肝癌细胞中两种磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的变化

目的 在不同的生物学过程中观察磷脂酰胆碱特异性磷脂酶Ｃ（ＰＣ－ＰＬＣ）的活性变化，以及ＰＣ－ＰＬＣ在肝癌细胞中的作用。方法 采用亚安诱发大鼠肝癌，全反式视黄酸为肝癌细胞的诱导分化剂，ＰＣ－ＰＬＣ酶活性采用间接比色法测定，大鼠ＰＣ－ＰＬＣ酶蛋白采用亲和层析法进行部分纯化。结果 在肝癌细胞中观察到了两种不同活性的磷脂酰胆碱特异的磷脂酶Ｃ，一种是非钙依赖性，另一种是钙依赖性的。这两种酶活性有不同的生物学     

用酶联比色法测定肝脏磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D及其应用

研究建立一种磷脂酞胆碱专一性磷脂酶D（PC—PLD）的酶偶联比色测定法，并研究肝脏中磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D（PC—PLD）活力受磷脂的调节及其在肝癌中的变化。将PLD水解磷脂酰胆碱产生的胆碱用胆碱氧化酶氧化，生成的H2O2再在过氧化物酶催化下将4-氨基安替匹林和酚氧化成粉红色有色物质（Trinder反应）。结果：本法中酶浓度或反应时间和产物胆碱量有良好的正比关系。用0.15％的正辛基β-吡喃葡萄糖苷可将PC-PLD从膜性组分中增溶出来，而基本上不抑制酶活力，而其他5种去垢剂即使在很低的浓度下，均能抑制该酶活力。应用此法测定6种磷脂对鼠肝PC—PLD的影响发现只有磷脂酰乙醇胺（PE）可激活PC—PLD，还发现鼠肝癌中膜结合性PC-PLD活力明显增高，尤其是癌前期；而胞液PC-PLD仅在癌前期增高。结论：结果表明，①PC-PLD的酶联比色测定法较简便，灵敏度和重复性也较好，可以满意地应用于组织和细胞中此酶活力变化的研究；②大鼠肝PC—PLD受PE激活，并在肝癌中升高。     

肝细胞线粒体磷脂组分的增龄性改变及其机理

目的：探讨肝细胞线粒体脂组分的增龄性改变。方法：测定了不同月龄（６、１２、１８和２４月龄）组大鼠肝细胞（ＨＣ）线粒体脂及其组分、丙二醛（ＭＤＡ）、维生素Ｅ（ＶＥ）和脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）水平及ＶＥ对以上各指标的影响。结果：各月龄级总磷脂水平无明显改变，１８和２４月龄组磷脂酰胆碱（ＰＣ）含量明显降低，磷脂酰胺（ＰＥ）／ＰＣ值显著升高。１８和２４月龄组ＭＤＡ和ＰＬＡ２水平较６月龄组明显上升，ＶＥ含量明显     

G6PD缺乏时红细胞膜磷脂脂肪酸组成的改变

探讨Ｇ６ＰＤ缺乏时红细胞膜磷脂的氧化性损伤用氯仿：甲醇（２∶１Ｖ／Ｖ）抽提膜脂质，通过硅胶柱层析分离得到磷脂，经薄层层析分离得磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）、磷脂酰丝氨酸（ＰＳ）和磷脂酰胆碱（ＰＣ）采用ＴＬＣ扫描仪测定各种磷脂的含量用甲醇提取ＰＥ，ＰＳ及ＰＣ，经快速酯交换得到脂肪酸甲酯、采用毛细管气相色谱分析各种磷脂中脂肪酸的组成情况结果：Ｇ６ＰＤ缺乏时，ＰＳ含量下降，红细胞膜总磷脂及ＰＳ中不饱和脂肪酸（Ｃ１８∶１，Ｃ１８∶２）的含量均减少，ＰＥ中Ｃ１６∶０的含量也减少实验结果推测，Ｇ６ＰＤ缺乏时红细胞膜磷脂改变，ＰＳ含量的减少及ＰＳ中不饱和脂肪酸含量的下降可能与氧化性损伤有关     

银杏叶提出物抗溶血性磷脂酰胆碱对猪主动脉内皮细胞的氧化损伤作用

为了研究银杏叶提出物对溶血性磷脂酰胆碱损伤血管内皮细胞的保护作用，本实验采用培养的猪主动脉内皮细胞为对象，观察了溶血性磷脂酰胆碱对猪主动脉内皮细胞ＰＧＩ２、ＬＤＨ、ＭＤＡ含量的影响及银杏叶提出物的拮抗作用。结果显示：溶血性磷脂酰胆碱能升高ＭＤＡ，升高ＬＤＨ，降低ＰＧＩ２；而银杏叶提出物（１０、２５、５０μｇ·ｍｌ－１）能升高ＰＧＩ２，降低ＭＤＡ、ＬＤＨ含量，且其作用与剂量相关。结论：银杏叶提出物能拮抗溶血性磷脂酰胆碱对猪主动脉内皮细胞的氧化损伤作用，且可能与促进内皮细胞ＰＧＩ２的合成、释放有关。     

