妊高征患者外周血Th1/Th2失衡与细胞因子IL-12的相关性研究

目的探讨妊娠高血压综合征(pregnancy induced hypertension,PIH)患者外周血Th1/Th 2失衡与IL-12的关系及Th1/Th2比率失衡的原因.方法采集18例重度PIH患者、13例轻中度PIH患者、15例正常妊娠妇女及15例健康未孕妇女的外周血淋巴细胞,用酶联免疫吸附法(ELSIA)测定IL-12水平,用流式技术测Th1/Th2比率.结果重度PIH患者外周血IL-12(89.83±6.24 pg/ml)水平显著高于其他各组(P<0.001),Th1/Th2比率(18.26±1.24)亦显著高于其他各组(P<0.001),且二者存在明显正相关(r=0.672,P<0.001).结论PIH患者其外周血单核淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)分泌的IL-12可引起Th 2优势向Th1优势转变,从而导致Th1/Th2失衡.     

正常妊娠及妊高征患者外周血中IL-12、IL-18的检测意义

目的:检测非孕妇女、正常妊娠及妊娠高血压综合征(妊高征,PIH)患者外周血中IL-12和IL-18水平,探讨Th1/Th2细胞因子在妊高征发病中的作用。方法:孕20周后的子痫前期患者34例(轻度子痫前期15例,重度子痫前期19例),正常妊娠组32例,非妊娠对照组16例。取外周血进行流式细胞仪检测,选取CD28表达量最高者的淋巴细胞作为实验对象。采用ELISA法测定IL-12、IL-18,流式细胞仪测定Th1/Th2细胞比。结果:正常妊娠组、非孕组及妊高征组IL-12比较均存在显著性差异(P<0.001)。轻度子痫前期组、重度子痫前期组与正常妊娠组IL-18比较均不存在显著性差异(P>0.05)。各组IL-18/IL-12浓度比比较,正常妊娠组与妊高征组比较存在显著性差异(P<0.0001)。IL-18/IL-12浓度比与Th1/Th2细胞比的相关性比较,呈明显负相关(P<0.01)。结论:正常妊娠的IL-18/IL-12浓度比明显高于妊高征组与Th1/Th2细胞比呈相反变化。     

早期稽留流产患者免疫机制的研究

目的:探讨T细胞表型及Th1/Th2功能亚群在早期稽留流产发病中的免疫机制。方法:选取14例早期稽留流产患者(妊娠8～10周),采用血液自动分析仪检测其外周血中淋巴细胞和粒细胞百分率,采用流式细胞仪检测其外周血中T淋巴细胞及其亚群的百分率,用酶联免疫吸附法测定其血清中细胞因子干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)和白介素-4(Inter-leukin-4,IL-4)的浓度。同时选取18例正常妊娠早期妇女(妊娠8～10周)检测上述各项指标作为对照。结果:①早期稽留流产患者外周血中淋巴细胞比率29.77±4.37,明显高于对照组的23.4±5.96(P<0.05);粒细胞比率为60.09±4.58,明显低于对照组的67.76±7.31(P<0.05)。②早期稽留流产患者外周血中CD3+细胞和CD4+细胞的百分率以及CD4+/CD8+的比值分别为66.76±8.76、41.01±8.47、1.83±0.50,均显著高于正常妊娠早期妇女的56.72±10.86、31.22±7.70、1.20±0.42(P均<0.05);CD8+细胞的百分率为25.05±5.87,与对照组的27.35±6.28比较,无显著差异。③早期稽留流产患者血清中IFN-γ浓度为28.96±10.76ng/L,明显高于对照组18.11±7.08ng/L(P<0.01);IL-4为13.16±8.37ng/L,显著低于对照组的25.91±15.96ng/L(P<0.05)。结论:稽留流产的发生可能与CD4+/CD8+T细胞比例失调,以及Th1/Th2功能亚群向Th1偏移有关。     

