肝素对脂多糖诱导人肾小球系膜细胞增殖及细胞分泌物影响

为了解肝素对脂多糖诱导人肾小球系膜细胞增殖和细胞因子分泌的影响。作者采用四甲基偶氮唑蓝比色分析法及生物活性法,分别测定了人肾小球ＭＣ增殖和细胞因子的分泌情况。结果显示;在正常培养条件下,人肾上球ＭＣ分泌一定理的白细胞介素６（ＩＬ－６０和肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）。脂多糖诱导ＭＣ增殖及分泌ＩＬ－６,ＴＮＦ－α。高浓度的肝素（５００Ｕ／ｍｌ）促进ＭＣ增殖及分泌细胞因子,低浓度的肝素（５Ｕ／ｍｌ）抑制     

肝素对人肾小球系膜细胞生长的影响及机制

肝素是临床上常用的抗凝药物。近年来国外作者发现其对间质源性细胞，如血管平滑肌细胞、3T3成纤维细胞、肝储脂细胞等具有明显的抗增生作用[1]。肾小球系膜细胞是一种在结构和功能上十分相似于血管平滑肌细胞的血管周细胞。本实验通过建立人肾小球系膜细胞株，观察肝素对该细胞生长的抑制作用，并通过肝素对血小板源性生长因子（PDGF）和c—myc癌基因表达的影响，并探讨其作用机制。材料和方法人肾小球系膜细胞培养肾小球系膜细胞取自不宜做肾移植的供肾，参照我室大鼠系膜细胞培养方法［‘］，并做适当修改进行。系膜细胞增殖测定按已报…     

肝素对体外培养的人肾小球系膜细胞作用的研究

肝素是临床常用的抗凝药物,近年来普遍应用于肾小球疾病的治疗,然而,对肝素的非抗凝作用在肾小球疾病中意义的研究,尚未引起足够重视。本研究利用体外培养的人肾小球系膜细胞(GMC),观察了不同浓度的肝素对该细胞生长、释放肿瘤坏死因子(TNF)和乳酸脱氢酶(LDH)以及产生纤维连结蛋白(FN)的影响,以证实肝素的非抗凝作用与其抗凝作用一样,在介导肾小球疾病的缓解中,有着同样重要的地位,现报告如下:1　材料和方法1.1　人肾小球系膜细胞培养的建立　在无菌条件下,选用肾移植备用肾的部分肾皮质,经匀浆后,过80、100、150目不锈钢筛,用等渗盐水…     

肝素对大鼠肾小球系膜细胞的抑制作用

通过观察肝素对体外培养的大鼠肾不球系膜细胞生长、超微结构、细胞外基质合成及癌基因表达的影响，探讨肝素减轻以ＭｓＣ增生为特征的肾小球病变的可能怀。分离培养的ＭｓＣ经鉴定后，分为肝素组和对照组进行观察，结果发现肝素可明显抑制ＭｓＣ生长，此ＷＴＥＴ具有剂量依赖性，电镜发现肝素使ＭｓＣ微丝减少，内质网和高尔基体扩张，次组溶酶体增多，髓样小体形成。     

低密度脂蛋白对体外肾小球系膜细胞生长的影响

低密度脂蛋白对体外肾小球系膜细胞生长的影响王晓燕潘晓勤姜新猷低密度脂蛋白（ＬＤＬ）血症是肾脏疾病最常见的表现之一。为此，我们观察了人血浆ＬＤＬ对体外培养的人肾小球系膜细胞（ＧＭＣ）生长的影响。一、资料和方法１．ＬＤＬ分离：以依地酸抗凝的人血浆经超速离...     

