肝癌及癌旁组织HBV DNA定点PCR研究

目的采用定点ＰＣＲ技术，研究ＨＢＶ的Ｓ和Ｃ基因在肝癌与癌旁组织的存在状态，探讨癌旁ＨＢｓＡｇ表达与Ｓ基因的关系。方法福尔马林固定，石蜡包埋肝癌及癌旁组织２８例，ＨＢｓＡｇ免疫组化后的切片分别切割癌组织、癌旁ＨＢｓＡｇ强阳性区（Ｐ２）及癌旁ＨＢｓＡｇ阴性区（Ｐ１）各１个低倍视野，作Ｓ及Ｃ基因ＰＣＲ。结果癌组织Ｓ基因较Ｃ基因检出率高（１８／２８ｖｓ１０／２８，Ｐ＜０．０５），癌旁二者无差异；癌旁中Ｐ１与Ｐ２的Ｓ及Ｃ基因检出率无显著性差异；高分化肝癌Ｓ和／或Ｃ基因检出率较中分化者低（２／５ｖｓ２０／２８，Ｐ＜０．０５）。结论癌组织中整合的ＨＢＶＤＮＡ为残缺不全的，ＨＢｓＡｇ强阳性与阴性区的Ｓ基因检出无显著性差异。     

套式及免疫套式聚合酶链反应检测乙型肝炎表面抗原阴性肝病患者血清中乙型肝炎病毒DNA

为了更准确、简便而又快速地了解乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性肝病患者的病因，建立了套式和免疫套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ的技术，结合丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染指标的检测，对ＨＢｓＡｇ阴性肝病患者的病因进行了研究。发现套式ＰＣＲ能将单次ＰＣＲ的敏感性稳定地提高１０００倍；免疫套式ＰＣＲ可检测到０．１～０．０１ｐｇ／Ｌ水平。检测ＨＢｓＡｇ阴性肝硬化２２例（Ａ组）、ＨＢｓＡｇ阴性慢性肝炎１３例（Ｂ组）、ＨＢｓＡｇ阴性和乙型肝炎病毒核心抗体（抗－ＨＢｃ）阳性正常对照组３０例（Ｃ组）及ＨＢｓＡｇ（＋）／ＨＢｅＡｇ（－）肝硬化患者１２例（Ｄ组），分别有４５．５％、３０．８％、１３．３％和１００％患者血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性。ＨＢＶＤＮＡ在一些抗－ＨＢｓ（＋）肝病患者和所谓健康人的血清中也存在。Ａ、Ｂ两组检出有ＨＢＶ和（或）ＨＣＶ感染患者分别占８１．８％和５３．８％。提示套式和免疫套式ＰＣＲ是简便、快速而又高度敏感的检测方法；ＨＢＶ感染可能是引起ＨＢｓＡｇ阴性慢性肝病的重要原因，且ＨＢｓＡｇ阴性肝病病因大多与病毒感染有关；应该重新认识自然感染者血清中抗－ＨＢｓ的临床意义。     

小儿乙型肝炎血清,病理及免疫病理分析

本文通过检测１５例小儿病毒性肝炎患者血清ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ标志及肝组织内ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ发现ＨＡＶ和ＨＣＶ标志全部阴性，ＨＢＶ标志全部阳性。１５例ＨＢＶ感染中，血清ＨＢＶＤＮＡ阳性１１例。其中ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）９例，ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｂ（＋）２例。综合血清其它的感染指标与肝脏病理及免疫病理的变化对１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病例作了重要分析。进一步证实ＨＢｅＡｇ为临     

肝细胞癌患者肝组织中丙型肝炎病毒抗原的定位研究

用过氧化物酶与抗过氧化物酶（ＰＡＰ）法检测了７３例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝组织中的丙型肝炎病毒抗原（ＨＣＶＡｇ）和ＨＢｓＡｇ及ＨＢｃＡｇ。结果显示：ＨＣＶＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的检出率分别为２８．８％，７５．３％和２６．０％，ＨＣＶＡｇ阳性的肝细胞多呈散在分布，ＨＣＶ染色颗粒既可见于细胞浆也可见于细胞核，ＨＣＶＡｇ的检出与ＨＢＶ的感染态多显著相关，提示，ＨＣＶ可在ＨＣＣ患者的肝细胞中表达，Ｈ     

