褪黑素对七氟醚重复暴露诱发新生大鼠远期认知障碍的影响

目的： 探讨褪黑素对七氟醚重复暴露诱发新生大鼠远期认知功能障碍的影响及可能机制。
方法： 选择新生雄性SD大鼠96只,6日龄,体重10～15 g。采用随机数字表法将大鼠分为四组：对照组（C组）、褪黑素组（M组）、七氟醚组（S组）和七氟醚+褪黑素组（SM组）,每组24只。C组自由饮食饮水;M组在出生后第6天开始每天接受1次腹腔注射褪黑素10 mg/kg,连续3 d,第21天分笼后开始饮用含褪黑素的水;S组在出生后第6天开始每天吸入3%七氟醚2 h,连续3 d;SM组在出生后第6天开始每天接受1次腹腔注射褪黑素10 mg/kg,后吸入3%七氟醚2 h,连续3 d,第21天分笼后开始饮用含褪黑素的水。大鼠出生后第35天采用旷场实验记录探索总路程以及中央格停留时间,第36天采用新物体识别实验记录识别指数;第37—39天采用场景性、条件性恐惧实验记录僵直时间。出生后第8、40天取大鼠脑组织,采用Western blot法检测大鼠前额叶皮层iNOS和CD68蛋白含量,ELISA法检测IL-1β和IL-6浓度。
结果： 与C组比较,S组识别指数明显降低,场景性、条件性恐惧测试阶段僵直时间明显缩短,出生后第8天前额叶皮层iNOS和CD68蛋白含量、IL-1β和IL-6浓度明显升高（P<0.05）。与S组比较,SM组识别指数明显升高,场景性、条件性恐惧测试阶段僵直时间明显延长,出生后第8天前额叶皮层iNOS和CD68蛋白含量、IL-1β和IL-6浓度明显降低（P<0.05）。出生后第40天四组间前额叶皮层iNOS和CD68蛋白含量、IL-1β和IL-6浓度差异无统计学意义。
结论： 褪黑素可以抑制前额叶皮层的炎症反应,改善七氟醚重复暴露导致的新生大鼠远期认知障碍。     

丰富环境对七氟醚吸入诱发新生大鼠远期认知功能障碍的影响

目的观察丰富环境对七氟醚吸入诱发新生大鼠远期认知功能障碍的影响。方法 6日龄新生雄性SD大鼠30只随机均分为三组:O2+标准环境组(OS组)、七氟醚麻醉+标准环境组(SS组)和七氟醚麻醉+丰富环境组(SE组)。SS、SE组分别在日龄6、7、8d时,每天接受1次2h的3%七氟醚麻醉,氧浓度100%;O2组在相应日龄吸入100%氧气。出生后第8天起至行为学测试前分别进行标准环境和丰富环境饲养,连续4周。第35天行旷场实验。第36天行场景性、条件性恐惧实验训练。第37、38天行场景性、条件性恐惧实验测试。行为学测试结束后2h,每组各取4只大鼠海马组织,采用Western blot法检测Synapsin-1、PSD-95、c-fos及BDNF含量。结果旷场实验测试中,三组探索路程和中央格停留时间差异无统计学意义。场景性恐惧实验测试中,与SS组比较,OS、SE组僵直反应明显增加(P0.05)。条件性恐惧实验测试中,三组僵直反应差异无统计学意义。与SS组比较,OS、SE组海马Synapsin-1、PSD-95、c-fos和BDNF含量明显增加(P0.05)。结论七氟醚麻醉可致新生大鼠远期海马依赖性认知功能受损,丰富环境可改善此种损伤,其机制可能与增加突触可塑性相关蛋白表达有关。     

