F-BOX蛋白家族在生殖领域的研究进展

由于卵母细胞中转录水平的改变不显著，因此翻译后修饰如泛素-蛋白酶系统（UPS）可能起到重要的调控作用。其核心成员F-BOX在UPS中负责特异性识别底物，以帮助泛素系统泛素化并降解目的蛋白。F-BOX蛋白广泛存在于生殖细胞及胚胎中，但对其底物功能的研究却十分缺乏。有研究报道，F-BOX蛋白通过对上皮细胞间质转化（EMT）、细胞信号转导及细胞增殖与凋亡中的关键蛋白进行泛素化，参与到卵母细胞的发育和成熟、卵母细胞-胚胎转化（OET）及早期胚胎发育的进程中，其还可以调控体内雌孕激素的水平。本文通过介绍F-BOX在UPS中的作用，综述其在卵母细胞、OET和胚胎发生发展中的生物学作用，及其对雌孕激素水平的调控，以期F-BOX可以作为潜在的干预靶点，为人类生殖健康和计划生育的研究提供新的思路。     

卵母细胞成熟过程MPF的调控和MPF的作用底物

系统综述卵母细胞成熟过程中成熟促进因子的调控及其作用底物。研究表明，卵母细胞成熟过程中，成熟促进因子的活性受Cdc25、Myt1和Wee1蛋白以及泛素信号途径的调控，而成熟促进因子本身又可作用于下游的信号分子，如Aurora A蛋白、核纤层蛋白和组蛋白等，来发挥其在成熟过程中的中心调控作用。     

泛素-蛋白酶体系统与冠心病

泛素-蛋白酶体系统(UPS)是细胞内除溶酶体外重要的降解系统,也是真核生物细胞内主要的降解系统,UPS不仅是一种清除损伤或陈旧蛋白质的重要机制之一,而且还参与调节炎症、信号转导、转录调控和细胞凋亡等各种细胞生物学功能[1-3]。近年研究表明UPS可调节动脉粥样硬化、缺血后再灌注损伤、心脏衰竭等的发生和发展,且动物试验表明蛋白酶体抑制剂对冠心病可能有效,因而UPS可能成为冠心病诊断、监测和治疗的重要靶点之一。1 UPS的组成和功能UPS系统主要由泛素(Ub)、泛素活化酶(E1)、泛素结合酶(E2 s)、泛素-蛋白连接酶(E3 s)、26S蛋白…     

Kiss-1基因与胚胎种植和发育的关系

目的:通过体外实验研究雌激素、孕激素对人绒毛膜癌细胞株BeWo中Kiss-1 mRNA表达的调节,探讨其在胚胎种植和发育中的作用。方法:体外培养BeWo细胞,采用不同浓度的雌激素和孕激素作用48h后,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定各种条件下Kiss-1 mRNA的表达水平。结果:低浓度雌激素(10-9M,10-8M)可促进Kiss-1 mRNA的表达,而高浓度雌激素(10-7M)作用恰好相反(P<0.05);不同浓度的孕激素均促进Kiss-1 mRNA的表达,但随着浓度的升高,Kiss-1 mRNA的表达逐渐下降(除10-7M和10-6M组间无差异外,余各组间均为P<0.05)。结论:(1)雌、孕激素均对BeWo细胞中Kiss-1基因的表达有调控作用;(2)较低浓度的雌、孕激素均上调Kiss-1基因的表达;(3)较高浓度的雌激素下调Kiss-1基因的表达,而较高浓度的孕激素则上调Kiss-1基因的表达;(4)Kiss-1基因可能在妊娠胎盘形成和种植过程中起着重要的作用。     

子宫接受性基因调控的研究

胚胎着床是一个复杂的过程,涉及到着床胚泡和雌孕激素主导的子宫的分子相互作用.由于基因剔除技术的应用,有些基因被发现在胚胎着床过程中发挥重要作用.本文主要就发育调控基因-同源框基因在着床过程中的作用加以讨论,并进一步提出胚胎着床通路的基因调控的模式.     

骨形态发生蛋白15基因与人类卵母细胞及卵泡发育

骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein,BMP-15)是卵母细胞分泌的生长因子,属于转化生长因子β(TGF-β)超家族,对卵泡发育、卵泡细胞增殖和分化有重要作用.人卵母细胞的发育是一个多阶段复杂的生理过程,其经历一系列形态学、生物化学和生理学变化都需要一系列基因的精确表达调控.探讨BMP-15基因在人卵母细胞及卵泡发育中的作用及可能的调控机制,可以对人类卵母细胞发育调控有新的认识,还将从分子水平为卵泡发育障碍疾病的治疗提供新思路.     

