高效液相色谱法测定复方丹参滴丸中丹参素和原儿茶醛的含量

目的：建立同时测定复方丹参滴丸中丹参素和原儿茶醛含量高效液相色谱法。方法：选用C18柱，流动相为甲醇－水－冰醋酸（19：80：1），检测波长为279nm。结果：丹参素和原儿茶醛分别在10－80mg/L和2－16mg/L范围内线性关系良好，丹参素和原儿茶醛的平均回收率分别为99．5％和99．7％，RSD分别为1．6％和1．3％。结论：方法简便,灵敏，准确，样品处理简便易行，可作为复方丹参滴丸的质量控制方法。     

复方丹参片质量评价方法的探讨

目的:对复方丹参片不同生产厂家质量分析与评价。方法:采用实验室高效液相色谱进行复方丹参片质量评价,主要采用采用日本生产的LG-5A高效液相色谱进行丹参片质量评价,主要包括LC-10AT泵、SPD-10A检测仪和DGC-12A脱气仪器,同时采用分析天平、医用超声清洗设备和离心机。主要试剂采用原儿茶醛和丹参素,主要试剂采用原儿茶醛和丹参素标准试剂,辅助试剂主要为甲醇、乙腈等,均为分析级纯度。搜集10批复方丹参片药物进行研究,建立原儿茶醛和丹参素标准曲线和绘制回归方程进行分析。结果:对10批复方丹参片中丹参素和原儿茶醛含量进行分析研究显示,其中丹参素最大含量为0.412mg/片,最小含量为0.139mg/片;原儿茶醛最大含量为0.844mg/片,最小含量为0.246mg/片,丹参素及原儿茶醛含量均分布差异性较大。结论:采用高效液相色谱进行复方丹参片质量评价准确可靠且可重复性好,但复方丹参片中丹参素和原儿茶醛含量差异性较大。     

高效液相色谱法测定不同煎煮条件下丹参和冠心Ⅱ号中丹参素、原儿茶醛的含量

目的测定不同煎煮条件下丹参和冠心Ⅱ号中丹参素、原儿茶醛的含量。方法采用反相高效液相色谱法。KromasilC18柱(250mm×46mm,5μm);流动相:乙腈-0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(9∶91),磷酸调至pH2.8;检测波长:280nm;流速:1.0mL/min。结果丹参素在0.245～5.880μg(r=0.9998)、原儿茶醛在0.011～0.504μg(r=0.9996)范围内呈线性,丹参素和原儿茶醛最低检测浓度分别为9.8ng/mL和2.1ng/mL,回收率分别为97.81%(RSD=1.13%)和94.72%(RSD=1.18%)。结论该方法可用于丹参及冠心Ⅱ号制剂的质量控制。     

