毫米波辐照对小鼠腺垂体,睾丸和肾上腺皮质超微结构的影响

本实验用频率36.11GHz,功率密度为5mW/cm~2的毫米波,每天30分钟,连续5天照射小鼠背部,于照后1、3、5、7天时处死,观察腺垂体、肾上腺和睾九的超微结构变化。结果发现照射后腺垂体部分促生长激素细胞、促性腺激素细胞出现一定程度的退行性变化,后期有分裂刺激现象。睾丸生精上皮细胞有一定程度的损伤性变化,少数细胞还见有凝固性坏死。睾丸支持细胞、间质细胞和肾上腺皮质细胞仅见轻微变化。上述结果证明低功率密度毫米波辐射对小鼠内分泌系统有一定程度的生物学效应。     

毫米波辐射对植入前小鼠胚胎及早期胚胎的影响

本文报道小鼠受精卵体外及在体受毫米波辐照后一些改变。毫米波源为36.11GHz固态微波连续发生器,波长8mm,功率密度为10mW/cm~2、8mW/cm~2、4mW/cm~2及2mW/cm~2。结果发现2-4mW/cm~2毫米波辐照即可使体外培养之受精卵细胞表面微绒毛减少、脱落,细胞表面形成许多囊泡。透射电镜下可见细胞间隙扩大、胞浆中线粒体膨胀、空化,用FITC-ConA试验可见细胞表面结合荧光减少。酶试验证明辐照后卵胚细胞表面AKP,ATPase,5′-Nase均有降低。在体受精卵细胞经辐射后证明,辐射可使胎儿体重增长减慢,囊胚形成数量下降,植入率降低,而表面酶下降不明显。     

毫米波辐照对小鼠植入后胚胎发育的影响：：Ⅰ.足孕期畸形学评价

本文采用频率36.11GHz,功率密度为7.2mW/cm~2的毫米波,在小鼠怀孕6—15天时进行2小时/天的照射,在孕期终了(18天)用足孕期畸形学指标进行分析。结果发现,足孕期孕鼠体重、孕鼠体重增加数、平均孕鼠体重变化百分率,孕鼠脑、肝、肾,卵巢等脏器重量及脏器/体重比值,活胎数、吸收数、死胎数、总植入数,平均胎鼠体重、胎盘重、胎鼠身长、尾长、性别比等指标无明显变化;亦未导致胎鼠外表、内脏发生畸形,或骨骼畸形增多。孕鼠主要脏器组织形态学检查无明显改变。     

微波辐照对小鼠脑内MDA、DA和NE含量及NOS活性的影响

近年来,微波辐照对人体健康的影响越来越受到医学界的关注。有研究表明2450MHz微波具有较强的生物学效应,为探讨短促但持续多天的微波辐照对机体的损伤机制,我们分别选用了频率2450、900、450和45MHz,功率密度100mW／cm^2的微波,每日3次,每次1．5s,连续照射小鼠90d,观察了这些条件下微波辐照对小鼠脑内多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、丙二醛(MDA)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性的影响。     

毫米波辐照对小鼠植入后胚胎发育的影响：Ⅱ：生后精神生理学分析

本文用频率36.11GHz,功率密度为7.2mW/cm~2的毫米波,在小鼠怀孕6—15天时进行2小时/天的照射,用生后精神生理学指标进行分析。结果发现,未见导致胎仔生后耳廓张开、睁眼、睾丸下降、阴唇张开等生理指标的改变,也未使表面翻正、姿态纠正、听觉惊愕等早期反射指标发生变化,成熟仔鼠的游泳耐力亦未受明显影响。但可导致出生三天内的脍仔体重降低,一周后照射组胎仔体重与对照组无明显差别。毫米波辐射可导致成熟后仔鼠的学习及记忆能力降低,表现在Y型电迷宫条件反射实验中,需要较对照组鼠更多训练次数和错误次数才能达到规定标准。实验证明,低功率密度毫米波照射植入后期胚胎可引起仔鼠精细的精神生理学方面的改变。     