七氟醚对新生大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴发育的影响

目的研究新生期七氟醚暴露对下丘脑-垂体-肾上腺皮质(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴发育及功能的影响。方法新生雄性SD大鼠54只,6日龄,随机分为三组:对照组(C组)、七氟醚组(S组)和布美他尼+七氟醚组(BS组),每组18只。C组:吸入100%氧气6h;S组:吸入2.1%七氟醚6h;BS组:吸入2.1%七氟醚6h,在麻醉前30min和麻醉后3h注射布美他尼。6h后,每组随机选取6只处死收集血清,采用ELISA法测定皮质酮浓度;各组剩余大鼠于第60天行高架十字迷宫测试,第65天行束缚应激30 min,并在应激前后取尾静脉血,采用ELISA法测定血清皮质酮浓度。结果麻醉后S组血清皮质酮浓度明显高于C组(P0.01);BS组血清皮质酮浓度明显低于S组(P0.01)。S组进入开放臂次数明显少于C组(P0.05),开放臂停留时间明显短于C组(P0.05),应激前后血清皮质酮浓度明显高于C组(P0.05或P0.01);BS组进入开放臂次数明显多于S组,开放臂停留时间明显长于S组(P0.05),应激前后血清皮质酮浓度明显低于S组(P0.05)。结论新生期七氟醚麻醉可导致HPA轴功能亢进,其机制与GABAA受体相关。     

七氟醚单次和多次暴露对新生鼠海马神经元结构的影响

目的探讨等同时间不同次数七氟醚暴露对新生大鼠海马CA1细胞形态及超微结构的影响。方法出生7d的SD雄性大鼠45只,体重14~18g,随机均分为三组:对照组(C组)、单次七氟醚暴露组(SS组)和多次七氟醚暴露组(TS组)。SS组于出生后第7天吸入1次3%七氟醚6h;TS组于出生后第7、8、9天每天吸入1次3%七氟醚2h,累计6h;C组在相应日龄吸入60%氧气。三组于出生后第14天灌注取脑,采用HE和尼氏染色观察大鼠海马CA1区锥体神经元形态及数量变化;同时,透射电镜下观察该区域神经元超微结构及突触后致密物厚度和活性区长度。结果 HE和尼氏染色显示:与C组比较,SS组和TS组海马CA1细胞排列稀疏,神经元数量明显减少(P0.05);与SS组比较,TS组海马CA1神经元数量明显减少(P0.05)。电镜结果显示:与C组比较,SS组和TS组海马CA1神经元亚细胞器均有不同程度的受损,突触后致密物厚度明显变薄,活性区长度明显缩短(P0.05);与SS组比较,TS组神经元亚细胞器损伤更明显,突触后致密物厚度更薄,活性区长度缩短更严重(P0.05)。结论七氟醚单次和多次暴露均会引起新生大鼠海马CA1区锥体神经元数量减少及细胞超微结构的改变,等同时间多次暴露比单次暴露对神经元形态的损伤更严重。     

七氟醚暴露致新生大鼠未成熟脑损伤的研究

目的探讨七氟醚早期暴露对新生大鼠脑发育的影响。方法选取新生6日龄SD大鼠80只,随机分为四组,每组20只,分别为空白对照组(C组),1%七氟醚暴露2 h组(Sev1组),2%七氟醚暴露2 h组(Sev2组),4%七氟醚暴露2 h组(Sev3组);七氟醚暴露组分别置于1%、2%、4%七氟醚中每天暴露2 h,连续3 d;出生后第9天采用0.5%戊巴比妥钠麻醉后处死新生大鼠取出脑组织;采用电子天平秤检测各组大鼠在出生后6、9、15、28 d体重和脑重的变化;采用荧光定量PCR法(RT-PCR)检测Cx30、IL-6及BDNF基因mRNA表达量;采用免疫荧光法检测GFP蛋白含量;出生后28 d Morris水迷宫评价新生大鼠学习记忆能力。结果与C组比较,Sev1、Sev2和Sev3组新生大鼠体质量和脑质量均有所减轻,且随着日期延长这种减轻更为明显,Cx30 mRNA和BDNF mRNA表达量明显降低,IL-6mRNA表达量明显升高(P0.05),GFP细胞数量明显减少(P0.05);与Sev1组比较,Sev2和Sev3组新生大鼠体质量和脑质量均明显减轻,GFP数量明显减少(P0.05);与C组比较,Sev1、Sev2和Sev3组逃避潜伏期和游动距离均明显延长(P0.05),目标象限停留时间明显缩短(P0.05),穿越虚拟平台次数明显减少(P0.05)。结论新生大鼠接受七氟醚暴露可致未成熟脑损伤及远期学习记忆能力下降,且这种脑损伤程度与七氟醚浓度呈正相关;其机制可能与其脑内Cx30、BDNF基因表达水平改变有关。     

