复发性流产患者胎盘滋养细胞凋亡及Fas、FasL表达的研究

目的 :通过比较正常早孕妇女和复发性流产 (RSA)患者胎盘绒毛滋养细胞凋亡及Fas、FasL表达 ,进一步从细胞及分子水平探讨复发性流产的发病机理。方法 :应用免疫组织化学SP方法 ,测定 30例RSA患者和 2 5例正常早孕妇女胎盘绒毛滋养细胞Fas和FasL基因蛋白的表达 ,并通过MIAS 2 0 0 0医用彩色病理图像免疫组化测量系统对其表达进行半定量分析 ,其结果用平均灰度表示 ;同时应用DNA缺口原位末端标记技术 (TUNEL法 )测定两组胎盘绒毛滋养细胞凋亡情况。结果 :RSA组患者胎盘绒毛FasL的表达低于正常组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;而Fas表达两组比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,胎盘绒毛细胞滋养细胞及合体滋养细胞的凋亡指数 ,RSA组明显高于正常组 ,差异有非常显著性 (P<0 0 1)。结论 :细胞凋亡的增加可能是RSA发生的一个重要病理过程 ,且RSA患者胎盘绒毛滋养细胞表面FasL表达减少 ,导致母胎间免疫耐受的破坏 ,引起异常的免疫反应可能是RSA发病的重要机制。     

Fas／FasL与滋养细胞及妊娠滋养细胞疾病关系的研究

Fas／FasL是凋亡信号传导的一条途径。正常妊娠滋养细胞表达FasL诱导母体活化淋巴细胞凋亡是胎儿免疫耐受的重要机制。Fas／FasL在妊娠滋养细胞疾病中表达的研究刚起步。葡萄胎滋养细胞表达FasL引起蜕膜Fas巴细胞凋亡促进免疫耐受和滋养细胞的存活。恶性滋养细胞Fas介导的凋亡敏感性降低及与FasL同时表达反击淋巴细胞可传授免疫赦免。Fas／FasL可能代表一个机制，通过这个机制恶性滋养细胞抵抗凋亡，逃避免疫监视和发生转移。     

原因不明复发性流产患者蜕膜Foxp3 mRNA及蛋白质的表达

目的:探讨原因不明复发性流产(URSA)患者蜕膜Foxp3 mRNA及蛋白的表达。方法:分别采用免疫组化S-P法、半定量和实时定量PCR法和W estern B lot法检测25例URSA患者蜕膜组织Foxp3 mRNA及蛋白的表达与分布,并以32例正常早孕妇女为对照。结果:(1)免疫组化S-P法显示Foxp3表达于胞浆,妊娠后的蜕膜组织有Foxp3的表达;URSA患者蜕膜Foxp3的表达显著低于正常妊娠妇女(P<0.01);(2)半定量和实时定量RT-PCR法分析均显示,URSA患者蜕膜组织Foxp3 mRNA的表达显著低于正常早孕妇女(P<0.05);(3)W estern B lot法分析显示,URSA患者蜕膜组织Foxp3蛋白的表达显著低于正常早孕妇女(P<0.05)。结论:Foxp3可能在维持早期妊娠中起重要作用,其表达水平降低可能与URSA的发病有关。     

复发性自然流产患者绒毛滋养细胞凋亡相关蛋白配体的表达

凋亡相关蛋白(factor associated suicide，Fas)的配体(Fas ligand，FasL)，属于Ⅱ型跨膜糖蛋白，与细胞表面的Fas分子结合，可导致表达Fas的细胞发生凋亡。已知Fas大量表达在活化的T细胞表面，Fas-FasL介导的活化T细胞的凋亡在外周免疫耐受中起重要作用。近年来的研究发现，Fas-FasL在母胎免疫耐受中也起重要作用，即表达FasL的滋养细胞能够杀伤入侵到胎盘绒毛的表达Fas的淋巴细胞，从而使滋养细胞免受母体免疫细胞的破坏。     

