脂多糖诱发的早产小鼠子宫组织NO、PGE2的变化

目的探讨感染性早产的发生与子宫局部组织一氧化氮(NO)和前列腺素(PGs)比值变化的关系.方法将 20只孕16天的小鼠分为脂多糖、脂多糖乙二胺四乙酸二钠/一氧化氮(DETA/NO)、脂多糖+DETA以及生理盐水组4组,每组5只,分别注药后观察它们的分娩时间,另外4组孕鼠共 20只,在给予上述药物后12小时处死,检测其血清孕酮水平及子宫组织产生的亚硝酸盐和 PGE2.结果给予脂多糖注射的孕鼠子宫组织产生亚硝酸盐及PGE2增加,而亚硝酸盐与PGE2的比值及其血清孕酮水平则明显下降.DETA/NO可以部份逆转.结论脂多糖可以通过使小鼠血清孕酮水平下降并使其子宫局部组织的NO/PGE 2值降低而诱发早产,DETA/NO则可能通过阻止血清孕酮水平的下降以恢复局部组织的NO/PGE2 值,从而阻止早产的发生.     

脂多糖诱发的早产小鼠子宫组织NO，PGE2的变化

目的；探讨感染性早产的发生与子宫局部组织一氧化氮（NO）和前列腺素（PGs) 比值变化的关系，方法：将20只孕16天的小鼠分为脂多糖，脂多糖乙二胺四乙酸二钠／一氧化氮（DETA／NO），脂多糖＋DETA以及生理盐水组4组，每组5只，分别注药后观察它们的分娩时间，另外4组孕鼠共20只，在给予上述药物后12小时处死，检测其血清孕酮水平及子宫组织产生的亚硝酸盐和PGE2，结果：给予脂多糖注射的孕鼠子宫组织产生亚硝酸盐及PGE2增加，而亚硝酸盐与PGE2的比值及其血清孕酮水平则明显下降，DETA／NO可以部分逆转。结论：脂多糖可以通过使小鼠血清孕酮水平下降并使其子宫局部组织的NO／PGE2值降低而诱发早产，DETA／NO则可能通过阻止血清孕酮水平的下降以恢复局部组织的NO／PGE2值，从而阻止早产的发生。     

米菲司酮对一氧化氮刺激小鼠子宫组织合成PGE2的调节作用

为探讨孕激素受体拮抗剂米菲司酮是否能调节子宫组织中一氧化氮(nitric oxide,NO)和PGE2间的相互作用.给孕16天的小鼠皮下注射米菲司酮或无水乙醇,12小时后处死小鼠,并将其子宫组织分别放入空白或含IL-1β、DETA/NO或DETA的RPMI 1640培养液中培养.检测其子宫组织在培养液中产生的PGE2.结果:与空白对照相比,两组小鼠的子宫组织在DETA/NO和IL-1β的刺激下,其PGE2生成量都增加.而在实验组,其增加幅度则更加显著(28.51±10.67 vs 6.85±3.77, P＜0.01; 53.38±7.32 vs 20.61±2.93,P<0.001).这说明米菲司酮可以使IL-1β及NO刺激子宫组织生成PGE2的作用加强.     

慢性束缚应激对围着床期小鼠胚泡的影响及其机制

目的探讨慢性束缚应激刺激对围着床期小鼠模型胚泡着床的影响及其机制。方法选择10～12周龄的健康、清洁级性成熟的雌性和雄性昆明种小鼠各20只,建立妊娠动物模型。将16只孕鼠随机分为应激组和对照组,每组8只。应激组小鼠在妊娠第3天(D3)上午开始给予束缚应激刺激,连续3d。对照组小鼠在应激组束缚应激刺激时给予断水、断食,同时不给予任何处理。妊娠D5慢性束缚应激刺激后,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清皮质酮、孕酮和催乳素的水平,尾静脉注射0.5%锥虫兰染液观察小鼠子宫内膜组织胚泡的着床位点数,观察、测定孕鼠子宫蜕膜胚泡数及孕鼠体质量、子宫和卵巢质量,并计算子宫和卵巢指数,HE染色法观察慢性束缚应激刺激对小鼠子宫蜕膜组织间质细胞和腺体的病理学改变,半定量RT-PCR法检测子宫蜕膜组织中IL-10mRNA和TNF-αmRNA水平的变化。结果与对照组比较,应激组血清皮质酮水平明显升高,催乳素、孕酮水平均明显降低,子宫内膜胚泡着床位点数减少,体质量、子宫质量均减轻,子宫指数减少,光学显微镜观察显示对照组子宫蜕膜内胚泡呈串珠状,胚泡大小和形状基本一致,分布均匀。应激组子宫蜕膜见胚泡串珠状部分消失并分布不均匀,子宫蜕膜胚泡数减少。子宫蜕膜中IL-10mRNA、TNF-αmRNA表达水平均明显降低,TNF-αmRNA/IL-10mRNA比值明显升高(均P<0.05)。结论围着床期慢性束缚应激刺激可使血清中催乳素和孕酮的含量下降,皮质酮含量升高,并可能导致子宫局部Th1/Th2免疫平衡向Th1漂移,降低小鼠胚泡着床数,从而影响胚泡着床。     

