周围血白细胞的复制型丙型肝炎病毒RNA的检测及临床意义

用简并引物作套式反转录。聚合酶链反应检测正、负链丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ。显示３０例急、慢性丙型肝炎患者的血清及血浆中，７例无症状抗－ＨＣＶ阳性者的血清、血浆及周围血白细胞（ＰＢＬ／Ｃ）中，均未检出负链ＨＣＶＲＮＡ。慢性丙型肝炎者ＰＢＩ（中正、负链ＨＣＶＲＮＡ的检出率高于急性丙型肝炎及无症状抗－ＨＣＶ阳性者（Ｐ＜０．０５～０．００１）。１７例经肝组织学检查的患者中，急性肝炎（ＡＨ）者ＰＢＬ／Ｃ的正、负链ＨＣＶＲＮＡ检出率低于慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）者（Ｐ＜０．０５）。１例ＡＨ及６例ＣＡＨ患者肝组织内正、负链ＨＣＶＲＮＡ全部阳性。证实丙型肝炎患者的ＰＢＬ／Ｃ确可被ＨＣＶ感染，病程越长，被ＨＣＶ感染的可能性越大；病情活动者，ＰＢＬ／Ｃ中负链ＨＣＶＲＮＡ的检出率越高。提示ＨＣＶ不仅可以感染ＰＢＬＣ，而且可在其中复制；负链ＨＣＶＲＮＡ的出现与病情活动有关。     

竞争性逆转录聚合酶链反应定量检测对HCV RNA

为了解感染丙型肝炎病素（ＨＣＶ）后的（ＨＣＶＲＮＡ）含量与丙型肝炎病情轻重，预后，治疗反应的关系，采用竞争性逆转录聚合酶链反应（ＣＲＴ－ＰＣＲ）的方法，对９例感染了ＨＣＶ患者的血清进行了ＨＣＶＲＮＡ的定量检测。结果：６．６×１０３拷贝１毫升占８８．９％，６．６×１０４拷贝／毫升占１１．１％。结果提示：急慢性丙型肝炎及无症状ＨＣＶ感染者体内均含有较高的病毒滴度，且滴度低预后好，抗病毒疗效好。     

外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正负链检测的临床意义

目的通过对外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶＲＮＡ正负链的检测,来探讨其与丙型肝炎慢性化及干扰素治疗的关系．方法慢性丙型肝炎患者４０例,其中干扰素治疗者１０例,分离血清及ＰＢＭＣ．异硫氰酸胍－酚－氯仿抽提法提取ＨＣＶＲＮＡ,应用逆转录－巢式ＰＣＲ技术检测ＨＣＶＲＮＡ正负链．结果血清正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６７５％,但负链均为阴性,ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为５７５％,负链的阳性率为３５０％．其中３例患者血清中正链ＨＣＶＲＮＡ为阴性,而ＰＢＭＣ中为阳性．１０例干扰素治疗者在治疗结束时血清正链ＨＣＶＲＮＡ６０％转阴,ＰＢＭＣ中负链ＨＣＶＲＮＡ８０％转阴,而正链仅３７５％转阴．结论ＨＣＶ能在ＰＢＭＣ中存在和复制,这可能是导致丙型肝炎易发生慢性化的原因之一．ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ正负链的检测对于临床判断干扰素的疗效及预后有重要意义     

丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞中HCV RNA检测及意义

目的 了解丙肝患者血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶＲＮＡ存在情况及有其临床意义，方法 应用套式ＰＣＲ检测４６例急性丙型肝炎（丙型肝炎以下简称丙肝）和４２例慢性丙型肝炎患者血清和ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ。结果 慢性丙型肝炎患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ检出率显著高于急性丙型患者（Ｐ〈０．００１），急，慢性丙型肝患者血清和慢性丙肝患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶ ＲＮＡ检出率显著高于ＡＬＴ正常的抗－ＨＣＶ阳性     

