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肝癌细胞中两种磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的变化 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 在不同的生物学过程中观察磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C(PC-PLC)的活性变化,以及PC-PLC在肝癌细胞中的作用。方法 采用亚安诱发大鼠肝癌,全反式视黄酸为肝癌细胞的诱导分化剂,PC-PLC酶活性采用间接比色法测定,大鼠PC-PLC酶蛋白采用亲和层析法进行部分纯化。结果 在肝癌细胞中观察到了两种不同活性的磷脂酰胆碱特异的磷脂酶C,一种是非钙依赖性,另一种是钙依赖性的。这两种酶活性有不同的生物学 相似文献
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研究建立一种磷脂酞胆碱专一性磷脂酶D(PC—PLD)的酶偶联比色测定法,并研究肝脏中磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D(PC—PLD)活力受磷脂的调节及其在肝癌中的变化。将PLD水解磷脂酰胆碱产生的胆碱用胆碱氧化酶氧化,生成的H2O2再在过氧化物酶催化下将4-氨基安替匹林和酚氧化成粉红色有色物质(Trinder反应)。结果:本法中酶浓度或反应时间和产物胆碱量有良好的正比关系。用0.15%的正辛基β-吡喃葡萄糖苷可将PC-PLD从膜性组分中增溶出来,而基本上不抑制酶活力,而其他5种去垢剂即使在很低的浓度下,均能抑制该酶活力。应用此法测定6种磷脂对鼠肝PC—PLD的影响发现只有磷脂酰乙醇胺(PE)可激活PC—PLD,还发现鼠肝癌中膜结合性PC-PLD活力明显增高,尤其是癌前期;而胞液PC-PLD仅在癌前期增高。结论:结果表明,①PC-PLD的酶联比色测定法较简便,灵敏度和重复性也较好,可以满意地应用于组织和细胞中此酶活力变化的研究;②大鼠肝PC—PLD受PE激活,并在肝癌中升高。 相似文献
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肝细胞线粒体磷脂组分的增龄性改变及其机理 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨肝细胞线粒体脂组分的增龄性改变。方法:测定了不同月龄(6、12、18和24月龄)组大鼠肝细胞(HC)线粒体脂及其组分、丙二醛(MDA)、维生素E(VE)和脂酶A2(PLA2)水平及VE对以上各指标的影响。结果:各月龄级总磷脂水平无明显改变,18和24月龄组磷脂酰胆碱(PC)含量明显降低,磷脂酰胺(PE)/PC值显著升高。18和24月龄组MDA和PLA2水平较6月龄组明显上升,VE含量明显 相似文献
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探讨G6PD缺乏时红细胞膜磷脂的氧化性损伤用氯仿:甲醇(2∶1V/V)抽提膜脂质,通过硅胶柱层析分离得到磷脂,经薄层层析分离得磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰丝氨酸(PS)和磷脂酰胆碱(PC)采用TLC扫描仪测定各种磷脂的含量用甲醇提取PE,PS及PC,经快速酯交换得到脂肪酸甲酯、采用毛细管气相色谱分析各种磷脂中脂肪酸的组成情况结果:G6PD缺乏时,PS含量下降,红细胞膜总磷脂及PS中不饱和脂肪酸(C18∶1,C18∶2)的含量均减少,PE中C16∶0的含量也减少实验结果推测,G6PD缺乏时红细胞膜磷脂改变,PS含量的减少及PS中不饱和脂肪酸含量的下降可能与氧化性损伤有关 相似文献
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银杏叶提出物抗溶血性磷脂酰胆碱对猪主动脉内皮细胞的氧化损伤作用 总被引:1,自引:0,他引:1
为了研究银杏叶提出物对溶血性磷脂酰胆碱损伤血管内皮细胞的保护作用,本实验采用培养的猪主动脉内皮细胞为对象,观察了溶血性磷脂酰胆碱对猪主动脉内皮细胞PGI2、LDH、MDA含量的影响及银杏叶提出物的拮抗作用。结果显示:溶血性磷脂酰胆碱能升高MDA,升高LDH,降低PGI2;而银杏叶提出物(10、25、50μg·ml-1)能升高PGI2,降低MDA、LDH含量,且其作用与剂量相关。结论:银杏叶提出物能拮抗溶血性磷脂酰胆碱对猪主动脉内皮细胞的氧化损伤作用,且可能与促进内皮细胞PGI2的合成、释放有关。 相似文献
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老化红细胞变形能力与膜磷脂及收缩蛋白含量的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