铬离子对妊娠小鼠内分泌及胎盘的影响

目的 探讨重金属铬离子对孕ICR小鼠的生殖内分泌毒性影响,为行人工全髋关节表面置换术后铬离子对妊娠机体可能产生的影响提供实验依据.方法 将56只ICR雌性受孕小鼠随机分成高、中、低剂量组及对照组四组,每组14只,实验组以不同剂量重铬酸钾灌胃染毒,对照组予双蒸水灌胃.将36只孕鼠于孕19d处死,取血清测定雌二醇、孕酮水平,取子宫、胎盘作病理切片及电镜观察.结果 中、高剂量组血清孕酮、雌二醇水平低于对照组,差异有显著性,且随着剂量增高血清孕酮、雌二醇水平有下降趋势.光电镜观察,实验组孕鼠子宫胎盘在染毒以后出现不同程度的形态、结构改变.结论 本实验提示高、中剂量重铬酸钾暴露会对孕鼠生殖内分泌产生较显著的影响.     

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖诱发小鼠早产的防治作用

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)诱发小鼠早产的预防和治疗效果及作用机理.方法 将100只孕15 d C57BL/6小鼠随机分为LPS组、NS组、NAC组、治疗作用组和预防作用组,每组20只.在干预后4 h、8 h、12 h、24 h后每个时间点分别处死3只孕鼠,Western Blotting检测子宫组织NF-κB P65,RT-PCR检测IL-8 mRNA水平,试剂盒检测孕鼠血清IL-8、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)浓度,取母、胎肝脏检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平.另每组8只观察NAC对小鼠早产的治疗效果及毒副作用.结果 NAC治疗LPS诱发小鼠早产分娩潜伏期延长至(35.4±2.1) h,活产率为69.0%,NAC预防给药则延长至(44.8±2.6) h,活产率提高至84.3%,与LPS组[(15.1±1.9) h,4.3%]相比差异均有统计学意义(P＜0.001).LPS作用4 h、8 h、12 h、24 h后,NF-κB活化增强,在4 h达高峰;子宫组织IL-8 mRNA水平、血清IL-8浓度、MDA均升高,在LPS作用8 h后最高;而活胎率、母胎肝脏GSH-PX以及血清SOD水平均下降,在作用8 h最低.预防作用组和治疗作用组各指标变化程度均减弱,同LPS组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 NAC对LPS诱发的小鼠早产防治效果明显,且预防作用大于治疗作用.     

一氧化氮、前列腺素E2在先兆早产中的作用

目的探讨一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)在先兆早产中的作用.方法采集先兆早产孕妇(24例)外周血和阴道冲洗液,采用硝酸还原酶法检测NO水平,用放射免疫法测定其PGE2值,并与同孕期对照组(24例)进行比较.结果先兆早产组血清NO、PGE2、阴道冲洗液NO和PGE2水平均高于对照组(P＜0.05),但外周血和阴道冲洗液NO/PGE2比值均小于对照组(P＜0.05).以两组孕妇为一个整体研究,结果,血和阴道冲洗液间NO水平尚不能认为相关,而两种样本PGE2水平呈部分正相关(r=0.526,P＜0.05),两种样本NO/PGE2比值间呈部分正相关,但相关强度低(r=0.290,P＜0.05).结论先兆早产时孕妇外周血和阴道冲洗液NO、PGE2增加,NO/PGE2比值下降.NO、PGE2的上述变化,可能是通过诱发宫缩和促使宫颈成熟而成为先兆早产发生的机理之一.     

