银杏聚戊烯醇提取技术研究

目的;从银杏叶中提取聚戊烯醇同系物。方法;以石油醚为提取溶剂,获得的石油醚浸膏中的聚戊烯乙酸酯经水解后转化为聚戊烯醇,再经柱色谱分离得到聚戊烯醇同系物。结果：得到的产物与聚戊烯醇标准品对照,为聚戊烯醇－16到聚戊烯醇－20同系物,由HPLC外标法测定其纯度为76％。结论：该提取制备方法简单可行。     

银杏叶聚戊烯醇的分离与纯化

目的:提取银杏叶聚戊烯醇同系物,对传统工艺中主要的分离、纯化步骤精确并优化。方法:以石油醚为提取溶剂,制得石油醚浸膏中的聚戊烯乙酸酯经水解后转化为聚戊烯醇,然后通过丙酮沉淀及乙醇除杂进一步提高样品纯度,最后过硅胶柱层析得到聚戊烯醇同系物,采用高效液相色谱法(HPLC)测定聚戊烯醇纯度。结果:得到的产物与聚戊烯醇标准品比较,纯度为95.27%。结论:该优化体系提取率高,简单可行,易于工业放大。     

银杏叶聚戊烯醇类化合物的制备与分析

目的利用制备型反相高效液相色谱(RP-HPLC)法从银杏叶中分离制备聚戊烯醇同系物单体。方法采用石油醚对银杏叶索氏提取,经硅胶柱层析初步分离纯化,由制备型RP-HPLC进行分离得到10个单体。结果经UV、IR、MS、1HNMR和13C NMR鉴定,证明所得聚戊烯醇乙酸酯中异戊烯基单元数为11~20,排列为(ω)-(trans)2-(cis)n-(α)。结论RP-HPLC可用于银杏叶聚戊烯醇单体的制备。     

从银杏叶中制备聚戊烯乙酸酯

目的：研究银杏聚戊烯乙酸酯的制备技术,方法：以石油醚为提取溶剂,获得的石油醚浸膏经硅胶吸附能除去大部分极性较大的杂质;再经制备TLC分离、脱蜡、制备TLC纯化得到聚戊烯乙酸酯同系物的混合物,结果经HPLC外标法测定其同系物的纯度为84％。结论：该方法简易行,大大降低了工作量。     

银杏叶聚戊烯醇同系物体外抑制乳腺癌MCF-7细胞株增殖作用及机制研究

目的:研究银杏叶聚戊烯醇同系物体外抑制MCF-7细胞增殖的作用并初步探讨作用机制.方法:经制备反相高效液(RT-HPLC)获得银杏叶聚戊烯醇同系物,MTT法检测其对MCF-7细胞增殖的影响,选取抑制细胞增殖作用强的同系物P3,用流式细胞仪检测5,10,20 mg·L-1 P3对MCF-7细胞周期、细胞凋亡的影响.结果:经提取分离获得10个银杏叶聚戊烯醇同系物,依次命名为P1,P2,P3……P10,其中P3对MCF-7细胞株增殖的抑制作用最强,IC50为10.32 mg·L-1,其作用机制低浓度时以阻滞细胞周期于G2/M期为主,高浓度可诱导凋亡.结论:银杏叶聚戊烯醇同系物P3为银杏叶提取物抑制MCF-7增殖的活性成分,其作用机制与阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡有关.     

银杏叶中聚戊烯醇类化合物的分离纯化研究

目的:探讨银杏叶中聚戊烯醇类化合物的分离纯化方法.方法:以聚戊烯醇的纯度为指标,筛选冷冻脱杂和硅胶柱层析最佳条件,获得含量90%以上的提取物.先用160倍量的石油醚-乙酸乙酯(9:1)溶剂冷冻除杂,然后用硅胶柱层析进一步纯化(洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯19:1).结果:精制后的聚戊烯醇纯度可达92.7%.结论:冷冻脱杂后再进行硅胶柱层析,可明显提高聚戊烯醇纯度,该方法重现性好,经济实惠,简单可靠.     

银杏叶聚戊烯醇对移植性肝癌的治疗作用

传统中药银杏叶(Folium Ginkgp)有广泛的生物活性,银杏叶黄酮类提取物已用于冠心病、高血脂的临床治疗,但其抗肿瘤作用国内尚未见报道.近年来,研究人员从银杏叶中提取、分离到另一类具有广泛生物活性的化合物-聚戊烯醇(Polyprenols GP-1)[1],据国外研究报告,植物聚戊烯醇有保肝、抗癌等活性,为了研究银杏叶聚戊烯醇对肝癌的治疗作用,笔者对其进行了抗移植性肿瘤的实验研究,现将研究结果报告如下:     

