｇ,在ｐＨ４～１１及２５℃～５５℃温度范围内稳定。     

纤溶酶原激酶衍生物与尿激酶溶栓疗效对比研究

目的:探讨纤溶酶原激酶衍生物(瑞通立)与尿激酶对急性心肌梗死患者溶栓的有效性和安全性。方法:将笔者所在医院收治的40例急性心肌梗死患者随机分为观察组和对照组,分别采用瑞通立+低分子肝素和尿激酶+低分子肝素进行治疗,同时配合各项辅助治疗措施,并观察及监测临床表现、心肌酶值、心电图动态变化等情况。结果:观察组再通率明显优于对照组,且比较差异有统计学意义(P0.05);不良反应及并发症观察组发生率较低(P0.05)。结论:瑞通立治疗急性心肌梗死更具有优势,是治疗该病安全、有效且简单快捷的溶栓药物。     

磷脂酰肌醇激酶的非同位素酶解测定法

用磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C水解磷脂酰肌醇激酶催化产生的磷脂酰肌醇-4-磷酸,产物1,4-二磷酸肌醇再经碱性磷酸酶水解后,测定磷的含量,建立了磷脂酰肌醇激酶的非同位素酶解测定法。该法回收率可达91％,CV=6.5％。     

贵州红豆杉药用原料林区划

在系统分析了贵州红豆杉的分布、引种基础上,从“人－－地－－树”系统的关键节点切入,用生物气候、地质岩性、母岩、土壤等因子的排序区划红豆杉的栽培区,并钭其划分为７个区。讨论了贵州红豆杉药用林栽培中的原生种与引进种配置,“人－－地－－树”系统与经济的可持续发展、规模化种苗供给问题。     

贵州小香猪超氧化物歧化酶和过氧化物酶同工酶的组织分布

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定贵州小香猪心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、卵巢、子宫等９种组织中超氧化物歧化酶和过氧化物酶同工酶。超氧化物歧化酶同工酶在Ｒｆ０．２２和０．２６处分别各有一条共有谱带，而过氧化物酶同工酶在Ｒｒ０．３９处有一条共有谱带。肝、肺、肾中两种酶活力较高，脑中未测得过氧化物酶。     

UFLC-UV法同时测定黔产丹参中4个水溶性成分的含量

目的：建立超快速液相色谱（UFLC）的方法同时测定丹参成分丹参素、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A.方法：采用Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈-0.05％磷酸为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长220 nm,柱温40℃,检测贵州4个不同产地的8批丹参成分丹参素、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A.结果：4种被测成分的线性关系良好（r ＞0.999）,精密度RSD 0.49％ ～ 1.67％,重复性RSD1.27％ ～2.17％,稳定性RSD 1.53％～2.85％,平均加样回收率在96.80％～103.08％,RSD 1.88％ ～2.79％ （n=6）,8批黔产丹参药材中丹参素、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A的平均含量分别为2.061、3.559、44.223及1.426 mg/g.结论：UFLC法用于检测丹参药材中丹参素、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A,具有简便、快速、准确的优点,能有效控制丹参药材的质量.     

超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱快速分析复方守宫散化学成分及血中移行成分

目的 采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱（ultra-performance liquid chromatography/quadrupole time-of-flight-tandem mass spectrometry, UPLC-Q-TOF/MS）对复方守宫散中化学成分及其血中移行成分进行定性分析,为该制剂的体内有效物质研究提供参考。方法 采用沃特世超高效液相色谱仪（ACQUITY UPLC）和沃特世高分辨质谱仪（Waters Synapt G2-Si QTOF）获得复方守宫散原药样品溶液、混合对照品溶液、空白血浆和含药血浆的液相色谱-质谱信息,再通过比对UNIFI（沃特世科学信息平台）质谱数据库中化合物信息以及部分对照品的提取离子流色谱图、质谱碎片裂解信息,鉴定出目标化合物。结果 共识别出复方守宫散中77个化学成分（主要有皂苷类25个、黄酮类13个、醌类12个）,采用对照品对其中6个成分进行了验证;通过比对空白血浆和含药血浆,发现复方守宫散中绿原酸、槲皮素、虎杖苷、人参皂苷Re等27个成分为入血成分。结论 具有高分辨率、高灵敏度的UPLC-QTOF/MS能够快速分析复方守宫散化学成分及其血中移行成分。     

