吉西他滨纳米衍生物在裸鼠体内的抗肿瘤作用

目的研究聚乙二醇(PEG)修饰后的新型吉西他滨药物抑制肿瘤生长的效果。方法将吉西他滨脂肪酸酰胺衍生物(Gem C18)与纳米粒(NPs)结合形成一种新型的吉西他滨纳米粒(Gem C18-NPs),并部分进行PEG修饰(PEG-Gem C18-NPs)。建立裸鼠TC-1或Bx PC-3肿瘤模型,观察PEG-Gem C18-NPs的抗肿瘤活性。结果在TC-1肿瘤模型中,Gem C18-NPs组和Gem C组从第1次给药后第11天起至第20天裸鼠肿瘤体积均小于对照组(P<0.05);Gem C18-NPs组与Gem C组从第17天至第20天裸鼠肿瘤体积比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组、Gem C组和Gem C18-NPs组的裸鼠肿瘤质量分别为(1.15±0.26)、(0.10±0.05)、(0.03±0.03)g,3组之间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。在Bx PC-3肿瘤模型中,Gem C18-NPs组与Gem C组在第1次给药后第15天后2组裸鼠肿瘤体积比较差异有统计学意义(P<0.05);Gem C18-NPs组、Gem C组在第15天前与对照组肿瘤体积比较差异无统计学意义(P>0.05);Gem C组和Gem C18-NPs组裸鼠体质量比较差异无统计学意义(P>0.05),注射3周后,对照组裸鼠的体质量较Gem C18-NPs组和Gem C组减轻(P<0.05)。在NPs是否会对肿瘤生长产生影响的实验中,NPs组与对照组裸鼠各个时间点肿瘤体积比较差异均无统计学意义(P>0.05)。Gem C18-NPs组在第13、15、17、19天时肿瘤体积与对照组和NPs组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Gem C18-NPs组裸鼠肿瘤内血管数为60.9±16.0,对照组为85.4±26.5,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Gem C18-NPs组裸鼠肿瘤内血管的平均长度为(12.6±18.9)μm,对照组为(27.9±45.4)μm,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Gem C18-NPs组裸鼠体内Caspase-3阳性细胞数为13.9±5.3,对照组为5.9±2.3,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。PEG-Gem C18-NPs组和Gem C18-NPs组各时间点肿瘤体积比较差异均无统计学意义(P>0.05);PEG-Gem C18-NPs组和Gem C18-NPs组各时间点肿瘤体积与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论新型的吉西他滨药物Gem C18-NPs与PEGGem C18-NPs均可明显提高吉西他滨抗肿瘤的疗效。     

液相共沉淀法制备吉西他滨磁靶向纳米粒

目的：采用液相共沉淀法制备吉西他滨磁靶向纳米粒,探索制备过程中的一些条件。方法观察不同搅拌速度、Fe3+/Fe2+比、pH、温度对四氧化三铁（Fe3O4）纳米粉的影响以及乳化水相/油相、超声时间、固化温度对磁靶向纳米粒的影响。结果制备Fe3O4纳米粉采用条件如下：800 r/min的搅拌速度、1.7∶1的Fe3+/Fe2+比、pH9、反应温度60℃,以及采用5∶40的水相/油相比、10 min的超声时间、100℃的固化温度。结论制备的Fe3O4纳米粉粒径小,纯度高,无团聚现象,制备的吉西他滨磁靶向纳米粒稳定性好。     

