体外鼠脑星形胶质细胞损伤后c-fos蛋白、GFAP及其mRNA的动态表达

研究ｃ－ｆｏｓ蛋白、ＧＦＡＰ—ｍＲＮＡ和ＧＦＡＰ在鼠脑星形胶质细胞（ａｓｔｒｏｃｙｅ，ＡＳ）损伤后反应性星形胶质化时的动态变化。用ＡＳ原代培养技术建立体外ＡＳ机械损伤模型．并结合应用免疫组织化学和原位杂交方法．结果：（１） ｃ－ｆｏｓ蛋白于损伤后 ４５ ｍｉｎ即有阳性表达，伤后 ２ ｈ消失； （２损伤边缘的 ＡＳ于损伤后 ６ ｈ开始表达 ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ， １ｄ达高峰，３ ｄ则在损伤边缘少数 ＡＳ中可检出 ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ；（３）损伤后 １ｄ，ＧＦＡＰ表达明显增强，胞体肥大，粗大突起伸向损伤区形成反应性星形胶质化。结论：（ｌ） ＡＳ受损后原癌基因 ｃ－ｆｏｓ首先被激活，ｃ－ｆｏｓ蛋白呈－过性的表达，参与调节ＡＳ的激活；（２）ＡＳ损伤后，ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ的转录增加，ＧＦＡＰ表达增强是由于在转录水平上ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ表达增强的结果；（３）反应性星形胶质化是ＡＳ的自身特性，以ＡＳ肥大为主，ＡＳ受损后，原癌基因ｃ－ｆｏｓ的蛋白参与调节ＡＳ激活的确切机制尚待阐明。     

神经生长因子对脊髓损伤后脊髓组织c—fos蛋白表达的影响

为探讨神经生长因子（ＮＧＦ）对脊髓损伤后脊髓组织ｃ－ｆｏｓ基因的影响。Ｗｉｓｔａｒ大鼠分成三组：正常对照组、生理盐水组、ＮＧＦ组；用ＡｌｌｅｎＷＤ法以１０ｇ×２．５致伤力损伤Ｔ８脊髓。ＮＧＦ组经蛛网膜下腔导管分别于术后即刻、１０、３０分、１、２、３、４小时注入ＮＧＦ溶液２０μｌ，生理盐水组经导管于同时间内注入等量的生理盐水。用免疫组化法检测ｃ－ｆｏｓ蛋白在脊髓组织中的表达。结果示生理盐水组在术后１     

c—fos蛋白在沙鼠全脑缺血后再灌注时海马中的表达…

在沙鼠急性全脑缺血的模型上，采用免疫组化方法观察了电针对海马各区ｃ－ｆｏｓ蛋白表达及神经元细胞形态改变的影响，电针们位为“风府”和“筋缩”，频率７ＨＺ，强度６ｍＡ，电针持续３０ｍｉｎ。结果表明，电针能明显加强急性全脑缺血沙鼠海马各ｃ－ｆｏｓ蛋白的表达，ＣＡ１区尤为明显。同时电针能明显改善缺血后ＣＡ１区神经元的变性坏死。提示电针对缺血后海马神经元细胞的保护作用可能与加强ｃ－ｆｏｓ蛋白的表达有关。     

星形胶质细胞对损伤反应的体外实验研究

目的：研究体外星形胶质细胞（Ast）反应性胶质化的发生、发展过程与规律。方法：体外分离培养Ast,利用划伤的方法,建立Ast对损伤反应的实验模型,通过形态学观察、RT－PCR、免疫细胞化学、原位杂交及图像分析等方法,研究体外Ast对损伤的反应及规律。结果：损伤体外培养的Ast后,观察到反应性胶质化的典型特征,表现为Ast胞体肥大、突变增粗、延长,GFAP免疫细胞化学染色增强;原位杂交、RT－PCR分析表明,GFAPmRNA表达显著提高。上述变化在伤后1d即可见到,5－7d达到高峰。结论：体外分离培养的Ast对损伤表现出活跃的反应,呈现出典型的反应性胶质化特征,其发生、发展过程与规律类似于在体情况下的Ast反应。     

