HPLC-ELSD法测定银杏滴丸中银杏内酯A、B、C和白果内酯

目的采用高效液相-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定银杏滴丸中银杏内酯A、B、C及白果内酯。方法样品以甲醇溶解,蒸干后水溶,醋酸乙酯提取处理。采用HPLC-ELSD法测定,ALLtech C18色谱柱(250 mm×4.5 mm,5μm);流动相:甲醇-四氢呋喃-水(35∶10∶65);体积流量:0.8 mL/min;气速:2.85 L/min;漂移管温度:105℃;柱温:30℃。结果银杏内酯A、B、C及白果内酯的平均加样回收率分别为98.5%、103.5%、99.7%、101.6%,RSD分别为2.5%、1.9%、2.8%、2.0%。结论建立的滴丸制剂中银杏内酯A、B、C及白果内酯的定量方法可行性好、简便、可靠。     

银杏内酯A、B和白果内酯的分离与纯化

以银杏叶浸膏ＥＧｂ７６１为原料,通过预处理,制备色谱和重结晶过程,得到纯度达９８％以上的银杏内酯Ａ、Ｂ和白果内酯纯品。建立了一种较简单的分离和纯化银杏内酯Ａ、Ｂ和白果内酯的方法。     

HPLC同时测定脉平片中白果内酯、银杏内酯A和银杏内酯B、银杏内酯C的含量

目的:建立脉平片中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的含量测定方法。方法:采用HPLC对制剂中银杏叶提取物的主要成分白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C进行定量分析。CAPCELL PAK C18色谱柱(4.6mm×250mm 5μm);流动相四氢呋喃-乙腈-水(12∶10∶78),蒸发光散射检测器,柱温30℃,流速1.0mL·min-1。结果:银杏内酯C在1.11~6.66μg,白果内酯在2.232~13.392μg,银杏内酯A在1.912~11.472μg,银杏内酯B在1.502~9.004μg均呈良好的线性关系,平均回收率分别为96.36%,97.18%,97.71%,96.57%;RSD分别为1.0%,1.4%,2.1%,1.4%。结论:方法准确可靠,专属性强,结果稳定,重复性好,可有效控制制剂质量。     

DA201型大孔吸附树脂分离银杏叶提取物中银杏内酯A、B、C和白果内酯的研究

银杏萜内酯主要包括银杏内酯A、B、C和白果内酯。银杏内酯B是一种很有应用前景的特异性血小板激活因子(PAF)受体拮抗剂，其专一性高，而银杏内酯A也是一种重要的昆虫拒食素，白果内酯对老年痴呆症和神经系统疾病具有一定疗效。目前，银杏萜内酯对心脑血管及外周血管疾病的有效疗效已使他成为药品及保健食品的原料。但目前银杏叶     

高效液相色谱法测定银杏叶胶囊中银杏内酯的含量

目的:应用HPLC-ELSD法测定银杏叶胶囊中银杏内酯A、B、C及白果内酯的含量.方法:采用C18色谱柱(Kromasil,4.6×250mm,5 μm),以甲醇-水为流动相梯度洗脱,ELSD雾化温度为50℃,载气N2流速为1.2L/Min.结果:测得银杏内酯A、B、C及白果内酯分别在2.18 μg-16.35 μg、2.10 μg-15.60v-g、0.59 μg-8.85 μg、0.73 μg-9.90 μg线性关系良好;银杏内酯A、B、C及白果内酯的平均回收率分别为97.28%、97.68%、98.34%、99.52%.结论:该方法简单、准确可靠.分离效果好;本方法可用于银杏叶胶囊的质量评价.     

高效液相色谱法测定银杏叶胶囊中银杏内酯的含量

目的：应用HPLC-ELSD法测定银杏叶胶囊中银杏内酯A、B、C及白果内酯的含量。方法：采用C18色谱柱（Kromasil,4.6×250mm,5μm）,以甲醇-水为流动相梯度洗脱,ELSD雾化温度为50℃,载气N2流速为1.2L/Min。结果：测得银杏内酯A、B、C及白果内酯分别在2.18μg-16.35μg、2.10μg-15.60μg、0.59μg-8.85μg、0.73μg-9.90μg线性关系良好;银杏内酯A、B、C及白果内酯的平均回收率分别为97.28%、97.68%、98.34%、99.52%。结论：该方法简单、准确可靠,分离效果好;本方法可用于银杏叶胶囊的质量评价。     

银杏叶提取物中白果内酯的分离纯化

目的 分离纯化白果内酯,提高银杏叶提取物的综合利用率。方法 由银杏叶提取物制得白果内酯初提物,再经硅胶柱色谱以及重结晶的方法进行分离、纯化。结果 得到质量分数达98%以上的白果内酯单体。在最佳工艺条件下,白果内酯的得率为80.32%。结论 该方法得率高,分离效果好,可应用于批量制备白果内酯单体。     

