高密度脂蛋白介导大鼠皮肤成纤维细胞内胆固醇流出的机制

目的 研究高密度脂蛋白－３（ＨＤＬ３）介导大鼠皮肤成纤维细胞胆固醇（ｃｈ）流出机制。方法 用Ｎ－乙酰咪唑修饰ＨＤＬ,阻断ＨＤＬ与细胞受体相互作用,观察其对ＨＤＬ３介导细胞ｃｈ流出的影响。用ＦＩＴＣ标记ＨＤＬ示踪ＨＤＬ３在介导细胞ｃｈ流出中自身代谢过程。结果 牛血清白蛋白（对照组）介导４．７４％细胞ｃｈ流出,ＨＤＬ３组和Ｎ－乙酰咪唑ＨＤＬ组分别为３１．８５％和８．４１％。ＦＩＴＣ－ＨＤＬ３与细胞３７     

抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体的制备和生物学性质

用经Ｃｕ￣（２＋）氧化修饰４ｈ和２４ｈ的小鼠低密度脂蛋白（ｍｕｒｉｎｅＯ－ＬＤＬ）混合物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于融合前３天用经Ｃｕ￣（２＋）氧化修饰４ｈ和２４ｈ人低密度脂蛋白（ｈｕｍａｎＯ－ＬＤＬ）的混合物加强免疫，取免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤ＳＰ－（２／０）细胞融合，获得５株抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体，命名为ＨＯＬ－１、ＨＯＬ－２、ＨＯＬ－３、ＨＯＬ－４、ＨＯＬ－５。这些单抗均有较高的抗体效价，抗体类型为ＩｇＧ－（２ａ），单克隆抗体相加实验表明，ＨＯＬ－１、ＨＯＬ－３、ＨＯＬ－４识别Ｏ－ＬＤＬ的同一抗原位点，ＨＯＬ－２识别另一个，ＨＯＬ－５识别第３个。竞争性ＢＡ－ＥＬＩＳＡ实验显示：ＨＯＬ－１能够识别丙二醛修饰的ＬＤＬ（ＭＤＡ－ＬＤＬ）、乙酰化修饰的ＬＤＬ（Ａｃｅｔｙｌ－ＬＤＬ）和各种修饰度的Ｏ－ＬＤＬ，但与未修饰ＬＤＬ（ｎ－ＬＤＬ）无交叉反应。     

氧化低密度脂蛋白对体外培养的肾小球系膜细胞的影响

我们观察了经氯化铜氧化修饰所形成的氧化低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）对体外培养的人肾小球系膜细胞生长、释放肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的作用。结果发现，Ｏｘ－ＬＤＬ刺激肾小球系膜细胞４８ｈ、７２ｈ以及１０６ｈ，均有抑制该细胞生长的作用。刺激４８ｈ时，细胞对ＭＴＴ的摄入量（以Ａ５７０表示），与Ｏｘ－ＬＤＬ的浓度成反比（ｒ＝－０．９９５，Ｐ＜０．０１）。刺激１８ｈ的细胞上清对Ｌ９２９细胞（ＴＮＦ敏感株）的杀伤能力有所增强，上清中的ＬＤＨ含量明显升高。与未修饰的低密度脂蛋白相比，Ｏｘ－ＬＤＬ对系膜细胞表现出明显的毒性，在高脂血症肾损伤时具有重要意义     

氧化修饰低密度脂蛋白的蛋白组份可引起巨噬细胞线粒体膜的损伤

采用ＡＣＡＳ５７０测定小鼠腹腔巨噬细胞线粒体膜电位，观察了氧化修饰低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）对巨噬细胞线粒体膜的损伤及其不同组份（ｍｏｉｅｔｙ）在致损伤中的作用。结果显示Ｏｘ－ＬＤＬ可使巨噬细胞线位体膜产生损伤，用ＧＳＨＰｘ模拟物ｅｂｓｅｌｅｎ清除Ｏｘ－ＬＤＬ上的脂氢过氧化物（ＬＯＯＨ）可使损伤减轻２０％。单独的脂质组份虽然含有大量的ＬＯＯＨ，但对巨噬细胞线粒体膜电位无显著影响，而单独的蛋白组份则可引起线粒体膜电位下降，其降低程度与Ｏｘ－ＬＤＬ清除ＬＯＯＨ后的降低程度相当，说明Ｏｘ－ＬＤＬ清除ＬＯＯＨ后对线粒体膜的损伤可能是由修饰的载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）产生的。     

抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体的制备和生物学性质

用经Ｃｕ＾２＋氧化装饰４ｈ和２４ｈ的小鼠低密度脂蛋白（ｍｕｒｉｎｅＯ－ＬＤＬ）混合物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于融合前３天用经Ｃｕ＾２＋氧化修饰４ｈ和２４ｈ人低密度脂蛋白（ｈｕｍａｎ Ｏ－ＬＤＬ）的混合物加强免疫，取免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤ＳＰ２／０细胞融合，获得５株抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体，命名为ＨＯＬ１、ＨＯＬ２、ＨＯＬ３、ＨＯＬ４、ＨＯＬ５。这些单抗均有较高的抗体效价，抗体类型为Ｉｇ     

氧化修饰低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡

通过观察凋亡细胞的核形态及特征ＤＮＡ梯形图谱（ＤＮＡｌａｄｄｅｒ），研究了氧化修饰和低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）诱导的巨噬细胞凋亡。结果显示：Ｏｘ－ＬＤＬ可引起明显的巨噬细胞凋亡，表现在Ｏｘ－ＬＤＬ处理的细胞核发生固缩，染色体ＤＮＡ断裂的的凝胶电泳图谱呈典型的梯形，正常和乙酰化的ＬＤＬ（Ｎ－ＬＤＬ和ＡＣ－ＬＤＬ）未引起明显的巨噬细胞凋亡。Ｏｘ－ＬＤＬ引起的巨噬细胞雕凋亡具有浓度和时间效应且与其修饰     

血液透析患者氧化修饰低密度脂蛋白水平检测与分析

近年来研究发现,氧化修饰低密度脂蛋白（ＯｘｉｄｉｚｅｄＬｏｗＤｅｎｓｉｔｙＬｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｏｘ－ＬＤＬ）是ＬＤＬ致动脉粥样硬化（ＡＳ）的重要机制［１］,故检测ＯＸ－ＬＤＬ将有助于对动脉粥样硬化性心血管疾病（ＡＳＣＶＤ）的预测［２］。慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）血液透析（ＨＤ）患者主要死于心脑血管疾病［３］。为探讨ＣＲＦ血透患者体内Ｏｘ－ＬＤＬ及其它脂蛋白成分的水平,我们检测了ＣＲＦ２１例ＨＤ患者血浆Ｏｘ－ＬＤＬ及血清总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、载脂蛋白Ａ１（ＡｐｏＡ１）、载脂蛋白Ｂ…     

大鼠肝窦状隙细胞内吞高密度脂蛋白-2的逆向胞饮作用

研究肝细胞选择性摄取高密度脂蛋白（ＨＤＬ２）胆固醇酯的机制。大鼠肝窦状腺细胞与异硫氰酸荧光标记无ＡｐｏＥ－ＨＤＬ２ＦＩＴＣ－ＨＤＬ２培养后，测定细胞结合、内吞与释放荧光强度。结果：细胞与ＦＩＴＣ－ＨＤＬ２３７℃培养３ｈ，细胞结合与内吞的荧光强度分别为８．８９±０．８７和５．３５±０．６９。细胞进一步３７℃培养２ｈ，细胞释放的三氯醋酸（ＴＣＡ）沉淀和ＴＣＡ可溶性荧光强度分别为２．９６± ０．５３和０．２８± ０．１５。乙酰咪唑修饰ＨＤＬ２，阻断其与细胞受体相互作用后的细胞结合与内吞分别为１．１５±０．３８和０．７７±０．１７，细胞释放的ＴＣＡ沉淀和ＴＣＡ可溶性荧光强度分别为０．４３±０．１６和０．０５±０．０４。结论：①细胞内吞ＨＤＬ２中８５．５％通过受体途径，１４．５％通过非特异性途径；②进入细胞内ＨＤＬ２颗粒中载脂蛋白（Ａｐｏ）没有经过溶酶体途径分解。而通过逆向胞饮途径释放出胞外。     

