P^21和PCNA在肝硬变组织中表达的研究

目的：探讨Ｐ２１、ＰＣＮＡ的相关关系及它们在肝硬变、肝细胞不典型增生（ＬＣＤ）、肝细胞癌（ＨＣＣ）形成中的作用。方法：运用Ｓ－Ｐ法对６０例单纯肝硬变（不伴癌）、３０例癌旁肝硬变及２７便ＨＣＣ的Ｐ２１、ＨＢｓＡｇ及ＰＣＮＡ表达情况进行实验研究。结果：癌旁肝硬变组织、单纯肝硬变组织、癌组织Ｐ２１阳性率分别为９０％、６８．３３％、６２．９６％,癌旁肝硬变与单纯肝硬变,癌旁肝硬变与癌组织之间判别有显著性意     

促凋亡基因bax在肝细胞癌的表达及其临床意义

目的：研究促凋亡基因bax在肝细胞癌（HCC）的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化SP方法，检测44例原发性肝细胞癌（包括其中22例肝癌伴肝硬化）、肝硬变20例和正常肝组织中bax蛋白的表达。结果：bax阳性率在HCC为2．27％（1／44）、肝硬变为30％（6／20）和10例正常肝组织为50％（6／20）和10例正常肝组织为50％（5／10）。结论：肝癌与肝硬化之间以及肝癌与正常肝组织间均有显著差别P＜0．05，bax参与细胞凋亡的调节作用。     

IGF—Ⅱ在肝硬变和肝癌组织的表达及其与LCD的相关性研究

目的：探讨ＩＧＦ－Ⅱ在肝硬变及肝细胞癌（ＨＣＣ）发生发展中的作用及其与不典型增生肝细胞（ＬＣＤ）的关系。方法：运用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法对５７例肝硬变,２９例ＨＣＣ癌旁组织及２１例ＨＣＣ进行实验研究。结果：ＬＣＤ在肝硬变及癌旁肝组织的发生率分别为５６．１％（３２／５７例）及６５．５％（１９／２９例）。ＩＧＦ－Ⅱ在５７例肝硬变组织、２９例癌旁肝组织及２１例ＨＣＣ中的阳性率分别为７１．９％（４１／５７例     

人体肝硬变肝细胞DNA含量的研究

利用自动化图象分析仪对４８例正常肝、重度慢性活动性肝炎、小结节性肝硬变、大结节及混合结节肝硬变、癌旁肝硬变的肝细胞ＤＮＡ含量进行测定分析，结果：①重度慢性活动性肝炎４Ｎ细胞及双核细胞比率下降；大结节及混合结节肝硬变２Ｎ比率增高；Ｓ期及双核细胞下降，显示细胞分化受抑制，可能与肝癌发生相关，②癌旁肝硬变２Ｎ／４Ｎ比率无明显改变，但≥５Ｎ细胞增高，双核细胞下降，ＤＮＡ直方图增宽，表明肝细胞分化受抑制且有向异倍体发展趋势，具有癌前病变性质，③小结节性肝硬变２Ｎ细胞比率显著下降，Ｓ期及双核细胞比率增高，为分化性代偿修复病变而与肝癌发生无关，肝细胞ＤＮＡ含量的定量分析对于了解肝硬变肝细胞的再生修复状态及患者预后评估将有重要的意义。     

增殖细胞核抗原在肝癌及癌旁组织中的表达

①目的探讨增生结节、肝硬变与肝癌之间的关系。②方法应用免疫组织化学方法检测了７０例肝癌及癌旁组织中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达。③结果肝癌组织中ＰＣＮＡ阳性表达明显高于癌旁组织（χ２＝６．６９，Ｐ＜０．０５）；在癌旁组织中，增生结节ＰＣＮＡ阳性表达显著高于肝硬变及正常肝组织（χ２＝８．４５，Ｐ＜０．０５），而后两者间ＰＣＮＡ表达差异无显著性（χ２＝０．００２，Ｐ＞０．０５）。④结论增生结节与肝硬变是两种不同性质的细胞群体。肝硬变仍为成熟的细胞，而增生结节可以持续增殖，甚至转变为癌。     