老化红细胞变形能力与膜磷脂及收缩蛋白含量的关系

①目的探讨老化红细胞变形能力与红细胞膜磷脂成分和收缩蛋白（ＳＰ）含量的关系。②方法检测４２例健康人外周血老化和年轻红细胞滤过指数（ＥＦＩ），膜磷脂成分中的神经磷脂（ＳＭ）、磷脂酰胆碱（ＰＣ）、磷脂酰丝氨酸（ＰＳ）、磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）、膜ＳＰ二聚体（ＳＰ－Ｄ）及四聚体（ＳＰ－Ｔ）含量的变化。③结果老化红细胞ＥＦＩ明显高于年轻红细胞（ｔ＝４．０６０，Ｐ＜０．００１），老化红细胞膜ＳＭ，ＳＭ／ＰＣ，ＳＰ－Ｄ和ＳＰ－Ｄ／ＳＰ－Ｔ明显增高，而ＰＥ，ＰＳ，ＰＣ和ＳＰ－Ｔ明显减低，与年轻红细胞比较差异有极显著性（ｔ＝２．９１１～３．５２０，Ｐ＜０．０１，０．００１）；老化红细胞ＥＦＩ与ＳＰ－Ｄ，ＳＰ－Ｄ／ＳＰ－Ｔ，ＳＭ和ＳＭ／ＰＣ呈正相关（ｒ＝０．５１１～０．６８４，Ｐ＜０．００１），而与ＳＰ－Ｔ，ＰＥ，ＰＳ，ＰＣ呈负相关（ｒ＝－０．５５２～－０．６１４，Ｐ＜０．００１）。④结论老化红细胞变形能力降低与膜磷脂成分和膜ＳＰ异常有密切关系。     

胞内钙离子不依赖性磷脂酶A_2

磷脂酶Ａ２（ＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２，ＰＬＡ２）是磷脂Ｃ－２位酰基水解酶的简称，它以生物膜磷脂为天然底物，催化多种磷脂Ｃ－２位脂酰键水解产生游离脂肪酸和溶血磷脂，其产物可成为细胞内的第二信使分子或进一步代谢为脂类炎症介质的前体，参与炎症反应、细胞增殖和细胞内信号传递。是生物化学、基因工程和药理学研究的热点酶类。根据其对钙离子（Ｃａ《）的依赖性可区分为钙离子依赖性和钙离子（Ｃａ《）不依赖性ＰＬＡ２。本文主要综述细胞内钙离子不依赖性ＰＬＡ２（ｉＰＬＡ２）。细胞裂解后胞液部分和胞膜部分所具有的ｉ…     

叶酸-脂质体制备及对HeLa细胞靶向作用

目的　研制一种能通过叶酸受体途径靶向肿瘤细胞的叶酸脂质体。方法　将叶酸（Ｆ）、聚乙二醇二胺（ＮＨ２ＰＥＧＮＨ２）、琥珀酸酐（ＳＵＣ）和卵黄磷脂酰乙醇胺（ＥＰＥ）按序共价连接,并与胆固醇（ｃｈｏｌ）、卵黄磷脂酰胆碱（ＥＰＣ）以１０∶４０∶５６配比,用成膜水化结合冷冻熔融超声法制备内含钙黄绿素叶酸脂质体,以负染色电镜法确定其粒径;用荧光显微镜观察ＨｅＬａ细胞摄取叶酸脂质体与脂质体的差异;以荧光定量法确定浓度、时间、游离Ｆ、磷脂酶Ｄ（ＰＬＤ）和磷脂酰肌醇特异磷脂酶Ｃ（ＰＩＰＬＣ）对ＨｅＬａ细胞摄取叶酸脂质体影响程度。结果　（１）ＦＰＥＧＳＵＣＥＰＥ连接物为色谱纯;叶酸脂质体平均粒径为２００ｎｍ。（２）叶酸脂质体进入ＨｅＬａ细胞质内量明显高于脂质体。（３）浓度增大、时间延长,叶酸脂质体摄取量递增幅度明显减缓;ＨｅＬａ细胞摄取叶酸脂质体量均在脂质体的４倍以上。（４）５０μｍｏｌ／Ｌ游离Ｆ可使叶酸脂质体摄取量降低５０％;ＰＩＰＬＣ（０．２Ｕ／ｍｌ）和ＰＬＤ（０．５ｍｇ／ｍｌ）处理后,叶酸脂质体摄取量分别降低７１％和７０％。结论　２００ｎｍ粒径的叶酸脂质体能通过细胞膜上Ｆ受体介导内吞     