电针对体外培养星形胶质细胞机械性损伤后反应性胶质化的影响

目的观察电针对体外培养星形胶质细胞(Astrocyte,Ast)机械性损伤后反应性胶质化的影响。方法取新生3d龄SD大鼠的大脑皮层进行Ast原代培养,取第三、四代细胞制作细胞机械性损伤模型,电针刺激,用倒置相差显微镜及免疫细胞化学荧光染色观察细胞生长增殖,细胞形态及胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的变化。结果模型组Ast机械性损伤后,细胞增生,体积变大,GFAP表达增强。电针组较模型组细胞增生减少,细胞体积变化不大,GFAP表达较弱。结论电针刺激可以抑制体外培养Ast机械性损伤后的增生,降低细胞内GFAP的表达,即电针可以抑制Ast的反应性胶质化。     

大鼠脑损伤时神经细胞c—fos,c—jun和c—myc基因表达变化

目的 观察大鼠脑损伤不同时间皮质神经细胞早期快反应基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｍｙｃ表达变化。方法 应用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、原位杂交和免疫组织化学方法检测皮质神经细胞中ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｍｙｃ的表达。结果 脑损伤后１５ｍｉｎ,伤测皮质神经细胞出现上述３种基因ｍＲＮＡ的表达,随时间的延长,表达逐渐增加,于伤后３ｈ达高峰并持续至伤后２５ｈ伤后,伤后７２ｈ恢复至对照水平ｃ－ｆｏｓ、ｃ－     

大鼠Meynert基底核注入海人藻酸后c—fos原癌基因蛋白在脑 …

为研究Ｍｅｙｎｅｒｔ基底核与纹状体边缘区以及脑内其他跟学习记忆有关的边缘系统结构间的关系,将海人藻酸注射于大鼠Ｍｅｙｎｅｒｔ基底核后,观察ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白在脑内的表达。海人藻酸注射４ｈ后,脑内只有少量ｃ－ｆｏｓ阳性表达;海人藻酸注射８ｈ后,脑内ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白表达增至最高峰。在海马、齿状回、中央杏仁核、纹状体、边缘区中有大量密集的ｃ－ｆｏｓ阳性表达。在终纹床核、丘脑网状核、外侧隔核、丘     

EGFR免疫组化和c—fos原位杂交研究皮肤上皮细胞对损伤开始…

用４０只ＳＤ大鼠在背侧皮肤做切创，按不同的时间取创缘皮肤切片进行ＥＧＦＲ单克隆抗体免疫组化和ｃ－ｆｏｓ基因的原位杂交实验。结果，在损作后５ｍｉｎ，开始出现ＥＧＦＲ阳性反应，并沿表皮基底带自创缘向外周扩散。１５ｍｉｎ上皮细胞开始出现ｃ－ｆｏｓ阳性反应。提示皮肤损伤后，至少在５ｍｉｎ之内。上皮细胞开始对损伤作出反应。１５ｍｉｎ左右，细胞基因开始表达，进行分裂增殖，参与皮肤的组织修复。     

急性应激诱导即时反应基因c—fos和c—jun的表达：I：c—fos和c—j …

目的 研究下丘脑和海马内ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ蛋白的表达与应激反应之间的时效关系。方法 采用特异性抗体的原位免疫细胞化学方法，对游泳应激后不同时间点的大鼠下丘脑和海马内ｆｏｓ和ｊｕｎ蛋白阳性神经元的分布进行观察，用图像分析技术对大鼠下丘脑室旁核（ＰＶＮ），视上核（ＳＯＮ）和海马齿状回（ＤＧ）内的ｆｏｓ和ｊｕｎ阳性细胞的相对切面面积比和平均目标灰度进行分析。结果 游泳应激结束后３ｈ，室旁核和视上核及     