血小板活化因子对人肾小球系膜细胞的影响

利用体外培养的人肾小球系膜细胞（ＧＭＣ）观察了血小板活化因子（ＰＡＦ）对其增殖、释放肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的影响，发现ＰＡＦ在较低浓度时（１０－８和１０－７ｍｏｌ／Ｌ），对ＧＭＣ摄取四唑盐（ＭＴＴ）的影响甚微，而较高浓度时（１０－６和１０－５ｍｏｌ／Ｌ）则有明显的抑制作用。经ＰＡＦ刺激１８ｈ的ＧＭＣ上清，对ＴＮＦ敏感的Ｌ９２９细胞株的杀伤能力有所增强，在ＰＡＦ１０－７ｍｏｌ／Ｌ时达高峰。此外，高浓度的ＰＡＦ尚具有促进ＧＭＣ释放ＬＤＨ的作用。这些结果说明：ＰＡＦ可以通过多种机理损伤肾小球系膜细胞，在肾小球的炎症反应中起重要作用     

肝素对脂多糖诱导人肾小球系膜细胞增殖及细胞分泌的影响

为了解肝素对脂多糖(LPS) 诱导人肾小球系膜细胞(MC)增殖和细胞因子分泌的影响,作者采用四甲基偶氮唑蓝比色分析法及生物活性法,分别测定了人肾小球MC增殖和细胞因子的分泌情况.结果显示:在正常培养条件下,人肾小球MC分泌一定量的白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α).脂多糖诱导MC增殖及分泌IL-6 、 TNF-α. 高浓度的肝素(500U/ml)促进MC增殖及分泌细胞因子, 低浓度的肝素(5U/ml)抑制MC增殖及分泌细胞因子. 据此,作者认为肝素仅在低浓度抑制MC增殖及细胞因子分泌,从而为临床治疗肾小球疾病和肝素剂量选择提供了一定的实验依据.     

肾小球内皮细胞对系膜细胞表达细胞粘附分子的影响

肾小球内皮细胞对系膜细胞表达细胞粘附分子的影响傅博程庆砾陈香美李文歌肾小球内皮细胞与肾小球基底膜、系膜细胞相毗邻，肾小球内皮细胞的损伤往往可以导致系膜细胞的病变［１］。为了探讨内皮细胞与系膜细胞相互关系在肾小球损伤演变过程中的作用，我们观察了肾小球内...     

系膜细胞的功能对肾小球滤过作用的影响

系膜细胞有两种类型即肾小球内系膜细胞和肾小球外系膜细胞，研究表明系膜细胞内有收缩系统存在，肾上球内系膜细胞与收缩功能有密切的关系，肾小球外系膜细胞功能的改变在管－球反馈的信号转导中起关键作用。此外，系膜细胞还有吞噬及产生并分泌多种生物活性物质等功能。其中系膜细胞的收缩在调节肾小球血液动力学如滤过系数和管－球反馈的变化方面可能具有重要的生理意义。     

紫草素对人胎肾小球系膜细胞增殖、凋亡及细胞外基质的影响

目的：研究紫草素对人胎肾小球系膜细胞(MC)增殖、凋亡及细胞外基质的影响。方法：采用人胎肾细胞培养法、MTT法、流式细胞仪及免疫组化的方法。结果：紫草素0．05、0．10、0．50及1，00mmol／L浓度对培养24、48、72h人MC有明显抑制作用；紫草素明显抑制高糖诱发的人MC细胞凋亡；紫草素0．05、0．10、0．50μg/ml显著抑制系膜基质层粘连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)及胶原Ⅳ(CoⅣ)的生成。结论：紫草素具抑制人MC增殖、细胞外基质生成及细胞凋亡作用。     

氧化低密度脂蛋白诱导人肾小球系膜细胞凋亡机制的研究

肾小球硬化的重要病理特征是进行性肾小球细胞外基质积聚和细胞的丧失。在肾小球炎症过程中 ,细胞过度凋亡导致细胞减少是肾小球硬化的重要原因[1] 。氧化低密度脂蛋白(Ｏｘ -ＬＤＬ)是引起肾小球硬化的重要因素[2 ,3] ,低浓度的Ｏｘ-ＬＤＬ(<10 0 μｇ/ｍｌ)抑制系膜细胞增殖 ,促进系膜细胞凋亡[4 ] ,但Ｏｘ -ＬＤＬ诱导系膜细胞过度凋亡的机制尚不清楚。我们利用体外培养的人肾小球系膜细胞进行实验 ,以探讨Ｏｘ-ＬＤＬ诱导系膜细胞凋亡的可能机制 ,为寻找延缓肾小球硬化的有效方法提供新思路。1　材料与方法1.1　实验材料　Ｂａｘ及Ｂｃ…     