固定剂量率方法滴注吉西他滨治疗恶性肿瘤的临床观察

目的探讨用"固定剂量率"方法使用吉西他滨治疗恶性肿瘤的可行性.方法 23例经病理或影像学资料证实的恶性肿瘤患者(NSCLC、NPC、经治复发乳腺癌及胰腺癌)接受GP方案化疗(其中吉西他滨采用"固定剂量率"方法滴注)3周重复,每名患者至少完成两周期化疗,并评价化疗毒副作用及疗效.结果共完成51周期化疗,所有患者均可进行疗效及毒副反应评价.总有效率:52.17%;获益率(CR PR SD):86.95%.毒性反应主要为血液学毒性,尤其Ⅲ/Ⅳ度血小板降低占31.4%(16/51)周期.结论在GP方案中采用固定剂量率滴注吉西他滨治疗中晚期NSCLC、鼻咽癌、经治复发乳腺癌及中晚期胰腺癌是可行的方法,具有较高有效率、临床受益率及临床受益反应率,其毒副作用可耐受,值得进一步研究,以探讨合适的吉西他滨用量.     

自噬在吉西他滨抑制巨噬细胞免疫中的作用及机制研究

目的 观察吉西他滨对巨噬细胞免疫功能的影响,并对其作用机制进行探讨.方法 脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)共同诱导巨噬细胞Ana-1为M1型巨噬细胞.酶联免疫吸附试验(Elisa)检测细胞因子的表达、透射电子显微镜下观察自噬体的形成,激光共聚焦显微镜下观察巨噬细胞吞噬功能及活性氧和自噬体的产生,流式细胞术检测...     

长链非编码RNA在胰腺癌吉西他滨耐药研究中的作用

获得性耐药是引起胰腺癌高致死率的主要原因,其中吉西他滨耐药在临床中最为常见。探究胰腺癌吉西他滨耐药的具体分子机制,有助于临床合理使用吉西他滨,提高患者的生活质量和生存率。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)被报道在胰腺癌吉西他滨耐药中发挥着重要作用,并具有肿瘤耐药后特异性表达的特点,可能成为恢复胰腺癌吉西他滨敏感性的理想靶点。本文通过总结各种lncRNA在胰腺癌吉西他滨耐药中的具体作用机制,以期探索基于lncRNA筛选胰腺癌吉西他滨耐药可能的治疗靶点。     

低剂量吉西他滨联合奥沙利铂治疗肌层浸润性膀胱癌的临床分析

目的 探讨低剂量吉西他滨联合奥沙利铂治疗肌层浸润性膀胱癌的疗效和安全性.方法 回顾性分析大连医科大学附属第一医院2012年1月~2015年6月确诊的肌层浸润性膀胱癌患者51例,给予吉西他滨600 mg/m2,第1,8天静脉滴注,奥沙利铂100 mg/m2,第2天静脉滴注,每21天为1个周期.结果 51例患者共完成207个周期化疗,完全缓解9例,部分缓解15例,稳定17例,进展10例,有效率为47.1%,中位无进展生存期为8.2个月.化疗的主要不良反应为骨髓抑制,Ⅲ~Ⅳ度中性粒细胞减少和血小板减少的发生率分别为11.8%和19.6%,且为可逆性,无化疗相关死亡病例.结论 低剂量吉西他滨联合奥沙利铂治疗肌层浸润性膀胱癌有一定疗效,且不良反应发生率低.     

吉西他滨诱导自噬对HepG2细胞增殖和周期的影响

目的:研究吉西他滨诱导肝癌HepG2细胞自噬以及使用自噬抑制剂后对HepG2细胞增殖、周期的影响.方法:通过CCK-8法检测不同浓度的吉西他滨以及在吉西他滨的基础上加入自噬抑制剂后对HepG2细胞的增殖的影响.应用流式细胞术检测细胞周期各时相变化.结果:自噬诱导剂吉西他滨对HepG2细胞的抑制率明显高于对照组(P<0.05),同种情况下加入一定量的自噬抑制剂3-甲基嘌呤(3-methyladenine,3-MA)后,培养24 h后,细胞的抑制率与吉西他滨诱导组相比较明显升高(P<0.05).流式细胞术的结果显示吉西他滨组与对照组相比较细胞周期中G1期细胞明显增多,S期明显减少;加入自噬诱导剂后G1期细胞明显减少,S期细胞明显增多(P<0.05).结论:吉西他滨诱导肝癌HepG2细胞发生自噬对细胞的增殖有明显的抑制作用,并且吉西他滨诱导肝癌HepG2细胞发生自噬多停留在细胞周期的G1期.     