快速简便筛检乙型肝炎病毒C基因启动子变异的方法及应用

目的明确中国乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｃ基因启动子（ＢＣＰ）区段变异特点及其可能的临床意义。方法应用错配聚合酶链反应限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法，结合核苷酸序列分析，检测１４３例ＨＢｓＡｇ阳性的ＨＢＶ慢性感染者中Ｘ基因／ＢＣＰ区的核苷酸（ｎｔ）１７６２碱基由Ａ→Ｔ和１７６４碱基由Ｇ→Ａ变异。结果在１１４份ＨＢＶＤＮＡ阳性血清中，３７例感染ＢＣＰ变异株，其中３１例为慢性肝炎病例，６例为慢性ＨＢＶ无症状感染者（ＡｓＩ）；其中４１例ＨＢｅＡｇ阳性ＡｓＩ中仅２例检出，１８例ＨＢｅＡｇ阴性ＡｓＩ中也有４例检出。ＨＢｅＡｇ阳性的６５例中，１３例有ＢＣＰ区变异，而ＨＢｅＡｇ阴性的４９例中，２４例有ＢＣＰ区变异（Ｐ＜０．０１）。结论错配ＰＣＲ－ＲＦＬＰ检测这一对点突变，具有快速、简便、适用的优点；ＨＢＶ毒株ＢＣＰ变异可能与肝病变活动有一定关系。     

原发性肝癌组织P16蛋白的缺失与HBV感染

目的研究Ｐ１６蛋白缺失与原发性肝癌发生发展的关系以及ＨＢＶ感染与Ｐ１６蛋白缺失的相关性．方法用免疫组化技术（ＬＳＡＢ法）检测７０例原发性肝癌组织标本中的Ｐ１６蛋白和ＨＢｓＡｇ．结果有６０６％（４０／６６）的肝细胞癌（ＨＣＣ）和７５０％（１／４）的胆管细胞癌（ＣＣＣ）Ｐ１６蛋白缺失；Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ和Ⅳ级（按Ｅｄｍｏｎｄｓｏｎ标准）ＨＣＣＰ１６蛋白缺失率分别为００％（０／１），４４１％（１５／３４），８２１％（２３／２８）和６６７％（３／４），组间差异显著（Ｐ＜００５）．在有癌旁肝组织的４８例标本中，癌组织Ｐ１６蛋白阴性率（７２６％）明显高于癌旁肝组织（４１２％，Ｐ＜００５）．有６２５％（３０／４８）的ＨＣＣ癌旁肝组织ＨＢｓＡｇ阳性．ＨＢｓＡｇ阳性病例与阴性病例的Ｐ１６阴性率分别为７３３％（２２／３０）和６６７％（１２／１８），差异无显著性（Ｐ＞００５）．结论Ｐ１６蛋白缺失与原发性肝癌相关，与肝癌的恶性发展关系密切，可能对预后有重要影响．ＨＢＶ感染与Ｐ１６蛋白缺失无明显相关性．     

乙型肝炎患者血清Pre-S-2抗原的意义

目的研究ＰｒｅＳ２抗原与乙型肝炎患者ＨＢＶ标记的关系．方法血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者２６例，血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｂ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者４７例及健康献血者２０例，血清用ＲＩＡ法检测ＰｒｅＳ２抗原及用ＰＣＲ法检测ＨＢＶＤＮＡ．结果血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者２６例，ＰｒｅＳ２抗原与ＨＢＶＤＮＡ均阳性（１００％）；血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｂ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者４７例，ＰｒｅＳ２抗原３０例阳性（６３８％），１７例阴性（３６２％），ＨＢＶＤＮＡ３２例阳性（６８１％），１５例阴性（３１９％），ＰｒｅＳ２抗原与ＨＢＶＤＮＡ均阳性２８例（５９６％），均阴性１４例（３００％）．健康献血者２０例，ＰｒｅＳ２抗原阳性１例（５０％），阴性１９例（９５０％），ＨＢＶＤＮＡ阳性２例（１００％），阴性１８例（８００％），ＰｒｅＳ２抗原及ＨＢＶＤＮＡ均阳性０例（０％），均阴性１８例（８００％）．结论ＰｒｅＳ２抗原可作为预测慢性乙型肝炎患者病情活动与传染的标志．     