不同浓度七氟醚麻醉对新生大鼠远期学习记忆能力的影响

目的 评价不同浓度七氟醚麻醉对新生大鼠远期学习记忆能力的影响.方法 新生SD大鼠27只,雌雄不拘,7日龄,体重12～20 g,采用随机数字表法,将其分为3组(n=9):对照组(C组)、2％七氟醚组(S1组)和3％七氟醚组(S2组),分别吸入空气、2％七氟醚和3％七氟醚4h.新生大鼠饲养至35日龄行旷场实验,36日龄行Morris水迷宫实验,42日龄进行连续被动回避实验测定大鼠学习记忆能力.结果 旷场实验:各组运动时间、运动速度和中央区时间的差异均无统计学意义(P＞0.05).Morris水迷宫实验:与C组比较,s2组第2～5天、S1组第2～3天寻找平台潜伏期延长,S1组和S2组探索期平台象限滞留时间百分比降低(P ＜0.05或0.01);S2组第3～4天寻找平台潜伏期长于S1组(p＜0.05);连续被动回避实验:与C组比较,S1组和S2组训练后24h时潜伏期缩短(P＜0.05);s2组训练后24 h时潜伏期短于S1组(P＜0.05).结论 七氟醚麻醉可呈浓度依赖性地降低新生大鼠远期学习记忆能力.     

七氟醚对新生小鼠fractalkine/CX3CR1表达及学习记忆功能的影响

目的探讨七氟醚对新生小鼠fractalkine/CX3CR1表达及学习记忆功能的影响。方法取健康6日龄C57BL/6新生小鼠36只,分为对照组(C组)、七氟醚1组(S1组)、七氟醚2组(S2组),每组12只。C组小鼠出生后第6、7和8天每天接受1次2 h的60%氧浓度的吸入;S1组小鼠出生后第6、7和8天每天接受1次2 h的2%七氟醚麻醉,吸入氧浓度为60%;S2组小鼠出生后第6、7和8天每天接受1次2 h的3%七氟醚麻醉,吸入氧浓度为60%。三组分别于出生后第9天(T_1)及出生后第34天(T_2)时各处死6只小鼠,取脑组织,采用Western blot法检测海马脑片fractakine和CX3CR1蛋白含量;real-time PCR检测海马脑片fractalkine和CX3CR1 mRNA的表达量。三组剩余6只小鼠用药3周后即出生第29天时行为期5 d的mirror水迷宫实验进行学习记忆能力测试并记录。记录出生后第29～32天小鼠的逃避潜伏期和游泳速度、原平台穿越次数。结果与C组比较,S1组和S2组学习记忆功能降低且海马脑片fractalkine和CX3CR1蛋白含量和mRNA表达量明显降低(P0.05);与S1组比较,S2组学习记忆功能降低且海马脑片fractalkine和CX3CR1蛋白含量和mRNA表达量明显降低(P0.05)。结论 6日龄小鼠连续吸入七氟醚3 d,3周后出现七氟醚麻醉浓度递增的学习记忆能力障碍。小鼠吸入七氟醚可致幼龄小鼠海马脑片fractalkine、CX3CR1蛋白含量和mRNA表达量降低。     