姜黄素对宫内感染性小鼠早产的防治作用

目的研究活化的激活蛋白1（Activator protein-1,AP-1）和单核细胞趋化蛋白1（monocyte chemoattractantprotein-1,MCP-1）在感染性早产孕鼠中的表达,从而探讨抑制AP-1的药物姜黄素（Curcumin,CUR）对感染性早产的预防和治疗作用。方法大肠杆菌腹腔注射建立感染性早产动物模型。将100只C57BL/6孕鼠随机分为模型组（E组）、对照组（NS组）、姜黄素组（CUR组）、治疗组（E＋CUR）、预防组（CUR＋E组）,每组20只。其中每组分8只观察潜伏期（菌液注射至分娩第一胎儿的时间）和活产率。于干预后3、6、12、24h各时间点处死3只孕鼠,免疫组化检测孕鼠子宫AP-1及MCP-1蛋白表达分布;Western blotting检测孕鼠子宫AP-1表达;ELISA检测孕鼠血清MCP-1蛋白分泌量。结果 CUR预防及治疗组能显著降低AP-1,MCP-1mRNA及蛋白的表达（P〈0.001）。CUR治疗感染性早产小鼠潜伏期延长为34.5h（对照15.1h）,CUR预防性给药则延长为45.3h;CUR作用于感染性早产小鼠可使妊娠时间延长。活产率提高（87.5%vs39.2%）。结论 CUR对大肠杆菌诱发的小鼠早产有预防和治疗作用,可能是通过抑制妊娠组织AP-1/MCP-1的活化。     

老鹳草提取物对实验性胃溃疡小鼠胃黏膜的保护作用机制研究

[目的]探讨老鹳草提取物对实验性胃溃疡小鼠胃黏膜的保护作用机制.[方法]取实验小鼠随机分组,连续灌胃给予老鹳草提取物7d,皮下注射利血平10mg/kg,6h后眼球采血,检测血清一氧化氮含量;采用无水乙醇制作小鼠胃黏膜损伤模型,测定小鼠胃黏膜组织中PGE2含量.[结果]老鹳草提取物组血清一氧化氮含量及胃黏膜组织中PGE2含量均明显高于模型组.[结论]老鹳草提取物对实验性胃溃疡小鼠胃黏膜抗损伤保护作用可能与提高血清一氧化氮含量及胃黏膜组织中PGE2含量有关.     

弓形虫感染对大鼠、小鼠血清一氧化氮水平的影响

目的测定正常大鼠、地塞米松处理大鼠以及小鼠感染弓形虫前后的血清一氧化氮水平,探讨弓形虫感染对其血清一氧化氮水平的影响。方法将36只雌性SD大鼠分为6组,每组6只。Ⅰ组:正常对照组;Ⅱ组:弓形虫感染组;Ⅲ组:地塞米松2mg/kg体重,隔天皮下注射2周后停止注射;Ⅳ组:地塞米松2mg/kg体重,隔天皮下注射2周后感染弓形虫,并停止注射地塞米松;Ⅴ组:实验期间,地塞米松2mg/kg体重,隔天皮下注射;Ⅵ组:地塞米松2mg/kg体重,隔天皮下注射2周后感染弓形虫,继续注射地塞米松。每周采集实验大鼠血液并分离血清。第6周时处死大鼠,收集血清,将弓形虫感染鼠的脑组织匀浆转种小鼠,并以脑组织为模板PCR扩增弓形虫SAG1基因。雌性昆明小鼠36只,于感染弓形虫后0,1,2,3,4,5d时每天处死6只,收集血清。硝酸根还原酶法测定大鼠、小鼠血清一氧化氮浓度。结果正常组大鼠6周平均一氧化氮浓度为(29.30±2.77)μmol/L;地塞米松注射2周后,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组大鼠血清一氧化氮水平分别为(13.24±2.30)μmol/L、(13.33±2.41)μmol/L、(14.98±1.71)μmol/L、(14.55±2.99)μmol/L;Ⅱ组大鼠感染弓形虫后,血清一氧化氮第3周时升至(76.79±6.93)μmol/L,而后持续下降,至第6周时为(52.34±4.50)μmol/L;Ⅲ组大鼠停止注射地塞米松后血清一氧化氮水平逐渐上升,至第4周时为(26.32±2.93)μmol/L,其后维持在正常水平;Ⅳ组大鼠感染弓形虫后第3周时其一氧化氮水平升至(36.19±7.42)μmol/L,然后继续上升,至第5周时达最高至(63.60±16.32)μmol/L,然后下降;Ⅴ组大鼠的一氧化氮浓度则维持在从(13.96±2.50)μmol/L到(14.98±1.71)μmol/L之间的较低水平;Ⅵ组大鼠感染弓形虫后血清一氧化氮水平缓慢上升,至第5周时升至最高,为(58.89±21.70)μmol/L,然后下降。采用PCR的方法从Ⅳ组中的1只大鼠的脑组织扩增出SAG1片段,Ⅵ组有2只大鼠的脑组织扩增出SAG1片段,并且其脑组织匀浆转种小鼠后回复分离出弓形虫速殖子;PCR阳性的3只大鼠血清一氧化氮浓度在实验期间均维持在较低水平。小鼠感染弓形虫前一氧化氮水平为(27.47±4.41)μmol/L,感染后1d其血清一氧化氮水平有所降低,为(19.29±3.07)μmol/L,然后快速升高,至感染后5d达最高峰(114.51±8.19)μmol/L,此时小鼠处于频死状态。结论地塞米松可降低大鼠血清一氧化氮水平,弓形虫感染可升高大鼠血清一氧化氮水平;注射地塞米松或未注射地塞米松的大鼠感染弓形虫后其血清一氧化氮水平都有升高,但升高的幅度与速度有所不同,未注射地塞米松的大鼠升高的速度更快、幅度更高。小鼠感染弓形虫后血清一氧化氮水平先降低而后升高,但不能防止小鼠因急性感染而死亡。     