丙型肝炎病毒C33c抗原及HBxAg在人原发性肝细胞癌中的分布及意义

作者应用免疫组化法对１０２例人原发性肝细胞癌（ＰＨＣ）组织进行了ＨＣＶ及ＨＢＶ抗原定位研究。ＨＣＶＣ３３ｃ抗原及ＨＢｘＡｇ在ＰＨＣ中的阳性检出率分别是８１．４％及７４．５％，Ｃ３３ｃ抗原和ＨＢｘＡｇ阳性占所检病例９４．１％，二者同时阳性为６１．８％，１０２例ＰＨＣ中５０例有癌旁肝组织，其Ｃ３３ｃ抗原和ＨＢｘＡｇ的阳性检出率分别是６２％和９２％。ＨＣＶＣ３３ｃ抗原定位于肝癌细胞的胞浆内，在胞浆内局灶分布或充满整个胞浆，有的紧靠核膜，胞核未见阳性信号。Ｃ３３ｃ抗原阳性细胞在ＰＨＣ中呈散在、局灶分布为主，在癌旁肝组织呈弥漫分布为主。     

乙型,丙型肝炎病毒与肝细胞癌的关系

乙型、丙型肝炎病毒与肝细胞癌的关系山东省千佛山医院（２５００１４）王文奇为进一步探讨肝细胞癌（ＨＣＣ）与乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的关系，我们测定了２６例ＨＣＣ患者的血清ＨＢ－ｓＡｇ、抗ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃ和抗Ｈ...     

抗HCV阳性慢性肝病患者HBV感染及前C／C区基因变异

探讨ＨＢＶ基因变异在ＨＢｓＡｇ阴性抗ＨＣＶ阳性慢性肝病中的意义。方法用巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）与限制片段长度多态性相结合，对５６例慢性肝病患者６例ＨＢｓＡｇ阴性抗ＨＣＶ阳性（Ａ组）．１９例ＨＢｓＡｇ阳性抗ＨＣＶ阳性（Ｂ组）及３１例单独ＨＢＶ成染（Ｃ组）进行前Ｃ区密码２８终止变异（Ａ８３）和Ｃ区密码９７异亮氨酸亮氨酸变异（Ｌ９７）分析。结果Ａ组和Ｂ组Ａ８３和Ｌ９７变异检出率分别为３３％和４２％显著低于Ｃ组８１％（Ｐ值＜０．００１）：而Ａ组和Ｂ组间无统计学差异（Ｐ值＞０．０５）。结论ＨＢＶ和ＨＣＶ双重感染ＨＢｓＡｇ阴性与Ａ８３和Ｌ９７变异无相关。     

多聚酶链式反应在慢性乙型肝炎血清学标志物检测中的应用

作者应用多聚酶链式反应检测９５例慢性乙型肝炎患者的血清标本，ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性组，ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性组，ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性组，抗－ＨＢｓ阳性组，抗－ＨＢｅ，抗－ＨＢｃ阳性组其ＨＢＶＤＮＡ阳性率分别为９６．５５％（２８／２９例），７８．９５％（１５／１９例），４０％（８／２０），２０％（２／１０例），１０％（１／１０例），并提出乙型肝炎病毒复制和传染性     