银杏叶聚戊烯醇类化合物对造血干细胞体外增殖作用的研究

目的探讨银杏叶聚戊烯醇磷酸酯的制备方法,并研究银杏叶聚戊烯醇类化合物对造血干细胞的体外增殖作用。方法采用三氯乙腈和四丁基磷酸二氢铵合成聚戊烯醇磷酸酯,采用造血干细胞体外半固体培养法研究银杏叶聚戊烯醇类化合物对造血功能的影响。结果三氯乙腈和四丁基磷酸二氢铵合成聚戊烯醇磷酸酯,收率可达45.1%。银杏叶聚戊烯醇各类化合物对造血干细胞具有促进增殖的作用,并在33μg/mL效果最佳,与对照组相比差异有显著性(P0.01)。银杏叶聚戊烯醇与银杏叶聚戊烯醇单体的活性之间没有显著性差异(P0.05),银杏叶聚戊烯醇磷酸酯的活性明显高于银杏叶聚戊烯醇。结论银杏叶聚戊烯醇类化合物对造血干细胞具有明显的促进增殖的作用,为该类化合物进一步开发研究提供了依据。     

银杏叶类脂成分与聚戊烯醇的协同抑菌作用

目的:考察银杏叶聚戊烯醇同系物以及其他15种类脂成分单体化合物对5种菌种(沙门菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌)的抑菌及协同作用.方法:正己烷作溶剂和空白对照,在样品质量浓度500 mg· L-1下,利用滤纸片法测定样品抑菌圈值;样品用正己烷配制成质量浓度分别为250,125,62.5,31.3,15.6,7.8,3.9 mg·L-1溶液并分散在培养基中,记录无菌生长样品浓度,以确定最小抑菌浓度(MIC)、最小杀细菌浓度(MBC)和最小杀真菌浓度(MFC)和计算分级抑菌浓度指数(FIC)方法来比较各样品对菌种的抑制作用.结果:橙花叔醇对4种细菌(沙门菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌)的抑菌活性均为最强,抑菌圈范围为17.4～20.9 mm,MIC和MBC范围依次为3.9 ～15.6,31.3～62.5 mg·L-1;芳樟醇对黑曲霉菌的抑菌活性最强,抑菌圈为17.9 mm,MIC和MFC依次为7.8,31.3 mg·L-1;β-石竹烯与银杏叶聚戊烯醇混合样品组对枯草芽孢杆菌的协同抑制作用最强;当β-石竹烯与银杏叶聚戊烯醇质量比为43.42％∶ 56.58％时,其抗枯草芽孢杆菌协同作用最佳,此时测得实际值FIC指数为0.16,抑菌圈值为19.8 mm.结论:银杏叶类脂成分具有一定抑菌作用,部分类脂成分与聚戊烯醇混合具有协同抑菌效应.     

松针叶聚戊烯醇的研究进展

松针叶为松科松属植物马尾松、湿地松、黄山松、落叶松、黑松、红松等的叶子,在全国各地均有分布,具有悠久的药用历史。聚戊烯醇是松针叶的主要活性成分,与人体内所含的多萜醇结构和生物活性相似,具有抗老年痴呆、抗氧化、保护肝损伤、治疗硬化症等作用。目前对松针叶聚戊烯醇的提取、分离纯化工艺及药理作用研究取得了一定进展,但国内关于其应用于临床的制剂开发尚未见报道。对松针叶聚戊烯醇的深入研究将有利于充分利用我国松针叶资源。本文对目前国内外松针叶中聚戊烯醇的提取和分离纯化方法、含量测定、药理作用、制剂等方面进行总结,并对其研究前景进行展望。从目前的研究状况来看,松针叶聚戊烯醇的分离纯化技术、药理作用机制、制剂开发等方面很值得更深入的研究,尤其是其制剂开发方面。     

Polyprenols mitigate cognitive dysfunction and neuropathology in the APP/PS1 mouse

Alzheimer's disease (AD) is a very common neurodegenerative disorder in the elderly and brings considerable financial and social problems worldwide. In this study, polyprenols were firstly evaluated the effects on the cognitive deficits and neuropathology in APP/PS1 mice model of AD. At 3 months old, the APP/PS1 mice were divided into model group; polyprenols low, middle, and high dosage group; and positive drug group. Age‐matched wild‐type mice were chosen in control group. The administration by oral gavage lasted 6 months. Polyprenols treatment significantly improved cognitive impairment of double transgenic mice compared with vehicle control treatment in behavioral tests. In addition, immunohistochemistry and enzyme‐linked immunosorbent assay showed that there were significantly reductions in neuritic plaques and the level of hyperphosphorylated tau in brain of polyprenols‐treated mice. Furthermore, we found that polyprenols treatment reduced the apoptotic cells in brain sections of 9‐month‐old APP/PS1 mice. These results reveal that polyprenols exert neuroprotective effects in APP/PS1 mice and could represent an effective treatment for AD.     