人肝细胞癌和癌旁组织中雄激素受体的定量检测

①目的了解肝癌病人癌与癌旁组织中雄激素受体（ＡＲ）的改变。②方法用葡聚糖包裹活性炭饱和吸附法（ＤＣＣ法）检测２１例肝细胞癌（ＨＣＣ）癌组织和癌旁组织中ＡＲ，并与７例男性肝硬变病人肝组织中的ＡＲ进行了比较。③结果癌组织中ＡＲ的含量显著高于癌旁组织（ｔ＝２．７９３，Ｐ＜０．０１）及硬变肝组织（ｔ＝２．３２３，Ｐ＜０．０５）。④结论ＡＲ的增加与肝细胞的恶变有关，从而为ＨＣＣ的内分泌治疗提供分子生物学依据。     

肝细胞肝癌组织中FN和PTEN基因表达水平及意义*

目的：研究FN和PTEN基因在肝细胞肝癌中的表达情况,探讨其在肝细胞肝癌发生发展中的作用及意义。方法：应用荧光实时定量PCR方法,检测84例肝细胞肝癌及癌旁组织中FN蛋白、PTEN蛋白、mRNA表达情况。分析FN和PTEN基因表达及肝细胞肝癌的关系。结果：FN蛋白主要定位于肝癌细胞外基质中。FN mRNA在肝细胞肝癌中的阳性率为79.76%,高于癌旁肝组织的阳性率9.52%,差异具有统计学意义（P<0.05）。PTEN蛋白明确定位于肝细胞胞质内。PTEN mRNA在肝细胞肝癌中的阳性率为38.09%,明显低于癌旁肝组织的阳性率100%,差异具有统计学意义（P<0.05）。FN在合并癌栓,淋巴结转移,AFP阳性,肿瘤数目多发的肝癌组织中的表达高,而在不同分化程度及不同肿瘤直径的肝癌组织中表达差异无统计学意义;PTEN在低分化肝癌细胞,合并癌栓,AFP阳性,淋巴结转移,肿瘤直径≥2cm的肝癌组织中表达较低,而在不同肿瘤数目的肝癌组织中表达无统计学意义,PTEN蛋白表达与HBsAg无关,与组织学分级及转移有关。结论：肝癌组织中FN mRNA的表达量高于癌旁组织,而肝癌组织中PTEN mRNA的表达量低于癌旁组织,FN和PTEN基因可能与肝细胞肝癌的发生发展有关,其可能在肝癌的发生发展、侵袭转移中起一定的促进或抑制作用。     

肝癌内分泌分化的免疫组织化学研究

本文应用嗜银染色和免疫组织化学方法对３４例原发性肝癌（肝细胞肝癌２８例，胆管细胞型肝癌６例）组织及癌旁组织中的内分泌细胞进行了研究；结果显示：内分泌细胞阳性率为１１．７６％（肝细胞肝癌３例，胆管细胞型肝癌１例）；在癌旁组织中也发现两例异位胃泌素阳性细胞。本文结果提示：①肝癌组织中存在内分泌细胞的分化；②癌旁组织中发现异位胃泌素阳性细胞的表达。     