原因不明复发性流产患者蜕膜组织中Th1/Th2比率与B7-1、B7-2的相关性

目的:探讨原因不明复发性流产患者蜕膜组织中Th1/Th2比率与巨噬细胞B7-1、B7-2表达水平的相关性,分析蜕膜组织中共刺激分子B7-1、B7-2及Th1/Th2比率失衡在原因不明复发性流产发病中的作用。方法:用双荧光标记流式细胞技术检测原因不明复发性流产妇女(流产组)和正常妊娠妇女(对照组)的蜕膜组织中Th1/Th2比率和巨噬细胞B7-1、B7-2的表达水平。结果:流产组妇女蜕膜组织中Th1/Th2比率(20.41±3.32)、巨噬细胞B7-1的表达水平(21.57±1.70)%明显高于对照组(P<0.01);流产组妇女蜕膜组织中巨噬细胞B7-2的表达水平(27.82±2.28)%明显低于对照组(P<0.01);流产组妇女蜕膜组织中Th1/Th2比率与蜕膜组织中巨噬细胞B7-1的表达水平之间存在显著正相关(r=0.8663,P<0.01);流产组妇女蜕膜组织中Th1/Th2比率与蜕膜组织中巨噬细胞B7-2的表达水平之间存在显著负相关(r=-0.9016,P<0.01)。结论:原因不明复发性流产患者蜕膜组织中B7-1表达水平增高、B7-2表达水平降低与蜕膜组织中Th1/Th2比率异常有密切的关系,可能是导致原因不明复发性流产发生的重要因素。     

主动免疫恢复T辅助细胞平衡治疗习惯性流产

目的:寻求安全、有效地治疗不明原因习惯性流产(UHA)的方法,并探讨主动免疫治疗前后的细胞因子的免疫功能变化及T辅助细胞的平衡状态。方法:①对35例UHA患者采用丈夫肘静脉血20 m l分离淋巴细胞行主动免疫治疗(妊娠前治疗两次,妊娠后治疗两次);②采用酶联免疫吸附方法对68例UHA患者及30例正常妇女外周血IL-2、IL-4、IL-10、IFN进行检测;③对29例主动免疫后妊娠成功者治疗前后的IL-2、IL-10、Th1/Th2进行检测。结果:①主动免疫组33例妊娠,妊娠成功并分娩29例,妊娠成功率87.88%(29/33),未经主动免疫治疗的对照组妊娠成功率26.67%(8/30),两组相比差异有显著性(P<0.010);②68例UHA患者较正常妇女外周血中IL-2明显升高(P<0.01),IL-10降低(P<0.05),Th1/Th2比值增高(P<0.05);③29例UHA患者主动免疫治疗后妊娠成功者IL-10显著上升(P<0.1),Th1/Th2比值下降(P<0.05)。结论:UHA患者Th1、Th2平衡异常,主动免疫治疗可诱导Th1向Th2转移,恢复Th1、Th2之间的平衡,可用于UHA的治疗。     

新利尿合剂对子痫前期患者Th1/Th2比率的影响

目的:探讨新利尿合剂(多巴胺、酚妥拉明、速尿及硫酸镁)治疗子痫前期的机理。方法:采用流式细胞技术分别测定24例使用新利尿合剂治疗的子痫前期患者(新利尿合剂组)、20例使用硫酸镁治疗的子痫前期患者(硫酸镁组)以及21例正常妊娠妇女(正常妊娠组)Th1、Th2细胞百分比和Th1/Th2比率,同时测量各组受试者血压、肝、肾功能。结果:①新利尿合剂组和硫酸镁组治疗后Th1细胞、Th1/Th2比率均降低(P<0.05),新利尿合剂组较硫酸镁组降低明显(P<0.05),但均未降至正常妊娠状态(P<0.05)。②新利尿合剂组和硫酸镁组治疗后Th2细胞比率无明显变化(P>0.05)。③用药后新利尿合剂组的血压较硫酸镁组有显著下降(P<0.05),肝、肾功能明显好转(P<0.05),但未完全恢复正常妊娠状态(P<0.05)。结论:使用新利尿合剂治疗可以改变Th1细胞与Th1/Th2比率,可以促进子痫前期患者体内Th1/Th2比率趋于平衡,是临床上治疗子痫前期的一种有效、可行的方法。     