骨形态发生蛋白15基因与人类卵母细胞及卵泡发育

骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein,BMP-15)是卵母细胞分泌的生长因子,属于转化生长因子β(TGF-β)超家族,对卵泡发育、卵泡细胞增殖和分化有重要作用。人卵母细胞的发育是一个多阶段复杂的生理过程,其经历一系列形态学、生物化学和生理学变化都需要一系列基因的精确表达调控。探讨BMP-15基因在人卵母细胞及卵泡发育中的作用及可能的调控机制,可以对人类卵母细胞发育调控有新的认识,还将从分子水平为卵泡发育障碍疾病的治疗提供新思路。     

PNGase在泛素-蛋白酶体系统和ERAD中的作用和意义

蛋白质代谢的内环境稳定是肿瘤细胞能够存活的关键生物学过程。泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasomesystem,UPS)在细胞蛋白包括细胞周期调控蛋白的降解过程中起着极其重要的作用。因此,这一过程是所有细胞尤其是癌细胞增殖和存活的关键[1]。近年来的研究发现,一种多肽———N-寡糖酶(Peptide:N-glycanase,简称PNGase)与泛素-蛋白酶体途径高度偶联,在蛋白酶体降解细胞蛋白质的过程中发挥着重要的作用,并且已经越来越成为国外学者研究的热点。本文就PNGase参与细胞内蛋白降解机制及PNGase潜在的医学意义进行综述。1蛋白质代谢的泛素…     

卵母细胞减数分裂的调控机制研究进展

卵母细胞减数分裂过程中存在三个关键调控点:第一次减数分裂前期、第一次减数分裂中/后期、第二次减数分裂中期.G蛋白耦联受体介导的信号通路和受体酪氨酸激酶-Ras蛋白信号通路中关键蛋白的合成及其磷酸化状态的改变与卵母细胞的成熟过程密切相关.性成熟后,在黄体生成激素及其他内分泌、自分泌/旁分泌因子作用下,G2期卵母细胞内环磷酸腺苷水平下降,激活成熟促进因子,减数分裂启动;此后,在细胞静止因子、后期促进复合物、蛋白激酶C、蛋白激酶B等蛋白因子以及钙离子/钙调蛋白依赖的信号途径、泛素-蛋白酶体途径、Mos/MAPK信号途径等信号通路的调控作用下,完成减数分裂.对卵母细胞成熟调控分子机制的研究取得极大进展,但某些具体调节机制还有待进一步探索.     

卵母细胞减数分裂的调控机制研究进展

卵母细胞减数分裂过程中存在三个关键调控点:第一次减数分裂前期、第一次减数分裂中/后期、第二次减数分裂中期。G蛋白耦联受体介导的信号通路和受体酪氨酸激酶-Ras蛋白信号通路中关键蛋白的合成及其磷酸化状态的改变与卵母细胞的成熟过程密切相关。性成熟后,在黄体生成激素及其他内分泌、自分泌/旁分泌因子作用下,G2期卵母细胞内环磷酸腺苷水平下降,激活成熟促进因子,减数分裂启动;此后,在细胞静止因子、后期促进复合物、蛋白激酶C、蛋白激酶B等蛋白因子以及钙离子/钙调蛋白依赖的信号途径、泛素-蛋白酶体途径、Mos/MAPK信号途径等信号通路的调控作用下,完成减数分裂。对卵母细胞成熟调控分子机制的研究取得极大进展,但某些具体调节机制还有待进一步探索。     

子宫接受性基因调控的研究

胚胎着床是一个复杂的过程,涉及到着床胚泡和雌孕激素主导的子宫的分子相互作用。由于基因剔除技术的应用,有些基因被发现在胚胎着床过程中发挥重要作用。本文主要就发育调控基因—同源框基因在着床过程中的作用加以讨论,并进一步提出胚胎着床通路的基因调控的模式。     

子宫接受性基因调控的研究

胚胎着床是一个复杂的过程，涉及到着床胚泡和雌孕激素主导的子宫的分子相互作用。由于基因剔除技术的应用，有些基因被发现在胚胎着床过程中发挥重要作用。本文主要就发育调控基因－同源框基因在着床过程中的作用加以讨论，并进一步提出胚胎着床通路的基因调控的模式。     

