柠檬提取物对多重耐药金黄色葡萄球菌的抑菌作用

目的:观察柠檬提取物对多重耐药金黄色葡萄球菌的抑菌效果,初步探讨柠檬提取物的抑菌机制。方法:采用纸片法、对倍稀释法对不同浓度柠檬提取物进行耐药菌株的抑菌试验;采用SDS-PAGE电泳法,观察柠檬提取物作用下菌体蛋白质电泳图谱的变化;通过测定乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶的活性,观察柠檬提取物作用下酶活性的改变。结果:柠檬提取物对临床分离的耐药金黄色葡萄球菌的纸片抑菌实验抑菌环>30mm,最小抑菌浓度为1:6400;在不同凝胶浓度的SDS-PAGE中,柠檬提取物作用的耐药金黄色葡萄球菌有明显的菌体蛋白电泳图谱的改变;柠檬提取物对酶活性无改变。结论:柠檬提取物对耐药金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,影响了菌体蛋白质的合成,初步揭示了柠檬提取物的作用机制。     

拳参提取物抑菌活性的初步研究

目的：研究拳参提取物的抑菌活性。方法：通过滤纸片对拳参提取物进行了抑菌试验。结果：不同浓度的拳参提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有一定的抑菌效果,随着拳参提取物浓度的增加,其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用增强,呈一定的剂量依赖性。但拳参提取物对痢疾杆菌却无抑菌效果。结论：拳参提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有显著的抑菌作用。     

连翘不同提取液对金黄色葡萄球菌体外抑制作用研究

目的:了解连翘不同提取液在体外对金黄色葡萄球菌的抑制效果。方法:将连翘洗净、烘干、粉碎成粗粉,分别用水、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、95%乙醇连续回流提取,提取液浓缩成相当于原药材1 mg/mL的药液,将药液处理后,制成含药滤纸片,采用纸片法,以抑菌环大小为参考指标,观察抑菌效果,确定最佳提取溶剂及提取工艺。结果:连翘用10倍量95%乙醇回流提取3次,每次1 h,所得药液的抑菌效果最佳。结论:优选得到的提取工艺确实可行,便于连翘生产质量的控制。     

大血藤叶片黄酮类化合物的HPLC分析

以芦丁水解产物为标样,通过HPLC法对大血藤叶片的黄酮类化合物进行含量测定,结果表明大血藤叶片主要含有8种不同的黄酮,总黄酮含量为8225mg/g干重;利用HPLC进行大血藤叶片黄酮含量的测定的变异系数为307%,平均回收率为978±299%,具有一定的可行性.     

金银花对金黄色葡萄球菌体外抑菌作用研究

目的 比较金银花对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)和甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)体外抑菌活性差异。方法 收集30株MSSA和30株MRSA菌,使用头孢西丁筛选试验和mecA基因检测对菌株进行验证,使用琼脂打孔法检测金银花对两类金黄色葡萄球菌的抑菌活性并比较差异,使用琼脂稀释法检测金银花对两类金黄色葡萄球菌的MIC并计算出MIC₅₀。结果 金银花对MSSA和MRSA均有体外抑菌活性且MIC₅₀均为3.125 mg/mL。结论 金银花对MSSA和MRSA均有较好的体外抑菌活性,在临床治疗金黄色葡萄球菌感染方面有很大的应用前景。     

中药方剂Bingdeling体外对临床常见4种细菌的抑菌作用

目的研究中药方剂Bingdeling体外对金黄色葡萄球菌等细菌的抑制作用。方法采用菌落形成计数方法,观察Bingdeling对临床常见4种细菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门菌、铜绿假单胞菌)体外抑菌作用;采用液体培养基连续稀释法测定Bingdeling体外对金黄色葡萄球菌生长的最小抑菌浓度(MIC);采用纸片扩散法进行中药方剂Bingdeling联合青霉素以及β-内酰胺类抗生素(阿莫西林)、氨基糖苷类抗生素(庆大霉素)、大环内酯类抗生素(罗红霉素)等抗菌药体外对金黄色葡萄球菌的药敏试验。结果体外抑菌实验结果表明,中药方剂Bingdeling体外对金黄色葡萄球菌的生长具有非常明显的抑制作用;Bingdeling体外对金黄色葡萄球菌生长的MIC是原液的0.016倍;体外Bingdeling联合青霉素、阿莫西林、庆大霉素、罗红霉素应用,对金黄色葡萄球菌有协同增强抗菌作用。结论Bingdeling体外对金黄色葡萄球菌有明显的抑菌作用,且与阿莫西林等抗菌药有协同抑菌作用,具有潜在的临床应用价值。     