触珠蛋白对化疗药物吉西他滨血液学毒性的预测

目的晚期胰腺癌的标准治疗是吉西他滨单药治疗,然而严重的中性粒细胞和血小板减少有时可以威胁患者生命。本研究的目的是寻找一种新方法以预测吉西他滨引起的血液学毒性。方法利用量化质谱（MS）比较使用吉西他滨化疗2个周期发生严重血液学毒性的20例患者（3～4级的中性粒细胞减少或2—4级血小板减少等）和20例没有发生血液学毒性患者（0级）的蛋白组学。结果在60,888肽中757肽峰密度明显不同（P〈0．01）,差异有统计学意义（P=0．00003）的质谱高峰来源于触珠蛋白。结论尽管触珠蛋白和血液学毒性之间的确切机制还需要进一步证实,但该研究对接受吉西他滨治疗的患者有较高的实用价值。     

靶向药物联合吉西他滨和吉西他滨单药化疗治疗晚期胰腺癌比较的Meta分析

目的 通过Meta分析探讨靶向药物联合吉西他滨和吉西他滨单药化疗在治疗晚期胰腺癌病人中的意义。方法 通过MEDLINE、EBM等数据库，检索国内外已发表和已注册但未发表的相关文献。选择的治疗组为吉西他滨联合靶向药物，对照组为吉西他滨单药化疗的晚期胰腺癌的随机对照实验。由2位评价者分别按上述检索策略收集资料、按选择标准入选。主要对半年生存率、1年生存率、客观缓解率和毒副反应进行Meta分析。结果 在治疗晚期胰腺癌方面，吉西他滨联合靶向药物和吉西他滨单药比较，半年生存率提高4％(P=0．27)，1年生存率提高3％(P=0．34)，客观缓解率降低了3％(P=0．17)，差异均无统计学意义。毒副反应方面，吉西他滨联合靶向药物和吉西他滨单药比较，3／4度中性粒细胞减少的发生率增加了2％(P=0．84)，差异无统计学意义，3／4度贫血发生率无变化(P=0．96)，3／4度恶心 呕吐的发生率减少了6％(P=0.02)，差异有统计学意义。结论 靶向药物联合吉西他滨不适合用于晚期胰腺癌，目前尚不推荐临床常规使用。     

不同剂量吉西他滨辅助化疗根治术后胰腺癌的随机对照临床研究

目的:比较标准剂量和小剂量吉西他滨对根治术后胰腺癌辅助化疗的疗效及安全性.方法:采用随机双盲平行对照的临床试验方法,以疾病相关症状改善、生存分析及毒副反应为结局终点指标,比较标准剂量(1 000 mg/m2)和小剂量(500 mg/m2)吉西他滨辅助化疗根治术后胰腺癌的疗效及安全性.结果:2005年1月至2007年3月间符合标准的患者共83例,随机分组后患者性别、年龄等具有基线可比性(P>0.05).意向性治疗分析和方案分析均显示标准剂量组和小剂量组疾病相关症状改善及术后生存均相当(P>0.05),而毒副反应,尤其是血液系统毒性在标准剂量组高于小剂量组(P<0.05).结论:小剂量吉西他滨对根治术后胰腺癌辅助化疗的疗效和标准剂量相当,而毒副反应减少.     

吉西他滨联合树突状细胞对HepG2细胞增殖的抑制作用

目的:观察肿瘤细胞裂解物致敏的树突状细胞(DC)联合吉西他滨(GEM)体外抑制肝癌HepG2 细胞系增殖的作用,为临床探索有效的肝癌综合治疗方案提供实验依据.方法:采用反复冻融法裂解HepG2 细胞,提取肿瘤细胞抗原后致敏DC,并以DC刺激自身T 细胞的增殖和活化.按不同处理因素分组:①空白对照组,只含空白培养液;②阴...     