子宫内膜癌60例p53蛋白与雌、孕激素受体表达水平及诊断价值分析

目的探究p53蛋白及雌、孕激素受体表达水平在子宫内膜癌诊断中的价值。方法选取该院2014年6月-2017年1月收治的60例子宫内膜癌患者作为研究组,其中病理分期:早期组41例,进展组19例;肌层浸润程度:未出现浸润定为A组(28例),浸润1/2定为B组(20例),浸润1/2定为C组(12例)。另选健康女性60例作为对照组。采用免疫组化SP法检测p53蛋白、雌激素受体与孕激素受体表达水平,对比分析p53蛋白、雌激素受体与孕激素受体表达水平在子宫内膜癌诊断中的价值。结果子宫内膜癌患者p53蛋白表达水平高于健康人群(P0.05),雌、孕激素受体表达水平均低于健康人群(均P0.05);研究组中,早期组p53蛋白表达水平与进展组比较,差异无统计学意义(P0.05),早期组雌、孕激素受体表达水平均高于进展组(均P0.05);研究组中,C组p53蛋白表达水平高于A组(P0.05),C组雌、孕激素受体表达水平均低于A组(均P0.05),B组雌激素受体阳性表达水平低于A组(P0.05),C组雌、孕激素受体表达水平均低于B组(均P0.05);研究组中,已发生淋巴转移患者子宫内膜p53蛋白表达水平高于未发生淋巴转移患者(P0.05),已发生淋巴转移患者子宫内膜孕激素受体阳性表达水平低于未发生淋巴转移患者(P0.05),已发生淋巴转移患者子宫内膜雌激素受体阳性表达水平与未发生淋巴转移患者比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 p53蛋白及雌、孕激素受体表达水平在子宫内膜癌生物学方面灵敏度较高,对子宫内膜癌的临床诊断与治疗有重要意义。     

激素对女性生殖道组织Hox基因表达的调控

同源框基因(Homeobox gene,Hox gene)是胚胎发育过程中编码对尿殖管、外生殖管分化发育有重要意义的一系列转录因子.该轴打开的时间及模式可决定副中肾管的发育过程,而激素是Hox基因正常的表达调控者.雌、孕激素及其受体可直接与Hox基因中雌激素受体和孕激素受体结合位点结合而调控Hox基因的表达;此外,孕激素还对内膜腺上皮Hox基因通过间质细胞介导起负调控作用;雄激素可通过雄激素受体介导机制调节Hox基因的表达;维生素D则通过与受体蛋白结合DNA结合蛋白在蛋白基因水平上起作用.     

米托蒽醌抑制USP11促进BACE1降解延缓阿尔茨海默病发展的实验研究

目的 探讨米托蒽醌(Mitoxantrone, MTX)抑制USP11促进BACE1降解,从而延缓阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)发展的作用机制。方法 构建USP11-siRNA-H4细胞株,Westen blot检测USP11、β-分泌酶(BACE1)等的表达水平;免疫共沉淀和蛋白质泛素化实验探究USP11和BACE1蛋白之间的泛素化调控作用。以米托蒽醌(MTX)腹腔注射AD小鼠,水迷宫实验观其空间记忆能力,利用Westen blot与ELISA分别检测小鼠脑组织中USP11、BACE1与Aβ_1-40表达水平。结果 USP11-siRNA-H4细胞中USP11、 BACE1的表达水平分别为(0.300±0.114)、(0.267±0.125),均低于NT siRNA组,差异有统计学意义(P<0.01)。USP11与BACE1之间存在相互作用且可对BACE1去泛素化。MTX处理后,AD小鼠记忆能力提高,且下调USP11、BACE1及Aβ_1-40的表达。结论 米托蒽醌通过抑制USP11促进BACE1泛素化与降...     

IVF中拮抗剂方案促排联合GnRH-a扳机后的黄体支持

正自然周期中,黄体生成素(LH)峰触发排卵并促进黄体形成,由此卵泡期进入黄体期。黄体期,垂体脉冲式分泌LH刺激雌、孕激素的释放。胚胎着床后,胚胎开始逐渐释放人绒毛膜促性腺激素(hCG)进入母体循环,hCG结构及生化作用与LH相似,两者共同维持黄体功能。直到妊娠7周左右,由胎盘代替黄体继续分泌雌、孕激素维持妊娠过程。体外受精-胚胎移植(IVF-ET)黄体期与自然周期大不相同。IVF周期中黄体功能不全,其原因可能为:1     