海马内DNA甲基转移酶在七氟醚所致新生大鼠远期认知功能损伤中的作用

目的观察海马内DNA甲基转移酶(DNMTs)在七氟醚所致新生大鼠远期认知功能损伤中的作用。方法出生7d雄性SD大鼠64只,随机均分为四组(n=16):对照组(C组)、七氟醚组(S组)、七氟醚+生理盐水组(SN组)及七氟醚+5-杂氮胞苷组(5-AZA,DNMTs抑制剂,SA组)。C组吸入30%O22h,连续3d;S组、SN组和SA组吸入3%七氟醚+30%O22h,连续3d;SA组在七氟醚吸入前1h时侧脑室注入5-AZA 1mg/kg;SN组则注射等容量生理盐水。4周后,一部分大鼠行旷场实验和Morris水迷宫实验(n=8),另一部分取海马组织(n=8),采用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的mRNA和蛋白含量。结果旷场实验中,四组大鼠探索路程和中央格停留时间差异无统计学意义。与C组比较,S组在Morris水迷宫实验中逃逸潜伏期明显延长,目标象限探索时间明显缩短,海马内DNMT3a及DNMT3b的mRNA和蛋白含量明显增加(P0.05);与SN组比较,SA组逃逸潜伏期明显缩短,目标象限探索时间明显延长,海马内DNMT3a及DNMT3b的mRNA和蛋白含量明显减少(P0.05);四组海马内DNMT1的mRNA和蛋白含量差异无统计学意义。结论七氟醚可致新生大鼠远期认知功能损伤伴海马内DNMT3a和DNMT3b表达增加;5-AZA可降低海马内DNMT3a及DNMT3b表达,减轻七氟醚所致新生大鼠远期认知功能损伤,表明DNMTs参与了七氟醚所致新生大鼠远期认知功能损伤的过程。     

异氟醚对新生鼠齿状回神经前体细胞发育动力学的影响

目的 探讨异氟醚对新生鼠齿状回神经前体细胞发育动力学的影响。方法 将出生7日龄（P7）SD大鼠随机分为两组：异氟醚组（I组,n = 8）和对照组（C组,n = 7）。I组吸入1.5%异氟醚维持4 h,C组只吸入室内空气4 h。两组P7大鼠分别在麻醉暴露前及结束后腹腔注射5-溴脱氧尿苷（BrdU,100mg/kg）以标记海马齿状回的神经前体细胞及其子细胞,然后在暴露结束后1 w,利用BrdU和DCX（未成熟神经元标志物）或GFAP免疫荧光双标的方法观察两组齿状回神经前体细胞的迁移、分化及存活的情况。结果 与C组比较,I组P7大鼠齿状回颗粒细胞层BrdU+细胞的数量减少（P＜0.05）。两组齿状回新生细胞迁移至颗粒细胞层或门区的比例,以及分化为神经元或神经胶质细胞的比例均无统计学差异（P＞0.05）。结论 异氟醚减少新生鼠齿状回新生颗粒细胞的早期存活,但并不影响神经前体细胞的早期迁移及分化。     

围术期全麻药七氟烷对新生大鼠远期记忆损害和神经细胞焦亡的影响

目的 研究围术期吸入性全麻药七氟烷对新生大鼠海马神经细胞焦亡和认知功能的影响。方法 出生后7 d的SD大鼠随机分为对照组和实验组,同一环境下实验组暴露于2.8%七氟烷4 h,对照组暴露于空气中4 h,6 h后提取海马组织,western blot检测焦亡相关蛋白NLPR3、GSDMD、GSDMD-N、IL-18、IL-1β的表达变化（n=6）。另一批动物七氟烷或空气暴露处理后,与母鼠同窝继续饲养,30 d行旷场实验,33～34 d行条件恐惧性实验（n=10）。结果 与对照组相比,七氟烷组幼鼠海马组织焦亡相关蛋白NLPR3、GSDMD、GSDMD-N、IL-18、IL-1β表达显著上调（P<0.001）。七氟烷组动物在条件恐惧性实验中僵直时间比对照组明显缩短（P<0.001）,旷场实验中总运动距离和中心区域时间七氟烷组与对照组差别无统计学意义（P>0.05）。结论 七氟烷暴露可以导致新生大鼠记忆能力障碍,其机制可能与诱导神经细胞焦亡有关。     