Preparation of curcumin prodrugs and theirin vitro anti-tumor activities

Summary The curcumin prodrugs, which could be selectively activated in tumor cells, were prepared to establish a basis for the targeted chemotherapy for cancer. On the basis of the molecular structure of curcumin, the N-maleoyl-L-valine-curcumin (NVC), N-maleoyl- glycine-curcumin (NGC) were chemically synthesized and identified by IR and NMR spectroscopy. After treatment with these two prodrugs for 6–24 h, the rates of growth inhibition on human bladder cancer EJ cells and renal tubular epithelial (HKC) cells were detected by MTT colorimetry. Our results showed that after the treatment with 20 μmol/L–40 μmol/L NVC and NGC for 6–24 h, the growth inhibitory effects on EJ cells were 6.71%–65.13% (P<0.05), 10.96%–73.01% (P<0.05), respectively, in both dose- and time-dependent manners. When compared with the curcumin of same concentrations, the growth inhibitory effects of these two prodrugs on HKC cells were significantly decreased (P<0.01). It is concluded that activation of curcumin prodrugs via hydrolysis functions of cellular esterase could inhibit the growth activities of tumor cells, and reduce the side effects on normal diploid cells. This provided a novel strategy for further exploration of tumor-targeted chemotherapeutic drugs. LU Peng, male, born in 1977, M. D., Ph. D. This project was supported by a grant from the National Natural Sciences Foundation of China (No. 30200284).     

RGD肽修饰紫杉醇聚合物纳米粒的制备及其药效学研究

制备靶向肽c(RGDyK)修饰的紫杉醇聚合物纳米粒,并对其体内外药效学性质进行评价。采用透析法制备靶向肽修饰的包载紫杉醇(PTX)的低相对分子质量肝素-全反式维甲酸聚合物(PTX-LHRyK)纳米粒,测定其粒度分布、Zeta电位、载药量和包封率等理化性质,通过体外细胞毒实验和体内药效学实验评价PTX-LHRyK纳米粒的抗肿瘤效果。制得的PTX-LHRyK纳米粒的粒径为(131.7±2.3)nm,Zeta电位为(-27.1±2.3)mV,载药量和包封率分别为(32.03±0.11)%和(84.84±2.63)%。随着孵育时间的延长,PTX-LHRyK纳米粒对B16F10细胞的毒性增加,孵育72 h后对B16F10细胞的IC₅₀为(41.6±7.2)ng/mL,LHRyK载体对B16F10细胞的存活率无显著影响。体内药效学研究显示,PTX-LHRyK纳米粒的抑瘤率达到75.28%,是混合药物溶液组的1.46倍,纳米粒制剂组的小鼠体重和相对脾重均无显著性变化。因此,PTX-LHRyK纳米粒粒径小,载药量高,可明显提高紫杉醇的抗肿瘤治疗效果,且降低药物的不良反应。     

吉西他滨联合顺铂治疗晚期软组织肉瘤29例临床观察

目的: 观察吉西他滨(GEM)联合顺铂(DDP)治疗晚期软组织肉瘤的临床疗效及毒副反应。方法: 选取29例软组织肉瘤患者,化疗方案采用GEM 1 000 mg/m2静脉滴注,第1和第8天;DDP 30 mg/m2静脉滴注,第1~3天。观察其疗效及毒副作用。结果: 完全缓解1例,部分缓解14例,无变化7例,进展者7例,总有效率75.86%。主要毒副反应为骨髓抑制及胃肠道反应,无明显的肝肾功能损害。结论: GEM联合DDP化疗方案治疗晚期软组织肉瘤有较好的疗效,且耐受性较好。     