蛋白激酶C在人子宫平滑肌组织中比活性的测定

目的：检测正常、妊娠与肌瘤组织的人子宫平滑肌细胞（ＨＭＣ）胞浆和胞膜中蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的比活性,比较其异同。方法：根据同位素放射免疫结合实验技术,应用同位素标记的［－３２Ｐ］ＡＴＰ测定ＰＫＣ活性。结果：基础状态下,ＨＭＣ胞膜ＰＫＣ比活性为（４．１５±０．２４）ｎｍｏｌ／ｇＰｒ·ｍｉｎ－１,高于胞浆（１．８８±０．３７）ｎｍｏｌ／ｇＰｒ·ｍｉｎ－１（Ｐ＜０．０５）;肌瘤组织胞膜ＰＫＣ比活性为（４．８０±０．５７）ｎｍｏｌ／ｇＰｒ·ｍｉｎ－１,高于胞浆（２．７５±０．６３）ｎｍｏｌ／ｇＰｒ·ｍｉｎ－１（Ｐ＜０．０５）;妊娠组织胞膜ＰＫＣ比活性为（３．９８±０．４８）ｎｍｏｌ／ｇＰｒ·ｍｉｎ－１,高于胞浆（３．２４±０．６９）ｎｍｏｌ／ｇＰｒ·ｍｉｎ－１（Ｐ＜０．０５）;且肌瘤与妊娠时ＨＭＣ的ＰＫＣ总活性高于正常组织。１０μｍｏｌ／Ｌ乙酰胆碱（ＡＣｈ）、４Ｕ／Ｌ催产素（ＯＴ）可使ＨＭＣ的胞膜ＰＫＣ比活性升高、胞浆ＰＫＣ比活性轻度下降、总活性增加;１００ｎｍｏｌ／Ｌ佛波酯（ＴＰＡ）则可使ＨＭＣ的胞膜ＰＫＣ比活性升高、胞浆ＰＫＣ比活性下降、总活性基本不变。正常组织和肌瘤组织以ＴＰＡ作用最强,妊娠组织以ＯＴ作用最     

血清肌酸激酶MM同工酶亚型和丙酮酸激酸对急性心肌梗塞早期诊断的意义

用普通琼脂糖快速电泳法和２，４—二硝基苯肼法分别测定２１例ＡＭＩ患者血清ＣＫ－ＭＭ亚型和ＰＫ的活力，动态观察ＡＭＩ发病后不同时间ＣＫ－ＭＭ亚型和ＰＫ的变化，对比ＣＫ和ＣＫ－ＭＢ，以评价各指标在ＡＭＩ后不同时间的诊断价值。结果：ＡＭＩ发病５ｈ内首次血清ＣＫ－ＭＭ３％高于心绞痛组和对照组，ＭＭ３／ＭＭ１比值高于心绞痛组和对照组（Ｐ＜０．０１）。而同时限测定的ＣＫ、ＣＫ－ＭＢ和ＰＫ与心绞痛组和对照组比较无差异（Ｐ＞０．０５）；梗塞后６ｈ内ＭＭ３／ＭＭ１诊断阳性半天高１９～２４ｈ内ＰＫ和ＣＫ－ＭＢ诊断阳性率最高；３６～７２ｈＣＫ诊断阳性率最高。血清ＣＫ－ＭＭ亚型，尤其是ＭＭ３／ＭＭ１是ＡＭＩ最早、最敏感的生化指标。     

黄金菊药效组分标准物质分量定值的不确定度评价

目的：评价黄金菊药效组分标准物质[1]分量定值的不确定度。方法：建立数学模型,逐层对三批（批号为20110201、20110202、20110203）黄金菊药效组分标准物质分量定值的不确定度来源进行分步计算和整体合成,得到合成标准不确定度（Uc）和扩展不确定度（U）。结果：黄金菊药效组分中黄芩苷的含量测定结果20110201：（88.04±0.84）%,20110202：（88.03±0.84）%,20110203：（88.06±0.84）%;绿原酸的含量测定结果20110201：（5.67±0.12）%,20110202：（5.67±0.16）%,20110203：（5.67±0.12）%;荭草苷的含量测定结果20110201：（4.53±0.09）%,20110202：（4.54±0.09）%,20110203：（4.54±0.09）%;牡荆苷的含量测定结果20110201：（1.136±0.02）%,20110202：（1.135±0.02）%,20110203：（1.134±0.02）%,k=2,p=95%。结论：影响药效组分标准物质分量定值的不确定度的主要是操作因子中的称量、定容和移液。     

血清胸苷激酶1在肿瘤临床治疗中的价值探讨

目的 研究血清胸苷激酶1（STK1）在肿瘤疗效评估中的价值.方法 采用高灵敏度的增强化学发光法检测102例恶性肿瘤患者化疗过程中的血清TK1水平,随访6个月,并结合实体瘤疗效评估标准（RECIST）进行疗效综合评估.结果 43例患者,化疗前TK1平均水平为（3.55±2.82）pM,化疗后TK1平均水平为（2.20±1.17）pM,化疗前后比较具有显著性差异（P=0.0002）.血清胸苷激酶1与RECIST评估治疗效果符合率为60.5％（26/43）.结论 血清TK1在肿瘤疗效评估中具有重要价值.     

脑瘫患儿血清6种必需氨基酸高效毛细管区带电泳分析

目的 应用高效毛细管区带电泳法测定脑瘫患儿血清中6种氨基酸含量。方法 采用以2，4－二硝基氟苯作为衍生剂的高效毛细管区带电泳法测定血清中6种必需游离氨基酸的含量。结果 6种必需氨基酸的线性范围为5－500μmol/L，相对标准偏差为3．6％－9．5％，平均回收率为91．2％－105．0％；脑瘫患儿血清6种氨基酸的含量与正常对照组相比，赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸明显降低，色氨酸、异亮氨酸、缬氨酸无明显改变。结论 高效毛细管区带电泳可以准确测定血清6种必需基酸的含量；脑瘫患儿血液中氨基酸比例失调。