薏苡仁油注射液对人体肝癌SMMC-7721裸鼠异种移植模型的抑制作用

目的 研究薏苡仁油注射液对裸鼠移植性人体肝癌SMMC-7721的抑制作用.方法 建立人体肝癌SMMC-7721裸鼠异种移植模型,通过尾静脉注射不同剂量的薏苡仁油注射液,观察和测量肿瘤大小及荷瘤鼠体重,计算相对肿瘤增殖率及肿瘤抑制率,并对裸鼠肿瘤组织和主要脏器的石蜡切片分别进行Ki-67指标的免疫组化染色和HE染色.结果 25 ml/kg、12.5 ml/kg及6.25 ml/kg 的薏苡仁油注射液对移植于裸鼠的人体肝癌SMMC-7721的相对肿瘤增殖率分别为33.02％,35.78％和39.41％,抑瘤率为49.54％、46.86％、41.71％.给药组裸鼠肿瘤组织的Ki-67阳性率明显低于对照组,主要脏器的HE染色未见异常.结论 薏苡仁油注射液三个剂量组对移植于裸鼠的人体肝癌SMMC-7721模型都有一定的抑制作用,在体内均具有良好的抗肿瘤活性和安全性.     

视黄酸和硒对SMMC-7721肿瘤细胞的协同抑制作用

用 SMMC-7721人肝癌细胞株,经视黄酸(RA)、硒(Se)、RA+Se 的不同处理,发现1×10~(-6)mol/LRA 和2.5×10~(-(6))mol/LSe 的联合对细胞株生长有明显的抑制作用,生长率为40.1%;而单独应用 Se 或 RA,生长率分别为67.4%和65.2%.3~H-TdR 掺入试验也表明,掺入率由单独作用的 Se86.1%和 RA 87.5%下降到74%.瑞氏染色发现联合抑制组细胞有重分化的迹象。本文提示低浓度Se 和 RA 的联合对肿瘤细胞有显著的协同抑制作用。     

腺病毒介导的ING4基因对SMMC-7721人肝癌细胞生长的抑制效应

目的研究腺病毒介导的ING4（Ad-ING4）基因对体外SMMC-7721人肝癌细胞的生长抑制作用。方法将腺病毒空载体Ad-GFP及重组腺病毒Ad-ING4分别感染SMMC-7721细胞,采用RT-PCR法及间接免疫荧光检测ING4基因的转录和表达;荧光显微镜观察Ad-ING4对SMMC-7721细胞的细胞毒作用;MTT比色法绘制细胞生长曲线,计算生长抑制率;流式细胞术（FCM）检测Ad-ING4对细胞凋亡的影响;DAPI核荧光染色检测细胞凋亡的核形态学变化。结果 RT-PCR及间接免疫荧光显示Ad-ING4能在SMMC-7721细胞内稳定表达;Ad-ING4感染72h和96h后对细胞的生长抑制率达33.82%和50.70%;FCM检测有明显的凋亡峰,凋亡率可达46.7%;DAPI染色结果显示SMMC-7721细胞胞核呈现核深染、固缩、断裂等细胞核凋亡的形态改变。结论 Ad-ING4能够明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

槲寄生碱对人肝癌细胞SMMC-7721生长抑制作用的研究

目的:研究槲寄生碱对人肝癌SMMC-7721细胞生长的抑制作用.方法:取对数生长期的人肝癌SMMC-7721细胞接种96孔板,待细胞生长良好后加入含不同浓度槲寄生碱培养液,取3个时间点(作用24h、48h、72h)采用MTT比色法观察槲寄生碱对人肝癌SMMC-7721细胞生长的抑制作用,抑制率(%)=(1-实验组A值/对照孔A值)×100%.结果:0.1mg/mL和0.2mg/mL浓度组在24h、48h、72h均表现出抑制SMMC-7721细胞生长作用,且作用强于5-Fu.0.05mg/mL组在3个时间点也表现出抑制SMMC-7721细胞生长作用,但作用弱于5-Fu.0.025mg/mL组在作用48h后才表现出对SMMC-7721细胞生长抑制作用.结论:槲寄生碱对人肝癌SMMC-7721细胞生长有显著的抑制作用,且呈剂量和时间依赖方式.     