西妥昔单抗联合吉西他滨对三阴性乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究表皮生长因子受体的单克隆抗体西妥昔单抗与吉西他滨联合应用对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和凋亡的影响.方法：使用不同浓度药物联合处理MDA-MB-231细胞,四甲基偶氮唑蓝法检测药物的生长抑制效应;碘化丙啶染色流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot 测定MDA-MB-231 细胞bcl-2家族蛋白表达.结果：75 μg/ml的西妥昔单抗与10 μmol/L的吉西他滨联合作用于MDA-MB-231细胞的48 h 存活率为48.53%;75 μg/ml的西妥昔单抗与2 μmol/L的吉西他滨联合用药诱导的细胞凋亡率为 45.7%,较单用吉西他滨的凋亡率16.5%明显提高（P〈0.01）;单用吉西他滨可以使蛋白 bcl-2 表达下调,合用后较单用下调更加明显.结论：西妥昔单抗与吉西他滨对三阴性乳腺癌MDA-MB-23细胞有抑制增殖及促进凋亡的作用,两者联合表现为相加或协同作用.     

吉西他滨联合铂治疗晚期肺鳞癌与肺腺癌疗效分析

目的观察吉西他滨对晚期肺鳞癌与肺腺癌治疗的疗效差别,为临床上晚期肺癌的化疗的药物筛选提供依据。方法肺鳞癌组31例与肺腺癌组37例分别接受吉西他滨（1000mg／m^2）加顺铂（75mg／m^2）或卡铂（AUC=5）化疗,每21d为1周期,每2个周期考评疗效。结果鳞癌组31例和腺癌组37例均能进行临床评价。鳞癌组中部分缓解（partial response,PR）为10例（32．2％）,稳定（stable disease,SD）为14例（45．2％）,进展（progressive disease,PD）为7例（22．6％）,完全缓解（complete response,CR）为24例（77．4％）。中位生存期为12月,1年生存率为54．8％（17／31）。腺癌组中PR为11例（29．7％）,SD为18例（48．7％）,PD为8例（21．6％）,CR为29例（78．4％）。中位生存期为9月,1年生存率为29．7％（11／37）。结论吉西他滨对肺鳞癌与肺腺癌的疾病控制相近,但对鳞癌表现出比腺癌更高的生存时间与生存率。     

肝靶向抗病毒药Lac-PLL-ACV的制备及其趋肝性研究

目的：减少抗病毒药阿昔洛韦（Acyclovir,ACV）在治疗乙型肝炎中的肝外毒副作用，获得肝靶向ACV偶联物。方法：多聚赖氨酸（Poly-L-lysine,PLL)在氰硼酸钠的催化作用下与乳糖反应生成乳糖化多聚赖氨酸，乳糖化多聚赖氨酸与咪唑化阿昔洛韦在37℃pH9.5的条件下反应合成偶联物乳糖化多聚赖氨酸－阿昔洛韦（Lactosaminated poly-L-lysine-acyclovir,Lac-PLL-ACV）。偶联物经尾静脉注射进入小鼠体内后，收集小鼠血浆及肝脏样品，用高效液相色谱法测定药物浓度，研究遇联物的体内分布和药代动力学。结果：HPLC检测证实Lac-PLL-ACV在血浆中十分稳定，不易解离出ACV。偶联物的肝最大摄取率约为60％，是ACV组的10倍以上，偶联物肝中的T1／2，AUC，CL分别为ACV的4．2倍，56．6倍和1／57，具有明显的肝靶向性。结论：乳糖化多聚赖氨酸作为肝去唾液酸糖蛋白受体（Asialoglycoprotein receptor,ASGPR)介导的一种药物载体，能使抗病毒药ACV获得较满意的肝靶向性。     