低分子肝素对肾小球系膜细胞产生细胞外基质的影响

[目的]了解不同葡萄糖浓度环境下,低分子肝素对人系膜细胞表达纤维连接蛋白(FN)和IV型胶原作用。[方法]培养人肾小球系膜细胞,分为正常葡萄糖组、高葡萄糖组及加低分子肝素组,培养24、48 h收集细胞上清液,用酶联免疫法检测FN和IV型胶原。[结果]高糖组24和48 h FN分别为(1.552±0.546)ng/mL和(2.547±0.968)ng/mL明显高于正常糖组(0.777±0.076)ng/mL和(1.180±0.091)ng/mL(P<0.01);IV型胶原分别为(64.577±5.543)ng/mL和(80.140±6.605)ng/mL,明显高于正常糖组(42.468±5.615)ng/mL和(46.368±5.714)ng/mL(P<0.01)。在低分子肝素1 ng/mL的作用下,高糖组的FN24 h及FN48 h分别降低为(1.070±0.349)ng/mL及(1.918±0.074)ng/mL,IV型胶原24 h及IV型胶原48 h分别降低至(41.993±7.470)ng/mL及(40.490±4.377)ng/mL。低分子肝素提高至10 ng/mL时,高糖组的FN24 h及FN48 ...     

黄芪对大鼠肾小球系膜细胞增生水平的影响

目的：探讨黄芪注射液(AM)对大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增生作用的影响。方法:实验分三组，空白对照组，脂多糖组(LPS)，综合组(LPS十AM)。采用MTT掺入方法，于24、48小时，观察三组GMCs增生水平。结果：综合组于48小时GMCs增生的抑制最为显著，且GMCs增生水平明显低于脂多糖组(P＜0．01)和空白对照组(P＜0．05)。结论：AM能抑制大鼠GMCs增生。     

人肾小球系膜细胞原代培养及鉴定方法的研究

目的：建立一种重复性好、传代次数多的人肾小球系膜细胞培养方法。方法：取肾脏肿瘤手术切除后远离患病部位的正常肾脏组织、水囊引产的胎儿肾,三层筛网滤过分离,取最下层筛网上组织,用胶原酶消化,培养正常人肾小球系膜细胞。同时采用形态学观察和免疫荧光技术,对鼠抗人结蛋白,鼠抗人角蛋白进行鉴定,采用MTT、 流式细胞仪技术对不同来源肾脏的系膜细胞生长状况进行比较。结果：形态学、免疫荧光法鉴定表明培养细胞为肾小球系膜细胞,胎肾原代培养后8～10d即可传代,而成年肾脏原代培养后需15～16d方可传代。成年肾脏培养细胞至第4代细胞生长缓慢,贴壁能力减弱,出现死亡。而胎肾培养细胞则可继续培养至第7～10代。结论:三层滤网法分离人肾小球系膜细胞, 方法简单、高效,培养的原代肾小球系膜细胞符合肾小球系膜细胞的生物学特性,且进一步证明胚胎组织比成年个体肾脏原代细胞培养容易成功。     