柴胡皂甙D对SMMC-7721细胞株体外分化的研究

摘要：目的　观察柴胡皂甙D（SSD）对SMMC-7721细胞的体外分化诱导作用,并初步探讨其作用机制。方法　通过观察细胞毒作用、平均核面积、细胞周期改变和P38MAPK、NF-κB信号转导分子的表达变化初步揭示其作用机制。结果　SSD具有明显的细胞抑制作用且,呈一定的量效关系;SSD2.5 mg/L、5 mg/L处理组能明显缩小平均核面积（p<0.05）;能使细胞周期阻滞于G0/G1期（p<0.005）;能明显上调P38MAP kinase表达（p<0.05）,显著抑制NF－κB的核内表达 (P<0.05)。结论　SSD对SMMC－7721细胞具有显著诱导分化作用;并且将SMMC-7721的细胞周期明显阻滞于G0/G1期,从而使细胞增殖活性降低,进而趋于分化或凋亡;其作用机制可能是通过上调 P38MAPK,下调NF－κB表达有关。     

白毛藤提取物对肝癌SMMC-7721细胞增殖及c-myc基因表达的抑制作用

目的观察白毛藤水提液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及c-myc基因mRNA表达水平的影响,探讨中药白毛藤的抗癌作用机制。方法用不同浓度白毛藤水提取物处理肝癌SMMC-7721细胞,观察细胞形态变化,用台盼兰染色并作细胞计数,cck-8试剂盒检测不同药物浓度组的细胞增殖抑制情况。RT-PCR检测c-myc基因mRNA表达水平。结果倒置显微镜下可见给药组细胞数目明显减少,且随药物浓度增加其抑制效果增强。WST-8法显示,在药物浓度为2,4,8,16 mg/ml时,细胞增殖明显受到剂量依赖性抑制,其抑制率分别为24.37%,50.07%,66.14%,83.23%。细胞中c-myc基因mRNA表达水平降低,并与药物浓度呈明显的量效关系。结论白毛藤可显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,下调c-myc基因mRNA表达,这可能是白毛藤的抗癌作用的部分机制。     

阿司匹林对SMMC-7721人肝癌细胞增殖的影响

目的:探讨阿司匹林对肝癌细胞株SMMC-7721体外增殖的影响。方法:SMMC-7721细胞体外培养,阿司匹林处理细胞,倒置显微镜观察细胞形态学改变,MTT法检测细胞增殖程度,Tunel法检测细胞凋亡指数。结果:不同浓度的阿司匹林能明显抑制细胞增殖,且抑制程度呈现剂量和时间依赖关系。细胞凋亡指数也随阿司匹林浓度的增加而增加。结论:阿司匹林对SMMC-7721的增殖具有抑制作用,抑制程度与阿司匹林的浓度和作用时间呈正相关,其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡来抑制细胞的增殖。     

青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721选择性抑制作用的实验研究

目的研究青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721的选择性抑制作用。方法将人肝癌细胞株SMMC-7721接种于小鼠腰部皮下,制成小鼠荷瘤动物模型,分别用青蒿素、琥珀酸亚铁、青蒿素＋琥珀酸亚铁、生理盐水（对照组）对荷瘤小鼠进行干预,观察小鼠肿瘤体积的变化;TUNEL法检查肿瘤细胞的凋亡,计算抑瘤率和凋亡指数。结果青蒿素和青蒿素＋琥珀酸亚铁与生理盐水相比,明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长（P〈0.05）,其抑瘤率分别为33.21%和55.04%,2组间存在明显差异（P〈0.05）。青蒿素联合琥珀酸亚铁表现出明显的促凋亡作用,凋亡指数为31.35%,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论青蒿素和青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721均有肿瘤抑制作用和促进肿瘤细胞凋亡的作用,但是联合用药作用更强。     

脱落酸对SMMC-7721人肝癌细胞诱导分化作用的研究

目的探讨脱落酸(abscisicacid,ABA)对SMMC-7721人肝癌细胞的诱导分化作用.方法采用细胞培养方法,分别以RPMI-1640培养液、HMBA以及不同浓度ABA处理细胞,以改良MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞周期,观察各组细胞的超微结构.结果除0.1μg/mLABA的浓度以外,其它浓度都能抑制细胞增殖且抑制率随时间延长和浓度的增加而增高.细胞阻滞于G0/G1期,细胞超微结构向正常方向逆转.结论ABA对SMMC-7721人肝癌细胞具有抗增殖、促分化作用.     