①目的探讨老化红细胞变形能力与红细胞膜磷脂成分和收缩蛋白(SP)含量的关系。②方法检测42例健康人外周血老化和年轻红细胞滤过指数(EFI),膜磷脂成分中的神经磷脂(SM)、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰乙醇胺(PE)、膜SP二聚体(SP-D)及四聚体(SP-T)含量的变化。③结果老化红细胞EFI明显高于年轻红细胞(t=4.060,P<0.001),老化红细胞膜SM,SM/PC,SP-D和SP-D/SP-T明显增高,而PE,PS,PC和SP-T明显减低,与年轻红细胞比较差异有极显著性(t=2.911~3.520,P<0.01,0.001);老化红细胞EFI与SP-D,SP-D/SP-T,SM和SM/PC呈正相关(r=0.511~0.684,P<0.001),而与SP-T,PE,PS,PC呈负相关(r=-0.552~-0.614,P<0.001)。④结论老化红细胞变形能力降低与膜磷脂成分和膜SP异常有密切关系。 相似文献
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磷脂酶A2(PhospholipaseA2,PLA2)是磷脂C-2位酰基水解酶的简称,它以生物膜磷脂为天然底物,催化多种磷脂C-2位脂酰键水解产生游离脂肪酸和溶血磷脂,其产物可成为细胞内的第二信使分子或进一步代谢为脂类炎症介质的前体,参与炎症反应、细胞增殖和细胞内信号传递。是生物化学、基因工程和药理学研究的热点酶类。根据其对钙离子(Ca《)的依赖性可区分为钙离子依赖性和钙离子(Ca《)不依赖性PLA2。本文主要综述细胞内钙离子不依赖性PLA2(iPLA2)。细胞裂解后胞液部分和胞膜部分所具有的i… 相似文献
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叶酸-脂质体制备及对HeLa细胞靶向作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 研制一种能通过叶酸受体途径靶向肿瘤细胞的叶酸脂质体。方法 将叶酸(F)、聚乙二醇二胺(NH2PEGNH2)、琥珀酸酐(SUC)和卵黄磷脂酰乙醇胺(EPE)按序共价连接,并与胆固醇(chol)、卵黄磷脂酰胆碱(EPC)以10∶40∶56配比,用成膜水化结合冷冻熔融超声法制备内含钙黄绿素叶酸脂质体,以负染色电镜法确定其粒径;用荧光显微镜观察HeLa细胞摄取叶酸脂质体与脂质体的差异;以荧光定量法确定浓度、时间、游离F、磷脂酶D(PLD)和磷脂酰肌醇特异磷脂酶C(PIPLC)对HeLa细胞摄取叶酸脂质体影响程度。结果 (1)FPEGSUCEPE连接物为色谱纯;叶酸脂质体平均粒径为200nm。(2)叶酸脂质体进入HeLa细胞质内量明显高于脂质体。(3)浓度增大、时间延长,叶酸脂质体摄取量递增幅度明显减缓;HeLa细胞摄取叶酸脂质体量均在脂质体的4倍以上。(4)50μmol/L游离F可使叶酸脂质体摄取量降低50%;PIPLC(0.2U/ml)和PLD(0.5mg/ml)处理后,叶酸脂质体摄取量分别降低71%和70%。结论 200nm粒径的叶酸脂质体能通过细胞膜上F受体介导内吞 相似文献
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目的:观察膜磷脂成分改变对心肌肌浆网(SR)钙摄取功能的影响。方法:磷脂酶A_2或溶血磷脂分别与正常狗心肌SR温育,测定钙摄取量。结果:磷脂酶A_2可使SR摄钙量减少48.8%(P<0.01),加入磷脂酰胆碱可部分逆转磷脂酶A_2造成的损伤。溶血磷脂酰胆碱或溶血磷脂酰丝氨酸显著抑制SR钙摄取。结论:磷脂酶A_2改变膜磷脂微环境,造成SR摄钙功能障碍可能是某些病理情况下,心肌细胞钙稳态失衡的原因之一。 相似文献
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叶酸—脂质体制备及对HeLa细胞靶向作用 总被引:14,自引:0,他引:14
目的 研制一种能通过叶酸受体途径靶向肿瘤细胞的叶酸-脂质体。方法 将叶酸(F)、聚乙二醇二胺(NH2-PEG-NH2)、琥珀酸酐(SUC)和卵黄磷脂酰乙醇胺(EPE)按序共价连接,并与胆固醇、卵黄磷脂酰胆碱(EPC)以10:40:56配比,用成膜-水化结合冷冻-熔融超声法制备内含钙黄绿素叶酸-脂质体,以负染色-电法确定其粒径;用荧光显微镜观察HeLa细胞摄取叶酸-脂质体与脂质体的差异;以荧光定量法 相似文献
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血清糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的检测 总被引:6,自引:0,他引:6
利用自制的、具完整糖基化磷脂酰肌醇(GPI)结构的胎盘型碱性磷酸酶(PLAP)做底物,通过聚乙二醇/葡聚糖分相系统定性,TX114分相定量,初步建立了检测人血清中GPI特异性磷脂酶D(GPIPLD)的方法,并对酶促反应的某些动力学性质进行了探讨。该方法重现性好(CV=3.6%),灵敏度高(血清用量2μl即可),且经济、实用,有一定的推广价值。用该方法检测100名正常人血清,表明其GPIPLD的活性范围为30%~50%(用转化底物的百分率表示)。 相似文献