微波局部照射小鼠睾丸对精子染色体的影响

精细胞是男性遗传物质代代相传的唯一联系，了解微波辐射对生精细胞遗传物质的影响，将有益于微波的应用和防护。本实验应用２４５０ＭＨ：微波局部照射ＢＡＬＢ／ｃ小鼠睾丸，在睾九内温度达４１±０．５℃后维持１５分钟。对动物分别照射１或３次，于东次照射后二个月观察精子单倍染色体。结果显示，精子染色体的改变主要为非整倍体的增加，但和对照间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）．该结果说明，一定剂量的微波照射，对生殖细胞的遗传物质无显著的远后效应。     

CSN6对人乳腺癌细胞增殖的影响

目的观察COP9信号复合体(COP9 signalosome,CSN)6号亚单位(CSN6)对乳腺癌细胞(MCF-7)增殖的影响。方法应用Western blot检测CSN6和PTEN蛋白表达,MTT法及划痕损伤实验检测转染CSN6及磷酸酶基因(PTEN)质粒的细胞增殖生长的情况。结果 MCF-7细胞转染shRNA-CSN6,在CSN6蛋白表达降低的同时,PTEN的表达增高。乳腺癌细胞MDA-MB-468细胞在转染PTEN后,其增殖受到抑制,而转染CSN6后,能够逆转PTEN的抑制作用,促进细胞生长。结论 CSN6有可能通过降解PTEN而引起乳腺癌细胞的增殖生长。     

微波局部照射小鼠睾丸对睾丸、附睾及精子的形态学影响

微波作为环境污染物,其对人类的危害已逐渐受到人们的重视,尤其生殖细胞,不但对微波敏感,而且在人类遗传学中占有独特的地位。本实验应用2450MHz微波局部照射BALB/c小鼠睾丸,于照后不同时间观察睾丸、附睾和精子的形态学改变。结果表明,微波可引起各级生精细胞以浊肿为主的病理学改变,并存在不均一性、持久性、不同的细胞具有不同的敏感性等特点。精子的形态学改变表现为大头畸形增多(P<0.05～0.01),超微结构观察到了一些光镜下难以发现的畸形学表现。一定量的微波对生殖细胞的影响是明确存在的,故对微波的损害应给予积极的防护。     

物理辐照对液体粘度影响的研究

本文用自来水和蒸馏水作为研究对象,使用临床上用于治疗的几种物理辐射源对样品进行处理,用奥氏特瓦尔德粘度计测量其粘度的改变.结果发现有的样品经照射后粘度有明显的改变.     

1～6 GHz多频复合微波辐射对小鼠焦虑样行为的影响

目的:研究不同功率密度的1～6 GHz多频复合微波辐射对小鼠焦虑样行为的影响，并初步探讨其海马相关神经机制。方法:56只成年雄性BALB/c小鼠随机分为四组：假辐照组(sham)和不同功率密度照射组(分别为1、5、10 mW/cm²),照射组采用多频(1.8、2.6、3.5、4.9、5.8 GHz)复合微波辐射，每天1 h(每个频点12 min),连续照射1周。采用旷场实验及高架十字迷宫实验检测小鼠焦虑样行为；通过HE染色观察小鼠海马组织学变化；通过高分辨液质联用技术检测小鼠海马组织内单胺类神经递质的含量。结果:各组小鼠体表温度及体重均无明显改变。在旷场实验中，与sham组相比，10 mW/cm²组小鼠中央区进入次数显著降低(P<0.05),其余组无明显变化。高架十字迷宫实验中，与sham组相比，10 mW/cm²组小鼠开放臂进入时间百分比显著降低(P<0.05),其余组无明显变化。HE染色结果显示，与sham组相比，各照射组小鼠海马CA3区均有不同程度的损伤，且损伤程度随着功率密度的增加而加重。神经递质检测...     