丹参-川芎有效成分配伍对氧糖剥夺海马神经元细胞保护作用研究

观察丹参-川芎有效成分(丹参素、原儿茶醛、川芎嗪、阿魏酸)配伍对体外原代培养的海马神经元细胞缺糖缺氧(氧糖剥夺)损伤的保护作用,并优选较佳组合。方法原代培养乳鼠海马神经元细胞,免疫组化法进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)鉴定,并建立海马神经元细胞氧糖剥夺模型。MTT法确定丹参素、原儿茶醛、川芎嗪、阿魏酸及尼莫地平的非细胞毒性剂量范围,以L9(34)正交表设计安排成分配伍给药。将培养的细胞随机分为12组:对照组、模型组、尼莫地平阳性对照组及正交配伍1～9组。采用比色法、WST-1法、硫代巴比妥酸(TBA)法分别检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平,酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6水平变化,Hoechst33258荧光染色法观察海马神经元细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞早期凋亡率。采用极差分析法分析正交试验结果。结果药物正交配伍组合均可显著改善缺氧海马神经元细胞的形态,显著减弱LDH活力,增强SOD的活性以及降低MDA的水平,显著抑制细胞TNF-α的释放,降低IL-1β和IL-6的水平,明显减少了细胞的凋亡。丹参-川芎有效成分对LDH活力的影响大小依次为丹参素川芎嗪原儿茶醛阿魏酸,最佳配伍组合为丹参素(120μg/m L)、原儿茶醛(120μg/m L)、川芎嗪(80μg/m L)、阿魏酸(20μg/m L)。对SOD活性的影响主次因素依次为阿魏酸川芎嗪丹参素原儿茶醛,最佳配伍组合为丹参素(120μg/m L)、原儿茶醛(120μg/m L)、川芎嗪(80μg/m L)、阿魏酸(40μg/m L)。对MDA水平的影响主次因素依次为丹参素原儿茶醛阿魏酸川芎嗪,最佳配伍组合为丹参素(60μg/m L)、原儿茶醛(60μg/mL)、川芎嗪(80μg/m L)、阿魏酸(20μg/m L)。对TNF-α水平影响的主次因素依次为川芎嗪原儿茶醛丹参素阿魏酸,最佳配伍组合为丹参素(60μg/m L)、原儿茶醛(60μg/m L)、川芎嗪(40μg/m L)、阿魏酸(10μg/m L)。影响IL-1β水平的主次因素依次为川芎嗪阿魏酸丹参素原儿茶醛,最佳配伍组合为丹参素(30μg/m L)、原儿茶醛(30μg/m L)、川芎嗪(80μg/m L)、阿魏酸(20μg/m L)。影响IL-6水平的主次因素依次为原儿茶醛川芎嗪阿魏酸丹参素,最佳配伍组合为丹参素(120μg/m L)、原儿茶醛(120μg/m L)、川芎嗪(80μg/m L)、阿魏酸(10μg/m L)。影响细胞早期凋亡率主次因素为阿魏酸原儿茶醛川芎嗪丹参素,最佳配伍组合为丹参素(60μg/m L)、原儿茶醛(30μg/m L)、川芎嗪(20μg/m L)、阿魏酸(40μg/m L)。结论丹参-川芎有效成分配伍对氧糖剥夺海马神经元细胞的保护作用机制可能与减轻氧化应激损伤、减轻炎症损伤和抑制细胞凋亡有关,可参考实验结果为临床不同病程需要更改组方配比,指导临床用药。     

RP-HPLC法测定双丹滴丸中丹参素和原儿茶醛的含量

目的测定双丹滴丸中丹参素和原儿茶醛的含量。方法采用高效液相色谱法测定双丹滴丸中丹参素和原儿茶醛的含量。采用Hypersil ODS色谱柱,以甲醇-乙睛-0.5%醋酸溶液(8∶2∶90)为流动相,流速1 mL/min,检测波长280 nm。结果丹参素和原儿茶醛的平均回收率分别为100.2%和99.68%,RSD分别为1.1%和1.2%。结论该方法简便,灵敏,准确,可作为双丹滴丸的质量控制方法。     

活血胶囊中丹参素和原儿茶醛的含量测定

目的制定活血胶囊中丹参素和原儿茶醛的含量测定方法。方法采用HPLC法,以丹参素和原儿茶醛为对照品,检测波长为280nm,甲醇-0.5%醋酸水溶液(22∶78)为流动相。结果丹参素在0.421～3.364μg范围、原儿茶醛在0.212～1.699μg范围有良好的线性关系,样品平均加样回收率丹参素和原儿茶醛分别为100.05%和99.39%,RSD分别为3.07%和1.62%。结论本法结果准确,精密度及重现性较好,可作为该制剂的质量控制方法。     