大豆苷元抑菌活性的初步研究

目的:研究大豆苷元的抑菌活性.方法:通过滤纸片对大豆苷元进行了抑菌试验.结果:不同浓度的大豆苷元溶液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌有一定的抑菌效果,随着大豆苷元浓度的增加,其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌作用增强,呈一定的剂量依赖性.但大豆苷元对痢疾杆菌却无抑菌效果.结论:大豆苷元溶液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌有显著的抑菌作用.     

五黄膏抑菌作用的实验研究

目的:观察五黄膏的抑菌作用。方法:制备五黄膏制剂,取样进行细菌培养和抑菌实验,以凡士林为对照,观察五黄膏对标准菌株和临床菌株(金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌)抑菌作用。结果:五黄膏制剂取样培养无细菌生长,抑菌实验证实其对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌标准菌株均具有明显抑菌作用,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌临床菌株有显著抑菌作用(P<0.01)。结论:五黄膏体外对标准菌株和临床菌株(金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌)具有抑菌作用。     

苦参、绿茶及紫苏叶提取物联用对金黄色葡萄球菌的体外活性研究

[目的]考察苦参、紫苏叶和绿茶联合应用对金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抗菌活性,为预防和治疗金黄色葡萄球菌感染的中药制剂的研发提供实验基础。[方法]采用琼脂稀释法测定了苦参、绿茶及紫苏叶提取物对金黄色葡萄糖球菌的抑菌活性,并用棋盘微量肉汤稀释法测取苦参提取物分别与绿茶及紫苏叶提取物联合用药时的最低抑菌浓度(MIC),并计算出分级抑菌指数(FIC)。[结果]苦参提取物、绿茶提取物和紫苏叶提取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为0.025 0、0.250 0、0.312 5 g/L。苦参提取物与紫苏叶提取物的联合抑菌实验结果:分级抑菌指数FIC=1.5,表现为无关作用。苦参生物碱提取物与茶叶提取物对金黄色葡萄球菌的联合抑菌实验结果:分级抑菌指数FIC=0.75,表现为相加作用。[结论]苦参、紫苏叶和绿茶的提取物均对金黄色葡萄球菌具有良好的抑制活性,茶叶提取物与苦参提取物联合应用具有相加作用。     

参卿止痒洗液体外抑菌作用研究

目的:探讨参卿止痒洗液的体外抑菌作用。方法:采用二倍稀释法,测定参卿止痒洗液对铜绿假单胞菌、大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、表面葡萄球菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度。结果:参卿止痒洗液对铜绿假单胞菌、大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、表面葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为:128 g·L~(-1)、128 g·L~(-1)、128 g·L~(-1)、128 g·L~(-1)、256 g·L~(-1)。最低杀菌浓分别为:512 g·L~(-1)、128 g·L~(-1)、256 g·L~(-1)、256 g·L~(-1)、512 g·L~(-1)。结论:参卿止痒洗液对铜绿假单胞菌、大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、表面葡萄球菌等临床常见的感染性细菌有较好的抑菌作用。     

红藤饮片提取物抑菌活性与次生代谢产物含量的相关性

目的:了解3个不同产地、2个不同批次的红藤饮片6种次生代谢产物含量、抑菌活性及两者的相关性。方法:利用分光光度法对红藤饮片提取物的6种次生代谢产物含量进行分析,以金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为实验菌株,用纸片琼脂扩散法测定抑菌圈大小;以平板二倍稀释法统计最小抑菌浓度(M IC);以试管二倍稀释法统计最小杀菌浓度(M BC)。结果:红藤药液对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌活性以安徽产地第一批次最高,抑菌圈大小、M IC、M BC分别为(9.67±0.29)mm、12.5 m g/m l、31.25 m g/m l和(10.17±0.58)mm、12.5 m g/m l、31.25 m g/m l,江苏产地第二批次最低,抑菌圈大小、M IC、M BC分别为(7.67±0.29)mm、25 m g/m l、125 m g/m l和(8.17±0.29)mm、25 m g/m l、125 m g/m l。红藤饮片提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性在不同产地和不同批次之间均有显著性差异(P<0.01);对枯草芽孢杆菌的抑菌活性在不同产地亦有显著性差异(P<0.01),但不同批次之间无显著性差异(P>0.05)。红藤药液的6种次生代谢产物总量以安徽产地第一批次最高(3.61%),江苏产地第二批次最低(1.90%)。红藤提取物的总生物碱和游离蒽醌在不同产地之间有显著性差异(P<0.01),而在不同批次之间无显著性差异(P>0.05);总绿原酸、黄酮类化合物、总鞣质和总皂苷在不同产地和不同批次之间均有显著性差异(P<0.01)。影响红藤饮片对2种细菌的抑菌活性的主要次生代谢产物可能为总皂甙、总鞣质、游离蒽醌及总绿原酸。结论:不同红藤饮片的次代谢产物的含量及抑菌活性以安徽和浙江产地较高,江苏产地较低;红藤的抑菌活性与饮片中总皂甙、总鞣质、游离蒽醌及总绿原酸的含量密切相关。     