Foxp3在子宫内膜、正常早孕和原因不明复发性流产患者蜕膜上的表达

目的:探讨Foxp3在增生期、分泌期内膜和正常早孕、原因不明复发性流产(URSA)患者蜕膜的表达。方法:用免疫组化法观察15例增生期子宫内膜, 12例分泌期子宫内膜, 32例正常早孕和25例URSA患者蜕膜组织Foxp3的表达与分布。结果:增生期子宫内膜无Foxp3表达,分泌期内膜和蜕膜组织均有表达;分泌期内膜Foxp3的表达显著低于正常早孕组(P<0 .01)和URSA组(P<0. 05);URSA患者蜕膜Foxp3的表达显著低于正常早孕组(P<0 .01);Foxp3表达于胞浆,正常早孕组和分泌期内膜主要表达在腺上皮细胞,URSA患者主要表达在间质细胞。结论:Foxp3在分泌期子宫内膜和蜕膜组织的表达可能在胚泡植入和早期妊娠的维持中起重要作用,其表达水平降低可能与URSA的发生有关。     

胸腺基质淋巴细胞生成素及相关因子在原因不明复发性流产中的表达

目的:探讨胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)与原因不明复发性流产(URSA)的关系。方法:建立研究组自然流产小鼠模型(CBA/J×DBA/2)和对照组正常妊娠小鼠模型(CBA/J×Balb/c),采用免疫印迹(Western Blot)方法和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测绒毛、蜕膜组织中TSLP的表达;采用酶联免疫吸附双抗体夹心(ELISA)方法检测外周血TSLP、细胞因子白介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)的表达;采用流式细胞仪检测调节性T细胞(Treg)表面FoxP3的表达。结果:RT-PCR法检测自然流产模型组绒毛组织中TSLP的表达低于正常妊娠模型组(P<0.05);Western Blot法分析显示自然流产模型组绒毛、蜕膜组织中TSLP的表达低于正常妊娠模型组(P<0.05);ELISA法检测自然流产模型组血清中TSLP、IL-4的表达低于正常妊娠模型组(P<0.05),而IFN-γ的表达较正常妊娠模型组未见明显增高(P>0.05);流式细胞仪检测自然流产模型组CD4+CD25+Treg和FoxP3的表达明显低于正常妊娠模型组(P<0.05)。结论:TSLP明显降低,可能是导致URSA患者母胎界面免疫耐受异常的重要原因。     

妊娠肝内胆汁淤积症胎盘细胞凋亡与Fas、FasL的研究

目的　探讨妊娠肝内胆汁淤积症 (intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)胎盘组织Fas及 Fas L (Fasligand)表达在细胞凋亡中的作用。　方法　采用 d U TP缺口末端标记法 (TU NEL )和免疫组化技术对 31例 ICP患者胎盘组织中的细胞凋亡、Fas、Fas L的基因表达进行检测 ,并以正常妊娠胎盘组织 31例作为对照组。　结果　 ICP组胎盘组织中细胞滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞及绒毛间质细胞的凋亡指数 (AI)分别为 4 9.0 9± 9.13(t=13.4 1)、4 6 .6 4± 9.77(t=12 .16 )、35 .0 9±9.4 9(t=8.4 3)、38.74± 9.70 (t=11.2 8) ,明显高于对照组 (P<0 .0 0 5 )。 ICP组细胞滋养细胞和合体滋养细胞 Fas表达明显增强 (P<0 .0 0 5 ) ,Fas L在细胞滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞及绒毛间质细胞中的表达明显低于对照组 (P<0 .0 0 5 )。　结论　 ICP患者胎盘组织中 Fas表达增强 ,Fas L表达减弱 ,可导致母胎间免疫耐受的破坏 ,胎盘细胞凋亡增加 ,可能与 ICP患者胎盘功能减退有关。     