主动免疫治疗对反复自然流产患者外周血Th1/Th2模式表达影响

目的:探讨主动免疫治疗对原因不明性反复自然流产(URSA)患者Th1/Th2模式表达的影响。方法:采用流式细胞仪对30例URSA患者进行主动免疫治疗前后外周血Th1/Th2模式测定,以30例正常已生育妇女作为对照。结果:UR-SA组Th1型细胞因子IFN-γ(18.98±5.37)%,明显高于对照组的(8.69±2.66)%(P<0.05);而Th2型细胞因子IL-4(5.52±0.18)%,明显少于对照组的(6.78±0.61)%(P<0.05),Th1/Th2为3.14,模式向Th1偏移。主动免疫治疗后Th2型细胞因子IL-4水平(10.27±2.04)%及Th1型细胞因子IFN-γ水平(11.73±2.47)%,Th1/Th2为1.41,模式向Th2偏移。结论:URSA患者Th1/Th2模式偏向Th1,主动免疫治疗可使Th1/Th2模式偏向Th2,诱导母胎免疫耐受,使妊娠成功。     

Th1/Th2失衡与妊娠高血压综合征

妊娠时母胎界面的母体淋巴细胞被激活且可产生各种细胞因子 ,细胞因子在母胎界面局部网络的相对平衡对正常妊娠的维持有重要作用。近年来的研究发现妊娠高血压综合征患者外周血Th1/Th2细胞因子的失衡与其发病有密切关系 ,因此可从妊娠高血压综合征时Th1/Th2失衡的角度考察PIH的发病原因及采取相应的免疫防治措施     

Th1／Th2失衡与妊娠高血压综合征

妊娠时母胎界面的母体淋巴细胞被激活且可产生各种细胞因子，细胞因子在母胎界面局部网络的相对平衡对正常妊娠的维持有重要作用、近年来的研究发现妊娠高血压综合征患者外周血Th1／Th2细胞因子的失衡与其发病有密切关系，因此可从妊娠高血压综合征时Th1／Th2失衡的角度考察PIH的发病原因及采取相应的免疫防治措施。     

胃癌患者Th1/Th2型细胞因子的测定

目的探讨胃癌患者Th1/Th2型细胞因子的失调及其临床意义。方法利用细胞因子诱生及ELISA等技术 ,检测了20例胃癌患者和15例正常人外周血单个细胞 (PBMC)培养上清液中Th1类因子干扰素r(IFN -r)和Th2类因子白细胞介素4(IL -4)的水平。结果在PBMC诱生培养上清液中 ,胃癌组IL -4的诱生水平[(41.6±11.3)ng/L]比对照组[(22.6±3.9)ng/L]明显升高(P<0.01) ,而IFN -r的诱生水平胃癌组[(849.8±161.3)ng/L]较对照组[(1437.5±327.6)ng/L]下降 ,差异有显著性意义(P<0.01)。结论胃癌患者体内存在Th1/Th2失调 ,在胃癌的发生发展中可能起重要作用。     