TLC-UV法对丹参注射液中原儿茶醛的含量测定

目的:用薄层层析-紫外分光光度(TLC-UV)法测定丹参注射液中原儿茶醛的含量。方法:以原儿茶醛作为对照品,二氯甲烷-乙酸甲酯-甲酸(8.5-5-0.9)为展开剂,分离得到原儿茶醛,采取紫外分光光度法,检测波长279 nm,测定原儿茶醛的含量。结果:原儿茶醛在0.49~4.61μg/m L的范围内线性关系良好,r=0.999 7。平均含量为0.201 mg/m L,加样回收率为98.0%_104.0%。结论:薄层层析-紫外分光光度法(TLC-UV)测定丹参注射液中原儿茶醛的含量,方法精密度好,准确度高、操作简便,可用于控制丹参注射液的质量。     

复方丹参片质量评价方法的研究

目的:建立不同厂家复方丹参片的质量评价方法。方法:采用高效液相色谱法测定复方丹参片中丹参素和原儿茶醛的含量,色谱柱:Hypersil ODS柱(150mm×6.0mm);流动相:甲醇-乙腈-水-冰醋酸(3:5:91:1);流速:1.0ml·min~(-1);检测波长:280nm;柱温:35℃。结果:2个活性成分丹参素和原儿茶醛分别在(7.5×10~(-3)～1.5×10~(-1))mg·ml~(-1)和(2.5×10~(-3)～5.0×10~(-2))mg·ml~(-1)内线性关系良好,r=0.9999。结论:本法简便可行,结果准确,重现性好,可用于复方丹参片的质量控制。     

贵州松桃产丹参水溶性成分指纹图谱及多指标成分同时定量研究

目的:建立贵州松桃县产丹参水溶性成分指纹图谱,并对其6种水溶性成分同时进行含量测定。方法:采用Phenomenex Luna C18(2)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以0.4%甲酸(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 m L/min;柱温为30℃。结果:从10批丹参指纹图谱中标定出11个共有峰,10批样品相似度均≥0.999;丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B浓度分别在0.0680~1.3583 mg/m L、0.0008~0.3967 mg/m L、0.0005~0.2660 mg/m L、0.0020~0.3992 mg/m L、0.0063~0.6311 mg/m L、0.0097~1.9306 mg/m L范围内线性关系良好,r均≥0.9999,平均加样回收率分别为100.84%、102.44%、100.53%、100.63%、100.83%、100.35%,RSD均2.3%。结论:所建立的方法简单、结果准确,可为丹参的质量评价提供参考依据。     

丹红注射液中主要有效成分在脑缺血大鼠体内药动学研究

目的建立同时测定给予丹红注射液主要组分后脑缺血再灌注损伤大鼠血浆中丹参素、原儿茶酸、香草酸、丹酚酸B和羟基红花黄色素A(HYSA)质量浓度的HPLC-DAD方法,为其药动学研究提供准确可靠的方法。方法制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,iv丹红注射液主要有效成分丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B和HYSA后,收集血样,采用Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.4%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长280 nm用于检测丹参素、原儿茶酸、香草酸和丹酚酸B,403 nm用于检测HYSA,柱温为30℃,内标法定量。结果原儿茶醛在MCAO大鼠体内迅速被代谢,3 min即可检测到其代谢产物原儿茶酸和香草酸。丹参素、原儿茶酸、香草酸、丹酚酸B和HYSA的进样浓度分别在0.35~140 mg/L(R2=0.999 8)、0.15~60 mg/L(R2=0.999 0)、0.05~20 mg/L(R2=0.998 8)、0.25~100 mg/L(R2=0.999 6)、0.075~30 mg/L(R2=0.998 5)呈良好线性关系,平均回收率均在80%~120%,日内、日间RSD均小于10%,稳定性符合体内药物分析要求。大鼠iv给予丹红注射液主要有效成分后丹参素、原儿茶酸、香草酸、丹酚酸B和HYSA的主要药动学参数:AUC0~∞分别为(1143.862±230.840)、(427.024±59.293)、(135.785±47.631)、(418.631±66.242)、(288.788±87.809)mg·min/L,t1/2z分别为(71.496±29.067)、(82.379±26.279)、(40.331±6.006)、(125.164±59.709)、(177.577±112.836)min。结论所建立的HPLC-DAD分析方法专属性强,各成分分离度好,分析时长适宜,操作简单快速,可用于MCAO大鼠体内丹参素、原儿茶酸、香草酸、丹酚酸B、HYSA的同时测定及复方丹红注射液的药动学研究。     