国产重组干扰素α1—b治疗慢性丙型肝炎追访2年的疗效观察

输血后抗ＨＣＶ和ＨＣＶ－ＲＮＡ（ＲＴ－ＰＣＲ法）阳性的慢性丙型肝炎４３例，随机分为二组，治疗组２２例应用重组干扰素α１－ｂ治疗，对照组２１例用一般护肝药，１２周后ＳＡＬＴ的复常率分别为５０％．４、７６％（Ｐ＜０．０５）。血中ＨＣＶ－ＲＮＡ阴转率分别为２７．２７％、４．７６％（Ｐ＜０．０５）。对治疗组ＳＡＬＴ复常病人停药后３、６、１２、１８、２４个月追访，复发率分别为３７．５％、４４．４４％、６０％     

多重和套式聚合酶链反应检测血液,腹膜透析患者血清中HBV D…

利用免疫学和聚合反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透），１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感     

血清抗－HCV与HCV RNA检测结果比较

采用逆转录一套式－聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅ－ＰＣＲ）及ＥＬＩＳＡ（Ａｂｂｏｔｔ）对一组经第二代抗－ＨＣＶＥＬＩＳＡ（上海科华生物技术有限公司，科华）试剂筛选的抗－ＨＣＶ阳性血清及抗－ＨＣＶ阴性的非甲非乙型肝炎患者血清，进行了ＨＣＶＲＮＡ与抗－ＨＣＶ检测。对两者检测结果及相互关系进行了分析与比较。结果显示：Ａｂｂｏｔｔ与科华ＥＬＩＳＡ试剂两者抗－ＨＣＶ检测的阳性符合率及总符合率为７７．７％及７９．８％。两者与ＨＣＶＲＮＡ检测阳性结果的符合率分别为４９，７％及５６．３％。２０８份血清中ＨＣＶＲＮＡ阳性１０９份，其中抗－ＨＣＶ阳性组ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６０．２％，较之抗－ＨＣＶ阴性之非甲非乙型肝炎ＨＣＶＲＮＡ阳性率（５０．０％）为高，其在ＰＣＲ试验中呈阳性与强阳性反应者的比率，前者亦显著高于后者（８５．２％与２５．ｏ％，Ｐ＜０．０１）。     

多重和套式聚合酶链反应检测血液、腹膜透析患者血清中HBV DNA和HCV RNA

利用免疫学和聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透）、１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感染率显著高于一般人群。血、腹透两组ＨＣＶ感染率相差非常显著，血透患者抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性高于腹透患者，表明血透过程在丙型肝炎传播方面起重要作用。作者还采用多重和套式ＰＣＲ方法，将ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ在合并的逆转录和ＰＣＲ扩增系统中，连续进行逆转录和第一轮多重ＰＣＲ扩增，再进行第二轮多重ＰＣＲ，具有特异、敏感、简便、快速和经济等特点，适于临床应用。     

HCV基因型和病毒量与干扰素疗效的关系

用α１型基因工程干扰素（ＩＦＮ－α１）治疗２６例慢性丙型肝炎（丙肝），观察丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型和ＨＣＶＲＮＡ量和疗效的关系。其中２０例作ＨＣＶ的基因型，结果表明ＨＣＶⅠ型中病毒清除反应属Ａ级（完全清除）为４／６，Ⅱ型为０／６，Ⅲ型为５／７，提示Ⅰ、Ⅲ型较Ⅱ型易于清除病毒（Ｐ＜０．０５）；基因型和ＡＬＴ反应关系不明显。２６例作ＨＣＶＲＮＡ，半定量结果表明病毒含量低者，病毒清除反应佳（Ｐ＜０．０５），而和ＡＬＴ关系不明显。作者认为ＨＣＶ基因型和血清病毒量可作为预测干扰素疗效的参考指标，定量检测血清中ＨＣＶＲＮＡ在评价ＩＦＮ疗效中十分重要。     

重组干扰素治疗慢性丙型肝炎疗效评价

本文报道了２９例慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）患者采用重组α－干扰素（α－ＩＦＮ）每日６００万单位，疗程８周，于治疗前，治疗后即刻、３个月、６个月或１年，２年采集血清，测定丙型肝炎病毒核酸（ＨＣＶＲＮＡ）并动态观察其丙氦酸转氨酶（ＡＬＴ）的变化。结果表明：１２例（４１．４％）呈持续应答，ＨＣＶＲＮＡ持续阴转２年以上，ＡＬＴ亦持续正常；９例（３１．ｏ％）呈暂时应答；８例（２７．６％）为无应答反应。并提示血液中含有高滴度ＨＣＶＲＮＡ的ＣＨＣ患者可能对干扰素治疗较为敏感。     