反相高效液相色谱法测定大血藤中大黄素的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定大血藤中大黄素含量的方法.方法选用DiamonsilTMC18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.1 %磷酸水溶液(80:20);检测波长:254 nm;流速:1.00 mL/min;柱温:35 ℃.结果大黄素进样量在0.0416～0.2080 μg范围内线性关系良好,r=0.9997,平均加样回收率为101.4 %,10批大血藤饮片中大黄素的含量范围为6.72～13.71 μg/g.结论该方法操作简便,快速,准确,重现性好.     

五花血藤化学成分的研究

目的对五花血藤（Sargentodoxa cuneata）的藤茎部分进行化学成分研究。方法五花血藤藤茎的95%乙醇提取物加水溶解后,分别用石油醚,醋酸乙酯和正丁醇萃取。正丁醇萃取物应用多种色谱柱及仪器进行分离纯化,并运用理化性质,核磁数据和光谱学数据等方法鉴定化合物的结构。结果从五花血藤藤茎中分离鉴定了12个化合物,分别为：毛柳苷（1）、3,4-二羟基苯乙醇葡萄糖苷（2）、N-（对羟基苯乙基）阿魏酸酰胺（3）、eugenylβ-rutinoside（4）、原绿酸（5）、齐墩果酸（6）、（-）-表儿茶素（7）、2-苯乙基-β-D-呋喃芹糖基-（1″-6′）-β-D-吡喃葡萄糖苷（8）、β-谷甾醇（9）、胡萝卜苷（10）、3,4-二羟基苯乙醇（11）、豆甾醇（12）。结论化合物5、6、11为首次从该植物中分离得到。     

大血藤多酚组分的化学表征及抗氧化活性研究

本实验富集大血藤多酚组分并对其进行含量测定和化学表征,丰富该药材的物质研究基础,初步分析多酚化合物体外抗氧化活性作用,为后续研究提供理论基础。采用紫外可见分光光度计确定最大吸收波长并测定总多酚含量,采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪对其进行化学表征,利用DPPH 法和 ABTS 法评价大血藤总多酚的体外抗氧化活性。结果显示优化Folin-Ciocalte法最大吸收波长为740 nm,大血藤总多酚含量约为32.34%;通过高分辨质谱检测到大血藤中多酚类成分有62个,包括28个酚酸和酚苷类成分、13个木脂素类成分、12个苯丙素类成分、9个黄酮类成分;提取物对DPPH和ABTS自由基都具有清除作用,IC₅₀值分别为4.88 μg/mL、16.68 μg/mL。该研究从大血藤提取物中检测到62个多酚类成分,抗氧化活性与其密切相关,深入研究了大血藤多酚组分,为该药的进一步发展提供理论基础。     

不同产地大血藤药材指纹图谱研究及红景天苷和绿原酸的含量测定

目的建立不同产地大血藤药材的高效液相色谱指纹图谱,同时测定红景天苷和绿原酸2种成分的含量。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Phenomenex-C18(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;检测波长:280nm;流速:1.0mL/min;进样量:15μL;柱温:30℃。结果 10个产地的大血藤药材指纹图谱相似度达0.9以上,共标定14个共有峰,可确认红景天苷和绿原酸两个峰。红景天苷和绿原酸含量在不同产地大血藤中差异很大,以安徽产大血藤药材中含量为最高。结论所建立的高效液相色谱指纹图谱测定方法准确可靠,重现性好,可作为大血藤药材的鉴别和内在质量评价的依据。     