5—甲基硫代腺苷对培养鼠脑星形胶质细胞反应性胶质化的抑制

观察５－甲基硫代腺苷（５－ＭＴＡ），作为碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）受体的酪氨酸激酶抑制剂，对反应性星形胶质化的影响。原代培养大鼠星形胶质细胞（ＡＳ）行机械刮伤后，应用免疫组织化学及原位杂交法检测增生细胞核怕（ＰＣＮＡ），胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）及其ｍＲＮＡ表达。结果：与对照组相比，损伤后１－２ｄ，实验组ＡＳ胞体瘦小，突起短少，增生减弱（ＰＣＮＡ阳性细胞数减少，Ｐ〈０．０１），ＧＦＡＰ－     

c—fos蛋白在大鼠肝癌发生中的表达及意义

采用免疫组织化学ＡＢＣ法，对二乙基亚硝胺（ＤＥＮ０诱发大鼠肝癌发生过程中ｃ－ｆｏｓ蛋白在肝组织中的表达进行了系统观察。结果：正常大鼠肝细胞不表达ｃ－ｆｏｓ蛋白，诱癌第４周即可见少量肝细胞呈ｃ－ｆｏｓ蛋白阳性表达。随诱癌发展进程，肝细胞ｃ－ｆｏｓ蛋白表达逐渐增强，至诱癌中期（８－１２周），肝增生结节内部分肝于ｃ－ｆｏｓ蛋白阳性表达。诱癌晚期（１８周），癌结节内大部分肝癌细胞亦呈ｃ－ｆｏｓ蛋白阳性表达     

连续不同时间睡眠剥夺后大鼠脑干中c—fos蛋白的表达

目的 探索睡眠剥夺的脑机制。方法 该研究采用小平台水环境法建立大鼠睡眠剥夺模型，用fos蛋白免疫组化的方法分别测量睡眠剥夺12h、24h、48h、72h、96h组、大平台对照组、正常单独饲养组脑中fos蛋白的表达。结果 睡眠剥夺使fos蛋白在脑干中不同区域的表达不同，主要区域有孤束核、臂旁核、脑桥被盖核、脑桥网状结构、蓝斑下核及被盖背外侧核。结论 这些脑结构同异相睡眠有关，但不存在着明显地随睡眠剥夺时间延长表达增多的现象。     

肾上腺素能受体激动剂与阻断剂对血管平滑肌细胞增殖和c—fos,c—my…

研究肾上腺素能受体激动剂与阻断剂对血管平滑肌细胞增殖、ＤＮＡ合成和ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ原癌基因表达的影响。应用细胞培养、＾３Ｈ一胸腺嘧啶核苷掺入和斑点杂交的方法。肾上腺素能体激动剂可促进离全培养的大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖、ＤＮＡ合成和原癌基因的表达，该效应可被其相应的阻断剂所抑制。     

氟烷吸入麻醉引起c—fos基因在中枢神经系统的表达与分布

研究氟烷吸入麻醉在中枢神经系统作用部位。应用ｃ－ｆｏｓ基因免疫组织化学方法。ＳＤ大鼠在吸入氟烷浓度为０．７５％．１。５％和２％麻醉１ｈ后，Ｆｏｓ阳性神经元主要分布于端脑；梨状皮层，杏仁核簇，伏核，外侧隔核，终纹麻核、海马ＣＡＩ区，海马回嗅觉小岛；     

大鼠肾缺血再灌注损伤时c—fos基因的表达

为探讨原癌基因ｃ－ｆｏｓ在急性缺血性肾脏损伤修复中的分子调控作用，用免疫组织化学法及原位分子杂交技术，对急性肾缺血再灌注后大鼠肾组织内Ｆｏｓ蛋白及ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的分布、强度、时程和动力学特征进行研究。缺血再灌注早期即可诱导肾组织中ｃ－ｆｏｓ的高效表达，肾缺血４５ｍｉｎ，Ｆｏｓ蛋白表达在再灌注１ｈ、２ｈ￣４ｈ达高峰、８ｈ锐减、２４ｈ消失。ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ０．５ｈ出现、１ｈ达高峰、２ｈ锐     