Fas/FasL与滋养细胞及妊娠滋养细胞疾病关系的研究

Fas/FasL是凋亡信号传导的一条途径.正常妊娠滋养细胞表达FasL诱导母体活化淋巴细胞凋亡是胎儿免疫耐受的重要机制.Fas/FasL在妊娠滋养细胞疾病中表达的研究刚起步.葡萄胎滋养细胞表达FasL引起蜕膜Fas+淋巴细胞凋亡促进免疫耐受和滋养细胞的存活.恶性滋养细胞Fas介导的凋亡敏感性降低及与FasL同时表达反击淋巴细胞可传授免疫赦免.Fas/FasL可能代表一个机制,通过这个机制恶性滋养细胞抵抗凋亡,逃避免疫监视和发生转移.     

细胞凋亡和PCNA在早孕绒毛滋养细胞及蜕膜中的表达与自然流产的关系

目的 :研究细胞凋亡与细胞增殖在早孕绒毛滋养细胞和蜕膜中的表达及与自然流产的关系。方法 :对孕 3月内 2 0例正常妊娠、2 0例第 1次自然流产 (SA)和 15例反复自然流产 (RSA)的绒毛和蜕膜组织应用TdT介导的dUTP缺口原位末端标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡 ,应用免疫组织化学SP法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)。结果 :正常早孕绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞和蜕膜中的凋亡指数分别为 7.2 1± 1.2 4、8.89±2 .5 2和 7.70± 0 .82 ;SA组为 15 .4 0± 6 .5 9、2 5 .83± 6 .83和 32 .0 3± 3.2 7;RSA组为 18.77±8.2 2、34.0 2± 13.4 9和 34.96± 5 .4 6。增殖指数在正常早孕绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞和蜕膜中为 6 4 .13± 5 .90、0和 6 2 .0 8± 4 .76 ;SA组为 6 7.0 2± 6 .79、36 .13± 3.5 6和 6 4 .94± 4 .6 0 ;RSA组为 6 8.6 7± 8.4 5、33.6 7± 4 .0 8和 6 3.99± 5 .5 4。即孕 3月内正常妊娠的绒毛和蜕膜组织中均有一定量的细胞凋亡与细胞增殖存在。SA与正常早孕相比绒毛和蜕膜中的细胞凋亡均明显增加 (P <0 .0 1) ,RSA合体滋养细胞凋亡也较SA明显增加 (P <0 .0 5 ) ;细胞滋养细胞和蜕膜中的细胞增殖在自然流产与正常妊娠间无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :细胞凋亡和增殖的平衡与妊娠维持?     

主动免疫治疗对原因不明复发性流产患者外周血淋巴细胞Fas表达的影响

目的:探讨经主动免疫治疗后对原因不明复发性流产(URSA)患者外周血淋巴细胞Fas表达的影响。方法:收集来我院就诊URSA患者30例,采用荧光标记流式细胞分析技术,检测经淋巴细胞主动免疫治疗前、一疗程结束后3周的外周血淋巴细胞Fas表达。同时选择同期正常育龄妇女20例,作为正常对照组,比较两组Fas表达情况。结果:①CD4+ T淋巴细胞的Fas表达,正常对照组与URSA组治疗前、后的比较中,差异无统计学意义(P>0.05);②URSA组治疗前的CD8+ T淋巴细胞和NK细胞的Fas表达均比正常对照组明显升高(P<0.05);③URSA组治疗后的CD8+ T淋巴细胞和NK细胞的Fas表达均较治疗前降低(P<0.05)。结论:URSA患者存在CD8+ T淋巴细胞和NK细胞的异常激活,主动免疫治疗可以降低Fas在淋巴细胞上的表达,从而有利于胚胎的发育。     