RMP基因在体内对肝癌细胞株SMMC-7721的生长抑制作用

目的探讨RMP基因在体内抑制肿瘤细胞生长的作用及其机制。方法通过体外构建真核表达载体pGPU6-Neo-RMP-484、pFLAG-CMV-4-RMP以及稳定表达细胞株shRNA-SMMC-7721、RMP-SMMC-7721,并测定RMPmRNA表达的变化,荷瘤裸鼠皮下注射各组肝癌细胞,观察移植瘤的大小及病理变化。结果成功构建了真核表达载体及稳定表达细胞系。实验组移植瘤体积、质量、病理及肿瘤相关蛋白的表达量均有明显变化。结论RMP基因在体内能有效地抑制肝癌细胞的生长,为RMP对肝癌的基因治疗/基因干预提供了有价值的靶点及体内分子机制的实验依据,为深入研究奠定了基础。。     

天花粉蛋白与胂酸基乙酸抑制肝癌细胞SMMC-7721的协同作用

目的:了解天花粉蛋白(TCS)与胂酸基乙酸(ASAC)对SMMC-7721细胞生长的协同抑制效果.方法:不同浓度的两药单独或联合分别作用于生长良好的SMMC-7721细胞24h、48h和72h,然后以MTT比色法测定每组药物对SMMC-7721细胞的抑制率.结果:联合用药组的抑制率比单独用药组更大,在第48h和72h联合用药组抑制率较单药用药组有显著差异.结论:TCS与ASAC这两种促癌细胞凋亡的药物对SMMC-7721细胞生长具有周期协同抑制作用,联合用药可减少用药量,提高抑癌效果.     

STUDY ON EFFECTS OF QUERCETIN ON PML GENE AND PROTEIN IN LEUKEMIA CELL LINES

Objective To investigate the effect of quercetin on PML gene and protein expression andlocalization in leukemia cell lines. Methods Cell morphology was assayed by Wright's stain and fluorescence stain, and PML mRNA expression by RT-PCR , PML protein localization by immuno-fluorescence. Results NB4 and HL-60 cells differentiated morphologically after treatment with all-trans-retinoic acid (ATRA) while K562 cells did not differentiate. Typical apoptosis was found in each cell line after treatment with quercetin. Immuno-fluorescence analysis showed , after treatment with ATRA , the fusion protein disappeared in NB4 cells and PML protein relocated , while HL-60 and K562 cells had no difference from control cells. After treatment with quercetin, the fusion protein disappeared in NB4 cells, PML protein relocated, then degraded. In HL-60 cells and K562 cells, PML protein also located and then degraded . The expression of PML mRNA was not changed in all three cell lines after treatment with ATRA or quercetin. C     

胂酸基乙酸与10-羟基喜树碱对肝癌细胞 SMMC-7721生长的协同抑制作用

目的:了解胂酸基乙酸(ASAC)与10-羟基喜树碱(10-HCPT)对肝癌细胞SMMC-7721细胞生长的协同抑制效果.方法:两药组合和单药以不同浓度分别作用于生长良好的SMMC-7721细胞,分别在第24h、48h和72h终止作用,以MTT实验测定每组药物对SMMC-7721细胞的抑制率大小.结果:协同作用组比单药组的抑制效果好.在第48h和72h协同组有显著性差异(P<0.05).结论:ASAC与10-HCPT这两种促癌细胞凋亡的药物对SMMC-7721细胞生长具有周期协同抑制作用.     

阻断MEK／ERK上调内质网应激条件下CHOP和p53表达

目的：研究MEK／ERK信号途径在肝癌细胞SMMC-7721抵抗内质网应激诱导凋亡中的分子机制。方法：采用MEK特异抑制剂PD98059阻断内质网应激介导的MEK／ERK活化,并利用流式细胞和Western blot技术分析阻断MEK／ERK对内质网应激诱导的细胞凋亡及其关键调控分子GRP78、CHOP和p53表达的影响。结果：阻断MEK／ERK信号途径后,SMMC-7721细胞对内质网应激诱导凋亡的敏感性明显增强,CHOP和p53的蛋白水平显著上调。结论：内质网应激介导的MEK／ERK活化能够通过下调CHOP和p53表达抵抗细胞凋亡。     

实时定量PCR检测镉对人肝癌细胞SMMC-7721中TRPC1和TRPC4 mRNA表达的影响

目的：观察氯化镉（CdCl₂）处理后人肝癌SMMC-7721细胞中TRPC1和TRPC4 mRNA表达的改变,在mRNA水平探讨镉对肝癌细胞钙通道的影响。方法：以人肝癌细胞株SMMC-7721为研究模型,细胞暴露于氯化镉终浓度为0、5、10、20、30及40 μmol·L^-1的培养液中24 h。采用SYBR荧光实时定量PCR法检测TRPC1和TRPC4 mRNA表达,相对定量采用比较CT值法。结果：随着剂量的增加,TRPC1 mRNA表达有降低的趋势,除20 μmol·L^-1组外,各组mRNA表达均高于对照组（P<0.01）;TRPC4 mRNA表达有先增高后降低的趋势,5、10和30 μmol·L^-1组mRNA表达均高于对照组（P<0.01）。2个基因均在低剂量（5和10 μmol·L^-1）组表达增加幅度较大（P<0.01）。结论：低剂量镉可显著增加人肝癌SMMC-7721细胞中TRPC1和TRPC4的表达,镉可在mRNA水平对SMMC-7721细胞钙通道产生影响。     