高效液相色谱法同时测定赤丹丸中6种有效成分的含量

 目的建立高效液相色谱法测定赤丹丸中丹参素钠、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、汉黄芩苷和丹参酮ⅡA含量的方法。方法Agilent Zorbax Extend-C₁₈(4.6mm×250mm,5μm)柱;流动相组成为A:甲醇,B:水(磷酸调pH3.0),C:乙腈,进行梯度洗脱;流速1.0mL·min^-1;检测波长280nm。结果丹参素钠线性范围16.4～327.0mg·L^-1,平均回收率为97.5%,RSD为1.31%;黄芩苷线性范围15.8～316.0mg·L^-1,平均回收率为97.4%,RSD为1.02%;黄芩素线性范围10.3～206.0mg·L^-1,平均回收率为99.3%,RSD为0.68%;汉黄芩素线性范围12.6～251.0mg·L^-1,平均回收率为100.2%,RSD为1.76%;汉黄芩苷线性范围11.3～225.0mg·L^-1,平均回收率为99.4%,RSD为2.6%;丹参酮ⅡA线性范围5.04～100.7mg·L^-1,平均回收率为97.8%,RSD为1.4%;结论本方法测定结果准确可靠,可用于测定赤丹丸中6成分的含量。     

复方甘肃丹参滴丸提取工艺研究

目的：研究复方甘肃丹参滴丸的最佳提取工艺。方法：采用L9（34）正交设计,以丹酚酸B和迷迭香酸的含量为考察指标,优化提取工艺。结果：最佳提取条件为加10倍量的70%乙醇,回流提取3次,1h/次。结论：该提取条件为确定复方甘肃丹参滴丸的提取工艺提供了科学依据。     

毛细管电泳-场强放大堆积技术测定白花丹参中的水溶性有效成分

目的:利用高效毛细管电泳-场强放大柱内堆积技术分离测定白花丹参中的水溶性有效成分原儿茶醛,原儿茶酸,丹参素,迷迭香酸和丹酚酸B.方法:采用未涂层熔融石英毛细管柱(75 μm×50.2 cm,40 cm),以含15%甲醇的20 mmol·L-1硼砂(pH 10.0)为运行缓冲液,分离电压28 kV,柱温25℃,检测波长210 nm.进样前压力进水3.4 kPa;电动进样-8kV×3 s.结果:原儿茶醛的线性范围是3.0～60.0 mg·L-1(R2=0.9996);原儿茶酸,丹参素,迷迭香酸,丹酚酸B的线性范围均为1.0～20.0 mg·L-1(R2=0.9991,0.9994,0.9989,0.9998),检测限分别为0.55,0.40,0.25,0.32,0.38μg·L-1,富集倍数高,灵敏度高;将此方法应用于实际样品测定,回收率为97.31%～99.81%.结论:该方法简单、快速、准确、灵敏度高,可用于白花丹参的质量控制.     

正交设计优选益心通脉合剂提取工艺

目的：优选益心通脉合剂的水提工艺。方法：以丹参素钠、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量和干膏收率的综合评分为 指标,通过L₉（3⁴）正交试验考察加水量、煎煮时间和煎煮次数对益心通脉合剂水提工艺的影响。采用HPLC测定丹参素钠、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量,检测波长分别为280,260 nm。结果：各因素对水提取工艺的影响顺序为提取次数 >加水量 >煎煮时间,最佳水提工艺为加15倍量水煎煮3次,每次0.5 h;丹参素钠和毛蕊异黄酮葡萄糖苷平均提取量分别为4.928,0.399 5 mg·g^-1。结论：优选的提取工艺稳定可行,适用于益心通脉合剂的规范化生产。     