胶体金免疫层析法检测抗幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体

目的　建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌（ Ｈｐ）细胞毒素相关蛋白 Ａ（ ＣａｇＡ） 抗体的胶体金免疫层析法（ＧＩＣＡ） ．方法　采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记葡萄球菌Ａ 蛋白（ＳＰＡ） ,将重组的ＣａｇＡ 抗原划线固定于硝酸纤维素膜上,制成免疫层析检测试条． 血清中ＩｇＧ 与测试条上金标记物结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条．结果　用ＧＩＣＡ 与ＥＬＩＳＡ 试剂盒对比检测了３２６ 份血清标本中抗ＣａｇＡ 抗体,本方法的特异性为９５－８ ％ ,敏感性为９７－３ ％ ,两法符合率为９６－６ ％ ．结论　ＧＩＣＡ 检测血清中的抗ＣａｇＡ 抗体特异性强、灵敏度高、简便快速,无需特殊仪器设备,有广泛应用价值．     

乙型肝炎肝组织血管内皮细胞生长因子的表达

目的　研究血管内皮细胞生长因子（ ＶＥＧＦ） 与乙型肝炎（ 乙肝）分级（ Ｇ） 和分期（Ｓ） 的关系．方法　乙肝活检肝标本１５０ 例,用ＶＥＧＦ 单克隆抗体进行免疫组化（ＳＰ 法） 染色．结果　ＶＥＧＦ 在肝组织表达有胞浆型、膜窦型及窦内皮细胞型;ＶＥＧＦ 主要由肝细胞分泌,其次在肝窦内皮细胞、贮脂细胞、成肌纤维细胞,单形核细胞也示阳性． 无明显病变的血管内皮细胞及肝细胞ＶＥＧＦ 染色阴性． 提示随分级增高ＶＥＧＦ表达增强,其间有极显著性差异（ Ｐ＜ ０－０１） ;而Ｓ 低分值者ＶＥＧＦ 多示阳性表达,Ｓ 较高分值者其多为强阳性表达,两者有明显不同（ Ｐ＜ ０－０１） ．结论　ＶＥＧＦ 表达与乙肝Ｇ 和Ｓ 呈相关．     

重型病毒性肝炎预后的临床分析

目的：探讨影响重型肝炎（重肝）预后的因素。方法：本文总结了207例重型病毒性肝炎资料。结果：（1）重肝好发年龄主要分布于30－50岁，年龄越大，死亡率越高，老年患者病死率达71．4％；（2）单纯HBV感染是重肝的主要病因，占70．5％，其病死率49．65％，而重叠病毒感染（HBV＋HCV和或HBV＋HEV）均明显加重病情，病死率达55．56％和53．65％；（3）重肝早期治疗有效率达65．4％，而中晚期疗效差，有效率34．8％和11．3％；（4）重肝按脑病型，腹水型，混和型及其它型分型，各型治愈好转率有明显差异，分别为25％，42％，7％和63％；（5）并发症多少与转归明显关联，0－1种存活率46％，2－3种13．3％，4－5种5．4％；（6）重肝患者常伴有胆结石胆囊炎（12．6％），糖尿病（Ⅱ型）（4．8％），胰腺炎（0．7％）等。结论：年龄大小，病因不同，临床类型不同，并发症多少及伴随疾患的有无，均会影响重肝转归。     