20 W微波照射骨骼肌卫星细胞的增殖与分化：兔骨折内固定模型研究

BACKGROUND:Low power microwave irradiation has been shown to promote the healing of fractures with internal fixation; however, its action mechanisms on the skeletal muscle around the fracture site are unclear. OBJECTIVE:To study the effects of low power microwave irradiation (20 W) on the proliferation ability of skeletal muscle satellite cells in a rabbit model of femoral fracture with internal fixation. METHODS:Forty male New Zealand rabbits were used to establish femoral fracture followed by internal fixation models, and then were equally randomized into spontaneous recovery and microwave treatment groups. Low power microwave irradiation (20 W) was given for 30 consecutive days in the microwave treatment group on day 4 after modeling, while no microwave irradiation was given in the spontaneous recovery group. Rabbit thigh muscles adjacent to the implant were obtained to isolate skeletal muscle satellite cells. Immunohistochemical staining, hematoxylin-eosin staining and quantitative RT-PCR were used to evaluate the ability of the proliferation and differentiation of skeletal muscle satellite cells. RESULTS AND CONCLUSON: Hematoxylin-eosin staining showed that there was no significant difference in the morphology and histology of skeletal muscle tissues between the spontaneous recovery and microwave treatment groups. However, the relative mRNA expression of MyoG in the cultured skeletal muscle satellite cells in vitro and the number of α-sarcometric actin-postive cells in the microwave treatment group were significantly increased compared with the spontaneous recovery group (P < 0.05). The proliferative ability of skeletal muscle satellite cells was inhibited at the early stage, but not at the later stage. Our results suggest that low power microwave irradiation (20 W) can promote the proliferation and differentiation of skeletal muscle satellite cells around the implant in a rabbit model of femoral fracture with internal fixation, and thereby confirm the efficacy and safety of low power microwave irradiation for the internal fixation of fractures. 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

缺氧对兔胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的: 观察缺氧对培养的兔胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响及其可能的机制。方法: 采用析因实验设计, 测定在正常或缺氧环境下, 不同浓度的胎牛血清对培养的血管平滑肌细胞数量、[³H]-TdR掺入量、MTT比色以及细胞cGMP水平的影响; 透射电镜观察细胞超微结构。结果: 缺氧组平滑肌细胞的数量、[³H]-TdR掺入量以及MTT比色显著多于常氧组(P<0.01); 电镜下可见缺氧组较正常组细胞器发达, 可见大量分泌胞, 少量髓样变线粒体; 缺氧组平滑肌细胞内的cGMP浓度明显高于常氧组。结论: 缺氧可促进血管平滑肌细胞DNA合成, 促进细胞增殖, 可能与提高细胞内的cGMP水平有关。     

不同培养体系对鼠表皮干细胞增殖和分化的影响

目的 探讨不同培养体系对表皮干细胞增殖、分化的影响,建立理想的调控表皮干细胞增殖、分化的培养体系.方法 酶消化和Ⅳ型胶原快速黏附法获取鼠表皮干细胞.分别在普通培养皿培养、与几丁质膜生物支架材料共培养及以几丁质膜生物支架材料作为载体植入裸鼠体内培养等不同培养体系下观察表皮干细胞生长情况.普通培养和与几丁质膜生物支架材料共培养4周后,对比表皮干细胞克隆形成率的差异.免疫组织化学染色观察表皮干细胞以几丁质膜为载体植入裸鼠体内后4周表皮干细胞的增殖、分化情况.结果 表皮干细胞在普通培养皿培养3d左右,细胞开始克隆增殖;12 d左右融合成片;传代培养后增殖能力逐渐减低,融合成片时间逐渐延长,传代培养3～4代后细胞终末分化,失去增殖能力.几丁质膜生物支架材料培养表皮干细胞,2周后呈棋盘式集落生长,几丁质膜生物支架材料上有大量的表皮干细胞小集落,集落上有大量的增殖细胞附着生长,扫描电镜下见几丁质膜生物支架材料纤维直径约10 μm,以纤维为主,上下两层呈纵横排列成十字孔,孔间有大量表皮干细胞集落.几丁质膜生物支架材料培养表皮干细胞4周后,其克隆形成率明显高于普通培养皿培养[(12.6±2.7)％比(5.7±1.1)％,P＜0.05].表皮干细胞几丁质膜生物支架材料植入裸鼠体内培养4周后,细胞大量增殖形成巢状排列,在表皮干细胞巢周围,可见有类似皮肤附件结构.结论 表皮干细胞在体外普通培养皿培养可增殖生长,但维持增殖时间较短;与几丁质膜生物支架材料共培养,可较长时间地维持表皮干细胞的增殖特性;植入体内后表皮干细胞大量增殖.     