癌光啉和PhotofrinⅡ对人体肿瘤细胞系光敏杀伤作用的比较

本文报道癌光啉(代号PsD-007)和photofrin Ⅱ对人体肿瘤细胞系杀伤效应的比较。结果表明,在相同浓度和相同光照剂量处理细胞时,PsD-007对人体肝癌细胞系SMMC-7721和人体胃癌细胞系NGCC-8310的光敏杀伤效应至少相当于或略优于Photofrin Ⅱ。实验提示,一定浓度的PsD-007和Photofrin Ⅱ作用细胞时,光敏杀伤效应随光辐照剂量的增加而增强;在一定光照剂量处理细胞时,一定浓度范围内,光敏杀伤效应随光敏剂浓度的增加而增强。     

外源性神经节苷脂GM_3对人肝癌细胞生长的抑制作用

为了解神经节苷脂（ＧＭ_３）是通过何种途径来调节细胞生长的。运用ＲＮＡ和蛋白质含量的测定及免疫组化法，结果发现：ＧＭ_３（１０ｍｇ／Ｌ）可明显抑制人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１细胞增殖，抑制率达到２８．８１％；同时能降低细胞内平均ＲＮＡ和蛋白质含量，以ＧＭ_３处理细胞３ｄ时最为明显。ＧＭ_３能使ｃ－ｆｏｓ蛋白量在短时间内剧增，ＧＭ_３处理３０ｍｉｎ时增加了２．８５倍；而ｃ－ｍｙｃ蛋白量在短时间内明显减少，ＧＭ_３处理４５ｍｉｎ时抑制率达到８１．３１％。以上结果提示ＣＭ_３抑制细胞增殖可能与抑制ＲＮＡ、蛋白质合成及影响某些癌蛋白的表达有关。     

扶正药物及其配伍的药物血清对SMMC-7721人肝癌细胞增殖的抑制作用

目的：探讨不同扶正药物及其配伍对肝癌细胞增殖的抑制作用。方法：选取临床治疗肝癌常用的益气、温阳、补肾、养阴等扶正治法的代表药物,并根据阴阳治则理论将其分别配伍为益气养阴、温阳养阴及补肾（阳）养阴等方剂分别煎成汤液,采取大鼠灌胃给药后分离药物血清,作用于体外培养的SMMC－7721人肝癌细胞,以正常大鼠血清和维甲酸作对照。用MTT法测定细胞增殖。结果：养阴组、益气养阴组的作用最为明显。结论：养阴药北沙参、麦门冬及其与益气、温阳、补肾配伍后的药物血清能显著地抑制SMMC－7721人肝癌细胞增殖,养阴与益气药配伍后具有明显的协同效应。     

柴胡提取物对人肝癌细胞和小鼠S-180肉瘤的抑制作用

目的 :研究柴胡水提物对体外培养的人肝癌 SMMC-772 1细胞线粒体代谢活性、细胞增殖及小鼠移植性 S-1 80实体瘤的影响。方法 :中药柴胡 ( BCDC)经粉碎、浸提、超速离心、减压浓缩、冷冻干燥得柴胡提取物。人肝癌 SMMC-772 1细胞经不同浓度柴胡提取物处理不同时间后 ,检测了各实验组和对照组细胞的有丝分裂指数、细胞增殖及线粒体活性几方面的变化。S-1 80肉瘤小鼠连续 9d腹腔注射 3 3 .3 mg/ kg体重 BCDC提取物 ,停药 1 5d后 ,杀死小鼠称量瘤重。结果 :1经 3 55mg/ L BCDC提取物处理人肝癌 SMMC-772 1细胞 2 4 h,其线粒体活性为对照组的 50 .2 6% ,处理 72 h为 2 4 .82 %。2以 3 55mg/ L BCDC提取物处理 7d中 ,人肝癌细胞数分别是血清对照组( FCS)的为 57.5% ,4 5.88% ,3 7.0 6% ,2 8.3 7% ,2 0 .90 % ,1 2 .89% ,1 4.1 8% ;无血清对照组 ( NON)的 65.0 9% ,62 .2 4 % ,56.99% ,4 9.0 8% ,4 0 .78% ,2 6.78% ,2 8.4 1 %。 3经 BCDC提取物处理 2 4 h后 ,即使更换正常培养基 ,人肝癌细胞数在 96h的恢复培养中仍低于处理前的细胞数。 4有丝分裂指数实验组为 0 .3 0 ,对照组分别为 5.3和5.4 ( P<0 .0 0 1 )。 5BCDC提取物对小鼠 S-1 80实体瘤抑制率为 87.2 1 %。