替加氟磁性长循环热敏脂质体的制备及在大鼠体内的药代动力学研究

目的 研究替加氟磁性长循环热敏脂质体的制备、药动学规律和靶向性.方法 采用反相蒸发超声法制备替加氟磁性长循环热敏脂质体,采用高效液相色谱仪等检测替加氟在大鼠体内各组织中的药物浓度.结果 替加氟磁性长循环热敏脂质体平均粒径为126nm左右,具有强磁性和超顺磁性.磁控并加热的替加氟磁性长循环热敏脂质体组的肝内8 h药时曲线下面积是游离药物组的17.45倍,是替加氟长循环脂质体组的3.9倍;其肝外组织血浆、肾器官中比游离组低.其肝靶向效率达到73.9%.替加氟长循环脂质体组半衰期比替加氟游离药物组明显延长.结论 替加氟磁性长循环热敏脂质体显著增加药物在肝脏的分布,降低了药物的肾毒性.     

E1A, E1B double-restricted adenovirus enhances the cytotoxicity and antitumor activity of gemcitabine to renal cell carcinoma

Background  Our previous studies have demonstrated potent oncolysis efficacy of the E1A, E1B double-restricted replication-competent oncolytic adenovirus AxdAdB-3 for treatment of bladder cancer. Here, we reported the feasibility and efficacy of AxdAdB-3 alone, or in combination with gemcitabine for treating renal cell carcinoma.

Methods  Cytopathic effects of AxdAdB-3 were evaluated in human renal cell carcinoma cell lines TOS-1, TOS-2, TOS-3, TOS-3LN, SMKT-R3, SMKT-R4 and ACHN, and in normal human renal proximal tubule epithelial cells (RPTEC). AxdAdB-3 induced down-regulation of the cell cycle was determined by flow cytometry. Combination therapies of AxdAdB-3 with gemcitabine were evaluated in vitro and in vivo on subcutaneous TOS-3LN tumors in a severe combined immunodeficiency disease (SCID) mouse model.

Results  AxdAdB-3 was potently cytopathic against the tested most renal cell carcinoma cell lines including TOS-2, TOS-3, TOS-3LN, SMKT-R3 and SMKT-R4, while normal human RPTEC were not destroyed. AxdAdB-3 effectively induced cell cycle S-phase entry. Combined therapy of AxdAdB-3 with gemcitabine demonstrated stronger antitumor effects in vitro and in vivo compared with either AxdAdB-3 or gemcitabine alone.

Conclusion  AxdAdB-3 alone, or in combination with gemcitabine may be a promising strategy against renal cell carcinoma.

     

LHRHa靶向紫杉醇脂质体的制备及体外抗肿瘤作用

目的:制备促黄体激素释放激素类似物(Luteinizing hormone-releasing hormone analogues,LHRHa)靶向紫杉醇脂质体(Paclitaxel liposomes,PTX-Lipo),研究其在体外增强紫杉醇(Paclitaxel,PTX)对卵巢癌A2780/DDP细胞的抑制作用。方法:采用薄膜超声法制备PTX-Lipo与LHRHa靶向紫杉醇脂质体(LHRHa-Paclitaxel liposomes,LHRHa-PTX-Lipo),用透射电镜考察脂质体形态;高效液相色谱法测定2种PTX-Lipo的包封率;激光共聚焦法通过卵巢癌A2780/DDP细胞对4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑荧光素的摄取检测来反映细胞对NBD-Lipo与NBD-LHRHa-Lipo的摄取情况;MTT法及细胞克隆形成实验检测LHRHa-PTX-Lipo体外对卵巢癌细胞的生长抑制情况。结果:制备LHRHa-PTX-Lipo的平均粒径123.4 nm,包封率在90%以上;A2780/DDP细胞对NBD-LHRHa-Lipo组的荧光摄取明显高于NBD-Lipo组;LHRHa-PTX-Lipo对A2780/DDP细胞的生长及克隆形成抑制明显高于PTX组及PTX-Lipo组(P<0.05)。结论:采用薄膜超声法制备的LHRHa-PTX-Lipo可使药物在靶部位聚集,增强药物对卵巢癌细胞的抑制作用。