不同浓度七氟醚对老年大鼠海马神经发生和恐惧记忆的影响

目的探讨七氟醚对老年大鼠海马神经发生和恐惧记忆的影响。方法 SPF级健康雄性SD大鼠24只,20月龄,体重250~300g,采用随机数字表法分为三组:对照组(C组)、3%七氟醚组(LS组)和4%七氟醚组(HS组),每组8只。C组吸入空-氧混合气体,LS组予3%七氟醚吸入,HS组予4%七氟醚吸入,吸入时间均为3h。吸毕24h进行条件恐惧实验(场景和声音)检测大鼠恐惧记忆。先进行声音和电流刺激训练,训练后2h和24h进行场景和声音实验。行为学实验结束后立即处死大鼠,采集脑组织进行免疫荧光分析海马中Ki67、NeuN、GFAP阳性细胞数和形态学变化。结果与C组比较,HS组和LS组大鼠24h场景实验僵直时间明显缩短,海马齿状回中Ki67、NeuN、GFAP阳性细胞数明显减少(P0.05)。与HS组比较,LS组大鼠24h场景实验僵直时间明显延长,齿状回中Ki67、NeuN、GFAP阳性细胞数明显增多(P0.05)。C组大鼠海马齿状回组织结构完整、清晰,细胞排列整齐有序,LS组和HS组大鼠的海马齿状回均出现细胞排列紊乱,结构完整性破坏,且HS组破坏更为严重。结论 3%和4%七氟醚吸入3h均能抑制老年大鼠海马神经发生,引起恐惧记忆下降。4%七氟醚对海马神经发生和恐惧记忆的损伤更重。     

钙蛋白酶介导的酪氨酸激酶受体B截断对剖腹探查术后小鼠认知功能的影响

目的 观察海马酪氨酸激酶受体B（TrkB）在小鼠术后认知功能障碍（POCD）中的表达变化,并探讨钙蛋白酶活化是否参与其调控。
方法 16月龄雄性C57BL/6小鼠54只,体重28~30 g,随机分为三组,每组18只：对照组（C组）、七氟醚麻醉+剖腹探查组（P组）和七氟醚麻醉+剖腹探查+钙蛋白酶抑制剂MDL28170组(PM组)。C组吸入纯氧;P组采用吸入3%七氟醚+剖腹探查术,建立POCD动物模型;PM组在七氟醚麻醉前即刻腹腔注射钙蛋白酶抑制剂MDL28170（20 mg/kg）,其后每天注射1次直至术后第5天。C组和P组腹腔注射生理盐水20 mg/kg。术后第5天进行旷场试验,记录小鼠探索路程及停留在中央格的时间,第6天进行条件性恐惧试验训练,第7天进行场景性条件性恐惧试验测试,记录小鼠5 min内僵直反应（除呼吸运动外无其他运动的状态）时间。于术后24 h每组取6只小鼠海马组织,采用Western blot法检测钙蛋白酶活性;行为学测试完成后2 h每组取6只小鼠海马组织,采用Western blot法检测全长型TrkB受体（TrkB-FL）、截断形式的TrkB受体（TrkB-T₁）、突触后致密蛋白-95（PSD95）的含量。
结果 旷场试验中,三组小鼠总的探索路程和中心区域停留时间差异无统计学意义。与C组比较,P组僵直反应时间百分比明显降低,海马TrkB-FL、PSD95含量明显降低,海马钙蛋白酶活性明显增高、TrkB-T₁含量明显升高（P＜0.05）;与P组比较,PM组在场景性恐惧测试中僵直反应时间百分比明显增高,海马TrkB-FL、PSD95含量明显升高,海马钙蛋白酶活性降低、TrkB-T₁含量明显降低（P＜0.05）。
结论 钙蛋白酶活化截断TrkB-FL,导致TrkB-T₁表达增多,损害小鼠术后认知功能。     