129 H1-NMR定量分析银杏叶和银杏制剂中的白果内酯和银杏苦内酯

以丙酮-d6-苯-d6(50∶50)为溶剂和间苯三酚为内标,用H1-NMR对银杏叶和银杏制剂中的白果内酯(BB)和银杏苦内酯(GA、GB、GC)进行定量分析。 材料与方法:①仪器与条件:Bruker DMX 600光谱仪;64 scans扫描参数:0.167Hz/point、PW 4.0ms、RD 1.0s;傅利叶转换FIDs:LB=0.2Hz,GB=0和PC=1.0。②样品制备:500g样品以70% 甲醇100mL超声30min提取3次。合并提取液蒸干得粗提物,将其在环己烷和水中分配。水层再以甲基乙基酮提取3次。甲基乙基酮层以无水硫酸钠脱水,再蒸干,以1mL丙酮-d6-苯-d6定容。 结果与结论:64 scans下,银杏化合物检测限…     

HPLC-ELSD法测定注射用银杏二萜内酯中银杏内酯A、B、C、K

目的建立测定注射用银杏二萜内酯中银杏内酯A、B、C、K的HPLC-ELSD法。方法采用HPLC-ELSD法,Phenomenex Luna C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为四氢呋喃–甲醇–水,梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min;柱温为30℃;漂移管温度为105℃,氮气体积流量为3.0 L/min。结果注射用银杏二萜内酯中银杏内酯A、B、C、K分别在1.70-8.50μg（r=0.999 7）、2.45-12.5μg（r=0.999 8）、0.30-1.50μg（r=0.999 7）、0.25-1.25μg（r=0.999 7）呈良好的线性关系;平均回收率分别为101.03%、100.86%、100.78%、101.02%,RSD值分别为0.87%、0.29%、1.30%、1.34%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于注射用银杏二萜内酯中银杏内酯A、B、C、K的测定。     

Pharmacokinetics of bilobalide,ginkgolide A and B after administration of three different Ginkgo biloba L. preparations in humans

A sensitive LC‐ESI‐MS method with a solid‐phase extraction was established for the determination of bilobalide, ginkgolide A and ginkgolide B in human plasma; bioavailability and pharmacokinetics of three different Ginkgo biloba L. preparations have been investigated. The preparations used in the present single‐dose pharmacokinetic study were different formulations of Ginkgo biloba L. extracts (Geriaforce? tincture, new Ginkgo fresh plant extract tablets and EGb 761?) with various excipients. The analysis of Ginkgo terpene lactones was performed by LC‐MS on a Zorbax^® SB‐C18 column. The mobile phase consisted of water + 0.1% acetic acid and methanol 68/32 (v/v) to 49/51 (v/v) at a flow rate of 200 μL/min. Bilobalide, ginkgolide A and ginkgolide B were monitored using the selected‐ion monitoring (SIM) mode at m/z of 325, 453 and 423, respectively. The amounts of the active compounds (terpene lactones) in the administered products were in the low‐mg range per dose. The assay method was successfully applied to the study of the pharmacokinetics and bioavailability of bilobalide, gingkolide A and ginkgolide B in humans. The resulting maximum concentrations (median) of bilobalide, ginkgolide A and ginkgolide B in plasma after administration of the maximum daily dose of the different Ginkgo products were 3.53, 3.62, and 1.38 ng/mL respectively after administration of Geriaforce? tincture; 11.68, 7.36, and 4.18 ng/mL, respectively after taking Ginkgo fresh plant extract tablets; and 26.85, 16.44, 9.99 ng/mL, respectively after administration of EGb 761? tablets. These data are relevant to demonstrate relative bioavailabilities of different Ginkgo biloba L. preparations (Geriaforce? tincture, new Ginkgo fresh plant extract tablets and EGb 761?). Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

HPLC测定银杏愈伤组织内酯A的研究

建立了一种可用于银杏离体细胞培养物中内酯Ａ含量分析的ＲＰ－ＨＰＬＣ方法。样品经低浓度甲醇提取后,用中性或酸性氧化铝固相萃取柱纯化,用示差检测器检测,银杏内酯Ａ的最低检测限为 ０,０１２ μｇ,方法回收率为（９６．０±２）％,ＲＳＤ为 ３．１％。     

银杏叶中银杏萜内酯的GC-MS定性定量分析

目的：建立银杏叶中银杏内酯A，B，C和白果内酯的定性定量分析方法。方法：银杏叶以20％乙醇超声提取，乙酸乙酯萃取，再经酸性氧化铝－活性炭－硅藻土混合柱层析，在100℃以双－三甲基硅烷三氟乙酰胺硅烷化60min后，用HP－5 MS毛细管色谱柱，柱温从180℃程序升温至300℃。采用选择离子监测（SIM）方式，以峰值最高的碎片离子作为监视离子进行定量分析。结果：银杏内酯A，B，C和白果内酯的保留时间分别为13．7，14．3，15．3和6．8min，特征（监视）离子（m/z)分别为537，625，713及455（299）；平均回收率分别为102．0％，99．4％，96．0％和96．3％，RSD分别为0．54％，2．40％，1．98％和2．43％。结论：本方法操作简便、重现性好、专属性强、准确可靠，可作为银杏萜内酯的定性定量分析方法。     