健康人群和肝病患者中检测TTV的意义

目的了解新型肝炎病毒－ＴＴＶ的致病性和在健康人群和肝病患者中的流行情况．方法收集１８０份健康体检患者血清和１５６份不同类型肝病患者血清,采用ＰＣＲ方法检测ＴＴＶ的ＤＮＡ．同时检测ＨＡＶ,ＨＢＶ,ＨＣＶ,ＨＥＶ和ＨＧＶ感染标志,比较分析ＴＴＶ在健康人群和不同类型肝病患者中流行情况及其致病性．结果健康体检人群和肝病患者中,ＴＴＶＤＮＡ检出率分别为２２％和４５％,两组间无显著性差异（Ｐ＞００５）．体检人群中,ＡＬＴ正常和升高者的检出率分别为１７％和１４３％．急性肝炎,慢性肝炎和肝硬变者的检出率分别为４８％,４３％和４７％．１１例阳性患者中,３例ＡＬＴ正常,８例ＡＬＴ异常．在８例ＡＬＴ异常患者中,６例为ＨＢＶ现行感染,１例为ＨＣＶ现行感染,仅１例为ＮＡ－Ｇ肝炎患者．结论在中国健康体检人群和肝病患者中能检出低水平的ＴＴＶ现行感染．但似乎仅引起个别患者的转氨酶轻度升高．ＴＴＶ的致病性可能较弱或需要其他因素协同致病．     

胃癌组织cyclinE表达的临床病理意义

目的　Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ 蛋白在细胞周期的Ｇ１ 晚期起作用,加速Ｇ１Ｓ期转化,与人类肿瘤有关． 本研究探讨ｃｙｃｌｉｎ Ｅ 蛋白在胃癌的意义．方法　用敏感而特异的免疫组化ＳＰ 法测定胃癌石蜡切片中ｃｙｃｌｉｎ Ｅ蛋白的异常表达．结果　Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ 在胃癌中表达６２ ％ （ｎ ＝ ６０ ,Ｍ＝ ４３ ,Ｆ＝ １７ ,３２岁～７３ 岁） ,与癌旁组织２６ ％ 相比有显著差异（ Ｐ＜ ０－０５） ．Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ表达与组织病理分化程度呈负相关． 分化差的胃癌组织ｃｙｃｌｉｎ Ｅ蛋白表达越强,ｃｙｃｌｉｎ Ｅ与肿瘤侵袭、淋巴结转移、远处转移无明显关系．结论　Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ 蛋白与胃癌发生有关,与胃癌进展无关．ＣｙｃｌｉｎＥ 蛋白可做为胃癌的一个潜在的诊断和判断预后的指标．     

Severe constipation as the presenting complaint of phaeochromocytoma

Abstract Phaeochromocytoma is a rare tumour which may present with gastrointestinal features. We report two patients who presented with severe constipation and were found to have a malignant phaeochromocytoma. Both patients deteriorated following barium contrast radiology. In the first patient, constipation improved following pharmacological manipulation with a and β adrenoreceptor antagonists. The diagnosis of phaeochromocytoma must be considered in a constipated patient with the features of catecholamine excess. (Aust NZ J Med 1991; 21: 888–890.)     

Hepatitis B virus RNA is measurable in serum and can be a new marker for monitoring lamivudine therapy

Background Changes in the serum hepatitis B virus (HBV) RNA level during lamivudine therapy were compared to those in the serum HBV DNA and HBV core-related antigen (HBVcrAg) levels in 24 patients with chronic hepatitis B. Methods For measurement of HBV RNA, total nucleic acid was extracted from serum samples and treated with RNase-free DNase I. After cDNA synthesis from extracted RNA, HBV RNA was measured by real-time detection polymerase chain reaction. Results The peak fraction of HBV RNA in serum samples was consistent with peak fractions of HBV DNA and HBV core protein in a sucrose gradient analysis, indicating that HBV RNA was incorporated into virus particles. All levels of HBV DNA, HBV RNA, and HBVcrAg decreased gradually during lamivudine therapy (P < 0.001 for all). The amount of decrease from the start of lamivudine therapy was significantly higher for HBV DNA than for HBV RNA or HBVcrAg during 6 months of lamivudine therapy (P < 0.001 for all). However, a similar difference was not seen between HBV RNA and HBVcrAg levels during that period. The HBV RNA level was significantly correlated (P < 0.001 for all) with levels of HBV DNA and HBVcrAg both at the beginning and 2 months after the start of lamivudine therapy. Conclusions HBV RNA is detectable in serum in a form indicating incorporation into virus particles, and its serum level might serve as a new viral marker with a significance different from that of HBV DNA in lamivudine therapy.     

