抗角蛋白自身抗体对角质形成细胞凋亡的影响

目的 探讨抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)对角质形成细胞凋亡的影响。方法 以不同浓度AK auto Ab作用体外培养人角质形成细胞后,用光镜及透射电镜观察细胞形态变化、用流式细胞仪分析细胞周期变化以及提取角质形成细胞DNA作电泳特征分析。结果 AK auto Ab作用后培养的角质形成细胞光镜、电镜下形态发生凋亡特有的改变,出现核固缩、染色质凝聚,并形成凋亡小体;细胞周期分析图中出现凋亡峰;DNA电泳呈有一定间隔的梯状条带。结论 AK auto Ab对角质形成细胞的凋亡具有诱导作用。     

天然抗角蛋白自身抗体产生细胞的检测

目的明确产生天然抗角蛋白自身抗体(anti-keratin autoantibody,AK auto Ab)的B细胞的类群和定位。方法取SPF级C57BL/6小鼠的腹腔细胞及脾细胞,进行体外培养,采用ELISA方法分析培养细胞分泌AK auto Ab的水平,ELISPOT方法分析分泌AK auto Ab的细胞数。结果腹腔细胞中分泌AK auto Ab的细胞数远多于脾细胞,其分泌的抗体滴度也显著高于脾细胞。结论AK auto Ab主要来源于腹腔B细胞,B1细胞可能是产生AK auto Ab的主要细胞。     

角蛋白,抗角蛋白自身抗体和银屑病

被作为上皮类型和分化阶段的分子标志－角蛋白，在银屑病患者表皮内明显地表现异常，并且这种异常改变不仅仅出现在皮损区域。最新研究提示屑病患者角朊细胞本身存在缺陷，它们较正常角朊细胞分化能力低下。直接以不同分子量的角蛋白作为对象的抗角蛋白自身抗体，也与银屑病有着明显的联系。有的角蛋白和抗角蛋白自身抗体可以作为判断银屑病的病情以及疗效、治愈标准的指标。深入研究银屑病患者角蛋白、抗角蛋白自身抗体的变化对进一     

纯化的抗角蛋白自身抗体对培养角朊细胞的作用

抗角蛋白自身抗体（ＡＫａｕｔｏＡｂ）的研究自从其被发现以来已取得很大进展［１］。我们曾经使用间接对比法和吸附试验观察过ＡＫａｕｔｏＡｂ对角朊细胞的作用［２］，但该方法有其明显的不足，为能更客观地观察ＡＫａｕｔｏＡｂ对角朊细胞的作用，我们应用纯化的ＡＫ...     

银屑病患者血清抗角蛋白自身抗体对角朊细胞的作用

用人表皮吸附、消耗的方法观察了银屑病患者含有与不含抗角蛋白自身抗体的ＩｇＧ对培养角朊细胞代谢活性的影响。发现抗角蛋白自身抗体的存在对角朊细胞的增生代谢具有明显的抑制作用，与抗角蛋白单克隆抗体的作用相似。提示银屑病时抗角蛋白自身抗体在表皮的沉积可能是一种继发性的保护反应，以限制病情的进展。     

角蛋白、抗角蛋白自身抗体和银屑病

被作为上皮类型和分化阶段的分子标志——角蛋白,在银屑病患者表皮内明显地表现异常并且这种异常改变不仅仅出现在皮损区域。最新研究提示银屑病患者角朊细胞本身存在缺陷,它们较正常角朊细胞分化能力低下。直接以不同分子量的角蛋白作为对象的抗角蛋白自身抗体,也与银屑病有着明显的联系。有的角蛋白和抗角蛋白自身抗体可以作为判断银屑病的病情以及疗效、治愈标准的指标。深入研究银屑病患者角蛋白、抗角蛋白自身抗体的变化对进一步了解银屑病可能提供一些有益的启迪。     

抗角蛋白单克隆抗体5G5对培养角质形成细胞增殖的影响

目的 研究抗角蛋白单克隆抗体5G5在无血清培养的角质形成细胞中的免疫学活性,观察其对角质形成细胞增殖的影响。方法 免疫组化观察5G5对角质形成细胞的反应性;从培养的角质形成细胞中提取角蛋白,免疫印迹法检测5G5所识别的角蛋白区带;四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)测定5G5对细胞增殖的影响。结果 5G5仅识别角质形成细胞中相对分子质量为50000的角蛋白区带,呈现为一条很强的染色带,而未与其它分子质量的角蛋白反应;免疫组化染色明显呈胞浆阳性;该单克隆抗体明显抑制培养的角质形成细胞增殖,并且存在剂量依赖关系。结论 特异性抗相对分子质量为50000角蛋白的抗体可能是角蛋白抗体家族中影响角质形成细胞增殖的有效成分。     