原发性肝癌和癌旁组织中TTVDNA的原位杂交研究

目的：通过对肝癌组织、癌旁组织和肝炎组织中TTVDNA的分布情况分析,探讨TTV感染与原发性肝癌的发病关系。方法：选择符合全国诊断标准并感染乙型肝炎病毒的原发性肝癌病人的肝癌组织及癌旁组织和乙型肝炎肝组织切片各为87、87和39份。以地高辛标记物制备TTVDNA探针,原位杂交法检测组织切片中TTVDNA。结果：肝癌组织中浆型阳性率明显高于癌旁组织（P〈0．05）,但两者核型阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）;肝炎组织中浆型和核型阳性率与癌旁组织比较差异无统计学意义（P〉O．05,）。肝癌组织中浆型阳性率明显高于肝炎组织（P〈O．01）,相反,肝炎组织中核型阳性率明显高于肝癌组织（P〈O．01）;癌旁组织中浆型＋核型阳性率与肝炎组织比较差异无统计学意义（P〉0．05）;肝癌组织和癌旁组织浆型＋核型阳性率明显高于肝炎组织（P〈0．01）。结论：有3种可能：①TTV感染与原发性肝癌发生存在一定关系,TTV感染肝细胞后在肝炎期主要分布于肝细胞核内,当肝细胞发生癌变后,TTV主要分布向肝细胞浆内转移;②浆型TTV感染可能与乙型肝炎病毒协同而易发生癌变;③TTV亦仅仅是乙型肝炎病毒的伴随病毒。     

基质金属蛋白酶在肝细胞癌中的表达

目的：探讨基质金属蛋白酶－2（MMP－2），基质金属蛋白酶－9（MMP－9）在肝细胞癌中的表达及其与侵袭转移过程的表达关系，进一步了解肝细胞癌侵转移的发生机制。方法：连续喂养大鼠二乙基亚硝酸（DENA）14周，建立二乙基亚硝胺大鼠肝细胞癌模型，诱癌24周取其全肝脏组织，通过免疫组化SABC法，检验32只大鼠的肝细胞癌模型标本肝癌及癌旁肝组织MMP－2和MMP－9的表达，应用图表分析法进行定量分析MMP－2和MMP－9的变化。门静脉癌栓形成作为肝细胞侵袭转移标志，结合反映肝细胞癌侵袭转移性的病理指标进行统计学分析：结果：诱癌2周时，肝癌发生率为100％，免疫组织显示：癌及其癌旁肝组织均有MMP－2及MMP－9表达，MMP－2及MMP－9在肝癌组织的表达显著高于癌旁肝组织（P＜0．01）；肝细胞癌组织中MMP－2及MMP－9含量升高与肝细胞癌侵袭转移有关。肝癌组织中MMP－2和MMP－9含量高于相对应癌旁肝组织时，癌栓发生率分别为43％和47％，当癌组织中MMP－2及MMP－9含量低于癌旁肝组织时癌栓发生率均为0，结论：MMP－2及MMP－9与肝细胞侵袭转移性有关，肝细胞癌在有侵袭转移情况下，MMP－2及MMP－9在癌组织表达明显增高，预示可通过检测癌组织MMP－2及MMP－9表达水平帮助判断肝癌复发，转移风险，同时利用基质金属蛋白酶抑制剂下调MMP－2及MMP－9的表达，间接地抑制肿瘤生长。     

肝细胞不典型增生与肝硬化和HBV的关系

用组织学和免疫组化方法探讨116例肝组织中的肝细胞不典型增生(LCD)发生率和乙型肝炎病毒(HBV)抗原的表达情况.发现肝细胞癌(HCC)伴肝硬化的LCD发生率为21/30(70%),单纯肝硬化为2/10(20%),HCC不伴肝硬化1/12(8.33%),正常对照1/64(1.56%).试验组52例中有46例HBsAg阳性,其中24例有LCD(52.17%),而6例HBsAg阴性肝组织中无1例有LCD(P<0.05).52例中22例HBcAg阳性,其中14例有LCD(63.64%);30例HBcAg阴性,10例有LCD(33.33%),前者LCD发生率明显高于后者(P<0.05).结果还发现,HBsAg和HBcAg阳性肝硬化的LCD发生率(65.71%,77.78%)明显高于HBsAg和HBcAg阴性的肝硬化及HBsAg、HBcAg阳性的非肝硬化病例(P<0.01,P<0.05).表明LCD的发生与肝硬化和HBV都有关.     