22种中草药提取物体外抗菌实验研究

目的:测定芸香草等22种中草药提取物体外抑菌活性。方法:乙醇冷浸制备22种植物药材的乙醇提取物,观察其对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白念珠菌、铜绿假单胞菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑制作用,用琼脂打孔法对其抗菌活性进行筛选,通过倍比稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果:22种乙醇提取物中有6种对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白念珠菌、铜绿假单胞菌有不同程度的抑制作用,有7种对MRSA有较强的抑制作用,抑菌圈直径为15~27 mm,MIC为31.25~500 mg/L,MBC为250~2 000 mg/L,对白念珠菌、大肠埃希菌活性较弱。结论:芸香草、肉豆蔻等7种对所测金黄色葡萄球菌及MRSA具有较好的抑菌效果。     

细叶石仙桃不同提取物体外抑菌作用的研究

目的研究细叶石仙桃醇提物不同萃取部位的体外抗菌活性。方法采用试管稀释法测定细叶石仙桃不同极性提取物的最低抑菌浓度（MIC）,用琼脂扩散法测定其抑菌圈的大小。结果细叶石仙桃不同极性提取物对白假丝酵母菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、消化链球菌的抑制作用明显。细叶石仙桃提取物对革兰阳性菌和白假丝酵母菌MIC范围为80～120 mg/mL,对革兰阴性菌的MIC范围为100～160 mg/mL。正丁醇萃取部分抑菌活性最强。结论细叶石仙桃提取物在体外有较好的抗菌活性。     

医院和社区获得性金黄色葡萄球菌耐药性情况调查

目的 了解临床分离的社区获得性和医院获得性金黄色葡萄球菌的耐药情况,为进一步指导临床治疗,更好地控制MRSA引起的感染提供依据.方法 采用K-B纸片扩散法检测金黄色葡萄球菌对不同种类抗生素的敏感性.结果 医院获得性甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(HA-MSSA)对头孢唑啉、庆大霉素和左氧氟沙星的耐药率显著高于社区获得性甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌( CA-MSSA) (P＜0.05);医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( HA-MRSA)对头孢唑啉、红霉素、克林霉素、四环素、庆大霉素、左氧氟沙星和利福平的耐药率显著高于CA-MSSA和HA- MSSA( P＜0.05);HA- MRSA多重耐药菌株所占的比率为90.4％,显著高于CA-MSSA的20.0％和HA-MSSA的37.4％,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 医院获得性金黄色葡萄球菌耐药情况较严重,CA-MSSA和HA-MSSA药物敏感性明显高HA-MRSA,HA-MRSA呈现多重耐药性.     

金黄色葡萄球菌L型对宫颈癌细胞生长的影响

目的:研究金黄色葡萄球菌(金葡菌)L型对体外培养的单层人宫颈癌细胞(HeLa)生长的影响作用.方法:用常规方法诱导金葡菌为L型后感染HeLa细胞,采用光学显微镜、透射电子显微镜检测金葡菌L型黏附及侵入细胞情况,并采用改良的MTT比色法检测细胞增殖能力.结果:光镜、电镜检查显示金葡菌L型能够黏附并且进入HeLa细胞;改良的MTT法检测表明金葡菌L型能够促进HeLa细胞增殖(P<0.01).结论:金葡菌L型能够感染并促进HeLa细胞增殖生长,揭示金葡菌L型可能与宫颈癌的发生有关.     

金葡菌及其L型诱导脐静脉内皮细胞凋亡及相关基因的研究

目的:探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)及其L型诱导细胞凋亡的作用及可能的分子机制.方法:用流式细胞术检测金葡菌及其L型感染人脐静脉内皮细胞(HUVECs) 后2 h、4 h、6 h、8 h和10 h的细胞凋亡率,并同时用免疫组化方法检测各时间点bcl-2及Fas基因的表达情况. 结果:金葡菌及其L型均能诱导HUVECs发生凋亡,与对照组比较差异有显著性(P<0.05～P<0.01).金葡菌L型诱导细胞的凋亡率均低于金葡菌(P<0.01);bcl-2及Fas基因表达率在感染后6 h与对照组比较差异均有显著性(P<0.01),在诱导的时间内bcl-2基因表达率逐渐降低,而Fas基因表达率逐渐增加(P<0.01).结论:金葡菌及其L型均能诱导HUVEC发生凋亡,其机制可能与下调bcl-2蛋白及上调Fas蛋白有关.