复方天宁滴丸稳定性考察

目的:考察复方天宁滴丸中阿魏酸的热降解动力学过程.方法:以阿魏酸含量为指标,采用经典恒温加速法和留样观察法考察复方天宁滴丸的有效期,通过HPLC测定阿魏酸含量.结果:阿魏酸的含量变化符合一级动力学过程,预测有效期20.8个月.结论:经典恒温加速法和留样观察法的结果基本一致,经典恒温加速法可快速确定有效期,缩短新药开发周期.     

利用聚多巴胺制备丹参注射液缓释制剂的研究

目的:利用聚多巴胺(PDA)对丹参注射液中多成分进行负载,构建丹参注射液(SMI)缓释制剂(PDA-SMI)。方法:建立丹参注射液的原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B3种成分的分析方法并进行含量测定;制备PDA,在pH值2.5的条件下对SMI进行负载,制备PDA-SMI;对PDA-SMI体外释放行为进行考察。结果:SMI中原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B的浓度分别为0.344、0.214、0.262 mg/mL;PDA-SMI对原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B的载药量分别为8.59%,15.90%和20.57%;PDA-SMI中原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B体外累计释放率分别为84.05%,77.57%和63.12%。结论:PDA可以负载SMI的多种成分,载药量较高,并具有良好的缓释效应。     

穿心莲内酯对牙龈卟啉单胞菌抑制作用的临床观察(英文)

Object:To study the depressant effect of andrographolide dripping pills on Porphyromonas gingivalis.Method:30 healthy and 90 gingivopericementitis sufferers administrated by dummy,andrographolide dripping pills and andrographolide pellet,respectively were divided into four groups:normal group,control group,andrographolide dripping pills group and gandrographolide pellet group.Results:Andrographolide dripping pills and andrographolide pellet could decrease total dacterial count and Porphyromonas gingivalis c...     

金荞麦饮片液相色谱含量测定及指纹图谱研究

目的：研究金荞麦饮片高效液相色谱指纹图谱及含量测定方法。方法：采用高效液相色谱-电化学检测法,Diamonsil C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱；流动相为甲醇-0.1 mol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH 2.5)；流速1.0 mL·min^-1；柱温35 ℃；参比电极为ISAAC(in-situ Ag/AgCl)；工作电极为玻碳电极；辅助电极为铂电极。结果：建立了金荞麦饮片高效液相色谱图谱,发现了6个色谱峰为共有峰,其中4个分别为没食子酸,原儿茶酸,原儿茶醛和表儿茶素的色谱峰。原儿茶酸的质量分数为0.004%～0.05%,原儿茶醛的质量分数为0.003%～0.015%。结论：该方法可用于金荞麦饮片质量控制。     

丹参不定根离体培养的研究

目的：对丹参不定根的离体培养进行系统研究。方法：考察了蔗糖质量浓度、培养基pH、接种、植物生长物质等影响因子对丹参不定根的生长及其次生代谢产物含量的影响。结果：随着蔗糖质量浓度的增加，丹参不定根增殖倍数呈增长趋势，丹参酮的含量呈递减趋势变化，原儿茶醛含量呈折线变化，其中以添加30 g·L^-1 的蔗糖最高；培养基pH为6.5, 5.5 (或6.0), 5.8时分别最有利于丹参不定根的生长、丹参酮ⅡA的合成和原儿茶醛的合成。当接种量为2.5%时，丹参不定根的增殖倍数显著增加；MS培养基中附加0.5 mg·L^-1 KT最有利于丹参酮ⅡA和原儿茶醛合成。结论：蔗糖质量浓度、培养基pH、接种量、植物生长物质显著影响丹参不定根的生长和次生代谢产物的合成。