银屑病患者血清抗血蛋白自身抗体对角朊细胞的作用

用人表皮吸附、消耗的方法观察了银屑病患者含有与不含抗角蛋白自身抗体的ＩｇＧ对培养角朊细胞代谢活性的影响。发现抗角蛋白自身抗体的存在对角朊细胞的增生代谢具有明显的抑制作用，与抗角蛋白单克隆抗体的作用相拟。提示银屑病时抗角白自身抗体在表皮的沉积可能是一种继发性的保护反应，以限制病情的进展。     

与角质形成细胞相关自身抗体的研究进展

近年来 ,随着分子生物学和分子免疫学的发展 ,人们发现许多皮肤病和针对角质形成细胞的自身抗体有着密切的联系。这类抗体对疾病的诊断 ,治疗有所帮助。大致可分为抗核抗体、抗胞浆抗体及抗胞膜抗体三种类型。     

抗角蛋白自身抗体研究现状与展望

抗角蛋白自身抗体（ａｎｔｉｋｅｒａｔｉｎａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｙ，ＡｋａｕｔｏＡｂ）的研究已经历了２０余年的时间，对其特性、意义与疾病的关系等方面的认识都有了长足的进步。随着对ＡｋａｕｔｏＡｂ研究的拓展和深入，特别是现代免疫学和分子生物学技术的迅速发展，使得一些更深层次的认识成为可能。这一领域的研究正面临着新的希望和挑战。本文回顾在ＡＫａｕｔｏＡｂ研究中取得的成果，并对今后的前景作一展望。一、抗角蛋白自身抗体研究现状（一）ＡｋａｕｔｏＡｂ在体内的天然存在及其意义　１９７０年，Ｋｒｏｇｈ等［１…     

天然抗角蛋白自身抗体识别的角蛋白模拟表位的研究

目的 探索利用天然抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)淘筛噬菌体递呈的随机肽库,获得在体内具有功能活性的角蛋白模拟表位方法。方法 用角蛋白亲和层析柱从正常人混合血清中分离并纯化AK auto Ab,然后进行生物素标记;用生物素化的AK auto Ab对噬菌体递呈的随机15肽库进行3轮淘洗并进行ELISA检测;挑取23个阳性克隆进行DNA测序,分析所获数据并进行竞争实验。结果 DNA测序分析表明,AK auto Ab特异识别3个抗原表位区:SLSPMPTTNRR、PPLIPIPLRTM和TTPRPPMRIMLPRIT,其中SLSPMPTTNRR可能含有优势表位;携有这些短肽的噬菌体可与AK auto Ab特异结合,角蛋白可阻断这种特异的结合反应。结论 利用噬菌体随机肽库技术成功地获得了AK auto Ab所识别的角蛋白模拟表位。     

银屑病患者抗角蛋白自身抗体的初步研究

银屑病患者表皮中角蛋白有异常表达,特别是角蛋白K16,它常在银屑病活动的早期即在皮损边缘处的基底层上表达^[1,2]。为了研究银屑病患者血清中是否存在针对角蛋白K16的自身抗体,以及该抗体与银屑病病情变化的确切关系,我们用间接酶联免疫测定法(ELISA)和免疫印迹法(IBT)分别检测银屑病患者血清中的抗角蛋白自身抗体(AKautoAB)和抗角蛋白K16自身抗体(AK16autoAB)的滴度。     

高滴度天然抗角蛋白自身抗体转基因小鼠模型的建立

目的 建立天然抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)的转基因小鼠模型。方法 将转基因表达质粒显微注射法转入CBA×C57BL/6小鼠受精卵,导入假孕雌鼠输卵管后培育子代小鼠;PCR鉴定子代小鼠基因型;ELISA法分析转基因小鼠体内AK auto Ab水平的变化。结果 共获得12系转基因阳性的Founder小鼠,其中9系传至第3代;3系转基因小鼠体内的AK auto Ab水平显著增高。结论 成功建立AK auto Ab的转基因小鼠,获得了血清AKautoAb水平增高的动物模型。     

与角质形成细胞相关自身抗体的研究进展

近年来，随着分子生物学和分子免疫学的发展，人们发现许多皮肤病和针对角质形成细胞的自身抗体有着密切的联系。这类抗体对疾病的诊断，治疗有所帮助。大致可分为抗核抗体、抗胞浆抗体及抗胞膜抗体三种类型。     