七氟醚麻醉通过c-fos和神经振荡影响小鼠苏醒期恐惧记忆

目的 探讨c-fos和神经振荡在七氟醚麻醉小鼠苏醒期恐惧记忆中的作用。
方法 选择SPF级雄性成年C57BL/6小鼠270只,8～10周龄,体重18～24 g。将小鼠随机分为三组：A组吸入2.5%七氟醚麻醉2 h;B组吸入2.5%七氟醚麻醉6 h;C组吸入2.5%七氟醚麻醉2 h,连续3 d,每组90只。所有小鼠先进行恐惧条件实验训练,训练后1 d进行相应的七氟醚麻醉处理,记录麻醉停止到翻正反射出现（苏醒）的时间。于麻醉前30 min（T₀）、翻正反射出现后5 min（T₁）、30 min（T₂）和60 min（T₃）对小鼠进行恐惧条件实验测试,记录冻结时间百分比。于T₀、T₁时进行旷场试验,记录小鼠运动总路程和在中心区域停留时间。A组随机另取6只小鼠于麻醉前1周在海马组织植入微电极,后将小鼠放回原来的笼子恢复1周,于T₀—T₃时记录Delta、Theta、Alpha、Beta和Gamma波相对能量值。于T₀—T₃时采用免疫荧光法检测海马组织c-fos阳性细胞数,采用Western blot法记录海马组织c-fos蛋白相对含量。
结果 与T₀时比较,T₁时A组和B组冻结时间百分比明显升高（P＜0.05）,B组中心区域停留时间明显缩短（P＜0.05）。B组停止麻醉到翻正反射出现的时间明显长于A组（P＜0.05）,T₁时冻结时间百分比明显低于A组（P＜0.05）,T₁时中心区域停留时间明显短于A组（P＜0.05）。C组停止麻醉到翻正反射出现的时间明显短于B组（P＜0.05）,T₁时冻结时间百分比明显低于A组和B组（P＜0.05）,T₁时中心区域停留时间明显长于B组（P＜0.05）。与T₀时比较,A组T₁时Theta波和T₁、T₂时Gamma波相对能量值明显升高（P＜0.05）,T₁时海马CA1区c-fos阳性细胞数明显增多（P＜0.05）,T₁时海马组织c-fos蛋白相对含量明显升高（P＜0.05）。与T₁时比较,A组T₃时Theta波和T₂、T₃时Gamma波相对能量值明显降低（P＜0.05）,T₂、T₃时海马CA1区c-fos阳性细胞数明显减少（P＜0.05）。
结论c-fos表达上调和神经振荡增强参与单次短时间吸入七氟醚增强小鼠苏醒短时间内恐惧记忆的过程,但这一效应随着苏醒后时间的延长而逐渐消失。     

下丘脑神经生长因子前体对心肺转流大鼠室旁核场电位的影响

目的探讨下丘脑神经生长因子前体(nerve growth factor precursor, proNGF)在大鼠心肺转流(CPB)过程中的改变以及可能对交感输出产生的作用。方法雄性SD大鼠42只,3～4月龄,体重350～500 g。其中18只建立大鼠CPB模型,将大鼠分为三组:对照组、CPB组和心肌缺血-再灌注组(IR组)。CPB 110 min后,取大鼠下丘脑和心脏节段背根神经节,检测NGF mRNA表达量以及proNGF蛋白含量。另选取12只大鼠双侧室旁核(PVN)插管,连续7 d注入proNGF蛋白,检测并记录延髓头端腹外侧区(RVLM)场电位。另选取12只大鼠侧脑室注入proNGF蛋白,检测并记录给药前后PVN场电位;PVN场电位记录结束后,检测下丘脑谷氨酸以及γ-氨基丁酸(GABA)含量。结果与对照组比较,CPB末CPB组、IR组proNGF蛋白含量明显升高(P0.05),DRG以及下丘脑NGF mRNA表达量明显升高(P0.05)。注入proNGF蛋白后,RVLM以及PVN场电位1～4 Hz频段能量明显下降,其余频段能量明显升高(P0.05);侧脑室注入proNGF对下丘脑谷氨酸无明显影响,但明显降低GABA含量(P0.05)。结论大鼠CPB后下丘脑proNGF表达增加,可能参与下丘脑交感输出改变。     