Plant polyprenols reduce demyelination and recover impaired oligodendrogenesis and neurogenesis in the cuprizone murine model of multiple sclerosis

Recent studies showed hepatoprotective, neuroprotective, and immunomodulatory properties of polyprenols isolated from the green verdure of Picea abies (L.) Karst. This study aimed to investigate effects of polyprenols on oligodendrogenesis, neurogenesis, and myelin content in the cuprizone demyelination model. Demyelination was induced by 0.5% cuprizone in CD‐1 mice during 10 weeks. Nine cuprizone‐treated animals received daily injections of polyprenols intraperitoneally at a dose of 12‐mg/kg body weight during Weeks 6–10. Nine control animals and other nine cuprizone‐treated received sham oil injections. At Week 10, brain sections were stained for myelin basic protein, neuro‐glial antigen‐2, and doublecortin to evaluate demyelination, oligodendrogenesis, and neurogenesis. Cuprizone administration caused a decrease in myelin basic protein in the corpus callosum, cortex, hippocampus, and the caudate putamen compared with the controls. Oligodendrogenesis was increased, and neurogenesis in the subventricular zone and the dentate gyrus of the hippocampus was decreased in the cuprizone‐treated group compared with the controls. Mice treated with cuprizone and polyprenols did not show significant demyelination and differences in oligodendrogenesis and neurogenesis as compared with the controls. Our results suggest that polyprenols can halt demyelination, restore impaired neurogenesis, and mitigate reactive overproduction of oligodendrocytes caused by cuprizone neurotoxicity.     

银杏叶化学成分研究进展

银杏叶黄酮、萜内酯和聚异戊烯醇是银杏叶发挥独特药理活性的有效成分。该文综述了银杏叶中已经发现的化学成分,详细介绍了银杏黄酮、萜内酯、酚酸、聚异戊烯醇的化学结构。     

RP-HPLC制备色谱法分离淡豆豉中高纯度异黄酮苷元

淡豆豉经大孔树脂柱色谱初步分离纯化,采用RP-HPLC制备色谱法,乙腈-水-冰醋酸(35∶ 65∶ 1,v/v/v)为流动相,流速3.0 ml/min,检测波长260 nm.结果表明,在30 min内快速分离到大豆素、大豆黄素和染料木素,产物纯度均达到99%以上.     

三七总皂苷指纹图谱及含量测定HPLC条件的耐用性考察

目的：测试三七总皂苷指纹图谱HPLC条件的耐用性。方法：在不同品牌的HPLC仪器和十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱上，对梯度条件和柱温进行网格搜索。结果：在不同品牌的仪器、色谱柱上，可得到分离效果基本一致的指纹图谱，可以同时对人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1、人参皂苷Rd、人参皂苷Re5个成分进行准确定量。结论：通过优化实验，可以保证三七总皂苷的HPLC指纹图谱在不同的仪器、不同品牌的色谱柱上重现．从而保证三七指纹图谱质量标准的顺利执行。     

皱瘤海鞘有效部位HPLC指纹图谱的初步研究

目的：建立皱瘤海鞘有效部位的HPLC指纹图谱。方法：应用HPLC对不同产地的皱瘤海鞘有效部位供试液进行指纹图谱比较。结果：通过对6份样品的分析鉴定，获得了皱瘤海鞘有效部位的标准HPLC指纹图谱及13个特征峰。结论：HPLC指纹图谱鉴定法可以对皱瘤海鞘有效部位进行鉴定，并为其制剂提供可靠、方便的质量控制。     

两种方法测定川芎油中藁本内酯、洋川芎内酯A和正丁基苯酞的含量

目的:建立同时测定川芎油中藁本内酯、洋川芎内酯A和正丁基苯酞含量的方法,比较两种方法分析结果的差异.方法:采用超临界CO2萃取法和水蒸气蒸馏法提取川芎油,分别采用气相色谱质谱联用(GC-MS)内标法和高效液相色谱( HPLC)外标法测定,并进行方法学考察.结果:SFE-CO2萃取法和水蒸气蒸馏法的出油率分别为10.49％,1.54％,以每克药材中提取得到的藁本内酯、洋川芎内酯A和正丁基苯酞的量计算,SFE-CO2萃取法分别可得19.676,15.56,0.957 4 mg,水蒸气蒸馏法提取可得2.16,1.56,0.11 mg.GC-MS法测定结果较HPLC法低1％ ～4％,平均精密度高10％、检测限低10倍.结论:GC-MS内标法精密度、灵敏度都较好,对川芎油的含量的分析较为准确;HPLG法是一种相对方便、经济的方法.     

茯苓中三萜酸类成分HPLC指纹图谱的初步研究

目的 :建立茯苓中三萜酸类成分HPLC指纹图谱的测试方法。方法 :利用RP-HPLC、线性梯度洗脱筛选最佳测试条件 ,并应用LC/MS技术指认指纹图谱中的主要色谱峰。结果 :获得了较为理想的茯苓三萜酸类成分HPLC指纹图谱 ,其中9个色谱峰被指认。结论 :用文中的最佳条件可较全面地反映茯苓中的三萜酸类成分 ,为茯苓药材的质量控制提供有效手段。