HBV特异性T细胞治疗慢性乙型肝炎的研究

为寻求一种治疗慢性乙型肝炎的新方法,应用ＨＢＶ特异性Ｔ细胞输注治疗慢性乙型肝炎９例,结果显示,在疗程结束后,患者的ＨＢｓＡｇ,ＨＢｅＡｇＨＢＶＤＮＡ的含量均有所下降,其中ＨＢｅＡｇ下降较明显,Ｐ〈０．０１,２例ＨＢｃＡｇ阳性患者,ＨＢｃＡｇ阴转,ＣＤ＾＋３,ＣＤ＾＋４,ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋８ＮＫ活性上升,ＣＤ＾＋８,ｓＩＬ－２Ｒ较治疗前后所回复,表明特异性Ｔ细胞治疗慢性乙型肝炎有一定疗效,远期疗效     

肝炎病毒感染的肾移植受者术后并发症

目的：了解ＨＢｓＡｇ或Ａｎｔｉ－ＨＣＶ阳性对肾移植受者术后并发肝外感染、急性排异及移植肾功能不全的影响。方法：回顾分析１０１例肾移植受者的临床资料。结果：在ＨＢｓＡｇ（＋）与Ａｎｔｉ－ＨＣＶ（＋）组间上述三大并发症发生率差异不显著（Ｐ＞０．０５）；ＨＢｓＡｇ（＋）组或Ａｎｔｉ－ＨＣＶ（＋）组移植肾急性排异及肾功能不全的发生率较高，尽管较阴性组无显著差异（Ｐ＞０．０５），但肝外感染的发生率明显升高（Ｐ＜０．０５）。结论：对ＨＢｓＡｇ（＋）或Ａｎｔｉ－ＨＣＶ（＋）的肾移植受者必须密切监测肝功能，环孢素Ａ（ＣｓＡ）浓度及机体免疫状态，以选择适当的免疫抑制剂方案及剂量     

慢性肝炎和肝硬变内HBV的前S1和S2抗原的表达及意义

１１５例慢性炎和１３２例肝硬变标本，１０％福尔马林固定，石蜡包埋，ＨＥ染色，用ＨＢＣ法检测前Ｓ１和前Ｓ２抗原，ＰＡＰ法检测ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ。在１１５例慢性肝炎中，６０（５２．２％）例显示前Ｓ１抗原阳性和５４（４７．０％）例前Ｓ２抗原阳性。前Ｓ１和Ｓ２抗原伴有ＨＢｓＡｇ分别为９０．０％和８３．３％，伴有ＨＢｃＡｇ分别为５１．７％和５５．６％。在１３２例肝硬变中，８５（６４．４％）例显示前Ｓ１抗     

HBV 侵犯PBMC致线粒体功能改变

目的探讨ＨＢＶ侵犯外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）后对其线粒体功能的影响．方法ＨＢｓＡｇ阳性６个月以上，无肝炎症状及体征，肝功正常患者５８例．多聚酶链反应检测ＰＢＭＣ中ＨＢＶＤＮＡ，噻唑兰（ＭＴＴ）比色法测线粒体功能．ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ检测用固相放免法检测．结果慢性ＨＢＶ感染者５８例，ＰＢＭＣ中检出ＨＢＶＤＮＡ３１例（５３５％），ＰＢＭＣ中ＨＢＶＤＮＡ阳性组ＭＴＴ比色法查线粒体功能的Ａ（ＯＤ５００ｎｍ）值明显低于ＨＢＶＤＮＡ阴性组（００５±００３ｖｓ０２９±００７，Ｐ＜００１）．结论慢性ＨＢＶ感染时，ＨＢＶ常侵犯ＰＢＭＣ，并导致ＰＢＭＣ线粒体功能降低、能量代谢异常．这可为ＨＢＶ慢性感染免疫功能异常的原因之一．     

丙型肝炎抗原和乙型肝炎表面抗原在原发性肝细胞癌肝组织中的定位

用免疫组化技术对６４例原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）癌组织进行丙型肝炎抗原（ＨＣＡｇ）和乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）定位和分布的研究。结果见ＨＣＡｇ呈粗颗粒深着色，弥漫性分布于全核，部分核仁可显色。肝性细胞多数散在分布于癌组织中，少数集中分布。ＨＢｓＡｇ呈棕褐色细颗粒，分布于细胞浆和细胞膜，阳性细胞多数呈聚集性分布，少数呈散在分布。６４例ＨＣＣ癌组织中的ＨＣＡｇ阳性率为１２．５％（８／６４），ＨＢｓＡｇ阳性率为２６．５％（１７／６４）。１５例癌周组织，呈现ＨＣＡｇ或ＨＢｓＡｇ染色阳性者占６．６％，３３％。揭示ＨＣＶ在ＨＣＣ的发生中，有相当一部分以与ＨＢＶ双重感染形式存在。     