氧化修饰低密度脂蛋白的蛋白组份可引起巨噬细胞线粒体膜…

采用ＡＣＡＳ５７０测定小鼠腹腔巨噬细胞线粒体膜电位，观察了氧化修饰低密度脂蛋白对巨噬细胞线粒体膜的损伤及春不同组份（ｍｉｏｅｔｙ）在致损伤中的作用，结果显示Ｏｓ－ＬＤＬ可使巨噬细胞线粒体膜产生抽伤，用ＧＳＨＰｘ模拟物ｅｂｓｅｌｅｎ清除Ｏｘ－ＬＤＬ上的脂氢过氧化（ＬＯＯＨ）可使损伤减轻２０％，单独的脂质份虽然含有大量的ＬＯＯＨ，但在噬细胞线粒体膜电位无显著影响，而单独的蛋白组份则可引起线粒体膜一下降     

云芝多糖对氧化修饰LDL抑制巨噬细胞一氧化氮产生的保护作用

通过测定巨噬细胞培养上清液中亚硝酸盐的含量和观察细胞内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）ｍＲＮＡ含量的变化，研究了云芝多糖（ＰＳＫ）对氧化修饰ＬＤＬ抑制脂多糖（ＬＰＳ）诱导的巨噬细胞ＮＯ产生的保护作用。结果显示：Ｏｘ－ＬＤＬ可抑制ＬＰＳ诱导的巨噬细胞ＮＯ产生，而正常（Ｎ－ＬＤＬ）和乙酰化ＬＤＬ（ＡＣ－ＬＤＬ）则没有抑制作用，非特异性免疫调节剂ＰＳＫ处理小鼠对Ｏｘ－ＬＤＬ引起的巨噬细胞ＮＯ产生量下降具有保护作用     

慢性肾炎各肾功能与脂质变化的关系及临床意义

通过对６１名不同肾功能的慢性肾炎患者胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、载脂蛋白Ａ（ＡｐｏＡ Ⅰ）及载脂蛋白（ＡｐｏＢ）和高密度脂蛋白（ＨＤＬ－ｃｈ）、低密度脂蛋白（ＬＤＬ－ｃｈ）的测定,并与正常对照组４０例比较。发现慢性肾炎各期患者血清ＴＧ、ＬＤＬ－ｃｈ明显升高,ＨＤＬ－ｃｈ、ＡｐｏＡⅠ下降,这些改变以慢性肾功能不全组明显,ＡｐｏＢ在慢性肾功能衰竭组下降,其余各级升高。笔者在此就慢性肾炎发生继发血     

脑血管病血脂水平临床分析

本次报道２９２例脑血管病患者的ｃｈ，ＴＧ，ＨＤＬ－Ｃ，ＬＤＬ－ｃ，Ａｐｏ－Ａ１和Ａｐｏ－Ｂ血浓度测定结果提示三种脑血管病ＴＧ，ｃｈ，ＬＤＬ－Ｃ均高于对照组，有显著性差异。ＨＤＬ－Ｃ及Ａｐｏ－Ａ１血浓度降低是反映脑梗塞肠代谢异常的突出指标；ＨＤＬ－Ｃ血浓度升高易发生脑出血；ＨＤＬ－Ｃ血浓度正常或低下及Ａｐｏ－Ａ１低下易发生脑梗塞；ＴＧ，ｃｈ，ＨＤＬ－Ｃ，ＬＤＬ－Ｃ和Ａｐｏ－Ａ１血浓度均升高易发生混合     