丁酸钠对食管永生化上皮细胞增殖、分化和凋亡的作用

目的 研究丁酸钠对永生化食管上皮的增殖、分化和凋亡的作用。方法 用HPV18E6E7诱发的人胚食管上皮永生化细胞株SHEE,培养在50ml培养瓶和24孔培养板,实验组分别加入1mmol/L和5mmol/L丁酸钠,对照组未加药,作用4d。统计细胞克隆数,细胞超微结构用电镜检查;细胞周期和凋亡细胞数用流式细胞仪检查;Ki-67、细胞角蛋白用免疫组织化学SP法检查;激光共聚焦扫描显微镜检查用鬼臼毒素标记的F-肌动蛋白。结果 加入1mmol/L和5mmol/L丁酸钠4d克隆形成率分别为65.5%和25.5%,比对照组73.5%减少。细胞周期检查1mmol/L组S期细胞明显减少（4.6%),多停留在G0/G1期（83.8%)。与对照组比较,1mmol/L组细胞Ki-67表达降低,F-肌动蛋白和角蛋白表达增加,5mmol/L组细胞凋亡明显增多。结论 丁酸钠可以诱导SHEE细胞增殖停滞和细胞凋亡,并有促细胞分化作用。其与用药剂量和时间有关。     

人胎儿肝脏间充质干细胞的体外培养及生物学特性研究

目的建立一种在体外分离、培养人胎儿肝脏来源的间充质干细胞(MSC)的方法,并研究其生物学特性。方法采用双酶消化法分离获取人胎儿肝脏MSC并进行体外培养,待细胞达80%以上融合时传代,各传代细胞依次记为P1～P10代细胞,并于倒置相差显微镜下观察细胞形态。取P3、P7、P10代细胞,连续培养7d,观察分析细胞生长曲线。取P5代细胞,采用流式细胞仪检测MSC表面CD34、CD44、CD105、CD13、HLA-ABC、HLA-DR等抗原标志的表达。取P4代细胞,进行体外成骨细胞诱导培养后,采用碱性磷酸酶染色鉴定。冻存传代细胞,分别于2、6个月后复苏细胞,台盼蓝染色计数复苏后细胞存活率。结果原代细胞3d贴壁,6d后开始快速增长并形成集落,11d左右达80%～90%融合,多呈纤维样;传代培养后细胞维持纤维样形态。传代细胞生长曲线具有共同特征:潜伏期约24～48h,对数增殖期约3～4d,对数增殖期后第5～6天进入平台期。流式细胞仪检测显示,MSC表面CD34、HLA-DR呈阴性表达,CD44、CD105、CD13呈阳性表达,HLA-ABC呈弱阳性表达。碱性磷酸酶染色显示,诱导后细胞的细胞核染成均一的淡蓝色。冻存复苏后细胞存活率达90%以上,且与未冻存传代细胞相比具有相同的生长特性。结论本研究成功地从人胎儿肝脏培养出MSC,为MSC应用于科学研究和临床治疗提供了新的细胞来源。     