原发性肝癌合并门静脉癌栓的临床分析

目的探讨原发性肝癌门静脉癌栓(PVTT)形成的相关因素。方法回顾分析原发性肝癌243例,64排螺旋CT检查PVTT,总结PVTT与肝癌大体类型、肝硬化基础的相关性。结果 243例肝癌病例中合并门静脉癌栓98例,有肝硬化基础者PVTT发生率显著高于无肝硬化基础者;癌栓类型和肝癌大体类型及肿瘤中心位置无明显相关性。结论有肝硬化基础的原发性肝癌患者易形成门静脉癌栓。     

肝癌组织中巨噬细胞和自然杀伤细胞的免疫组化研究

目的：探讨巨噬细胞（MФ）、肝自然杀伤（NK）细胞在原发性肝细胞癌（HCC）及肝硬化组织中的数量、分布规律及其与患者预后的关系，为HCC患者临床预测提供新思路。方法：应用免疫组化S-P法检测60例HCC，62例单纯性肝硬化，23例正常肝组织MФ标记物CD68和NK细胞标记物CD57的表达，并分析阳性细胞数量与临床各参数的关系。结果：①各组MФ平均数从高到低为依次为癌旁组织、肝硬化、正常肝、HCC（P〈0．05）；NK细胞平均数从高到低依次为HCC、癌旁组织、正常肝、肝硬化（P〈0．05）。②HCC中MФ细胞数量随分化程度降低而减少（P〈0．05）；NK细胞数量与组织学分级无明显关系。③HCC和癌旁组织中MФ细胞分布与临床TNM分期无关；HCC中NK细胞随着临床分期的发展有下降的趋势（P〈0．05）。④癌组织中15个月内有转移组的MФ细胞数少于无转移组（P〈0．05）；15个月内转移复发组癌和癌旁组织的NK细胞计数均明显少于无转移复发组（P〈0．01）。⑤在癌组织中MФ、NK细胞数呈线性正相关（r=0．344，P〈0．05）。结论：有转移瘤发生的HCC患者MФ和NK细胞数量明显少于无转移组；MФ数量与HCC分化程度密切相关；MФ和NK细胞计数可能是反映机体抗肿瘤免疫状态和生物学行为以及判断患者预后的重要指标。     

外周血GPC3与PEG10mRNA检测对肝细胞癌转移的诊断价值

目的研究外周血磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）与遗传印迹基因（PEG10）mRNA检测对肝细胞癌（HCC）转移的诊断价值。方法30例HCC患者分为HCC转移组（n=18）和HCC未转移组（n=12）,另选取11例肝硬化患者作为对照。以SYBR Green I作为荧光信号,采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQRT—PCR）检测三组患者外周血GPC-3 mRNA和PEG10 mRNA表达,应用ROC曲线和诊断性能专用指标评价两者预测诊断及排除诊断的价值。结果HCC转移组GPC-3mRNA和PEG10 mRNA表达显著高于HCC未转移组和肝硬化组（P〈0．05）;HCC未转移组与肝硬化组GPC-3 mRNA和PEG10 mRNA的表达比较差异无统计学意义。单项检测GPC-3 mRNA和PEG10 mRNA的诊断灵敏度分别为66．7％和72．2％,特异度均为91．7％,ROC曲线下面积（AUC）为0．748和0．812;两基因检测平行试验的灵敏度为90．7％,特异度为84．0％,阴性似然比为0．11,诊断准确率为83．3％;系列试验的灵敏度为60．5％,特异度为98．7％,阳性似然比为45．5,诊断准确率为73．3％。结论检测外周血GPC-3 mRNA和PEG10 mRNA对估计肝癌有无血行播散和肝外转移有一定的价值,且PEG10 mRNA优于GPC-3 mRNA。两者联合系列试验有助于HCC外周血转移的预测诊断。     