高速逆流色谱分离制备广陈皮中多甲氧基黄酮类成分的研究

目的采用高速逆流色谱技术(HSCCC)从广陈皮中制备分离高纯度多甲氧基黄酮类成分。方法应用制备型高速逆流色谱仪,通过优化各分离条件,以四元两相溶剂系统石油醚-醋酸乙酯-甲醇-水(1∶0.8∶0.7∶0.8),上相为固定相,下相为流动相,制备分离广陈皮醋酸乙酯萃取部分粗提物。结果300 mg粗提物经过260 min一次制备分离,得到了3个多甲氧基黄酮类化合物,经EI-MS及1H-NMR分析,鉴定为川陈皮素、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮及橘皮素,其质量分数分别为96.25%、97.10%、99.22%。结论该方法简便、经济,所得化合物既可作为广陈皮质量控制的参考物质,又可为柑橘属植物分类学研究提供一定的依据。     

HPLC法测定银杏叶粉针中总黄酮醇苷和萜类内酯

目的采用高效液相色谱法测定银杏叶粉针中总黄酮醇苷和总萜类内酯。方法黄酮醇苷水解后,采用HPLC-UV法测定;萜类内酯用醋酸乙酯萃取后采用HPLC-ELSD法测定。结果槲皮素、山柰素、异鼠李素分别在5.104～51.04、5.000～50.00、1.38～13.8μg/mL呈良好线性关系,平均回收率分别为99.34%、99.25%、101.2%(n=5);银杏内酯A、B、C及白果内酯分别在0.415～2.075、0.402～2.010、0.426～2.130、0.803～4.015mg/mL呈良好线性关系,平均回收率分别为99.28%、100.1%、101.0%、99.31%(n=5)。结论本实验采用的方法简便快速,结果准确,重现性好,可用于银杏叶粉针中黄酮和内酯类成分的质量控制。     

银杏叶总黄酮纯化工艺研究

目的对银杏叶总黄酮的纯化工艺进行优化研究。方法通过DM-130树脂和D-101树脂(比例为1∶1)进行混合,色谱纯化银杏叶总黄酮,用500 mL混合树脂装柱,上样质量浓度为10 mg/mL,洗脱体积流量为2.0 BV/h,pH值6.0,600 mL 75%乙醇一步洗脱,真空浓缩至干。结果通过上述工艺分离纯化银杏叶总黄酮,可得质量分数大于24%的精制银杏叶总黄酮。结论 DM-130树脂与D-101树脂按1∶1比例组成的混合树脂对银杏叶总黄酮的纯化效果较二者单独使用好,可用于银杏叶总黄酮的纯化。     

银杏叶和山楂叶的抗氧化作用

 目的：研究银杏叶、山楂叶提取物的抗氧化作用。方法：采用荧光法测定过氧化作用的产物丙二醛含量；分光光度法测定银杏叶、山楂叶提取物对氧自由基(H₂O₂，O₂)的抑制作用。结果：银杏叶(G)、山楂叶(H)的提取物能抑制小鼠肝匀浆在37℃温育下生成的丙二醛，抑制率G为68.5%，H为76.9%。抑制由邻苯三酚在pH8.4自氧化产生的O₂(与对照组相比,G:P＜0.01、H:P＜0.05)，并能降低由H2O2所致的血红蛋白氧化和红细胞的溶血作用(溶血率H₂O₂为10.9%，经G和H抗氧化作用后分别为5.7%和9.2%)。结论：银杏叶、山楂叶提取物对氧自由基具有强的抑制作用。     

高速逆流色谱分离纯化钩吻中钩吻素己和1-甲氧基钩吻碱

目的 建立高速逆流色谱技术分离纯化钩吻素己和1-甲氧基钩吻碱的方法 .方法 采用高速逆流色谱分离技术分离纯化钩吻生物碱单体,以氯仿-甲醇-0.1 mol/L HCl(4∶4∶2)为溶剂体系;高效液相色谱技术分析所提产物的质量分数;核磁共振谱、质谱分析确证单体的化学结构.结果 从300 mg钩吻总碱中经过一次高速逆流色谱技术分离纯化获得19.4 mg钩吻素己和21.2 mg 1-甲氧基钩吻碱,质量分数分别为95.4%、98.6%;经过电喷雾质谱及核磁共振的结构鉴定分析,证实分离得到的两种生物碱分别是钩吻素已和1-甲氧基钩吻碱.结论 高速逆流色谱技术可高效分离纯化钩吻素已和1-甲氧基钩吻碱,为钩吻生物碱的研发提供了制备技术.     

第二类超临界流体萃取银杏叶有效成分的实验研究

建立了一套超临界流体萃取小试、中试装置,实现了银杏叶有效成分的分离,并分别探讨了压力、流体比、温度、时间、原料粒度、ＣＯ２流量等因素对萃取得率和质量的影响。