1,3-二苯基-1,2,3,6-四氢嘧啶-4,5-二甲酸二乙酯抗炎镇痛作用的研究

目的探讨1,3-二苯基-1,2,3,6-四氢嘧啶-4,5-二甲酸二乙酯（LH-2703）体内外的抗炎镇痛活性。方法采用乙酸所致小鼠扭体反应和热板致痛模型评价镇痛作用;二甲苯致小鼠耳郭肿胀和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型评价抗炎作用。细菌脂多糖（LPS）刺激小鼠腹腔巨噬细胞活化作为体外炎症模型。酶免疫分析法（EIA）检测前列腺素E2（PGE2）的含量,Griess试剂法检测氧化亚氮（NO）的含量。结果LH-2703能减少乙酸所致小鼠的扭体次数,延长热板致痛的痛阈值,抑制二甲苯诱导的小鼠耳郭肿胀和角叉菜胶诱导的大鼠足跖肿胀。体外能抑制LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞产生炎症因子PGE2和NO,最低有效浓度分别为20、40μmol/L（P〈0.01,P〈0.05）。结论化合物LH-2703具有抗炎镇痛作用,其作用机制可能与抑制炎症因子PGE2和NO有关。     

内毒素休克小鼠一氧化氮与肝细胞凋亡的关系

目的探讨内毒素休克小鼠一氧化氮（nitric oxide,NO）与肝细胞凋亡的关系及其对肝功能的影响。方法36只小鼠随机分为对照组（r／,=6）和5个实验组（5个时间点,n=6）。实验组应用LPS腹腔注射建立小鼠内毒素休克模型,并分别于LPS给药后0．5h,2h,6h,12h,24h测定肝组织匀浆NO水平,并取肝细胞分离纯化,通过流式细胞仪观察各组肝细胞凋亡情况,同时采血分离血清测定各组小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平。结果肝组织匀浆NO水平从0．5h到6h逐渐升高,6h达高峰（P〈0．01）,6h到24h逐渐下降至接近正常水平。流式细胞仪检测凋亡结果正常对照组凋亡率为2．33％,LPS五个时间组凋亡率平均分别为10．34％,21．65％,26．12％,30．12％,36．51％,LPS组肝细胞凋亡率明显高于对照组。血清AST和ALT水平在LPS注射2小时开始升高,并随时间延长逐渐升高。结论NO的大量产生早于肝细胞坏死和肝细胞凋亡,可能在内毒素休克早期诱导肝细胞凋亡和肝损伤。     

云芝多糖对氧化修饰LDL抑制巨噬细胞一氧化氮产生的保护作用

通过测定巨噬细胞培养上清液中亚硝酸盐的含量和观察细胞内一氧化氮合酶（NOS）mRNA含量的变化，研究了云芝多糖（PSK）对氧化修饰LDL（Ox－LDL）抑制脂多糖（LPS）诱导的巨噬细胞NO产生的保护作用。结果显示，Ox－LDL可抑制LPS诱导的巨噬细胞NO产生，而正常（N－LDL）和乙酰化LDL（AC－LDL）则没有抑制作用。非特异性免疫调节剂PSK处理小鼠对Ox－LDL引起的巨噬细胞NO产生量下降具有保护作用。狭缝杂交结果显示，Ox－LDL可使LPS诱导的巨噬细胞NOSmRNA含量下降，PSK可保护巨噬细胞免受Ox－LDL引起的NOSmRNA含量下降。     