膜磷脂成分对心肌肌浆网摄钙功能的影响

目的：观察膜磷脂成分改变对心肌肌浆网（ＳＲ）钙摄取功能的影响。方法：磷脂酶Ａ＿２或溶血磷脂分别与正常狗心肌ＳＲ温育，测定钙摄取量。结果：磷脂酶Ａ＿２可使ＳＲ摄钙量减少４８．８％（Ｐ＜０．０１），加入磷脂酰胆碱可部分逆转磷脂酶Ａ＿２造成的损伤。溶血磷脂酰胆碱或溶血磷脂酰丝氨酸显著抑制ＳＲ钙摄取。结论：磷脂酶Ａ＿２改变膜磷脂微环境，造成ＳＲ摄钙功能障碍可能是某些病理情况下，心肌细胞钙稳态失衡的原因之一。     

叶酸—脂质体制备及对HeLa细胞靶向作用

目的 研制一种能通过叶酸受体途径靶向肿瘤细胞的叶酸－脂质体。方法 将叶酸（Ｆ）、聚乙二醇二胺（ＮＨ２－ＰＥＧ－ＮＨ２）、琥珀酸酐（ＳＵＣ）和卵黄磷脂酰乙醇胺（ＥＰＥ）按序共价连接,并与胆固醇、卵黄磷脂酰胆碱（ＥＰＣ）以１０：４０：５６配比,用成膜－水化结合冷冻－熔融超声法制备内含钙黄绿素叶酸－脂质体,以负染色－电法确定其粒径;用荧光显微镜观察ＨｅＬａ细胞摄取叶酸－脂质体与脂质体的差异;以荧光定量法     

血清糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的检测

利用自制的、具完整糖基化磷脂酰肌醇（ＧＰＩ）结构的胎盘型碱性磷酸酶（ＰＬＡＰ）做底物,通过聚乙二醇／葡聚糖分相系统定性,ＴＸ１１４分相定量,初步建立了检测人血清中ＧＰＩ特异性磷脂酶Ｄ（ＧＰＩＰＬＤ）的方法,并对酶促反应的某些动力学性质进行了探讨。该方法重现性好（ＣＶ＝３．６％）,灵敏度高（血清用量２μｌ即可）,且经济、实用,有一定的推广价值。用该方法检测１００名正常人血清,表明其ＧＰＩＰＬＤ的活性范围为３０％～５０％（用转化底物的百分率表示）。     

肝细胞内两种磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性

目的：观察肝细胞内磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性。方法：采用化学诱癌法、免疫法、亲和层析法、WesternBlot技术等方法。结果：（1）钙离子依赖性PC－PLC活性在诱癌过程中逐步升高;（2）鞘磷脂酶活性在诱癌过程中无显著改变;（3）PC－PLC抗体对钙非依赖性PC－PLC活性具有显著抑制;（4）肝细胞顺存在着与PC－PLC抗体相结合的蛋白质;（5）钙领带性和钙非依赖性PL－PLC的蛋白峰有部分重叠;（6）亲和层析柱提纯的酶蛋白只有钙非依赖性PC－PLC少万籁 ,结论：肝细胞中存在两种不同活性的磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C。     

各期高血压病患者红细胞膜磷脂成分的改变

本研究了各期高血压病患者红细胞膜磷脂各成分的变化。结果表明，在各期高血压组红细胞膜磷脂中神经磷脂（ＳＭ），磷脂酰胆碱（ＰＣ），磷脂酰丝氨酸（ＰＳ）和ＳＭ／ＰＣ比值均明显增高，磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）则显著降低，并且各指标改变与病情轻重有关。提示，红细胞磷脂成本异常通过影响红细胞的性能，参与原发性高血压的发生和发展。     

病理生理学

病理生理学金惠铭一、缺氧与心脑血管病首都医科大学在急性重复缺氧的小鼠中观察到，１次缺氧后小鼠磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）和磷脂酰丝氨酸（ＰＳ）含量显著升高，磷脂酰胆碱（ＰＣ）和鞘磷脂（ＳＭ）显著下降；但４次重复缺氧后脑细胞中除ＳＭ继续下降外，ＰＥ、ＰＳ、ＰＣ...     