妇女血清可溶性Fas/FasL与反复自然流产的关系初探

目的:探讨妇女血清可溶性Fas/FasL(sFas/sFasL)在反复自然流产(RSA)发病中的作用。方法:采用ELISA法检测62例RSA妇女(RSA组)、34例正常妊娠妇女(正常妊娠组)和34例正常非孕妇女(对照组)血清sFas/sFasL水平。结果:RSA组sFas含量(1051.44±420.87pg/ml)高于对照组(529.49±241.01pg/ml),差异有显著性(P<0.05);正常妊娠组sFas含量(520.19±253.82pg/ml)与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。RSA组、正常妊娠组、对照组sFasL含量分别为1.29±0.82ng/ml、1.20±0.85ng/ml、1.32±1.01ng/ml,3组间比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:反复自然流产的发生可能与血清sFas水平升高有关,而与血清sFasL无明显相关。     

Fas，FasL和cFLIP与宫颈癌研究现状

脂肪酸合成酶（Fas）是一种跨膜蛋白,属于肿瘤坏死因子（TNF）超家族。其与配体（FasL）相互作用是诱导细胞凋亡的主要途径之一。研究表明,Fas／FasL异常表达可引起肿瘤组织中细胞凋亡与增殖失衡。细胞型Fas相关死亡结构域蛋白样白细胞介素-1β转换酶抑制蛋白（cFLIP）是一种内源性凋亡抑制蛋白．可抑制多种凋亡受体。如Fas／FasL等诱导的细胞凋亡。近来发现,Fas/FasL、cFLIP在许多肿瘤组织中表达异常,可作为肿瘤治疗新靶点。已开展对三者在宫颈癌中的相关研究,将为宫颈癌诊断、治疗及预后判断提供新思路和手段。     

介入治疗前后宫颈癌组织局部Fas/FasL系统动态变化的研究

目的:研究介入治疗前后宫颈癌组织内肿瘤细胞和淋巴细胞Fas/FasL的动态变化,对介入治疗前后癌组织局部细胞免疫功能的动态变化进行初步探究。方法:对21例宫颈癌介入治疗前后标本,采用免疫组化法检测Fas和FasL的表达率及表达强度。结果:介入前、介入后第7天和介入后第14天3个时间点两两之间的比较:除了介入前与介入后第14天相比两种细胞Fas和FasL表达率差异无显著性(P>0.05),介入后第7天和第14天时FasL淋巴细胞表达率差异无显著性(P>0.05),其他均有统计学意义。结论:介入治疗能有效地逆转癌组织局部肿瘤细胞和淋巴细胞Fas/FasL系统的表达,促进肿瘤细胞死亡。     

Fas FasL在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及意义

目的　探讨Fas、FasL在正常卵巢和卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法　 2 0 0 0年 3月至 2 0 0 1年 1月中国医科大学附属第二医院等应用免疫组化法检测Fas、FasL在 5 6例卵巢浆液性肿瘤及 8例正常卵巢组织新鲜标本中的表达。结果　Fas在卵巢浆液性癌 (OSC)中的阳性表达率为 39 5 % ,明显低于交界性肿瘤 (77 8% )、良性肿瘤组织 (77 8% )及正常卵巢组织 (75 0 % ) ,差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。FasL在OSC中的阳性表达率为 78 9% ,明显高于交界性肿瘤 (4 4 4 % )、良性肿瘤组织 (33 3% )及正常卵巢组织 (37 5 % ) ,差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。卵巢浆液性癌中 ,Fas、FasL表达与临床分期相关 (P <0 0 5 ) ,与其他生物学特征无关 (P >0 0 5 )。结论　Fas在卵巢浆液性癌中表达下调 ,FasL在卵巢浆液性癌中过表达。     

Fas及FasL表达对大鼠睾丸局部热作用生精细胞凋亡的影响

目的 :探讨 Fas及 Fas L表达对睾丸局部热作用后生精细胞凋亡的影响。方法 :在大鼠睾丸局部受热后 0 .5 d、1 d、3d和 6d,应用流式细胞仪、原位末端标记法 ( TUNEL)检测生精细胞凋亡情况 ;应用流式细胞仪和免疫组化法检测 Fas和 Fas L蛋白表达情况。结果 :与其对照组相比热处理各组生精细胞凋亡明显升高 ( P<0 .0 1 ) ,各热处理组 Fas表达明显增强 ( P<0 .0 1 ) ,Fas L表达亦增强 ( P<0 .0 5 ) ;并且热处理后 Fas及 Fas L阳性表达增强和凋亡增多在发生时间和生精细胞的定位上基本吻合。结论 :睾丸局部热作用可引起生精细胞凋亡增多 ;Fas和 Fas L基因在这方面可能起重要作用     