一氧化氮抑制洛莫司汀对BT-325胶质瘤细胞的细胞毒作用

目的 :研究一氧化氮 (nitric oxide,NO)在体外实验中对洛莫司汀 (L omustine,CCNU)细胞毒作用的影响。方法 :使用不同浓度的细胞因子或 NO供体分别与 CCNU作用于 BT- 32 5细胞 ,用 Griess法测定 NO浓度 ,MTT法测定实验处理后肿瘤细胞的生存率 ,以此观察 NO对 CCNU细胞毒作用的影响。结果 :1IL - 1β和 LPS能刺激 BT- 32 5细胞生成 NO增加 ,并使 BT- 32 5细胞对 CCNU耐受性增强 (P<0 .0 5 ) ,这个作用能被 L- NAME所抑制。2 DETA NONOate能抑制 CCNU对 BT- 32 5细胞的细胞毒作用 (P<0 .0 5 ) ,在一定程度内呈剂量效应关系。3CCNU与 SNAP共培养 2 4 h后 ,其对 BT- 32 5细胞的细胞毒作用比单用 CCNU组明显增强 (P<0 .0 5 )。结论 :NO使 BT- 32 5细胞对 CCNU的耐受性增强 ,从而部分抑制 CCNU的细胞毒作用 ,这可能是 CCNU耐药的一个新机制 ;同时 NO能够缓解 CCNU在水溶液里的降解。     

高胰岛素水平对血管平滑肌细胞NO生成的影响

培养大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）,检测高胰岛素（HI）对VSMC膜蛋白激酶C（PKC）活性的影响,并采用硝酸还原酶法和免疫印迹法检测HI加或不加PKC抑制剂－H7对脂多糖（LPS）＋γ－干扰素（γ－IFN）诱导NO生成和一氧化氮合酶（iNOS) 表达的影响。结果：HI预处理的VSMC,膜PKC活性明显高于对照（P＜0．05）,LPS＋γ－IFN诱导NO生成显著低于对照（P＜0．01）,加H7培育,NO的生成量较HI处理组明显提高,但低于对照（P＜0．01）。免疫印迹示HI处理的VSMC,iNOS表达下降,提示：高胰岛素血症可能通过激活VSMC膜PKC,部分抑制iNOS表达,减少NO产生。     

晚期氧化蛋白产物对小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮的影响

目的 研究晚期氧化蛋白产物（AOPP）对小鼠腹腔巨噬细胞（MPM）产生一氧化氮的影响。方法 用次氯酸氧化牛血清白蛋白（BSA）制备的AOPP-BSA单独或与内毒素（LPS）一起与MPM共同培养或用AOPP-BSA预处理后再用LPS刺激MPM,用Griess试剂法测定培养上清一氧化氮的含量;MTT法测定细胞活力。结果 AOPP修饰可使BSA诱导MPM产生一氧化氮的量显著性降低。同时,AOPP-BSA预处理或与LPS一起共同刺激巨噬细胞均可显著性抑制LPS诱导的MPM产生一氧化氮,抑制程度与BSA的氧化修饰程度AOPP-BSA的浓度有关。结论 晚期氧化蛋白产物可抑制MPM诱导型一氧化氮的产生。     

高胰岛素水平对血管平滑肌细胞NO生成的影响

培养大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC) ,检测高胰岛素 (HI)对VSMC膜蛋白激酶C(PKC)活性的影响 ;并采用硝酸还原酶法和免疫印迹法检测HI加或不加PKC抑制剂 -H7对脂多糖 (LPS) +γ -干扰素 (γ -IFN)诱导NO生成和一氧化氮合酶 (iNOS)表达的影响。结果 ,HI预处理的VSMC ,膜PKC活性明显高于对照 (P <0 .0 5 ) ;LPS +γ -IFN诱导NO生成显著低于对照 (P <0 .0 1) ,加H7培育 ,NO的生成量较HI处理组明显提高 ,但低于对照 (P <0 .0 1)。免疫印迹示HI处理的VSMC ,iNOS表达下降。提示 :高胰岛素血症可能通过激活VSMC膜PKC ,部分抑制iNOS表达 ,减少NO产生。