地塞米松对肾缺血再灌注时c—fos bcl—2 ICAM—l蛋白表达的影响

目的：探讨大鼠肾缺血再灌注损伤不同时间c—fos、bcl—2、ICAM—1蛋白的表达及地塞米松对其影响。方法：用免疫组化法检测大鼠急性肾缺血再灌注不同时间内及地塞米松干预后c—fos、bcl—2、ICAM—1蛋白表达的分布及强度变化。结果：c—fos蛋白分布于近曲小管、远曲小管、集合管上皮细胞的细胞核、细胞浆内，再灌注后1h表达明显增强，3h达高峰，6h锐减。bcl—2蛋白主要分布于近曲小管上皮细胞的细胞浆，再灌注后1h表达明显增强，6h达高峰，24h仍有较强表达。ICAM—1蛋白分布在肾血管、肾小管等部位，其中以肾血管为著，其表达增强于再灌注后1h，直到24h仍有增高趋势。地塞米松干预后c—fos、ICAM—1蛋白表达明显下降(P＜0．01)。bcl—2表达明显增高(P＜0．01)。结论：地塞米松对肾缺血再灌注损伤有较好的保护作用。     

针刺对大鼠淋巴细胞及肾上腺髓质细胞ppENK和c—fos基因表达…

将４０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为４组；①针刺“足三里”穴２０ｍｉｎ；②不施针刺，上架２０ｍｉｎ，③针刺２０ｍｉｎ后８ｈ；④不针，上架２０ｍｉｎ后８ｈ。以钾离子透入法于针刺，上架前后测大鼠痛阈，制备分离的周血淋巴细胞滴片，膜片以及肾上腺石片标本。以生物素标记的ｃ－ｆｏｓ ｃＤＮＡ探针及ｐｐＥＮＫ寡核苷酸探针分别显示ｃ－ｆｏｓ的基因表达在４组比较中，第１组的信号均强于其它３组；③淋巴细胞及肾上腺髓质细     

胚鼠大脑皮质神经元原代培养中NMDA诱导c—fos mRNA表达

为了进一步研究对神经元的早期保护，本实验观察Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）在胚鼠大脑皮层神经元原代培养诱导ｃ－ｆｏｓ基因表达特点。结果显示：ＮＭＤＡ可诱导快速、短暂的ｃ－ｆｏｓ基因表达，并呈剂量、时间依赖关系；ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达可被ＮＭＤＡ竞争性或非竞争性受体拮抗剂Ａｐ－５（５０μｍｏｌ／Ｌ）ＭＫ－８０１（１０μｍｏｌ／Ｌ）完全阻断，Ｍｇ＾２＋（２ｍｍｏｌ／Ｌ）可部分阻滞，异搏定、尼凡     

亚低湿治疗家兔脑外伤后c—fos蛋白变化的实验研究

目的 研究脑外伤后ｃ－ｆｏｓ基因表达及全身亚低温治疗脑外伤后ｃ－ｆｏｓ基因表达的变化。方法：将成年雄性家兔利用颅脑外伤自由落体打击器造成一侧脑外伤动物模型,伤后动物被分为常组及亚低温组,常温组家兔体温维持在３７．０～３７．５℃,亚低温组 外伤后１０ｍｉｎ立即行亚低温治疗１５０ｍｉｎ（温度控制在３１．５～３２．５℃）,６ｈ后省死各组家兔,采用免疫组化方法及计算机图分析检测伤灶及周围脑组织ｃ－ｆｏｓ蛋     

惊厥易感大鼠听源性惊厥后脑内c—fos蛋白表达

目的：探讨遗传性癫痫易感大鼠Ｐ７７ＰＭＣ听源性惊厥的神经回路。方法：Ｐ７７ＰＭＣ大鼠以标准化听刺激诱发Ⅴ级吸源性惊厥，分别在惊厥后０、５、１、２、４、２４ｈ断头、取脑切片，行Ｆｏｓ免疫组化染色观察。结果：惊厥后脑内Ｆｏｓ样免疫洒色强度 呈明显的时间依赖和区域特点。多数核团在惊厥后０．５－１ｈ开始出现Ｆｏｓ表达，２－４ｈ达高峰，２４ｈ明显回落，不同核团其时程也存在差异，Ｆｏｓ表达最先出现在下丘平面尾