HBsAg阳性母亲PBMC HBV cccDNA对新生儿Th1/Th2型细胞因子的影响

  目的  探讨乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)阳性母亲外周血单个核细胞(peripheral blood monouclear cell，PBMC)中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA，cccDNA)对新生儿辅助性T细胞1(T help cell 1，Th1)、辅助性T细胞2(T help cell 2，Th2)型细胞因子及Th1/Th2比值的影响。  方法  以2011年6月-2013年7月在太原市第三人民医院妇产科分娩的HBsAg阳性母亲及其新生儿作为研究对象。采用电化学发光法(electrochemiluminescence immunoassay，ECLIA)检测HBV血清学标志物，real-time PCR-TaqMan探针法检测母亲PBMC HBV cccDNA，ProcartaPlex多因子分析技术检测新生儿外周血Th1型细胞因子白介素-2(interleukin 2，IL-2)，干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-ɑ)以及Th2型细胞因子白介素-4(interleukin 4，IL-4)，白介素-6(interleukin 6，IL-6)和白介素-10(interleukin 10，IL-10)水平。  结果  单因素分析显示:与阴性组相比，母亲PBMC HBV cccDNA阳性组IL-2、IL-6和IL-10水平升高，Th1/Th2比值降低(P=0.034；P=0.007；P=0.048；P=0.029)；经阴道分娩新生儿IL-6和IL-10明显高于剖宫产新生儿，Th1/Th2比值低于剖宫产组(均有P < 0.001)；新生儿HBsAg阳性组IL-10水平明显高于阴性组，TNF-α水平以及Th1/Th2比值明显低于阴性组(P=0.011；P < 0.001；P=0.027)。以Th1/Th2比值反映新生儿Th2优势应答程度，分析母亲PBMC HBV复制对新生儿Th2优势应答的影响，调整相关因素后，logistic回归分析结果显示母亲PBMC HBV cccDNA阳性新生儿发生Th2强优势应答的风险是母亲PBMC HBV cccDNA阴性新生儿的2.42倍(OR=2.42，95%CI:1.16~5.04，P=0.018)，经阴道分娩新生儿发生Th2强优势应答的风险是剖宫产新生儿的5.06倍(OR=5.06，95%CI:2.95-8.67，P < 0.001)。  结论  HBsAg阳性母亲PBMC HBV复制和阴道产可能加重新生儿Th2优势应答程度，提示需注重母亲PBMC HBV复制和分娩方式对新生儿Th1/Th2型细胞因子的影响。     

米非司酮终止妊娠与Th1/Th2调节的相关性研究

目的：探讨米非司酮终止妊娠者血清及蜕膜组织液中Th1/Th2型细胞因子的水平及临床意义。方法：采用酶联免疫吸附法检测50例口服米非司酮终止妊娠妇女（药流组）血清及蜕膜组织液中Th1（IL-2、IFN-γ）/Th2（IL-4、IL-10）型细胞因子水平,同时以50例正常健康早孕妇女,要求行人工流产终止妊娠者作为人流组。结果：药流组血清及蜕膜组织中IL-2、IFN-γ的水平明显高于人流组,而IL-4、IL-10含量明显低于人流组,这种变化与药物流产次数无关。结论：米非司酮可以改变流产妇女血清及蜕膜组织液中Th1/Th2平衡,从而终止妊娠。     

复发性流产患者Th1/Th2细胞因子失衡及淋巴细胞主动免疫治疗的疗效

目的:探讨不明原因反复流产(URSA)患者Th1/Th2细胞因子失衡关系及淋巴细胞主动免疫治疗的疗效。方法:采用细胞因子体外诱生技术对72例URSA患者和30例正常妇女的外周血单个核细胞进行诱生培养68h后,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测上清液中的Th1(IFN-γ)和Th2(IL-4)细胞因子水平;URSA患者分为淋巴细胞主动免疫治疗组和常规HCG保胎组,前瞻性研究淋巴细胞主动免疫治疗前后IFN-γ、IL-4细胞因子变化及两组的妊娠结局。结果:URSA患者IL-4水平低于正常对照组(P<0.05),Th1/Th2比值偏向Th1。经主动免疫治疗后,URSA患者IFN-γ水平降低(P<0.05),IL-4水平升高(P<0.05),Th1/Th2比值降低,偏向Th2(P<0.05)。主动免疫妊娠成功率达到85.71%。结论:URSA的发生可能与Th1/Th2平衡失调有关,主动免疫治疗可以有效纠正Th1/Th2平衡失调,对URSA患者是一种有效的治疗方法。     

宫颈鳞癌患者外周血单个核细胞Th1/Th2平衡状态的研究

目的探讨宫颈癌患者外周血辅助T细胞1(Th1)和辅助T细胞2(Th2)型细胞因子的表达状况。方法 30例宫颈癌患者采集外周血,采用流式细胞分析法,检测患者外周血CD4+细胞胞内细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4)的表达。应用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测培养上清IFN-γ、IL-4的水平,并与10例健康对照组进行比较。结果宫颈癌患者IFN-γ染色阳性(Th1)的细胞比例及培养上清IFN-γ浓度明显低于健康对照组,IL-4染色阳性(Th2)细胞比例及培养上清IL-4浓度在两组间差异无统计学意义。结论宫颈癌患者存在Th1/Th2细胞功能失衡,呈Th2优势应答模式,机体免疫抑制,导致肿瘤发生,同时为宫颈鳞癌的生物治疗提供靶点。     