乙型肝炎病毒前核心区基因变异的研究

应用聚合酶链（ＰＣＲ）方法，分别扩增乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）标志为ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋）抗ＨＢｃ（＋）的慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）１８例（第一组，ＨＢＶ标志物为ＨＢｓＡｇ（＋），抗ＨＢｅ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）的慢性乙型肝炎２１例（第二组，以及ＨＢＶ标志与第二组相同的体检健康的正常人１５例（第三组），其ＰＣＲ的阳性率分别为８３．３％，７１．４％和３３．３％，第二组与第三组要紫有显著差异（Ｐ〈０     

聚合酶链反应检测HBV－DNA的临床意义

本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ法对２７３７例乙肝患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ和乙肝病毒标志物进行检测，结果发现各组ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率：①ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为９９．２７％；②ＨＢｓＡｇ（＋）、抗ＨＢｅ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为４４．７７％；③ＨＢｓＡｇ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为４２．８６％；④ＨＢＶ标志物均阴性为１５．９２％。结果表明ＨＢＶ－ＤＮＡＰＣＲ检出先于其它乙肝病毒标志物，可早期发现乙肝。ＰＣＲ法直接检测ＨＢＶ－ＤＮＡ更有利于临床对乙肝的诊断和治疗。     

聚合酶链反应检测HBV DNA的临床意义

应用ＰＣＲ对１７１例肝病血清检测结果，ＨＢＶＤＮＡ阳性率５９．１％，ＥｌｉＳＡ检测ＨＢｓＡｇ阳性率４３．２７％，二者比较有显著性差异（Ｐ〈０．０１），ＨＢｓＡｇ（＋）／ＨＢｅＡｇ（＋）组ＨＢＶＤＮＡ阳性率７９．５％，而ＨＢｓＡｇ（＋）抗－ＨＢｅ（＋）组主５７．９％，ＨＢｓＡｇ（－）／抗－ＨＢｓ（＋）组，ＨＢＶＤＮＡ阳性率３６．８％。     

乙型肝炎患者血清中HBcAg与HBV复制指标的关系

目的探讨乙型肝炎患者血清ＨＢｃＡｇ与ＨＢＶ复制指标的关系及临床意义．方法对３１１例乙型肝炎患者进行了ＨＢｃＡｇ检测，并同时进行酶联法乙肝五项、地高辛法ＨＢＶＤＮＡ检测，其中２３７例进行乙肝ＤＮＡ聚合酶（ＤＮＡＰ）检测．结果ＨＢｃＡｇ阳性组的ＨＢＶＤＮＡ检出率（７７６％），明显高于ＨＢｃＡｇ阴性组（３５５％，Ｐ＜００１）；在ＨＢｃＡｇ阴性组中，抗ＨＢｅ阳性者仍能检出２９９％（４４／１４７）ＨＢＶＤＮＡ者阳性；ＨＢｅＡｇ，ＨＢｃＡｇ均阳性者其ＨＢＶＤＮＡ和ＤＮＡＰ的检出率高达８５９％；其他依次为ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ和ＨＢｃＡｇ均阳性者７１４％，抗ＨＢｅ，ＨＢｃＡｇ阳性者６９２％，ＨＢｅＡｇ阳性，ＨＢｃＡｇ阴性者６８４％，抗ＨＢｅ阳性，ＨＢｃＡｇ阴性者２７６％．结论血清ＨＢＶＤＮＡ，ＤＮＡＰ，ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ均是反映乙肝病毒复制的敏感指标，抗ＨＢｅ的出现并不表示病毒复制停止，应参考其他病毒复制指标情况．各种指标的不同组合可以清楚地反映出患者体内病毒复制状况．