LDL和HDL对体外培养的人肾小球系膜细胞生长的影响

我们利用体外培养的人肾小球系膜细胞（ＧＭＣ），观察了低密度脂蛋白（ＬＤＬ）和高密度脂蛋白（ＨＤＬ）对其增殖的影响。我们发现，经ＬＤＬ刺激４８ｈ，在浓度为５０～２００ｍｇ／Ｌ范围内，ＬＤＬ能促进系膜细胞增殖，且在１００ｍｇ／Ｌ时促进作用达高峰，ＭＴＴ掺入后细胞的Ａ值为０．２０８±０．０１９，较阴性对照（含５％脱脂小牛血清）０．０８５±０．０２４明显升高（ｔ＝８．０９２，Ｐ＜０．００１）。延长刺激时间至１０６ｈ，则高峰为２００ｍｇ／Ｌ，３Ｈ－ＴｄＲ掺入后的ｍｉｎ－１数为３０１０±３２４．５６，是阴性对照（１４３２．３４±５７０）的２倍多（ｔ＝４．２４１，Ｐ＜０．０１）。但当ＬＤＬ浓度＞２００ｍｇ／Ｌ时，细胞增殖水平均有所下降，甚至显示出轻度抑制作用。用２０％脱脂血清取代全脂血清，细胞增殖明显降低，Ａ值由０．４２２±０．０９降至０．１０２±０．０４２（ｔ＝７．８６，Ｐ＜０．００１）；在脱脂血清中重新加入２０ｍｇ／Ｌ和１００ｍｇ／Ｌ的ＬＤＬ，Ａ值上升为０．３３５±０．０５７和０．６４±０．０９８，分别为脱脂血清的３．２８和６．２７倍（ｔ值分别为８．０３和１１．９７，均Ｐ＜０．００１）。而不同浓度的ＨＤＬ对细胞显示有     

肾综合征出血热病毒对体外培养的人胚肾小球系膜细胞的影响

观察肾综合征出血热病毒Ａ９株（ＨＦＲＳＶ－Ａ９）对体外培养的人胚肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）的影响以及病毒唑、磷甲酸钠对病毒感染的抑制作用。采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、间接免疫荧光法（ＩＦＡ）、免疫酶组化法和电镜等技术检测ＭｓＣ中病毒、抗原与培养上清液中的病毒滴度。结果：ＨＦＲＳＶ－Ａ９感染ＭｓＣ７天后细胞中便有病毒抗原表达；电镜下胞浆中见到病毒颗粒和包涵体：病毒唑与磷甲酸钠能降低病毒抗原表达     

肾小球系膜细胞的分离和培养

目的 分离、培养和鉴定正常人肾小球系膜细胞。方法 筛网滤过分离正常人肾小球系膜细胞，同时采用免疫荧光技术，利用异硫氰酸荧光素(FITC)间接标记单克隆抗体；抗Ⅷ因子相关抗原抗体、抗结蛋白抗体、抗角蛋白抗体、抗细胞角蛋白抗体、抗Ⅳ型胶原抗体、抗纤维连接蛋白抗体、抗层粘连蛋白抗体对系膜细胞特有的中间微丝进行鉴定。并采用同期培养的同一来源的肾小球内皮细胞作对照。结果 抗Ⅷ因子相关抗原、抗角蛋白和抗细胞角蛋白抗体表达均为阴性，而抗结蛋白抗体、抗Ⅳ型胶原抗体、抗纤维连接蛋白抗体、抗层粘连蛋白抗体为阳性，说明培养的细胞为系膜细胞。结论 该种方法分离培养的细胞经过免疫荧光染色鉴定为肾小球系膜细胞。     

肾小球肾炎中系膜细胞α—SMA表达的分析

目的：探讨α－平滑肌肌动蛋白（α－SMA）在系膜细胞表型转化中的变化及意义。方法：应用免疫组化技术检测不同类型肾小球肾炎中系膜细胞α－SMA的表达程度。结果：α－SMA的表达程度与系膜细胞增生程度成正比。结论：肾小球肾炎中α－SMA的阳性表达标志着系膜细胞受损激活,细胞表型发生转化,功能恢复至胚胎状态,处于增殖／分泌表型。     

冬虫夏草对肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：观察冬虫夏草菌丝对体外培养的大鼠系膜细胞(MsC)增殖的影响。方法：应用血清药理学,使用氚标胸腺嘧啶([^3H]-TdR)掺入法检测大鼠肾小球MsC增殖。结果：含虫草菌丝血清可抑制MsC的增殖。结论：虫草菌丝可用于肾小球硬化的防治。