卵巢早衰和不孕症患者血清中抗透明带抗体 及Th1/Th2细胞因子的测定及意义

目的:探讨抗透明带抗体的表达和Th1/Th2细胞因子的改变在卵巢早衰(POF)和不孕症患者发病中的作用。方法:用ELISA法检测21例POF、20例不明原因不孕症和20例健康女性的血清中抗透明带抗体的表达、IFN-γ、IL-4和IL-10水平。结果:POF组和不孕组血清中抗透明带抗体的阳性率均明显高于对照组(P<0.01)。POF组和不孕组血清中IFN-γ/IL-10比值均明显高于对照组(P<0.01),不孕组IFN-γ/IL-4比值明显高于对照组(P<0.01)。结论:抗透明带抗体的表达和Th1/Th2细胞因子比值增高在POF及不孕症妇女的发病过程中起到重要的作用。     

胎盘辅助性T细胞因子IL-4、IL-6和IFN-γ与子痫前期关系的研究

目的:通过研究辅助性T细胞因子IL-4、IL-6及IFN-γ在子痫前期患者及血压正常的晚期妊娠妇女(NLP)胎盘母体面与胎儿面中的表达规律,探讨其在子痫前期发病过程中的病理生理机制。方法:选取子痫前期和正常妊娠孕妇作为研究组和对照组,应用免疫组化方法对两组胎盘的母体面与胎儿面Th1型细胞因子(IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4、IL-6)进行标记并通过彩色病理图像分析系统对染色结果进行定量检测并作比较。结果:①胎盘母体面滋养细胞IFN-γ表达的平均光密度在子痫前期轻度组、重度组及正常妊娠组分别为0.2034±0.0148、0.2688±0.0278、0.2075±0.0154,子痫前期重度组与正常妊娠组差异有统计学意义(P0.001);IL-6表达的平均光密度在子痫前期轻度组、重度组及正常妊娠组分别为0.1864±0.0009、0.1579±0.0070、0.1862±0.0127,子痫前期重度组与正常妊娠组差异有统计学意义(P0.001);IL-4表达的平均光密度在子痫前期轻度组、重度组及正常妊娠组分别为0.2026±0.0163、0.1994±0.0163、0.2011±0.0124,3组比较差异均无统计学意义(P0.05)。②胎盘胎儿面滋养细胞IFN-γ、IL-6、IL-4在子痫前期轻度组、重度组及正常妊娠组表达的平均光密度均无统计学差异。③子痫前期重度组滋养细胞IFN-γ、IL-6表达的平均光密度在胎盘母体面与胎儿面比较差异有统计学意义(P0.05);IL-4表达的平均光密度在胎盘母体面与胎儿面比较,无统计学差异(P0.05)。结论:在重度子痫前期孕妇胎盘母体面中表现为免疫杀伤的Th1型细胞因子表达增强,表现为免疫保护的Th2型细胞因子则表达减弱,而在胎盘胎儿面则无上述表现,提示胎盘母体面的Th1/Th2细胞因子失衡可能是导致子痫前期发病的病因之一。     

未足月胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎孕妇外周血miR-145表达及与Th1/Th2平衡的关系