Fas and FasL genetic polymorphisms in women with recurrent pregnancy loss: a case-control study

Aberrant apoptosis at the trophoblast–maternal interface and abnormal expression of Fas and Fas ligand (FasL) have been reported in complicated pregnancies with recurrent pregnancy losses (RPL) and preeclampsia. We assessed the prevalence of Fas and FasL genetic polymorphisms in Korean women with RPL and in fertile controls. In total, 306 women with RPL and 298 fertile controls were enrolled. Genotype distributions of Fas and FasL in RPL patients versus fertile controls were examined under the Hardy–Weinberg equilibrium. Fas ?670 A/G genotype (AA versus AG versus GG, p?=?0.340) and allele frequencies (A versus G, p?=?0.412) were not different between the RPL and control groups. There was no difference in each Fas ?1377?G/A and FasL ?844 C/T genotype, and their allele frequencies. In addition, the unions of two zygosities of each genotype and their combined genotypes did not differ between two groups. No difference in the prevalence of Fas and FasL single-nucleotide polymorphisms (SNPs) was observed between women with RPL and fertile controls among Korean women. To determine the possibility of genetic polymorphisms in Fas and its ligand as risk factors for RPL, further studies in various races and a large study population are needed.     

遗传性血栓形成倾向与反复自然流产的研究进展

反复自然流产大约影响1%-3%生育年龄的妇女,近年来研究证明反复自然流产与血栓形成倾向/易栓症(thrombophilia)有密切的关系。易栓症引起的复杂妊娠与凝血及抗凝系统缺陷的关系成为近几年研究的热点问题,本文主要对遗传性血栓形成倾向在反复自然流产中的作用及影响进行综述。     

胎儿生长受限患者血清和胎盘的Fas与FasL蛋白变化及意义

目的:探讨孕妇血清和胎盘Fas/FasL系统的表达与胎儿宫内生长发育的关系。方法:35例胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)患者,采用ELISA方法测定血清sFas和sFasL水平,采用Western blotting检测胎盘Fas和FasL的蛋白含量,并以45例正常孕妇为对照。结果:FGR组与对照组血清sFas水平分别为3.63±0.29 mg/L和1.17±0.53 mg/L,FGR组高于对照组(P<0.05)。FGR组胎盘组织FasL含量(0.341±0.371)与正常组(0.917±0.15)比较显著下降(P<0.05),并且FasL含量与胎盘相对重量和新生儿体质量呈显著正相关,相关系数分别为0.791和0.638。结论:FGR患者血清sFas水平升高,胎盘组织FasL下降与胎盘相对重量及新生儿体质量相关,提示母-胎界面免疫耐受异常亦可能是胎儿生长受限发病机制中的重要因素之一。     

正常人子宫内膜Fas、FasL协同表达与细胞凋亡相关性的研究

目的 :探讨正常人月经周期子宫内膜细胞凋亡及其与Fas基因家族的关系。方法 :应用TUNEL法检测细胞凋亡的时空分布 ,用原位杂交和免疫组化法检测Fas、FasL的表达。结果 :( 1)月经增殖晚期内膜无明显凋亡发生 ,Fas、FasLmRNA及蛋白的表达量极低 ;( 2 )月经分泌晚期内膜凋亡细胞比率高 ,Fas、FasLmRNA及蛋白的表达显著提高。结论 :Fas、FasL在人子宫内膜协同表达 ,且与子宫内膜凋亡的周期性变化一致 ,子宫内膜凋亡与Fas、FasL的高表达相关。内膜脱落、月经来潮可能是通过细胞凋亡实现的。