七氟醚后处理减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤

目的分析七氟醚后处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响并探讨其机制。方法清洁级成年雄性SD大鼠72只,3月龄,体重180～230 g。采用随机数字表法分为四组:假手术组(S组)、单纯七氟醚组(Sev组)、缺血-再灌注组(IR组)和七氟醚后处理组(SP组),每组18只。S组:穿线不阻断左冠状动脉前降支(LAD);Sev组:穿线不阻断LAD,穿线稳定后60 min吸入2.4%七氟醚15 min; IR组:穿线稳定后30 min阻断LAD,缺血30 min,再灌注2 h; SP组:穿线稳定后30 min阻断LAD,缺血30 min,再灌注2 h,同时在穿线稳定后60 min吸入2.4%七氟醚15 min。于再灌注后2 h,采用ELISA法检测血清LDH浓度,Western Blot法检测心肌受体相互作用蛋白1(RIPK1)、p-RIPK1、受体相互作用蛋白3(RIPK3)、p-RIPK3、混合系激酶结构域样蛋白(MLKL)、p-MLKL含量,荧光显微镜观察程序性坏死心肌细胞的荧光强度,1%氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测心肌梗死面积百分比,HE染色后光镜下观察心肌病理学形态。结果与S组比较,IR组和SP组血清LDH浓度明显升高(P0.05),心肌RIPK1、p-RIPK1、RIPK3、p-RIPK3、MLKL、p-MLKL含量明显增加(P0.05),程序性坏死心肌细胞荧光强度明显增强(P0.05),心肌梗死面积百分比明显升高(P0.05),心肌细胞排列更为紊乱。与IR组比较,SP组血清LDH浓度明显降低(P0.05),心肌RIPK3、p-RIPK3、MLKL和p-MLKL含量明显减少(P0.05),程序性坏死心肌细胞荧光强度明显减弱(P0.05),心肌梗死面积百分比明显降低(P0.05),心肌细胞排列更为整齐。S组和Sev组间各指标差异无统计学意义。结论七氟醚后处理可通过升高血清LDH浓度、降低心肌梗死面积百分比、改善心肌病理学改变减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤,其机制可能与抑制缺血-再灌注损伤后心肌细胞程序性坏死相关。     

孕晚期七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能和海马神经元树突棘发育的影响

目的 探讨孕晚期不同浓度七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能及树突棘发育的影响.方法 取SD孕鼠16只,用随机数字表法将其分为4组(每组4只):对照组(C组)、1.5％七氟醚麻醉组(S1组)、2.8％七氟醚麻醉组(S2组)和3.3％七氟醚麻醉组(S3组).七氟醚麻醉组母鼠于孕18～20 d进行每天1次的七氟醚麻醉,S1组、S2组和S3组孕鼠分别使用1.5％、2.8％和3.3％的七氟醚吸入4h并保持0.5、1.0、1.5 MAC;C组仅置于麻醉箱内,通入相同流量氧气暴露4h.于出生后21 d对各组子代大鼠水迷宫测定其认知功能,出生后28 d完成水迷宫测试后处死子代大鼠,采用高尔基染色法进行海马树突棘密度测定,采用RT-PCR法测定caspase-3 mRNA表达.结果 各组子代大鼠游泳路程、逃避潜伏期、穿越平台次数及平台所在象限停留时间比较差异无统计学意义(P＞0.05).与C组[(12±3)/10 μm]比较,S3组大鼠海马神经细胞树突棘密度降低[(9±3)/10μm](P＜0.05).各组子代大鼠海马内caspase-3 mRNA表达变化差异无统计意义(P＞0.05).结论 1.5 MAC七氟醚麻醉4h可降低子代大鼠海马内神经细胞树突棘密度,但未对子代大鼠认知功能及caspase-3 mRNA表达产生影响.     

氯离子转运蛋白NKCC1在老年小鼠术后认知功能障碍中的作用

目的 探讨氯离子转运蛋白钠离子钾离子氯共转运体1(NKCCl)在老年小鼠术后认知功能障碍(POCD)中的作用。方法 选择老年雄性C57BL/6小鼠40只,18～20月龄,体重28～32 g。将小鼠随机分为四组：对照+生理盐水组(N组),对照+布美他尼(NKCC1抑制剂)组(B组),POCD模型+生理盐水组(M组)和POCD模型+布美他尼组(MB组),每组10只。采用异氟醚麻醉和剖腹探查术建立POCD动物模型,于术后3～7 d行旷场与条件恐惧实验评估认知功能;行为学结束后采用Western blot法检测海马组织NKCC1、钾离子氯离子共转运体2(KCC2)、脑源性神经营养因子(BDNF)及突触后密度蛋白95(PSD95)的蛋白含量,免疫组织荧光检测海马组织CA1、CA3、DG区NKCC1免疫荧光强度。结果 与N组比较,M组场景僵直时间明显缩短(P<0.05),海马NKCC1蛋白含量明显升高(P<0.05),BDNF、PSD95蛋白含量明显降低(P<0.05),海马组织CA1、CA3、DG区NKCC1免疫荧光强度明显增强(P<0.05)。N组和B组各指标差异均无统...     