目的探讨miR-145在未足月胎膜早破(preterm prelabor rupture of membranes,pPROM)合并绒毛膜羊膜炎(histological chorioamnionitis,HCA)孕妇外周血中表达情况,并分析其与Th1/Th2平衡的关系。方法选取2018年3月至2019年4月河北省儿童医院因胎膜早破入院的pPROM孕妇50例作为研究组,根据是否发生HCA分为HCA组(17例)与无HCA组(33例),另选取正常妊娠孕妇34例作为对照组,采集静脉血,分离血浆及外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),通过qRT-PCR法检测外周血血浆中miR-145的表达情况,利用流式细胞术检测PBMC中Th1细胞、Th2细胞占PBMC的比例,采用酶联免疫吸附法检测Th 1细胞分泌的细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α以及Th 2细胞分泌的细胞因子IL-4、IL-6水平,Pearson法对miR-145与Th1、Th2细胞以及细胞分泌因子相关性进行分析,并通过ROC曲线分析外周血血浆miR-145对pPROM患者HCA发生的预测价值。结果与对照组、无HCA组相比,HCA组外周血血浆miR-145水平显著降低(P<0.05);与对照组、无HCA组相比,HCA组外周血Th1细胞比例、Th1/Th2比值显著升高(P<0.05),Th2细胞比例显著降低(P<0.05);与对照组、无HCA组相比,HCA组外周血血浆IL-2、IFN-γ、TNF-α水平显著升高(P<0.05),IL-4、IL-6水平显著下降(P<0.05);Pearson分析显示:外周血血浆miR-145表达与Th1细胞比例、Th1/Th2比值、IFN-γ、TNF-α、IL-2水平呈负相关(P<0.05),与Th2细胞比例、IL-4、IL-6水平呈正相关(P<0.05);ROC曲线分析显示miR-145水平预测pPROM患者HCA发生的截断值为0.56(曲线下面积0.859,敏感度89.3%,特异性68.2%)。结论pPROM合并HCA孕妇外周血血浆miR-145低表达,PBMC呈Th1优势,miR-145可能通过调控Th1/Th2平衡影响HCA的发生。     

妊高征患者血清新喋呤、白介素2及可溶性受体的变化与意义

目的:通过观察妊高征患者血清新喋呤、白介素2及可溶性受体(sIL-2R) 水平的变化, 探讨妊高征患者细胞免疫功能的变化及意义。方法: 采用酶联免疫吸附分析法与放射免疫分析法测定28例妊高征(轻、中度12例, 重度16例)和30例正常孕妇的血清新喋呤、白介素2和sIL-2R水平; 比较二组间新喋呤、白介素2和sIL-2R水平的差异; 观察新喋呤、白介素2和sIL-2R水平与妊高征病情的关系。结果: 妊高征患者血清新喋呤、白介素2和sIL-2R水平显著高于对照组(t'=4 543, P<0 .001; t=2. 946, P<0. 01; t'=2 .251, P<0. 05); 重度妊高征患者新喋呤水平显著高于轻、中度患者(t'=2 .913,P<0 .01), 重度妊高征患者与轻、中度患者组比较白介素2和sIL-2R均无显著性差异(t=0 .888, P>0 .2; t=0. 444, P>0 .5)。结论: 妊高征患者血清新喋呤、白介素2及可溶性受体水平显著增高, 新喋呤水平随妊高征病情加重而增高, 提示细胞免疫活性增强可能与妊高征的发生和发病有关。     

过敏性哮喘患儿外周血单个核细胞mir-29c与Thl/Th2细胞平衡的相关性分析

目的 分析过敏性哮喘(AA)患儿外周血单核细胞微小RNA 29c(mir-29c)表达及与CD4+辅助性T细胞1/CD4+辅助性T细胞2(Th1/Th2)平衡的相关性。方法 将2015年10月-2018年12月本院收治的94例AA患儿分为稳定组32例,轻度急性发作组27例,中度急性发作组35例;另取健康体检儿童40例为对照组。采集所有受试者儿童外周血,分离血清和单个核细胞(PBMC),检测mir-29c、Th1/Th2、IFN-γ、IL-4、T盒子转录因子21(T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA3)蛋白水平。结果 与对照组比较,稳定组、轻、中度急性发作组AA患儿PBMC中mir-29c水平、Th2亚群比例、GATA3蛋白水平及血清IL-4水平依次升高,PBMC中Th1亚群比例、Th1/Th2、T-bet蛋白水平、T-bet/GATA3及血清IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4依次降低,两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。AA患儿外周血mir-29c水平与Th1/Th2、IFN-γ/IL-4、T-bet/GATA3均呈负相关(r=-0.823、-0.789、-0.804,P＜0.05)。结论 mir-29c在AA患儿外周血单个核细胞中上调表达,可能通过Th1/Th2平衡影响AA发生。