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肝细胞内两种磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:观察肝细胞内磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性。方法:采用化学诱癌法、免疫法、亲和层析法、WesternBlot技术等方法。结果:(1)钙离子依赖性PC-PLC活性在诱癌过程中逐步升高;(2)鞘磷脂酶活性在诱癌过程中无显著改变;(3)PC-PLC抗体对钙非依赖性PC-PLC活性具有显著抑制;(4)肝细胞顺存在着与PC-PLC抗体相结合的蛋白质;(5)钙领带性和钙非依赖性PL-PLC的蛋白峰有部分重叠;(6)亲和层析柱提纯的酶蛋白只有钙非依赖性PC-PLC少万籁 ,结论:肝细胞中存在两种不同活性的磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C。 相似文献
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各期高血压病患者红细胞膜磷脂成分的改变 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究了各期高血压病患者红细胞膜磷脂各成分的变化。结果表明,在各期高血压组红细胞膜磷脂中神经磷脂(SM),磷脂酰胆碱(PC),磷脂酰丝氨酸(PS)和SM/PC比值均明显增高,磷脂酰乙醇胺(PE)则显著降低,并且各指标改变与病情轻重有关。提示,红细胞磷脂成本异常通过影响红细胞的性能,参与原发性高血压的发生和发展。 相似文献
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目的 观察外源性溶血磷脂酰胆碱对离体大鼠工作心脏的损伤作用。方法 麻醉SD大鼠,取其心脏,进行Langendorff灌注,待心脏稳定后转为工作心脏状态。然后随机分为3组,对照组,正常灌注35min,外源性溶血磷脂酰胆碱组,用含5μmol/LLPC的KH液灌注5min,再用正常的KH液灌注30min,缺血再灌注组,停灌注K-H液40min,再灌注30min。结果 与对照组相比,外源性溶血磷脂酰胆碱组 相似文献
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目的:探讨氧化修饰低密度脂蛋白(Ox-LDL)中溶血性卵磷脂(LPC)与血管效应的关系。方法:采用Cu^2+对低密度脂蛋白进行了氧化修饰,测定Ox-LDL的磷脂含量及其对血管舒张的影响,结果:Ox-LDL中的LPC量增加,卵磷脂(PC)量减少,Ox-LDL明显抑制血管内皮依赖性舒张,且抑制强度与LPC量呈正相关,结论:Ox-LDL对血管舒张的抑制作用与LPC有关。 相似文献
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探讨3'—甲基—4—二甲氨基偶氮苯(3'-Me-DAB)诱发大鼠肝癌过程中肝脏磷脂代谢的变化。用3'-Me-DAB诱发Wistar大鼠肝癌,同时辅以低胆碱饮食,TLC分离磷脂组分,Rouser法测定第6、9、12、16、20周肝脏中总磷脂及各磷脂组分含量。结果:发现诱癌组总磷脂和磷脂酸胆碱(PC)的含量不断下降,且两者变化一致;鞘磷脂(SM)在3'—Me—DAB加普通饮食组(A组)诱癌早期即迅速增高,超过对照组约1倍,并一直维持至肝癌形成,而在3'—Me—DAB加低胆碱饮食组(B组)虽然早期也升高,但当第20周肿瘤发生转移时降至对照组以下;溶血磷脂酰胆碱(LPC)仅在B组晚期出现下降。不含胆碱基因的磷脂组分:磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰丝氨酸(PS)和磷脂酰肌醇(PI)在3'—Me—DAB诱癌晚期均降低,B组尤为明显。缩醛磷脂的含量在整个诱癌过程中未见明显变化。结论:3'-Me-DAB诱发大鼠肝癌过程中主要影响PC和SM的代谢,表现为PC降低,SM增高。低胆碱饮食能缯强3'—Me—DAB对大鼠肝脏磷脂代谢的影响。 相似文献
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大鼠肝乳酸脱氢酶与磷脂脂质体的相互作用 总被引:1,自引:0,他引:1
以荧光光度法研究了大鼠肝LDH-M4与磷脂脂质体的相互作用。磷脂脂质体对LDH-M4具有抑制作用。磷脂酰肌醇(PI)脂质体的作用比磷脂酰乙醇胺(PE)大。当磷脂/蛋白(W/W)比为6时,PI能完全抑制LDH的活性,抑制作用呈剂量效应。而磷脂酰乙醇胺,当其磷脂/蛋白(W/W)比超过2时,抑制作用不明显,抑制作用呈非剂量效应。当以280nm为激发波长时,LDH-M4的发射峰为345nm,主要为色氨酸的 相似文献