七氟醚对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、凋亡及化疗敏感性的影响

目的探讨七氟醚对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、凋亡及化疗敏感性的影响。方法选取骨肉瘤MG63细胞,随机分为四组:对照组、1.7%七氟醚组、3.4%七氟醚组和5.1%七氟醚组,分别为不给予七氟醚、给予1.7%、3.4%和5.1%七氟醚处理。采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell细胞侵袭实验检测细胞迁移;给予各组顺铂处理,检测各组细胞凋亡情况。结果培养24、36和72 h的1.7%七氟醚组、3.4%七氟醚组和5.1%七氟醚OD值明显低于对照组(P0.05),培养24、36和72 h的5.1%七氟醚组OD值明显低于1.7%七氟醚组、3.4%七氟醚组(P0.05)。四组细胞凋亡率、细胞迁移数差异无统计学意义。顺铂作用后,1.7%七氟醚组、3.4%七氟醚组和5.1%七氟醚组细胞凋亡率明显低于对照组(P0.05),5.1%七氟醚组细胞凋亡率明显低于1.7%七氟醚组和3.4%七氟醚组(P0.05)。结论七氟醚可抑制骨肉瘤MG63细胞增殖,对细胞迁移、凋亡无明显影响;七氟醚可降低骨肉瘤MG63细胞对顺铂的敏感性。     

丹酚酸A复合右美托咪定对脑缺血-再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡的影响

目的探讨丹酚酸A复合右美托咪定对脑缺血-再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡及Sirt1-p53通路的影响。方法选择SD大鼠90只,体重160~230 g,随机分为五组:假手术组(S组)、缺血-再灌注组(IR组)、丹酚酸A干预组(A组)、右美托咪定干预组(D组)、丹酚酸A复合右美托咪定干预组(AD组),每组18只。采用线栓法建立大脑中动脉缺血-再灌注损伤模型。脑缺血-再灌注24 h后,检测大鼠血流动力学情况,Morris水迷宫实验观察第1、2、3、4、5天逃避潜伏期、穿越平台次数,评估神经功能缺损评分。采用TUNEL法检测海马神经细胞凋亡,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,硫化巴比妥酸法测定MDA含量,免疫组织化学法检测海马组织Bcl-2和Bax蛋白含量,Western blot法检测海马组织Sirt1和乙酰化p53蛋白含量。结果与S组比较,IR组、A组、D组和AD组第1、2、3、4、5天逃避潜伏期明显延长(P<0.05),穿越平台次数明显减少(P<0.05),HR明显减慢(P<0.05),MAP、CO明显降低(P<0.05),神经功能缺损评分明显升高(P<0.05),海马组织凋亡细胞百分比、MDA含量、Bax和乙酰化p53蛋白含量明显升高(P<0.05),海马组织SOD活力、Bcl-2和Sirt1蛋白含量明显降低(P<0.05)。与IR组比较,A组、D组和AD组第1、2、3、4、5天逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),穿越平台次数明显增多(P<0.05),HR明显增快(P<0.05),MAP、CO明显升高(P<0.05),神经功能缺损评分明显降低(P<0.05),海马组织凋亡细胞百分比、MDA含量、Bax和乙酰化p53蛋白含量明显降低(P<0.05),海马组织SOD活力、Bcl-2和Sirt1蛋白含量明显升高(P<0.05)。与A组、D组比较,AD组第1、2、3、4、5天逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),穿越平台次数明显增多(P<0.05),HR明显增快(P<0.05),MAP、CO明显升高(P<0.05),神经功能缺损评分明显降低(P<0.05),海马组织细胞凋亡百分比、MDA含量、Bax和乙酰化p53蛋白含量明显降低(P<0.05),海马组织SOD活力、Bcl-2和Sirt1蛋白含量明显升高(P<0.05)。结论丹酚酸A复合右美托咪定可显著降低脑缺血-再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡,其作用可能与Sirt1-p53通路有关。