氧化修饰低密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞周期及增殖细胞核抗原的影响

应用流式细胞仪对氧化修饰低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）刺激动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖、细胞周期及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、Ｐ５３、Ｐ２７及ｃ－ｅｒｂＢ蛋白表达的影响进行了观察。结果发现：Ｏｘ－ＬＤＬ和天然低密度脂蛋白（Ｎ－ＬＤＬ）刺激培养人动脉ＳＭＣ细胞增殖时其Ｓ期细胞百分率增加，且Ｏｘ－ＬＤＬ的作用比Ｎ－ＬＤＬ强，表明Ｏｘ－ＬＤＬ和Ｎ－ＬＤＬ刺激ＳＭＣ细胞增殖时与Ｓ期细胞的增加有关；Ｏｘ－ＬＤＬ刺激ＳＭＣ增殖的同时ＰＣＮＡ蛋白阳性率增加，而与Ｐ５３、Ｐ２７和ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白的表达无关。提示ＰＣＮＡ可能参与了Ｏｘ－ＬＤＬ刺激ＳＭＣ的细胞增殖作用；特异性蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂ＧＦ１０９２０３Ｘ能降低Ｏｘ－ＬＤＬ刺激ＳＭＣ增殖过程中ＰＣＮＡ的阳性率，表明该细胞增殖过程中ＰＣＮＡ表达的抑制可能与ＰＫＣ信号传递通路有关。     

血清HDL—Ch,ApoA1,ApoB和LP（a）测定对预测冠心病的临床意义

目的 探讨血清ＨＤＬ－Ｃｈ、ＡｐｏＡ１、ＡｐｏＢ和ＬＰ（ａ）测定对预测冠心病的临床意义。方法 采用氧化酶直接测定法以及免疫比浊不分别测定总胆固醇（Ｃｈ）、甘油三酯血清高密度脂蛋白（ＨＤＬ－Ｃｈ）和ＬＰ（ａ）,并对冠心病组与健康对照组进行比较。结果 冠心病组与对照组ＨＤＬ－Ｃｈ、ＡｐｏＡ１、ＡｐｏＢ和ＬＰ（ａ）浓度有显差异,当ＨＤＬ－Ｃｈ〈１．０ｍｍｏｌ／Ｌ,ＡｐｏＡ１〈１．０ｇ／Ｌ,ＡｐｏＢ〉０     

高密度脂蛋白氧化修饰对大鼠巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制

研究高密度脂蛋白-3（HDL3）氧化修饰对其介导大鼠腹腔巨噬细胞胆固醇（ch）流出功能影响及细胞Ch流出机制。HDL3和其组分载脂蛋白A－I（ApoA－I）经CU2+氧化修饰后分别与巨噬细胞（Mφ）一起培养，测定细胞ch流出量。结果：牛血清白蛋白（对照组）介导3.98％细胞ch流出，HDL3和氧化HDL3（Ox—HDL3）组分别为41．78％和17．43％，ApoA—I和Ox－ApoA一I分别为40％和17．33％。结论：1．HDL氧化修饰后介导细胞ch流出功能显著降低。2．HDL的这一功能是由其ApoA—I组分介导的。     

脂血康对冠心病患者血浆HDL亚组分水平及颗粒直径的影响

研究了中药脂血康煎剂对冠心病１０２例的血浆脂蛋白、载脂蛋白（Ａｐｏ）、高密度脂蛋白（ＨＤＬ）亚组分ＨＤＬ２、ＨＤＬ３水平的影响，并通过４％～３０％聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳观察了给药前后ＨＤＬ亚组分的颗粒直径和相对百分含量的变化。结果显示，脂血康能显著降低患者血浆甘油三酯（ＴＧ，Ｐ＜０．０５），总胆固醇（Ｔｃ，Ｐ＜０．０５），低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬｃ，Ｐ＜０．０５）和ＡｐｏＢ（Ｐ＜０．０２）的水平以及冠脉风险指数（ＣＩ，Ｐ＜０．００５），升高ＡｐｏＡ－Ⅰ（Ｐ＜０．００５）、ＨＤＬｃ（Ｐ＜０．０１）和ＨＤＬ２ｃ（Ｐ＜０．００５）的水平，增加颗粒直径较大的ＨＤＬ２ｂ的相对百分含量（Ｐ＜０．０５），而且作用优于复方丹参片。提示脂血康能有效地改善冠心病患者的脂蛋白代谢，影响ＨＤＬ的化学组成和颗粒分布，促进胆固醇逆向转运，从而预防动脉粥样硬化病变的发展。     