LPS及IL-1ra对系膜细胞产生一氧化氮及增殖的影响

目的 :观察脂多糖 (LPS)对体外培养的系膜细胞 (GMC)产生NO的影响及这一过程对GMC增殖的影响。方法 :用培养的第一、二代SD大鼠肾小球系膜细胞进行实验 ,分别加入LPS或LPS加白细胞介素 - 1受体拮抗剂 (IL - 1ra) ,2 4h后用经典的Griess方法测定培养上清中亚硝酸盐含量 ,用 [3 H]-TdR掺入率测定GMC的增殖 ,狭缝和Northern杂交测定iNOSmRNA表达。结果 :LPS刺激后 ,GMC出现iNOSmRNA的表达及亚硝酸盐增多 [(0 6 4± 0 2 5 )nmmol/ 10 4 细胞vs (0 12± 0 0 6 )nmmol/ 10 4 细胞 ],GMC增殖 (3735± 1177 9vs 1785± 2 80 6 ) ;LPS加IL - 1ra组 ,iNOSmRNA表达比LPS组减少 40 % ,上清亚硝酸盐含量更高 [(3 2 8± 0 33)nmmol/ 10 4 细胞 ],GMC增殖被抑制 (818± 77 2 7)。结论 :LPS诱导GMCiNOSmRNA表达及亚硝酸盐增多 ,并有GMC增殖。IL - 1ra部分拮抗iNOSmRNA的表达 ,但亚硝酸盐产量更高 ,GMC增殖被抑制     

LPS及IL-1ra对系膜细胞产生一氧化氮及增殖的影响

目的:观察脂多糖(LPS)对体外培养的系膜细胞(GMC)产生NO的影响及这一过程对GMC增殖的影响。方法:用培养的第一、二代SD大鼠肾小球系膜细胞进行实验,分别加入LPS或LPS加白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra),24h后用经典的Griess方法测定培养上清中亚硝酸盐含量,用[³H]-TdR掺入率测定GMC的增殖,狭缝和Northern杂交测定iNOSmRNA表达。结果:LPS刺激后,GMC出现iNOSmRNA的表达及亚硝酸盐增多[(0.64±0.25)nmmol/10⁴细胞vs(0.12±0.06)nmmol/10⁴细胞],GMC增殖(3735±1177.9vs1785±280.6);LPS加IL-1ra组,iNOSmRNA表达比LPS组减少40%,上清亚硝酸盐含量更高[(3.28±0.33)nmmol/10⁴细胞],GMC增殖被抑制(818±77.27)。结论:LPS诱导GMCiNOSmRNA表达及亚硝酸盐增多,并有GMC增殖。IL-1ra部分拮抗iNOSmRNA的表达,但亚硝酸盐产量更高,GMC增殖被抑制。     

胰岛素促进体外培养的小鼠卵巢颗粒细胞增殖

目的：研究胰岛素对体外培养的小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响,探讨胰岛素的促增殖作用是否与浓度相关。方法：未成熟小鼠卵巢颗粒细胞原代培养,四甲基偶氮唑蓝法（MTT）测定颗粒细胞增殖指数,观察不同浓度胰岛素对颗粒细胞增殖的影响。结果：与对照组相比,5ng·ml^-1。胰岛素对颗粒细胞没有促增殖作用（P〉0.05）,10ng·ml^-1有促增殖作用（P〈0.05）,100ng·ml^-1、1000ng·ml^-1的促增殖作用更强（P〈0.01）,100ng·ml^-1、1000ng·ml^-1作用无明显差异（P〉0.05）。结论：生理浓度的胰岛素能促进颗粒细胞增殖,高浓度胰岛素促增殖作用更强,本实验为进一步研究高胰岛素血症在多囊卵巢综合症（PCOS）的卵泡发育停滞机制奠定基础。