外源性溶血磷脂酰胆碱对离体大鼠工作心脏的作用

目的 观察外源性溶血磷脂酰胆碱对离体大鼠工作心脏的损伤作用。方法 麻醉ＳＤ大鼠，取其心脏，进行Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ灌注，待心脏稳定后转为工作心脏状态。然后随机分为３组，对照组，正常灌注３５ｍｉｎ，外源性溶血磷脂酰胆碱组，用含５μｍｏｌ／ＬＬＰＣ的ＫＨ液灌注５ｍｉｎ，再用正常的ＫＨ液灌注３０ｍｉｎ，缺血再灌注组，停灌注Ｋ－Ｈ液４０ｍｉｎ，再灌注３０ｍｉｎ。结果 与对照组相比，外源性溶血磷脂酰胆碱组     

氧化修饰低密度脂蛋白对血管内皮依赖性舒张的影响

目的：探讨氧化修饰低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）中溶血性卵磷脂（ＬＰＣ）与血管效应的关系。方法：采用Ｃｕ＾２＋对低密度脂蛋白进行了氧化修饰,测定Ｏｘ－ＬＤＬ的磷脂含量及其对血管舒张的影响,结果：Ｏｘ－ＬＤＬ中的ＬＰＣ量增加,卵磷脂（ＰＣ）量减少,Ｏｘ－ＬＤＬ明显抑制血管内皮依赖性舒张,且抑制强度与ＬＰＣ量呈正相关,结论：Ｏｘ－ＬＤＬ对血管舒张的抑制作用与ＬＰＣ有关。     

磷脂酶A2的活力测定与临床初步应用

磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２，ＰＬＡ２）是能催化和水解膜磷脂的磷脂酶中的一种，几乎存在于所有的细胞中，在血清、胰液、精浆、唾液、滑膜液中都可测得。酶蛋白由１２５个氨基酸的单一多肽链组成，分子量１２０００～１５０００，等电点是９．２，最适...     

磷脂酶A_2腺苷酸脱氨酶及C－反应蛋白在呼吸科常见病的应用

磷脂酶Ａ_２腺苷酸脱氨酶及Ｃ－反应蛋白在呼吸科常见病的应用（１０００３７）北京市解放军３０４医院呼吸科郭英江，崔德健，谭剑，杨少杰，茅培英，吕国平，文仲平磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）是炎症反应过程中的限速酶。临床研究报告国内尚不多见。Ｃ－反应蛋白（ＣＲＰ）?..     

3''''-甲基-4-二甲氨基偶氯苯对大鼠肝脏磷脂代谢的影响

探讨3'—甲基—4—二甲氨基偶氮苯（3'－Me－DAB）诱发大鼠肝癌过程中肝脏磷脂代谢的变化。用3'－Me－DAB诱发Wistar大鼠肝癌，同时辅以低胆碱饮食，TLC分离磷脂组分，Rouser法测定第6、9、12、16、20周肝脏中总磷脂及各磷脂组分含量。结果：发现诱癌组总磷脂和磷脂酸胆碱（PC）的含量不断下降，且两者变化一致；鞘磷脂（SM）在3'—Me—DAB加普通饮食组（A组）诱癌早期即迅速增高，超过对照组约1倍，并一直维持至肝癌形成，而在3'—Me—DAB加低胆碱饮食组（B组）虽然早期也升高，但当第20周肿瘤发生转移时降至对照组以下；溶血磷脂酰胆碱（LPC）仅在B组晚期出现下降。不含胆碱基因的磷脂组分：磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰丝氨酸（PS）和磷脂酰肌醇（PI）在3'—Me—DAB诱癌晚期均降低，B组尤为明显。缩醛磷脂的含量在整个诱癌过程中未见明显变化。结论：3'－Me－DAB诱发大鼠肝癌过程中主要影响PC和SM的代谢，表现为PC降低，SM增高。低胆碱饮食能缯强3'—Me—DAB对大鼠肝脏磷脂代谢的影响。     

大鼠肝乳酸脱氢酶与磷脂脂质体的相互作用

以荧光光度法研究了大鼠肝ＬＤＨ－Ｍ４与磷脂脂质体的相互作用。磷脂脂质体对ＬＤＨ－Ｍ４具有抑制作用。磷脂酰肌醇（ＰＩ）脂质体的作用比磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）大。当磷脂／蛋白（Ｗ／Ｗ）比为６时，ＰＩ能完全抑制ＬＤＨ的活性，抑制作用呈剂量效应。而磷脂酰乙醇胺，当其磷脂／蛋白（Ｗ／Ｗ）比超过２时，抑制作用不明显，抑制作用呈非剂量效应。当以２８０ｎｍ为激发波长时，ＬＤＨ－Ｍ４的发射峰为３４５ｎｍ，主要为色氨酸的