新西兰兔血脂值测定

利用全自动生化分析仪检测８０只新西兰兔的血脂值，包括甘油三脂（ＴＧ）、总胆固醇（ＣＨＯ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬＣ）、载脂蛋白Ａ（ＡｐｏＡＩ）、载脂蛋白Ｂ（ＡｐｏＢ）、脂蛋白（Ｌｐ［ａ］）等７项指标，其数值分别为１．００±０．７３、１．７５±０．９１、０．４７±０．１７、０．８１±０．７１ｍｍｏｌ／Ｌ、０．１９±０．０４、０．０４±０．０１ｇ／Ｌ和１９．８±３０．７ｍｇ／Ｌ，并推算ＨＤＬＣ／ＣＨＯ、ＡｐｏＡ／ＡｐｏＢ为０．３４±０．１５、５．８５±３．６７。     

香烟烟雾提取物对兔气道平滑肌细胞毒性损伤及对一氧化氮生成的影响

目的探讨吸烟对气道平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）的影响。方法分别以０、５％、１０％和３０％的香烟烟雾提取物（ＣＳＥ）孵育兔ＡＳＭＣ，测定其细胞存活率、丙二醛（ＭＤＡ）含量、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）漏出及一氧化氮（ＮＯ）稳定代谢终产物亚硝酸盐（ＮＯ－２）水平。用ｏｎｅｗａｙＡＮＯＶＡ检验及直线回归作统计学分析。结果在４８ｈＣＳＥ显著增加了ＡＳＭＣ的ＮＯ－２释放（１０％、３０％ＣＳＥ分别较对照组增加７５．７％和１１５．３％，Ｐ＜０．０１）；降低了细胞存活率，增加了细胞ＭＤＡ含量和ＬＤＨ漏出（Ｐ均＜０．０１），毒性损伤指标与ＮＯ－２的释放高度相关（ｒ分别为－０．７２１、０．７０６和０．７７３，Ｐ均＜０．０１）。结论吸烟可能对ＡＳＭＣ具有直接损伤作用，ＣＳＥ可能通过ＮＯ介导气道炎症损伤过程。     

抗ApoB抗体对LDL代谢的影响

＾１３１Ｉ标记的人血清低密度脂蛋白（ＬＤＬ）与羊抗人ＡｐｏＢ抗体形成的ＬＤＬ－抗体复合物以及＾１３１Ｉ－ＬＤＬ，进行由静脉注入正常家兔体内和小鼠腹腔巨噬细胞增减两项实验。结果显示，抗ＡｐｏＢ抗体的加入加快了ＬＤＬ在家兔血浆中的清除率；增加了网状内皮系统（如肝、脾组织）和巨噬细胞对ＬＤＬ的摄取；２４ｈ细胞培养可见巨噬细胞内有大量脂滴堆积。结果表明，抗ＡｐｏＢ抗体增加组织和巨噬细胞对ＬＤＬ的大量摄取，     

高血压病患者血清脂蛋白,载脂蛋白与胰岛素的关系

通过检测４１例高血压病患者和２７例正常对照者血清脂质、脂蛋白、载脂蛋白、葡萄糖及胰岛素含量。结果表明：与正常对照者比较，高血压病患者血清甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－ＣＨ）、ＡｐｏＢ、Ｉ及Ｉ／Ｇ比值均显著增加，高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－ＣＨ）、ＨＤＬ２－ＣＨ、ＡｐｏＡＩ及ＡｐｏＡｉ／ＡｐｏＢ比值均显著降低。相关性分析显示，高血压病Ｉ与ＴＧ和ＡｐｏＢ均呈正相关，与ＨＤＬ２－ＣＨ和ＡｐｏＡＩ