肝细胞癌中VEGF,HPA的表达与肿瘤微血管密度的关系及意义

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF),乙酰肝素酶(HPA)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达与肿瘤微血管密度(MVD)的关系及其意义。方法:应用免疫组织化学二步法联合检测72例HCC,62例肝硬化和23例正常肝组织中VEGF,HPA的表达和进行MVD计数,结合临床病理资料进行分析。结果: HCC中VEGF,HPA的表达率均明显高于肝硬化及正常肝,HCC中MVD值也显著高于肝硬化及正常肝。VEGF,HPA的表达率在TNMⅠⅡ期、无转移复发组、AFP<400μg/L组、无门脉癌栓组均明显低于ⅢⅣ期、转移复发组、AFP≥400μg/L组、有门脉癌栓组。在TNMⅠⅡ期、无转移复发组、AFP<400μg/L组、无门脉癌栓、单个肿瘤结节以及肿瘤直径<5cm组MVD计数亦明显低于ⅢⅣ期、转移复发组、AFP≥400μg/L组、有门脉癌栓、多个肿瘤结节以及肿瘤直径≥5cm组。VEGF,HPA的表达率与MVD值三者两两之间显示明显正相关。结论: VEGF,HPA在促进肿瘤微血管生成中起重要的作用,联合检测VEGF,HPA,CD34在肝癌中的表达,对肝癌患者的预后评估有一定的辅助意义。     

p53, p73, nm23-H1基因在肝细胞肝癌中的表达与临床病理的关系

目的：研究p53,p73,nm23-H1基因在肝细胞肝癌中的表达与临床病理学关系。方法：应用免疫组织化学方法（SABC法）研究18例正常肝、12例肝硬化、78例肝细胞肝癌的p53,p73,nm23-H1基因的表达情况。结果：18例正常肝，12例肝硬化中p53和p73基因表达阴性和弱阳性；p53,p73,nm23-H1基因在肝细胞肝癌中表达率分别为55．13％，52．56％，66．66％；p53的表达在不同的临床分期、 病理学分级、有无转移和是否乙型肝炎之间差异有显著性意义（P＜0．05或P＜0．01），而与AFP含量间无显著意义；p73基因表达与病理学分级，是否乙型肝炎和有无肝内或门静脉转移之间差异显著（P＜0．01），与临床分期、AFP含量间无显著意义；nm23-H1的表达与临床分期、AFP含量间有显著性意义（P＜0．05），和肝内或门静脉转移呈负相关（P＜0．01），而与病理学分级、是否乙型肝炎无差异性。结论：p53,p73和nm23-H1可作为肝细胞肝癌发生、发展和预后的主要参考指标之一。     

组织芯片检测肝细胞肝癌中ARF6蛋白的表达及临床意义

目的:探讨二磷酸腺苷核糖基化因子6(ADP-ribosylation factor 6,ARF6)在肝细胞肝癌(简称肝癌)组织中的表达及临床意义?方法:收集肝癌手术切除标本150例,以癌旁肝硬化组织作对照,制作组织芯片,用组织芯片技术结合免疫组化法,检测肝癌组织和癌旁肝硬化组织ARF6的表达,探讨ARF6表达与临床病理特征及预后之间的关系?结果:肝癌组织中ARF6的阳性表达率为48.7%(73/150),在癌旁肝硬化组织中ARF6的阳性表达率为8.3%(4/48),两者比较差异有统计学意义(P < 0.05)?肝癌组织中ARF6阳性表达与门静脉癌栓?临床分期?肿瘤直径及甲胎蛋白(AFP)水平相关(P < 0.05)?ARF6表达阴性的肝癌患者在肝切除术后的无瘤中位存活时间为45个月,1?3?5年无瘤生存率分别为(93.22 ± 7.93)%?(58.91 ± 6.18)%?(24.59 ± 6.80)%;ARF6表达阳性患者的无瘤中位存活时间为36个月,1?3?5年无瘤生存率分别为(88.91 ± 3.70)%?(41.61 ± 5.93)%?(19.03 ± 4.94)%?ARF6表达阴性与表达阳性的肝癌患者的无瘤生存时间差异有统计学意义(P = 0.019 1)?结论:肝癌组织中ARF6的表达与预后密切相关,ARF6不仅可作为肝癌预后不良的判断指标,还有望成为一种新的肝癌预后判断的标志物和潜在的治疗靶标?     