Genomic Epidemiology of SARS-CoV-2 in Tocantins State and the Diffusion of P.1.7 and AY.99.2 Lineages in Brazil

Tocantins is a state in the cross-section between the Central-West, North and Northeast regions of Brazilian territory; it is a gathering point for travelers and transportation from the whole country. In this study, 9493 genome sequences, including 241 local SARS-CoV-2 samples (collected from 21 December 2020, to 16 December 2021, and sequenced in the MinION platform) were analyzed with the following aims: (i) identify the relative prevalence of SARS-CoV-2 lineages in the state of Tocantins; (ii) analyze them phylogenetically against global SARS-CoV-2 sequences; and (iii) hypothesize the viral dispersal routes of the two most abundant lineages found in our study using phylogenetic and phylogeographic approaches. The performed analysis demonstrated that the majority of the strains sequenced during the period belong to the Gamma P.1.7 (32.4%) lineage, followed by Delta AY.99.2 (27.8%), with the first detection of VOC Omicron. As expected, there was mainly a dispersion of P.1.7 from the state of São Paulo to Tocantins, with evidence of secondary spreads from Tocantins to Goiás, Mato Grosso, Amapá, and Pará. Rio de Janeiro was found to be the source of AY.99.2 and from then, multiple cluster transmission was observed across Brazilian states, especially São Paulo, Paraiba, Federal District, and Tocantins. These data show the importance of trade routes as pathways for the transportation of the virus from Southeast to Northern Brazil.     

北京市腹泻儿童人博卡病毒VP1区基因特征分析

目的了解北京市5岁以下腹泻儿童人博卡病毒(human bocavirus, HBoV)感染状况及分子流行病学特征。方法收集2015年11月—2016年12月北京市哨点医院5岁以下急性腹泻儿童粪便标本,用巢式PCR对HBoV部分VP1区序列进行扩增,并对阳性序列进行基因特征分析。结果共采集粪便标本396例,检出HBoV 30例(7.58%),包括3种基因型别,分别为HBoV1型(17例)、HBoV2型(11例)、HBoV3型(2例),未检出HBoV4型。进化分析表明,HBoV1序列在进化树上包括两簇,其中,BJ16-325变异程度较大,自成一簇;其他HBoV1序列共同形成一簇。北京地区所有HBoV2序列均位于一个新的HBoV2亚型分支上。结论 2015—2016年北京市5岁以下腹泻儿童检出的HBoV包括3种基因型(1～3型);北京市至少存在2组不同来源HBoV1的流行;本地区流行的HBoV2为一种新的亚型。     

血清HGVRNA阳性病毒性肝炎94例研究

目的分析血清HGVRNA阳性病毒性肝炎的临床特点。方法全部病例入院后即检测血清AB，C，D，E型肝炎病毒标志及肝功能试验，抗-HGV采用ELISA法，HGVRNA采用RT-PCR法，均由302医院免疫室统一检测．结果在94例血清HGVRNA阳性患者中，单纯HGV感染（单纯感染组）18例，HGV合并其他肝炎病毒感染（合并感染组）76例，单纯感染组中以急性肝炎为主（61．1％），合并感染组以HBV＋HGV感染最多，占引例（5．3％）．51例中，以慢性肝炎（41．2％）及肝硬变（37．2％）为主，单纯HGV感染临床可表现为急、慢性肝炎及重型肝炎，其中，急性肝炎临床特点为：消化道症状较轻：半数以上有轻-中度黄疸，也可有重度黄疸者；ALT轻度增高；全部病例恢复顺利，合并感染组病情恢复也较顺利．11例重型肝炎，生存率45．4％．HGV与HBV合并感染者中，住院期间，HBsAg阴转率24．0％，HBeAg阴转率62．5％，HBVDNA阴转率55．6％结论单纯HGV感染以急性肝炎为主，亦可见于慢性肝炎及重型肝炎，合并感染级以慢性肝炎及肝硬变为主，并分析各自临床特点HGV与HBV合并感染时，对HBV可能有抑制作用.