吲哚美辛对癌性恶病质小鼠肌肉泛素-蛋白质酶途径的影响

目的:研究泛素-蛋白质酶途径在癌性恶病质小鼠骨骼肌中的表达以及吲哚美辛(IND)对其的调控作用. 方法:利用鼠结肠癌26细胞株皮下接种BALB/c小鼠,建立癌性恶病质模型.将30只BALB/c小鼠随机分为五组:对照组、荷瘤 等渗盐水组、荷瘤 IND 0.25 mg/(kg·d)组、荷瘤 IND 0.5 mg/(kg·d )组、荷瘤 IND 2.0 mg/(kg·d)组.监测各组小鼠去瘤体重和腓肠肌重量;测量血清TNF-α和IL-6水平,体外腓肠肌肌蛋白降解速率以及泛素-蛋白质酶途径组分mRNA表达. 结果:恶病质小鼠去瘤体重和腓肠肌重量明显下降(P< 0.01),血清TNF-α和IL-6水平明显升高(P< 0.01),腓肠肌蛋白质降解速率以及泛素蛋白质酶组分mRNA表达,均明显升高(P< 0.01).IND 0.5 mg/(kg·d)可以明显缓解恶病质小鼠腓肠肌重量的下降(P< 0.01),降低血清TNF-α(P< 0.05)和IL-6水平(P< 0.01),抑制体外腓肠肌蛋白的降解以及泛素蛋白质酶组分mRNA表达(P<0.01). 结论:泛素-蛋白质酶途径在癌性恶病质的骨骼肌消耗中起重要作用,它受炎性细胞因子调控.适当剂量的IND可能通过减少炎性细胞因子产生,抑制泛素-蛋白质酶途径的激活,缓解肌蛋白的降解.     

小鼠卵母细胞孤雌激活研究

孤雌激活技术通过人工刺激模拟受精过程,使卵母细胞在无精子条件下被激活,即无雄性配子的任何作用,由雌性配子产生胚胎,不论其是否发育成个体,均称为孤雌激活(或孤雌生殖)[1].孤雌激活与精卵结合的胚胎具有相同的全能性和增殖性[2],不但为实验研究提供可替代资源,分析研究精卵配子相互作用、胚胎初始发育机制,更好地了解精卵结合过程中卵母细胞内信号偶联过程激活动力学、细胞周期阻滞的恢复等生理机制[3];而且成熟卵母细胞的体外激活是核移植重构胚活化的必要条件[4];此技术也是建立胚胎干细胞系的一项重要技术[5],可用于基因治疗、器官移植、组织修复、疾病治疗等医学领域.     

雌孕激素对STAT3在小鼠子宫内膜表达的调控

目的:探讨雌、孕激素对STAT3在小鼠子宫内膜表达的影响。方法:将小鼠卵巢切除,随机分为对照组(腹腔注射油)、E2组(腹腔注射苯甲酸雌二醇)、P组(腹腔注射黄体酮)和E2+P组(腹腔注射苯甲酸雌二醇和黄体酮)。用RT-PCR方法检测STAT3 mRNA在各组小鼠子宫内膜的表达。同时用免疫组化方法检测STAT3和磷酸化STAT3蛋白在各组小鼠子宫内膜的表达。结果:STAT3 mRNA在E2组和E2+P组有明显的表达,而在P组和对照组无表达。STAT3蛋白在E2组和E2+P组有明显的表达,而在P组和对照组无表达。P-STAT3蛋白在E2组有强表达;在P组和E2+P组也有明显的阳性表达;而在对照组则无表达。结论:在小鼠子宫内膜,雌激素促进STAT3 mRNA和蛋白的表达;孕激素无促进STAT3 mRNA和蛋白表达的作用,但可以促进STAT3的磷酸化。在胚胎种植的过程中,STAT3的表达和活化受到雌、孕激素的调控。     

生长分化因子9对卵巢功能的影响和调控

生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF-9)是转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)超家族的新成员。作为卵母细胞分泌的因子,GDF-9在女性生殖功能中的作用近年得到广泛讨论。研究发现GDF-9可参与调节颗粒细胞分化发育,相关功能蛋白、因子产生,生殖系统相关基因表达以及卵巢细胞代谢、凋亡等过程,从而在卵巢卵泡生长及卵母细胞成熟、排卵和黄素化等方面发挥重要作用。骨形态发生蛋白15(BMP-15)是一种与GDF-9具有高度氨基酸同源性和相似蛋白结构的卵母细胞源性因子,研究发现GDF-9可与BMP-15形成异源二聚体并发挥协同作用。目前认为,GDF-9是卵母细胞与颗粒细胞完成双向通讯重要的影响因子,参与两种细胞的同步化通讯和协调生长过程,其异常表达可能与女性生殖内分泌失调及随之引发的不孕存在一定关系。本文从GDF-9对卵母细胞发育的影响及在卵泡形成过程中的调控等方面,对其影响和调节卵巢功能的作用进行综述。