The comparative study on ultrastructure and immunohistochemistry in AFP negative and positive hepatocellular carcinoma.

Summary: To comparatively investigate ultrastructural characteristics and expressions of AFP (alpha-fetoprotein) and Tn (Thomsen-Friedenreich-related antigen) protein in AFP negative (AFP-) and AFP positive (AFP+) primary hepatocellular carcinoma. Fourty-three cases of AFP- and AFP+ hepatocellular carcinoma (HCC) tissues and five cases of normal liver tissues were divided into three groups: control group (normal liver tissue, n=5); AFP+ HCC group (the serum AFP level was higher than 10 ng/ml, n = 22); AFP- HCC group (the serum AFP level was lower than 10 ng/ml, n=21). The ultrastructural morphology was studied by transmission electron microscopy, the expressions of AFP and Tn protein were detected by immunohistochemistry and cell image analysis. 1. The immunohistochemical study showed that (1) the expression intensity and positive rate of Tn protein in AFP- HCC group were markedly higher than that in AFP+ HCC group (P<0.01); (2) The expression intensity of AFP in AFP- HCC group was lower than that in AFP+ HCC group (P<0.01). 2. The transmission electron microscopy demonstrated that some AFP- HCC cells linked closely with each other, others dispersed loosely just as cultured cells, the remarkable morphologic features in AFP- HCC cells were simple organelles, but they were abundant in the free polyribosomes. In AFP+ HCC group, all the HCC cells linked closely together and were rich organelles in their cytoplasm, especially the rough endoplasmic reticula. In addition, mitochondria and Golgi complex were obviously observed. (1) The AFP and Tn protein had discrepancy distribution in AFP- and AFP+ HCC tissues, Tn protein may be one of the early diagnostic indicators in AFP- HCC; (2) The synthetic locations of the AFP and Tn protein were different in hepatocarcinoma cells by ultrastructural observation.     

The comparative study on ultrastructure and immunohistochemistry in AFP negative and positive hepatocellular carcinoma

AFP,asasensitiveandspecificbiochemicalmarkerintheprimaryhepatocellularcarcinoma,playsanimportantroleingeneralsurvey,earlierdiagnosisanddeterminationofthetreatingeffectofhepatocellularcarcinoma(HCC).SerumAFPlevelofmostHCCincreased,bywhichthediagnosisrateof…     

RELATIONSHJP OF HEPATOCE.LLULAR CARCINOMA, LIVER CIRRHOSIS, AND HEPATITIS B VIRUS A PATHOLOGIC STUDY OF l,069 AUTOPSY CASES IN DIFFERENT AREAS OF CHINA

A total of l,069 autopsy cases, including 500 0f hepatocellular carcinoma (HCC), 334 0f liver cirr- hosis (LC), and 235 0f other conditions (controls) were selected from 28,342 aLttopsies in different areas of China and investigated retrospectively. Orcein stain was the main ruethod for demonstrating intra- cellular hepatitis B surface antigen (HBsAg) in order to study the relationship between HCC, LC, and hepatitis B virus (HBV) infection. Of the HCC cases, 84.6'70 were associated with LC; 55.9To of the LC cases had HCC. The frequency of HCC in ma- cronodular cirrhosis was 73.8%, strongly indicating the close relationship between the two conditions. The positive rates of IABsAg were 80.2To in HCC, 67.7To in LC, and 4.770 in controls. These suggest that HbsAg was closely related to HCC with back- ground of chronic liver diseases, and liver cell dys- plasia was frequently present in HBsAg positive cases. HBV infection leading to liver cell damage and proliferation especially dysplasia may be the pathologic basis of HCC development. HBV is con sidered an important etiologic factor of HCC.