天然抗角蛋白自身抗体抗小鼠金黄色葡萄球菌感染的研究

目的 以高滴度天然抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)转基因小鼠为模型,分析AK auto Ab在抵御金黄色葡萄球菌感染中的作用.方法 取天然抗角蛋白自身抗体转基因小鼠及阴性对照小鼠,ELISA法检测小鼠腹腔冲洗液总IgM、抗角蛋白IgM抗体以及抗金黄色葡萄球菌IgM抗体水平:腹腔接种金黄色葡萄球菌制备感染模型,检测腹腔接种金黄色葡萄球菌后腹腔及肾脏菌落形成单位数量.测定菌负荷,流式细胞仪检测中性粒细胞比率、炎症因子浓度等.结果 ELISA检测发现,转基因小鼠腹腔冲洗液抗角蛋白IgM、抗金黄色葡萄球菌IgM水平高于阴性对照小鼠.差异有统计学意义(P<0.01);菌落形成实验显示,转基因小鼠腹腔及肾脏菌负荷低于阴性对照(P<0.01):流式细胞仪分析发现.转基因小鼠腹腔中性粒细胞比率、炎症因子浓度低于阴性对照(P<0.01).结论 AK auto Ab在小鼠体内对金黄色葡萄球菌感染具有良好的保护作用.     

抗角蛋白K16抗体对培养角质形成细胞分化和细胞活性的影响

目的研究抗角蛋白K16抗体对培养角质形成细胞分化和细胞活性的影响。方法鼠抗人角蛋白K16的IgG单克隆抗体作用培养的角质形成细胞,分别于作用12h,24h和36h,以同种型抗体作对照,采用定量PCR,Western blot的方法分别检测抗角蛋白K16抗体对角质形成细胞分化标志蛋白（nascent polypeptide-associated complex,NACA）和Involucrin mRNA表达的影响,以及对Involucrin和肌动蛋白合成启动蛋白（actin related protein,ARP2）表达的影响。结果 12h,24h和36h后NACA mRNA升高5.93-,3.35-和3.54-倍。12h和36h后Involucrin mRNA升高2.33-和2.0-倍。36h后Involucrin蛋白升高4.5-倍,而Arp2蛋白下降1.82-倍。结论抗角蛋白K16抗体能调节角质形成细胞的分化、影响细胞的活动力,角蛋白K16可能是维持银屑病角质形成细胞高分化和表皮增殖特性的重要因素。     

抗角蛋白自身抗体对体外培养鳞癌细胞端粒酶活性的影响

目的　研究抗角蛋白自身抗体对鳞癌细胞端粒酶活性的影响 ,探讨抗角蛋白自身抗体抑制鳞癌细胞增殖的机制。方法　分别以 4mg/L、8mg/L、16mg/L抗角蛋白自身抗体作用于鳞癌细胞株Tca 3 6h ,应用端粒重复序列扩增 ELISA(TRAP ELISA)和非变性聚丙酰胺凝胶电泳方法检测鳞癌细胞端粒酶活性的改变。结果　TRAP ELISA结果显示体外培养的鳞癌细胞具有较高水平的端粒酶活性 (t=3 .53 7,P <0 .0 1) ,电泳结果显示鳞癌细胞PCR产物为显色较深的多个梯形条带 ;抗角蛋白自身抗体在浓度为 4mg/L、8mg/L、16mg/L时 ,TRAP ELISA显示鳞癌细胞株Tca端粒酶的活性显著降低 ,该抑制作用呈剂量依赖性 (r =-0 .83 58,P <0 .0 1) ,电泳结果显示梯形条带数量减少 ,信号减弱。结论　抗角蛋白自身抗体可以呈剂量依赖的抑制体外培养鳞癌细胞端粒酶的活性 ,可能在抗角蛋白自身抗体抑制鳞癌增殖机制中起着一定的作用     

血清抗角蛋白自身抗体滴度消长对皮肤烫伤的影响

作者对家兔血清抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)滴度低下(实验组)及滴度正常(对照组)的皮肤烫伤进行了对比观察,并对烫伤后分界性炎症、表皮修复、表皮角朊细胞胞浆AK auto Ab含量进行检测。结果显示,实验组损伤明显、结痂较晚,分界性炎症出现较迟、程度较轻,表皮修复迟缓、愈合较慢,而角朊细胞胞浆内IgG AK auto Ab含量较低。提示,正常滴度的血清AK auto Ab在皮肤烫伤发展及修复的过程中,可能对机体起着重要的保护作用。     

抗角蛋白自身抗体对豚鼠银屑病样模型的影响

目的：观察抗角蛋白自身抗体对（anti keratin autoantibody,AK auto Ab）对豚鼠银屑病样模型的作用。方法：应用心得安法制备豚鼠耳廓银屑病样模型，采用亲和层析法纯化的正常人AKatuoAb，以肌肉注射方式给药，从组织病理变化评价治疗效果。结果AKatuoAb组动物银现样改变的恢复程度明显优于对照组（P＜0．0001），动物血清中可检测人到AKatuoAb。结论：提示AKatuoAb具有促进及鼠银屑病样模型恢复的作用。